银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究

２００６年第１３卷第６期

化工生产与技术ＣｈｅｍｉｃａｌＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ

!!!!!!"

!"

!!!!!!"

!"

研究与开发

收稿日期：２００６－１０－１０

以银杏叶提取物（ＧＢＥ）为原料制成的药物具有清除自由基，防止脑缺血和脑水肿，改善脑功能等多种作用。银杏叶制剂还可用于保健食品和化妆品等［１，２］。银杏叶中黄酮类化合物的提取直接决定着银杏叶的药用价值，因而成为国内外的研究热点。

提取方法最早用水浸提法，此方法具有设备简单、成本低且对环境和人类无毒害的特点，但提取率偏低、杂质含量较高，后处理难度大。有机溶剂法尤其酮、醇提取法是相当经典的方法，比如用丙酮作为提取剂的方法有：（１）丙酮提取－四氯化碳萃取法；（２）丙酮提取－氢氧化铅沉淀法；（３）丙酮提取－氨水沉淀法；（４）丙酮提取－硅藻土过滤法。（１）法工艺产品黄酮含量太低，达不到标准，（２）～（４）法工艺虽然能较好地从银杏叶中提取出有效成分含量较高的提取物，但它们存在着很多缺点。例如，使用了丁酮、四氯化碳等有毒害溶剂等，产品中无法避免这些物质的残留；操作复杂和步骤多，导致ＧＢＥ收率低且最终精制品的质量不够稳定。

随着超临界流体提取技术的迅速发展，应用该技术提取植物中活性成分已越来越广泛，与有机溶剂提取法相比，超临界流体萃取方法具有产品收率高、质量好、有效成分破坏少、无溶剂残留、操作方便等优点。但是超临界流体萃取法设备规模较大、技术要求高、投资大，安全操作要求高，难以用于较大规模的生产。乙醇和丙酮对活性成分提取率相近，但考虑到溶剂的成本和操作的安全性，使用乙醇水溶液比丙酮水溶液更合适。因此采用乙醇－水

为提取剂，对影响浸取的主要因素进行了研究。

１

实验部分

１．１

主要材料、试剂及仪器

银杏叶：产于连云港花果山，自采；氢氧化钠、无

水乙醇、硝酸铝、芦丁、亚硝酸钠、二氯甲烷和甲醇，均为分析纯。

７２３可见分光光度计，ＤＦ－１型集热式磁力搅拌

器，ＲＥ－５２８５Ａ型旋转蒸发器，恒温水浴锅，电热鼓风干燥箱，ＳＨＺ－ＣＤ型循环水式真空泵，等。１．２工艺流程

采用有机溶剂提取法，因为甲醇和丙酮具有毒性，所以采用乙醇－水作为提取剂比较合适［３］。

ＧＢＥ的提取工艺流程如下：

干燥银杏叶→粉碎→浸取→过滤→减压蒸馏→银杏浸膏粗提物→二氯甲烷萃取→减压除去溶剂→干燥→产物。

１．３银杏叶中总黄酮含量的测定

将银杏叶洗净，在低温下烘干至恒重，准确称取

２ｇ，置于索氏提取器中用甲醇回流提取至提取液无色；提取液经浓缩，并转入５０ｍＬ容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，取１ｍＬ按照标准曲线的作法测定吸光度［４］，水浴温度控制在７５℃左右。

银杏叶中总黄酮的质量分数＝５０×ρ１／ｍ１，ρ１为银杏叶中总黄酮的质量浓度，ｍｇ／ｍＬ；ｍ１为银杏叶质

量，ｍｇ。

本实验中银杏叶中总黄酮的质量分数＝５０×０．７／

银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究

朱平华

（淮海工学院化工系，江苏连云港２２２００５）

摘要

对银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺进行了研究，通过单因素试验和Ｌ９（３３）正交试

验，研究了浸取温度、乙醇含量和固液质量比对黄酮类化合物提取率的影响。结果显示温度是影响提取率的主要因素，最佳工艺为浸取温度８０℃，乙醇的体积分数为７０％和固液质量比１：７，银杏叶中黄酮类化合物的浸出率可达到９２．３％。关键词

银杏叶；黄酮类化合物；乙醇；提取

中图分类号ＴＱ２３４．２＋１，ＴＱ４６０．６＋１文献标识码Ａ文章编号１００６－６８２９（２００６）０６－００２５－０３

・２５

・

（２×１０００）＝１．７５％。

１．４ＧＢＥ中总黄酮含量测定

准确称取ＧＢＥ０．１ｇ，用甲醇溶解，并用体积分数为３０％的乙醇定容至５０ｍＬ，用移液管准确吸取该溶液１．０ｍＬ于１０ｍＬ比色管中，加入３０％乙醇至５ｍＬ，加入质量分数为５％的亚硝酸钠水溶液０．３ｍＬ，摇匀，放置６ｍｉｎ；加入硝酸铝水溶液０．３ｍＬ，摇匀，放置６ｍｉｎ；加入质量分数为４％的氢氧化钠水溶液４ｍＬ，再加入体积分数为３０％乙醇至１０ｍＬ，放置１０ｍｉｎ，于５１０ｎｍ处测吸光度，并由吸光度计算出质量浓度ρ２［５］，则ＧＢＥ中总黄酮的质量分数＝５０×ρ２／ｍ１，ρ２为ＧＢＥ中总黄酮的质量浓度，ｍｇ／ｍＬ；ｍ１为ＧＢＥ质量，ｍｇ。

本实验ＧＢＥ中总黄酮的质量分数＝５０×０．６４６／（２×１０００）＝１．６１５％

２试验结果及讨论

２．１各因素对总黄酮提取率的影响

浸提工艺涉及３个关键条件：浸提的温度、提取剂乙醇的含量和固液质量比。浸提温度采用３０，４０，５０，６０，７０和８０℃６个水平，乙醇的体积分数采用２０％，３０％，４０％，５０％，６０％，７０％，８０％和９０％８个水平，固液质量比采用３，４，５，６，７，８，９和１０这８个水平分别进行单因素试验。

２．１．１浸提温度

浸提温度对总黄酮提取率的影响见图１。试验结果表明提高温度有利于总黄酮的提取。但是，鉴于有效成分的热稳定性，以及温度升高时杂质溶出量也相应增大，在选取浸提温度时不能过高，本实验将浸提温度定在８０℃正是基于这种考虑，同时也是考虑到乙醇的沸点是７８．５℃，温度过高，乙醇挥发严重，生产成本加大。

图１浸提温度对总黄酮提取率的影响２．１．２乙醇含量

乙醇含量对总黄酮提取率的影响见图２。试验结果表明，乙醇含量对提取率的影响，在于不同含量的乙醇溶剂极性不同。体积分数为７０％的乙醇同银杏叶黄酮的极性最相似，依据“相似相溶”的原理，此条件下银杏叶黄酮的溶解度最大，所以７０％的乙醇提取效果最好。

图２乙醇含量对总黄酮提取率的影响２．１．３固液质量比

固液比对总黄酮提取率的影响见图３。试验结果表明乙醇用量的增加有利于总黄酮的提取，但增加到一定的程度，对提取率的影响变缓。考虑生产成本和后续处理，固液质量比取１：７。

图３固液质量比对银杏黄酮的影响

２．２正交试验

根据以上的单因素试验结果，采用正交试验法，以浸取温度、乙醇体积分数和固液质量比作为试验的３个因素，各设置３个水平试验，以确定银杏叶总黄酮的最佳提取条件。试验方法如下：称取干燥粉碎的银杏叶１０ｇ，用乙醇作溶剂进行浸取试验，将浸取液过滤、离心和浓缩定容，取１ｍＬ按标准曲线的做法于５１０ｎｍ处测定吸光度，计算浸取液中总黄酮含量及浸出率。正交试验结果及分析见表１［６］。

正交实验结果以总黄酮浸出率为主要考察目标，浸出率越高越好。从表中计算分析最佳条件为Ａ３Ｂ３Ｃ２，即浸取温度８０℃，乙醇的体积分数７０％和

朱平华银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究研究与开发・２６・