半胱氨酸(Cys)含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法
同型半胱氨酸检测试剂盒(酶循环法)简化说明书
R1+S+R2 孵育时间 150sec
比色杯光径
1.0cm
R1+S+R2 反应时间 1-3min
操作步骤：
标本
10
试剂 1（R1）
180
混匀，置 37℃孵育 3-5 分钟
试剂 2（R1）
50
混匀，置 37℃孵育 150 秒，在测定波长下检测 1-3 分钟吸光度变化，计算△A/min
全自动生化分析仪自身自带的程序参数输入法，上述的基本参数需要结合全自动分析仪自有的程
同型半胱氨酸-甲基转移酶催化下与 S-腺苷同型半胱氨酸（SAM）反应生成甲硫氨酸和 S-腺苷同 型半胱氨酸（SAH）。SAH 被 SHA-水解酶水解形成腺苷和 Hcy。生成的 Hcy 进入 Hcy-甲基转移 酶催化的催化反应，形成循环反应。这个循环反应导致了检测信号的明显放大。形成的腺苷立即 脱氢转化为次黄苷和氨，氨进一步在谷氨酸脱氢酶催化下和 NADH 反应，将 NADH 转化变为 NAD。在 340.nm 处检测 NADH 减少造成的吸光度下降量与样品同中性半胱氨酸的浓度成比例。
高蛋白饮食，可导致 HCY 升高。血清样本检测结果常比抗凝血浆检测结果高 5-10%。
检测方法：
1、试剂配制：本试剂为液体，可直接使用。
2、测定条件：
主波长
340nm
标本
10 uL
副波长
405nm
R1
180 uL
反应温度
37℃
R2
50 uL
反应方向
向下
R1+S 孵育时间
3-5min
反应方法
两点速率法
检测意义： 本试剂通过测定人血清同型半胱氨酸的浓度，辅助相关疾病的诊断。同型半胱氨酸主要作为
同型半胱氨酸测定试剂盒(酶循环法)产品技术要求九强生物
注：不同批号的校准品、质控品赋值有差异。
1.1 包装规格包装规格见表1。
1.2 主要组成成分主要组成成分见表2。
表2 主要组成成分注：不同批号的校准品、质控品赋值有差异。
2.1 外观试剂1为无色至淡黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；试剂2为无色至淡黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；校准品为无色至淡黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
质控品为无色至淡黄色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。
2.2 净含量试剂的净含量应不少于标称量。
2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度A340nm下测定空白吸光度应≥0.8000。
2.3.2试剂空白吸光度变化率A340nm下测定空白吸光度变化率≤0.0100。
2.4 准确度用国际参考物质NIST SRM1950，对试剂盒进行测试，相对偏差应不超过±15%。
2.5 分析灵敏度样本浓度为10.0 μmol/L时，其吸光度变化率应≥ 0.0100。
2.6 线性线性区间在[1.5,50.0]μmol/L，线性相关系数r应≥0.995，在[1.5,10.0]μmol/L区间内测定的绝对偏差应不超过±1.0μmol/L，在(10.0,50.0]μmol/L范围内测定的相对偏差应不超过±10%。
2.7 测量精密度2.7.1重复性使用高、低不同浓度的样本重复测定10次，其测定值的变异系数（CV％）应不大于3％。
2.7.2批间差随机抽取三批试剂盒的批间相对极差（R）应不大于10%。
2.8质控品赋值有效性使用质控品进行测定，所得结果应在质控范围内。
2.9 稳定性试剂盒在2℃～8℃密封避光保存，有效期为12个月。
取到效期后试剂盒进行检测，检测结果应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7.1、2.8的要求。
2.10校准品溯源性按照GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求，提供所用产品校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度，试剂盒校准品溯源至ID-LC/MS/MS参考方法。
组织半胱氨酸(cysteine)含量比色法定量检测试剂盒产品说
组织半胱氨酸（cysteine）含量比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途组织半胱氨酸（cysteine）含量比色法定量检测试剂是一种旨在通过先酸性预处理，有机溶剂萃取后，在碱性条件下，与萘醌磺酸钠进行反应后，由次亚硫酸钠作用产生的红色显色产物，在分光光度仪下，即采用比色法来测定样品中半胱氨酸含量的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心改良沙利文反应（Sullivan Reaction）、成功实验证明的。
其适用于各种组织（动物、人体等）裂解萃取液样品中半胱氨酸水平检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
技术背景L-半胱氨酸（L-cysteine；Cys；C）学名为2-氨基-3-巯基丙酸，是一种疏水性非必需α-氨基酸，分子式是HO2CCH(NH2)CH2SH或C3H7NO2S，分子量121.16，编码为UGU和UGC。
其侧链是巯基（thiol），为非极性，作为亲核剂（nucleophile），参与酶类反应。
氧化后，产生二硫化物和衍生物（disulfide derivative）胱氨酸（cystine），二硫化物成为蛋白质的结构形式。
动物通过胱硫醚β合酶（cystathionine beta synthase）和胱硫醚γ裂合酶（cystathione gamma lyase）由丝氨酸（serine）和蛋氨酸（methionine）转化成同源半胱氨酸（homocysteine）、S-腺苷蛋氨酸（S-adenosylmethionine）、胱硫醚（cystathionine），最后产生半胱氨酸和α-酮基丁酸（α-ketobutyrate）。
而植物和细菌通过丝氨酸乙酰基转移酶（transacetylase）和O-乙酰丝氨酸巯基裂合酶（O-acetylserine（thio）lyase），由丝氨酸产生半胱氨酸和乙酸。
半胱氨酸，是谷胱苷肽的前体，具有抗氧化作用、抗蛋白水解、使蛋白分子之间交联、参与硫化物代谢、与各种金属原子，例如铁、锌、铜等结合、参与蛋白质的转录后修饰、中和酒精毒性等功能。
Hcy说明书
液体生化试剂使用说明书同型半胱氨酸测定试剂盒（酶法）【包装规格】【预期用途】本试剂适用于人血清或血浆中同型半胱氨酸含量的测定。
【检验原理】同型半胱氨酸被转化为游离型后，通过与共价底物反应，同时产生腺苷。
腺苷立即水解成氨和次黄嘌呤，氨在谷氨酸脱氢酶的作用下，使β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原性（NADH）转化为NAD+，样本中的同型半胱氨酸的浓度与NADH的变化成正比。
【主要组成成分】R1：S-腺苷甲硫氨酸盐（SAM）0.1mmol/L β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原性（NADH）0.2mmol/L三（2羧乙基）磷氯化氢（TCEP）0.5mmol/Lα- 酮戊二酸 5.0mmol/L修饰化Hcy甲基转移酶（HMTase） 5.0KU/L谷氨酸脱氢酶（GLDH）10.0KU/LR2：修饰化S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）水解酶3.0KU/L 腺苷脱氨酶（ADA） 5.0KU/L【储存条件及有效期】试剂贮存于2－8℃、避光环境中，有效期为12个月。
【适用仪器】适用于日立7170、7060、7020、奥林巴斯、Beckman、东芝、利霸、迈瑞、岛津、欧宝、Microlab300等各种半自动、全自动生化分析仪。
【样本要求】样本为新鲜血清或肝素血浆。
请采血后立即离心分离血浆，或冷藏保存1小时内离心分离。
离心后样本在室温可稳定4天，0-2℃可稳定2周，-20℃下可稳定2个月。
【检验方法】1. 试剂准备液体试剂，直接使用，无需配制。
2. 基本参数测定模式速率法样本量13 ul延迟时间3分钟R1240 ul测定时间2-3分钟R265ul温度37℃主波长340nm光径1cm 副波长700nm值△A4. 结果计算采用合适的非线性模式，如logit/Log拟合多点定标的校准曲线；样品含量值通过校准曲线得出。
【参考值】3-15umol/L建议各实验室建立自己的参考值范围。
【检验结果的解释】如果不能确定检测结果的真实性则需直接重新测定或对样本进行稀释后重新测定。
资料3 同型半胱氨酸测定试剂盒(循环酶法)性能指标2020.06.10
同型半胱氨酸测定试剂盒（循环酶法）
性能指标
1 净含量
试剂盒内试剂净含量应不少于标示值。
2 外观性状
2.1 试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；
2.2 包装标签文字符号应清晰；
2.3 试剂盒内各组份的外观性状：
（1）R1：无色或淡黄色澄清液体；
（2）R2：无色或淡黄色澄清液体。
3 试剂空白
试剂初始吸光度A应不大于0.05。
4 分析灵敏度
测试10.0umol/L样本的吸光度变化率（ΔA/t）应不小于0.01。
5 线性
线性范围：试剂盒线性范围为（3-50）umol/L。
a)线性相关系数∣r∣应≥0.995；
b)线性偏差不超过±10%。
6 精密度
6.1 重复性
6.1.1 重复测试（10.0±2.0）umol/L的样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于5%。
6.1.2 重复测试（20.0±4.0）umol/L的样本，所得结果的变异系数（CV）应不大于3%。
6.2 批间差
测试（10.0±2.0）umol/L的样本，所得结果的批间相对极差（R）应不大于10%。
7 准确度
回收率应在（100±15）％范围内。
同型半胱氨酸检测试剂盒(酶法)产品技术要求
医疗器械产品技术要求编号：同型半胱氨酸检测试剂盒（酶法）1.产品型号/规格及其划分说明序号规格1R1：2×50ml、R2：2×5ml、R3：2×9ml（2×250Tests）2R1：2×50ml、R2：1×10ml、R3：1×18ml3R1：1×50ml、R2：1×5ml、R3：1×9ml2.性能指标2.1外观试剂R1溶液应呈粉红色、无颗粒、无杂质；试剂R2溶液应呈黄色、无颗粒、无杂质；试剂R3溶液应呈淡黄色、无颗粒、无杂质。
2.2净含量试剂盒各试剂装量应不小于标示值。
2.3试剂空白吸光度应为≤0.20。
用蒸馏水作为样品加入试剂测试,试剂空白吸光度A660nm2.4分析灵敏度测试40μmol/L被测物时，吸光度差值（△A）应不小于0.02。
2.5线性范围在（0～40）μmol/L范围内，其线性相关系数r≥0.990；浓度≥6μmol/L时，相对偏差≤20%；浓度＜6μmol/L时，绝对偏差≤1μmol/L。
2.6测量精密度2.6.1重复性用控制血清重复测试所得结果的重复性（变异系数，CV）应≤10.0%。
2.6.2批间差批间差应≤10.0%。
2.7准确度用参考物质进行测试，其相对偏差应≤20.0%。
3.检验方法仪器基本要求a）波长：660nm；温度：37℃±1℃。
b）全自动生化分析仪。
测试方法按说明书规定，因不同机型使用试剂最终浓度相同。
在此推荐以本公司BECKMAN或HITACHI全自动生化分析仪进行测试。
3.1外观和性状目测检查，试剂R1、R2、R3溶液性状应符合2.1的要求。
3.2净含量用通用量具进行测量，应符合2.2的要求。
3.3试剂空白吸光度用蒸馏水作为样品测试试剂（盒），在测试波长660nm下，记录测试启动时的吸光度（A1）和约5min(t)后的吸光度（A2），A2测试结果即为试剂空白吸光度测定值，应符合2.3的要求。
半胱氨酸(Cys)检测
半胱氨酸（Cys）检测
半胱氨酸（Cysteine, Cys）即L-半胱氨酸，是脂肪族含巯基的极性α-氨基酸，是人体的条件必需氨基酸和生糖氨基酸，可由体内的蛋氨酸（甲硫氨酸）转化
而来，可与胱氨酸互相转化。
主要用于医药、化妆品、生化研究等方面。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和液质联用(LC-MS)法，可高效、精准的检测半胱氨酸的含量变化。
此外，我们还提供其他氨基酸及其代谢物检测服务，以满足您的不同需求。
HPLC和LC-MS测定半胱氨酸样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报
告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 半胱氨酸含量信息
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
LC-MS氨基酸测定项目样本报告，点击查看>。
盐酸半胱氨酸含量测定方法学方案
盐酸半胱氨酸含量测定方法学方案一、引言盐酸半胱氨酸是一种重要的生物标志物，可以用于评估体内抗氧化能力和氧化应激的程度。
因此，准确测定盐酸半胱氨酸的含量对于临床诊断和疾病预防具有重要意义。
本文将介绍一种测定盐酸半胱氨酸含量的方法学方案。
二、实验材料和仪器1. 实验材料：- 盐酸半胱氨酸标准品- 磷酸盐缓冲液（pH 7.4）- 甲醛- 三氯乙酸- 二硫苏糖- 乙酸- 硫酸- 硫代硫酸钠- 硼酸- 二甲基亚砜（DMSO）- 水2. 仪器设备：- 离心机- 分光光度计- 恒温水浴槽- 微量移液器- 氮气吹扫仪三、实验步骤1. 制备样品a. 取适量的生物组织样品，如血液或尿液。
b. 加入甲醛（最终浓度10%）进行固定处理，固定时间为30分钟。
c. 加入三氯乙酸（最终浓度10%）进行蛋白质沉淀，沉淀时间为10分钟。
d. 离心沉淀物，去除上清液。
e. 加入磷酸盐缓冲液溶解沉淀，制备样品溶液。
2. 制备标准曲线a. 取一系列浓度不同的盐酸半胱氨酸标准品溶液，如0.1 mM、0.2 mM、0.4 mM、0.6 mM、0.8 mM和1.0 mM。
b. 分别加入三氯乙酸和磷酸盐缓冲液，制备与样品相同的处理液。
3. 反应体系的制备a. 取一定量的样品溶液和标准品溶液，加入磷酸盐缓冲液，使总体积为1 mL。
b. 加入硫酸（最终浓度为1 M）和硫代硫酸钠（最终浓度为10mM）。
c. 加入硼酸缓冲液（pH 9.0）和二硫苏糖（最终浓度为1 mM）。
d. 加入DMSO（最终浓度为1%）。
4. 反应条件的设置a. 将反应体系放置在恒温水浴槽中，温度设定为37°C。
b. 反应时间为30分钟。
5. 反应终止和样品处理a. 加入乙酸使反应体系酸化。
b. 使用氮气吹扫仪将溶液中的溶剂挥发。
c. 加入水溶解沉淀物，得到最终样品溶液。
6. 分光光度计测定a. 使用分光光度计测定样品溶液和标准曲线吸光度，波长为280 nm。
b. 根据标准曲线，计算样品中盐酸半胱氨酸的含量。
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半胱氨酸（Cys）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC0180
规格：50T/48S
产品内容：
提取液：液体25mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体45mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。
用前1天，向试剂二中加5mL蒸馏水充分溶解，再加磷酸1.25mL，混匀后盖紧（防止水分散失）沸水浴2h；冷却后加20mL蒸馏水，4℃可保存2周。
标准品：粉剂×1支，10mg半胱氨酸，4℃保存。
产品说明：
蛋白质含有三种含硫氨基酸：甲硫氨酸、胱氨酸和半胱氨酸（Cys）。
其中，Cys是唯一一种含有巯基的含硫氨基酸，从甲硫氨酸转化而来，并且可与胱氨酸互相转化。
Cys参与蛋白质二硫键的形成，经常是蛋白质活性中心的组成部分，还可以为其它生理生化反应提供巯基。
此外，Cys大量积聚在皮肤和粘膜表面，在角蛋白生成中维持重要的巯基酶的活性，并且补充巯基，以维持皮肤的正常代谢，调节表皮最下层的色素细胞生成的底层黑色素。
具有美白、解毒、改善炎症和过敏性皮肤等作用。
Cys还原磷钨酸生成钨蓝，在600nm处有吸收峰；通过600nm吸光度，计算Cys含量。
试验需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、低温离心机、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、磷酸和蒸馏水。
操作步骤：
一、半胱氨酸提取：
1、液体样品中半胱氨酸提取：取0.2mL液体样品，加提取液0.3mL，充分混匀，11000rpm4℃离心10min，
取上清液，待测。
2、组织中半胱氨酸提取：称取约0.2g组织，加入0.5mL提取液，冰上充分研磨，11000rpm4℃离心
10min，取上清液待测。
二、测定操作：
1.分光光度计预热30min以上，调节波长到600nm，蒸馏水调零。
2.标准液的配制：将标准品加入0.826mL蒸馏水得到100μmol/mL的标准液。
然后加水稀释为3、2、1、
0.5、0.25、0.125μmol/mL浓度的标准溶液。
3.按下表加入各试剂
试剂名称（μL）测定管标准管空白管
样本200
标准品200
蒸馏水200
试剂一500500500
试剂二300300300
混匀后室温静置15min，于600nm处测定吸光值。
三、样品中半胱氨酸含量计算：
1、标准曲线的绘制：
以各标准溶液浓度为x轴，以∆A（A标准管-A空白管）为y轴做标准曲线，得到方程y=kx+b。
将（A 测定管-A空白管）带入方程求x值。
2、半胱氨酸含量计算：
（1）按液体样本的体积计算
半胱氨酸含量（μmol/mL）=x×V样总÷V=2.5x
（2）按鲜重计算：
半胱氨酸含量（μmol/g鲜重）=x×V样总÷W=0.5x÷W
V：液体样本体积，0.2mL；V样总：提取体系体积，0.5mL；W：样品质量，g。