细胞培养基

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细胞培养基使用方法

细胞培养基使用方法

细胞培养基使用方法
细胞培养基使用方法:
① 在开始实验前确保所有器具如培养皿移液管等已经经过高压灭菌处理并放置在超净工作台内备用;
② 根据所需培养细胞种类选择合适基础培养基如DMEM RPMI1640等并检查有效期避免使用过期产品;
③ 将所需量培养基倒入无菌瓶中加入适量血清抗生素等补充成分搅拌均匀直至完全溶解无沉淀物;
④ 使用pH计调节溶液酸碱度至适宜范围通常为7.2~7.4之间具体数值依据不同细胞系略有差异;
⑤ 将配置好的培养基放入37摄氏度水浴锅中预热10分钟左右使其温度接近人体体温方便细胞生长;
⑥ 在无菌条件下小心开启瓶盖用移液管吸取适量培养基注入事先准备好的细胞悬液中轻轻混匀;
⑦ 取出一定体积混合液转移至培养皿中注意不要形成气泡以免影响细胞贴壁效果;
⑧ 将装有细胞的培养皿放入CO2培养箱内保持37摄氏度5%二氧化碳气氛下静置过夜;
⑨ 次日观察细胞生长状态如形态分布密度等记录下初始情况作为后续跟踪依据;
⑩ 在细胞达到约80%汇合度时需进行传代操作即用胰蛋白酶消化后重新接种到新鲜培养基中;
⑪ 定期更换培养基一般每2~3天一次去除代谢废物补充营养成分同时检查是否有污染迹象;
⑫ 最后提醒在整个操作过程中都要严格遵守无菌技术规范防止外来微生物侵入污染细胞株;。

细胞培养基的使用方法

细胞培养基的使用方法

细胞培养基的使用方法细胞培养基就像是细胞的“食物”和“家园”,在细胞研究等方面超级重要。

那怎么使用细胞培养基呢?先得根据细胞类型选择合适的培养基。

这就好比你不能给兔子喂老虎的食物一样,不同的细胞对营养需求不同。

拿到培养基后,要在无菌环境下操作,这可是重中之重。

无菌操作就像给细胞打造一个纯净的“小天地”,容不得半点细菌污染。

把培养基倒入合适的培养容器中,像把食物放在盘子里一样。

然后将细胞接种到培养基里,这过程要小心翼翼的,细胞很脆弱呀,就像小婴儿一样,稍微不注意就可能“受伤”。

在使用细胞培养基时,安全性可不能忽视。

如果不小心被污染了,那简直就是一场“灾难”。

细菌或者其他污染物就像一群“坏蛋”,会把细胞的“小天地”搞得乌烟瘴气,细胞可能就没法正常生长了。

稳定性也很关键。

培养基的成分得保持稳定,要是今天这个成分多了,明天那个成分少了,细胞就像在坐过山车一样,能舒服吗?肯定不能,生长状态肯定会受到影响。

细胞培养基的应用场景可多了去了。

在医学研究领域,比如研究癌细胞,培养基就像一个“战场”,为科学家研究如何打败癌细胞提供环境。

在生物技术产业,生产疫苗的时候,细胞培养基是细胞生长繁殖的“温床”,没有它,疫苗生产可能就无从谈起。

它的优势是什么呢?能给细胞提供合适的营养,让细胞茁壮成长。

这就像肥沃的土壤对于植物的重要性一样,没有肥沃的土壤,植物怎么能长得好呢?有一个实际案例。

在一个抗癌药物研发的实验室里,研究人员要培养癌细胞来测试新的药物。

他们精心挑选了合适的细胞培养基。

开始的时候,因为没有严格无菌操作,培养基被污染了,癌细胞生长得乱七八糟,就像一群无头苍蝇。

后来重新严格按照无菌操作要求来使用细胞培养基,癌细胞就像听话的士兵一样,整齐地生长,这样就能很好地测试药物的效果了。

细胞培养基的正确使用是细胞研究和相关产业发展的关键。

这就像盖房子打地基一样重要,要是地基没打好,房子能稳吗?肯定不能。

所以我们必须重视细胞培养基的使用方法,从选择到操作每一步都要谨慎对待,这样才能让细胞在培养基这个“小天地”里健康生长,为我们的科学研究和产业发展做出贡献。

细胞培养各种培养基简介

细胞培养各种培养基简介

DMEM、RIPA1640、F12、L15等细胞培养基的基本知识培养细胞的完全培养基由基础培养基(如MEM)和添加剂(如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子)组成,培养基的配方一直在改进,其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。

一、基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。

最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。

而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。

MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学最通用的培养基。

Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM 含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。

选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。

例如,有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非最佳选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。

F12中含有硫酸亚铁,据报道也有神经毒效应。

在所有这些培养基中,谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度,这是因为它具有不稳定性以及在许多细胞培养中它常用作碳源。

对于神经元的培养常常在基础培养基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸(若培养基中这两种物质缺乏时)。

MEM与F12均要用5%的CO2来平衡,DMEM含更高浓度的NaCO3,要用10%的CO2来平衡,当然也可以在较低CO2浓度下使用。

这些基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的,但通常在原代培养中使用也能有比较令人满意的结果。

原则上,HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐,以解除需要高浓度CO2培养环境的限制。

实际操作中并非如此简单。

显然,溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长是重要的。

细胞培养各种培养基简介

细胞培养各种培养基简介

DMEM、RIPA1640、F12、L15等细胞培养基的基本知识培养细胞的完全培养基由基础培养基如MEM和添加剂如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子组成,培养基的配方一直在改进,其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等;一、基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液BSS基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质;最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素;而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂例如核苷酸;MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学最通用的培养基;Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍;选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足;例如,有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非最佳选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时;F12中含有硫酸亚铁,据报道也有神经毒效应;在所有这些培养基中,谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度,这是因为它具有不稳定性以及在许多细胞培养中它常用作碳源;对于神经元的培养常常在基础培养基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸若培养基中这两种物质缺乏时;MEM与F12均要用5%的CO2来平衡,DMEM 含更高浓度的NaCO3,要用10%的CO2来平衡,当然也可以在较低CO2浓度下使用;这些基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的,但通常在原代培养中使用也能有比较令人满意的结果;原则上,HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐,以解除需要高浓度CO2培养环境的限制;实际操作中并非如此简单;显然,溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长是重要的;Leiboviz`s L15培养基可用来在大气环境中令神经细胞生长,该培养基采用了与众不同的BSS作基础,它含有高浓度的氨基酸来提高缓冲能力,培养基中使用半乳糖作碳源,以阻止培养基中乳酸形成,少量溶解的CO2由丙酮酸代谢产生;这一培养基的优点是明显的,特别是在保持较高CO2有困难时,例如在长时间的显微操作及生理学研究中;L15培养基已用来成功的培养了外周神经元,但尚未在CNS神经元的发育研究中全面检测过;二、血清细胞在单纯的基础培养基中不能存活,在特殊类型的细胞培养中必须提供某些痕量营养物质及生长因子才能使细胞得以生长并维持生长状态;基础培养基常常要添加血清,血清终浓度多为5~20%;特殊用途的血清来源须用经验确定,广泛应用的血清种类有马血清与胎牛血清;胎牛血清中富含有丝分裂因子,常选其作增殖细胞用的血清,也用于细胞系和原代培养;而马血清常常用来作有丝分裂后的神经元培养;然而,很多人也将胎牛血清用于神经型血清;人类的胎盘血清,亦曾用于神经组织的器官类型的培养,也用在一些特殊培养种类中;血清的不同批号含有不同的成分,所以许多人发现,应该在使用前对血清进行测试;大多数试剂商提供样品,所满意的批号即可选用,这样可以一次得到足够一年用量的血清,血清在使用前通常在56℃加热30分钟,这一过程称为灭活;三、无血清培养基1979年神经细胞培养出现了一个重要进展,用化学添加剂即可维持神经细胞存活与生长而不需要在培养基中添加血清;其工作基础是用合适的激素、营养物和促贴壁的物质的组合置换培养基中的成分,最后找到了适合大多数细胞培养的试剂配方,该配方称为N2,专门用于神经细胞培养,最早是用在B104大鼠神经母细胞瘤细胞系的培养;它的基础培养基是1:1的DMEM与H12的混合液,添加了胰岛素、转铁蛋白、黄体酮、腐胺和硒;胰岛素和胰岛素样生长因子对于大多数类型细胞的存活和生长有重要作用,硒是谷胱甘肽产生的合作因子,可能有助于过氧化物和超氧化物的水解,有报道说还能防止细胞的光照损伤;随后的其他配方如N1N3则含有较低浓度的转铁蛋白;未料到的是上述配方构成的培养基可以支持神经母细胞瘤细胞系快速增殖,随后又发展了能支持原代培养的各种神经元生长的培养基,这种培养基在许多实验室里已取代了有血清培养;在某些培养方案中,细胞直接进入无血清培养,这样的培养基可以消除来自血清的不均一性;更为重要的是,它们可用来检测生长因子以及其他促进神经元存活或生长的因子,或者用来检测那些可保护神经元免遭环境毒物损伤的制剂;专用于神经元的培养基在某些培养环境中还可以减低非神经元细胞的增殖,故可使神经元纯化;血清中含有的组分,例如血清蛋白,可作为代谢毒物清除剂使用并能聚集于培养基中;当缺乏这些成分时,如神经元在无血清培养基中生长时,特别容易为过氧化物及自由基伤害,这已被许多研究者注意到了;过氧化物酶以及超氧化物歧化酶可阻止培养基中过氧化物和超氧化物的累积,有报道讲可以促进低密度培养细胞的存活;有学者发现细胞存活可为氧分压的下降而促进;因而,无血清培养基的配方常含有抗氧化剂的试剂;例如,维生素E和丙酮酸,可作为过氧化物清除剂使用;上述这些影响在高密度培养时变小,特别是神经元与胶质共培养时,它们可以吸收和代谢神经元毒性物质如谷氨酸;应该注意,尽管无血清培养基是有化学限定性的,但在培养过程中它仍有变动,培养起始时可能有些物质缺乏,而后细胞的产物可能积累,从而使培养基的成分改变;这其实是有另一方面的好处,即条件培养基已培养过细胞的培养基的形成,条件培养基常常用来增加神经元和胶质细胞的发育;生长因子绝大多数哺乳类胚胎神经元有严格的营养要求,若不能提供适宜的生长因子或合适的因子组分,将会使绝大多数神经元在体外培养的数天中死亡;解决这一问题有两条思路,一是让培养细胞提供自己的营养因子,二是在培养基中加入纯的生长因子;如果细胞混合物能在高密度时生长,所需的生长因子便会积累到可观的数值,尤其当培养基很少变化时;若某种生长因子积累,而最后促使所需要的细胞类型能够生长;但是,这种对营养生长因子自身倚赖性亦有弊端,因为通常在混合细胞群体中细胞很难有同比例增殖,某些细胞会因生长条件的贫乏而受限制;另外,这种方法只能进行相当高密度的细胞培养;因为培养基的条件在细胞的较低密度时变的不够有效;不过某些时候纯化神经元群体的低密度培养可用条件培养基经过了高密度培养进行,或在胶质上生长的神经元所用过的培养基来支持;满足神经元营养需求的第二条途径是向培养基中加入生长因子;通常用于组培的通用适宜因子是神经生长因子NGF;不过,只有少数对这种蛋白质有反应的细胞类型的细胞才能生长;许多PNS类型的神经元在离体状态时表现出简单的营养需求,只需提供单一的营养因子就足以使其在低密度时增殖;例如,大鼠交感神经元仅需NGF即能存活,在其生存期间,这些神经元可在严格局限条件下生长好几个月即在无血清培养基中、或缺乏胶质细胞、或在化学限定基质上;有证据表明NGF是活体中交感神经元存活的生理调节因子;然而,交感神经元也对来自胶质细胞的神经营养因子GDNF有反应,还有NT3、LIF与CNTF也对其有作用;在不产生GDNF 或NT3的动物中,交感神经元会有损伤;在离体与活体营养需求之间的差别或许可以用在不同环境中NGF含量和分布的不同来解释,培养中的NGF弥散在整个环境中,而在活体内,大部分区域的含量是有限的;因此,NGF的重要性在于其合适的浓度;尽管在大多数实验中已经习惯了营养因子的最大效应使用量,其他营养因子的协同效应在亚优剂量下更容易观察到;此外,高浓度的营养因子可使细胞更能抵抗毒剂以及其他压力;相应的,低浓度的营养因子可能用来检查表现型,例如对自由基或氨基酸的毒性刺激剂量的反应;有许多其他的PNS培养系统只需单一营养因子就可使有实用价值的细胞保持在一定比例,广为人知的有雏鸡睫状自主神经节神经元和大鼠背根神经节感觉神经元;不过,这些模型也有局限性;例如,培养中的睫状神经节的神经元加入CNTF时,超过90%的神经元能存活一个很长时期,但并未有迹象表明它属于内源的靶细胞来源的营养因子,而是有争论的相关分子,GPA,扮演了这一角色;大鼠背根神经节含有好几种细胞群体,其中小细胞群、包括nocioceptive cell,对NGF有反应,但其他神经元,例如大细胞群中的proprioception 却对不同的神经营养因子有反应;因此,在大多条件下培养物的生长并不能忠实反映亲代群体的所有特性,这一问题在CNS的细胞培养中特别突出,因为已有的经验表明,没有一种培养基能适合于所有类型及亚类的神经细胞的生长;现有的证据已表明,CNS神经元的营养需求比PNS的更复杂;对脊髓运动神经元与视网膜节细胞神经元的研究表明,这些神经元与外周神经元相比能对更为广泛的营养因子起反应;例如,至少发现了15种不同的分子可在离体条件下增加神经元的存活;而且,已观察到运动神经元与视网膜对任何单独的营养因子的存活反应,与PNS中所观察到的典型反应相比,都要小得多;因此,大多数影响运动神经元及视网膜节细胞的营养因子仅仅只能支持神经元的亚群,而神经元的最佳存活要求诸多因子的结合;在视网膜节细胞的培养中,因子的最佳组合如BDNF、CNTF、IGF、bFGF包括了来自不同生长因子家族的代表;这一结果的普遍性尚待进一步的证实,但敲除单一的营养因子基因之后,没有表现出对CNS大多类群的神经元的存活产生太大影响,这一观察与上述的事实是一致的;现已知少突胶质细胞的长期存活也需要众多营养因子的相互作用;四、抗生素在细胞培养中最常用的抗生素是青霉素常用浓度是25~100ui/ml与链霉素25~100μg/ml;这两种抗生素常混合使用;在一些实验室里,它们常规加入所有的培养基中;庆大霉素10~100μg/ml通常有广谱抗菌效应,并具有溶液稳定性,故也被一些实验室使用,特别是当有低水平的污染存在时更是这样;以上这些试剂对霉菌与酵母菌的污染均无效;尽管很多实验室在细胞系的培养基中常规加入抗生素作继代培养,但仍建议不要在原代培养中加入抗生素,其理由之一是获得的细胞是无菌的,原代培养时的细菌污染很少发生;其次,尽管认为抗生素对细胞代谢的影响可忽略,但最好避免使用它们,以免细胞生长环境的不稳定;最重要的是要意识到培养中主要污染物的类型,它们通常暗示了问题的来源;五、抗有丝分裂剂某些DNA合成抑制剂对分裂细胞有毒,但对没有DNA合成的细胞仅有轻微影响;由于神经元通常缺乏DNA合成能力,因此对抗有丝分裂剂没有多大反应;这样的试剂常常用于神经元的培养,以消除或减少非神经元群体;若要杀死所有的非神经元细胞,可以先加入血清或生长因子来保证有高比例的非神经元细胞进行DNA合成,此时再加入抗有丝分裂剂;但是,某些细胞在它的细胞周期的某些时相时对抗有丝分裂剂是不敏感的;不过,可以重复的将抗有丝分裂剂使用于增殖的细胞群体;在CNS神经元的培养中抗有丝分裂剂常常在星形细胞形成单层后加入,此时,星形细胞由于接触抑制而终止了DNA的合成即细胞停止增殖,它们不会因抗有丝分裂剂的加入而死亡;原代培养中用这种方法阻止成纤维细胞的过度增殖是十分必要的;有两种抗有丝分裂剂常用于神经元的培养:Fluorodexyuridine,是胸苷合成酶抑制剂,一般使用浓度为~10μM;尿苷10μM也常使用,可阻止不分裂细胞的RNA合成;另外,阿糖胞苷也常被使用,其使用浓度为5~50μM;使用任何一种抗有丝分裂剂,都必须考虑它的神经原毒性,应该确定最低效应的使用浓度;阿糖胞苷在很低的浓度下,也会对某些种类的神经元有毒性,可以造成特定神经原的死亡;其他的抗有丝分裂剂尚未表现出这种毒性;六、培养的保持培养物是应该保持在孵箱中的;孵箱可以自动将O2与CO2混合很快达到培养基的设计要求,空气中的氧浓度比血液和脑脊液中要高得多;对于某些细胞的生长,包括神经原,应使氧含量处在一个较低的水平;可以用孵箱达到这个标准,但这样的孵箱并未广泛使用;高湿度可避免培养皿中培养基的蒸发,保持孵箱中的湿度通常是在箱底部放上一大盆水,这水应该经常换,乘水容器应经常消毒以防霉菌生长;若孵箱曾被霉菌孢子严重污染过,那么要想完全去除污染则会非常困难;当培养物必须要长期保持在孵箱中时,应采用较少培养基的瓶、皿,且将盖子盖紧以避免蒸发,或采用相应的按比例供空气的孵箱;温度的精确调节应定期检查,孵箱温度常设置为37℃或较低温度;细胞在低温时可有较长时间的忍耐限度,但当温度升至39℃时,几小时内即死亡;维持培养物的最佳方案常常改变;例如培养胶质细胞时,要经常换液以使其增殖达到最大;而在培养某些神经原时,则要求尽可能少的换液,神经原在两次换液之间的条件下长的最好;大脑皮质的培养要求在不换液的情形下维持一个月以上;另一方面,象海马神经原那样的细胞,倚赖于条件培养基,若换液太频繁细胞就会衰退,此时,可采用1/3或1/2换液的方式;。

细胞培养名词解释

细胞培养名词解释

细胞培养名词解释细胞培养是一种人工模拟体外环境,使细胞能够在实验室中生长和繁殖的技术。

在细胞培养过程中,细胞被放置在适当的培养基中,提供合适的营养物质和环境条件,以促使细胞进行正常的生长和分裂。

细胞培养的过程中涉及到许多与技术相关的名词,下面是一些常见的细胞培养名词的解释:1. 细胞培养基(Cell culture media):细胞培养基是一种含有营养物质的培养液,提供细胞所需的营养物质和生长因子,维持细胞的生长和分裂。

2. 无血清培养基(Serum-free medium):无血清培养基是一种不含胎牛血清的培养基,用来替代传统的含有血清的培养基。

无血清培养基可以减少很多血清相关的问题,如感染风险、批次差异等。

3. 细胞传代(Passage):细胞传代是指将细胞从一个培养瓶转移到另一个培养瓶中,使细胞继续生长和繁殖。

细胞传代可分为原代培养、一代传代、二代传代等,每代细胞数量逐渐增多。

4. 细胞凋亡(Apoptosis):细胞凋亡是一种自我调节的细胞死亡过程,通过激活细胞内一系列特定的信号通路来实现。

细胞凋亡在细胞培养中可能会发生,影响细胞的生长和繁殖。

5. 细胞凝集(Cell aggregation):细胞凝集指的是培养基中的细胞聚集在一起形成团块的现象。

细胞凝聚可能会对细胞培养产生负面影响,如影响细胞的生长速度和细胞间相互作用的研究。

6. 细胞冻存(Cell cryopreservation):细胞冻存是将细胞保存在极低温下的过程,使细胞处于休眠状态。

细胞冻存可以延长细胞的保存时间,并在需要时重新变活。

7. 细胞培养污染(Cell culture contamination):细胞培养污染是指培养基中存在不应存在的微生物,如细菌、真菌、病毒等。

细胞培养污染会影响实验结果和细胞的健康。

细胞培养是生物医学研究中重要的实验技术,通过细胞培养可以深入研究细胞的生理学、生物化学和分子生物学等方面的问题,为疾病的研究和新药的开发提供重要依据。

细胞培养基简介

细胞培养基简介

依据实验目的选择培养基
增殖实验
选择能够支持细胞快速增殖的培养基,以便在短时间 内获得大量细胞。
诱导分化实验
选择能够诱导细胞分化的培养基,以便观察细胞分化 过程和分化后的表型特征。
基因转染实验
选择能够支持基因转染的培养基,以便将外源基因导 入细胞并观察其对细胞表型的影响。
优化培养基配方
调整营养成分
较高。
无血清培养基
总结词
无血清培养基是指在培养基中不添加任何动物来源的血清,完全由化学成分合成的培养基。
详细描述
无血清培养基不含动物来源的血清,而是通过添加多种化学成分来模拟血清的功能,如添加蛋白质、生长因子等 。无血清培养基适用于生产疫苗、单克隆抗体等生物制品,因为其成分明确、质量控制方便,且能够避免血清批 次差异对细胞培养的影响。
再生医学
细胞培养基在再生医学领域也有广泛应用,如组织工程、器官再生等 。
发展趋势
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新型细胞培养基的开发
随着生物技术的不断发展,对新型细胞培养基的 需求越来越高,如无血清培养基、个性化培养基 等。
细胞培养基的个性化定制
根据不同细胞类型和实验需求,细胞培养基需要 进行个性化定制,以满足特定实验条件和生产需 求。
细胞培养基市场的主要参与者包括生 物技术公司、科研机构和制药企业等 。
细胞培养基市场主要集中在美国、欧 洲和亚太地区,其中亚太地区增长最 快。
应用领域
生物制药
细胞培养基是生物制药生产过程中必不可少的原料之一,用于大规 模培养细胞,生产重组蛋白、单克隆抗体等生物药物。
科学研究
细胞培养基广泛应用于生命科学、医学、药学和农业等领域的基础 研究和应用研究,如肿瘤研究、免疫学研究、干细胞研究等。

细胞培养基种类及用途

细胞培养基种类及用途

细胞培养基种类及用途1. DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium):DMEM 是最常用的无血清培养基之一,是以鹰的鸟胚为基础改进而来的,含有大量氨基酸、糖类、维生素和一些重要的生长因子。

适用于大多数哺乳动物细胞的培养,具有优良的细胞增殖和生长效果。

2.RPMI1640:RPMI1640是一种由罗斯韦尔公立医院制备的细胞培养基,主要用于淋巴细胞、淋巴瘤和骨髓细胞的培养。

它具有高浓度的氨基酸和维生素,适合长期的培养以及体外细胞繁殖实验。

3. MEM(Minimum Essential Medium):MEM 是一种最简单的细胞培养基,含有大量的必需氨基酸、维生素和果糖。

它广泛用于原代细胞和肿瘤细胞的培养,具有适应性强、成本低的优势。

4. FBS(Fetal Bovine Serum):FBS 不是一种细胞培养基,而是培养基中添加的血清。

FBS 富含细胞生长因子、激素和营养物质,可提供所需的细胞补体和血浆蛋白。

它被广泛用于细胞培养中,可以促进细胞的增殖和生长。

5. StemPro MSC SFM:StemPro MSC SFM 是一种专门设计用于人类间充质干细胞(MSC)培养的无血清培养基。

它富含生长因子和维生素,可以维持 MSC 的干性状态,有利于其增殖和多向分化。

6. Neurobasal medium:Neurobasal 是一种特殊的神经元细胞培养基,用于神经元细胞的培养。

它含有许多神经营养因子和激素,能够促进神经细胞的生长和分化。

7.DMEM/F12:DMEM/F12是一种混合型细胞培养基,是DMEM和HAMF12培养基的混合产物。

它具有增强细胞的生存能力和增殖速度的优势,适用于许多类型的肿瘤细胞和原代细胞的培养。

细胞培养基的选择要根据具体实验目的和细胞类型来确定。

不同种类的细胞培养基在细胞生长、增殖和分化方面有不同的影响,因此合理的选择细胞培养基可以提高实验效果和数据可靠性。

细胞培养基大全

细胞培养基大全

细胞培养基⼤全⼀、细胞培养基的概念和原理细胞培养基是⼈⼯模拟细胞在体内⽣长的营养环境,是提供细胞营养和促进细胞⽣长增殖的物质基础。

培养液或培养基的含义⼏乎相同,英⽂都是medium。

当它是粉剂时,倾向性地称为培养基,⽽将粉剂配成液体后,多称为培养液。

培养液中常常补加⾎清、抗⽣素等成分。

培养基主要包括天然细胞培养基、合成细胞培养基和⽆⾎清细胞培养基等。

天然细胞培养基是⼈们早期采⽤的细胞培养基,直接取⾃于动物组织提取液或体液,如⾎浆凝块、⾎清、淋巴液、胚胎浸出液等。

营养价值⾼,但成分复杂,差异⼤、不稳定,来源也受到限制。

⽔解乳蛋⽩和胶原是两种较好的天然培养基,富含氨基酸。

⾎清是天然培养基中最有效和最常⽤的培养基,但其组成成分复杂,其中⼀些成分与功能不明确。

⾎清的来源有胎⽜⾎清、⼩⽜或成⽜⾎清、马⾎清、鸡⾎清、⽺⾎清及⼈⾎清,最⼴泛应⽤的为胎⽜⾎清和⼩⽜⾎清。

合成细胞培养基是⽤化学成分明确的试剂配制的培养基,组分稳定,主要包括糖类、必需氨基酸、维⽣素、⽆机盐类等。

⾃1950 年199 细胞培养基问世以来,合成细胞培养基发展⾄今已有⼏⼗种,除了沿⽤半个世纪的基础合成细胞培养基之外,近年来还出现了营养成分更加丰富的低⾎清细胞培养基。

由于细胞种类和培养条件不同,适宜的合成细胞培养基也不同,在动物细胞培养中最常⽤基础细胞培养基有6~7 种,如BME、MEM、DMEM、HAM F12、PRMI1640、199 等。

由于天然培养基的⼀些营养成分不能被合成细胞培养基完全代替,因此⼀般需在合成细胞培养基中添加5%~10%的⼩⽜⾎清。

⼩⽜⾎清的加⼊对细胞培养⾮常有效,但⼩⽜⾎清的成分复杂,这对培养产物的分离纯化和检测会带来⼀定的不便,为减少⼩⽜⾎清的影响,开发了营养成分更加丰富的低⾎清细胞培养基,可以将⼩⽜⾎清的使⽤量降低到1~3%。

⽆⾎清细胞培养基(serum free medium, SFM)是指在使⽤中⽆需添加⾎清的细胞培养基,且其组成成分不含有任何动物组分。

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细胞培养基
1.概述
培养基是培养环境中最重要的成分,可提供细胞生长所必需的营养素、生长因子和激素,并能调节培养体系的pH 值和渗透压。

2.种类
(1)基础培养基
大多数细胞系均可在基础培养基中生长良好,基础培养基中含有氨基酸、维生素、无机盐和碳源(如葡萄糖),但是这种基础培养基配方中必须添加血清。

(2)减血清培养基
减少血清对细胞培养实验不良效应的另一种策略是使用减血清培养基。

减血清培养基是一种补充了营养素和动物来源因子从而降低了血清需要量的基础培养基配方。

(3)无血清培养基
无血清培养基 (SFM) 通过用适当的营养和激素成分代替血清,避免了使用动物血清带来的问题。

无血清培养基配方可用于多种原代细胞和细胞系,包括:用于重组蛋白生产的中国仓鼠卵巢(CHO) 细胞、各种杂交瘤细胞系、Sf9和Sf21 昆虫(草地贪夜蛾)细胞系以及用于病毒生产宿主细胞系(例如:293、VERO、MDCK、MDBK)等。

使用无血清培养基的一大优势是可通过适当的生长因子组合使培养基对特定细胞种类具有选择性。

3.常用细胞系培养基
许多哺乳动物连续细胞系均可采用相对简单的培养基(例如添加了血清的 MEM 培养基)进行培养,而采用MEM培养基培养的细胞同样也可采用DMEM或199培养基进行培养。

但是,如果细胞表达某种特殊功能,则可能需要使用较为复杂的培养基。

有关为某种细胞选择合适培养基的信息通常可通过发表的文献以及提供细胞的机构或者细胞库获得。

如果无法找到细胞该选择何种培养基的信息,您可根据经验选择生长培养基和血清,或者测试几种不同的培养基,以获得最佳结果。

一般而言,贴壁细胞可首先考虑MEM培养基,而悬浮细胞可首先考虑RPMI-1640 培养基。

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