多糖的测定
多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述多糖是一类重要的生物大分子,在生物体内发挥着重要的生物学功能,如能量储存和物质传递等。
由于多糖具有多种生物活性,在医学、食品、生物化学等领域都有广泛的应用。
准确测定多糖的含量对于科学研究和工业生产具有重要意义。
本文将综述几种常用的多糖含量测定方法,以期为相关领域的同行提供参考。
1. 酚-硫酸法酚-硫酸法是一种常用的多糖含量测定方法,其原理是将多糖与硫酸在酚存在下发生反应,生成紫蓝色的化合物,然后通过比色法测定色深与多糖含量的关系来确定多糖含量。
这种方法简单、快速、灵敏度高,适用于多种多糖的含量测定。
2. 高性能液相色谱法(HPLC)HPLC是一种在化学分离中广泛应用的方法,通过将样品溶解后注入色谱柱中,利用不同组分在色谱柱中的分配系数不同,使得组分在色谱柱中的停留时间不同,从而实现对不同组分的分离和测定。
HPLC方法具有高分辨率、高灵敏度和高准确性的特点,适用于各种多糖的含量测定。
3. 红外光谱法红外光谱法是一种通过测定物质在红外光谱区内的吸收峰来确定物质组成和含量的方法。
多糖分子中含有大量的羟基、甲基等官能团,这些官能团在红外光谱区内具有特征性吸收峰,通过测定这些吸收峰的强度来确定多糖的含量。
这种方法非常灵敏,并且不需要复杂的前处理步骤,适用于多种多糖的含量测定。
4. 显微镜观察法显微镜观察法是一种适用于纯度较高的多糖的含量测定方法,其原理是将多糖溶解后,通过显微镜观察多糖晶体形态来判断多糖的含量。
由于多糖的晶体结构与含量成正比,因此可以通过观察晶体的形态来判断多糖的含量。
这种方法简单、直观,并且不需要复杂的仪器设备,适用于一些实验室条件有限的情况。
多糖含量的测定方法

多糖含量的测定方法有多种,以下列举其中几种常用的方法: 1. 酚硫酸法:将样品与酚硫酸反应生成稳定的紫色化合物,通过测定紫色化合物的吸光度来确定多糖含量。
2. 蒽酮-硫酸法:样品经热水溶解后,乙醇沉淀,除去其他可溶性糖及杂质的干扰,用热水溶解沉淀物并稀释定容。
此法操作简便,测定速度快,可用于多糖的实时快速测定和定性分析。
3. 刚果红显色法:在一定条件下,刚果红显色剂能与乙酰甘露聚糖生成有色复合物,而不与麦芽糖糊精、蔗糖和葡萄糖等发生明显的显色反应。
由此可以建立定量分析芦荟多糖含量的刚果红显色分光光度法。
此外,还有其他方法如色谱法、光谱法等也可以用于多糖含量的测定。
具体使用哪种方法需要根据实验目的、样品性质和实验条件等因素进行选择。
多糖的测定

多糖含量测定
一、对照品溶液的制备
取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品适量,精密称定,加水溶解并定量制成每1ml中含90μg的溶液,即得。
二、标准曲线的制备
精密量取对照品溶液0.2ml、0.4 ml、0.6 ml、0.8 ml、1.0 ml,分别置10ml具塞试管中,加水至1.0ml,精密加5%苯酚溶液1ml,摇匀,再精密加硫酸5ml,摇匀,置沸水浴中加热20分钟,取出,放入冰浴中冷却5分钟,以相应的试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(附录 V A),在488nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
三、供试品溶液的制备
取本品粉末(过三号筛)约0.3g,精密称定,加水200ml,加热回流提取2小时,提取液转移至250ml量瓶中,用适量水分次洗涤容器,洗液转移至同一量瓶中,放冷,加水稀释至刻度,摇匀,滤过,精密吸取续滤液2ml,置15ml离心管中,精密加入无水乙醇10ml,摇匀,冷藏1小时,取出,离心(4000转/分钟)20分钟,弃去上清液,必要时滤过,沉淀加80%乙醇洗涤2次,每次8ml,离心,弃去上清液,沉淀加热水溶解并转移至25ml量瓶中,放冷,用水稀释至刻度,摇匀,即得。
四、测定法
精密量取供试品溶液1ml,置10ml具塞试管中,照标准曲线制
备项下的方法,自“精密加5%苯酚溶液1ml”起,依法测定吸光度,从标准曲线上读出供试品溶液中无水葡萄糖的量,计算,即得。
本品按干燥品计算,含铁皮石斛多糖以无水葡萄糖(C6H12O6)计,不得少于25.0%。
测定多糖含量测定方法

测定多糖含量测定方法
多糖含量的测定方法有多种,以下列举几种常用的方法:
1. 酚-硫酸法:将待测样品加入酚-硫酸混合液中,经强酸催化后,产生深棕色或褐色色素,根据其吸收波长测定其光密度,即可得到多糖含量。
2. 比色法:将待测样品加入反应液中,经过酸或碱催化后,与磷钨酸等试剂发生比色反应,测定吸收波长,计算多糖含量。
3. 全甘蔗多糖含量测定法:利用全甘蔗多糖的特性,在酸性条件下能与硫酸基团结合产生黄色化合物,根据其吸收波长测定光密度,计算多糖含量。
4. 中性多糖含量测定法:利用中性多糖的特性,在加酸或碱后,能够水解为单糖,利用安替比林反应或酶法,测定水解产物里的糖含量,根据比例关系计算多糖含量。
5. 光学活性低分子糖含量测定法:利用光学活性低分子糖所具有的旋光性质,通过测定样品的旋光度,计算出其中低分子糖的含量,进而计算多糖含量。
多糖含量测定的方法综述

多糖含量测定的方法综述
多糖是一类由多个单糖分子组成的生物大分子,在生物体内具有重要的生理功能和生
物活性。
对多糖含量的测定是生物化学研究中的重要内容之一,也是食品、医药、环境、
农业等应用领域中的常见分析任务。
本文将综述多糖含量测定的一些常用方法。
1. 加热法测定:多糖溶液在高温下能够形成胶体物质,形成胶体物质的温度范围称
为胶化温度。
多糖溶液的胶化温度与多糖含量呈正相关关系。
可以通过测定多糖溶液胶化
温度来间接评估多糖含量。
2. 光密度法测定:多糖在特定波长下会吸收特定的光线,可以通过测定多糖溶液的
吸光度来计算多糖的含量。
这种方法需要使用特定的光密度仪器来进行测定。
3. 盐酸水解法测定:多糖可以通过与酸进行水解来得到单糖,再通过选择性的反应
来检测单糖的含量。
盐酸水解法可以利用酸来降解多糖,然后通过比色法或高效液相色谱
法来测定水解产物中的单糖含量。
5. 高效液相色谱法测定:高效液相色谱法是一种高效、灵敏的分离和测定方法,可
以用于测定多糖中的单糖含量。
在高效液相色谱仪上,多糖可以通过色谱柱进行分离,并
通过检测器进行检测和定量。
6. 离子色谱法测定:离子色谱法是一种常用的分析方法,在测定多糖含量方面也有
应用。
多糖中的单糖可以转化为对应的酸性或碱性离子,然后通过离子色谱仪进行分离和
测定。
多糖含量测定的方法包括加热法、光密度法、盐酸水解法、酶解法、高效液相色谱法、离子色谱法和比色法等。
根据实际需要和实验条件的不同,可以选择合适的方法来进行多
糖含量的测定。
多糖的测定

多糖的测定是一种常见的生物化学实验,旨在确定样品中多糖的含量。
多糖是由许多单糖单元组成的碳水化合物,包括淀粉、糖原、纤维素等。
以下是多糖测定的常见方法和步骤:
1.碘滴定法:这是测定淀粉含量的常用方法。
它利用碘对淀粉蓝色复合物形
成的特征进行测量。
样品首先与碘溶液反应,形成蓝色化合物,然后根据颜
色的深浅来测量淀粉的含量。
2.酚-硫酸法:该方法用于测定糖原的含量。
它涉及将样品与酚和硫酸混合,
形成特定颜色的复合物。
这种复合物的颜色可以通过光度计或比色计来测量,以确定糖原的含量。
3.酚硫酸法:这是一种用于测定纤维素含量的常见方法。
它包括将样品与酚
硫酸混合,生成一种具有特定吸光度的化合物。
吸光度可以用光度计或比色
计测量,从而确定纤维素的含量。
4.酚-硫酸-苯酚法:这是测定葡萄糖聚合物含量的方法。
它涉及将样品与酚、
硫酸和苯酚混合,产生特定颜色的复合物。
这种复合物的颜色可以通过光度
计或比色计来测量,以确定葡萄糖聚合物的含量。
这些方法提供了测定不同类型多糖含量的有效手段,可以通过定量分析来确定样品中多糖的含量。
在实际操作中,严格遵循实验室安全操作规程以及特定的实验步骤非常重要,以确保准确和可重复的测定结果。
多糖含量测定的方法综述5篇

多糖含量测定的方法综述5篇第1篇示例:多糖是一类重要的生物大分子,广泛存在于自然界中的生物体内,具有重要的生物学功能。
多糖含量的测定是研究多糖在生物体内作用机制的重要手段。
本文将综述多糖含量测定的方法,旨在为研究人员提供参考。
一、概述多糖是由多个单糖单元通过糖苷键连接而成的高分子化合物。
多糖在生物体内参与多种生物学过程,如能量储存、细胞结构、免疫调节等。
测定多糖含量对于研究多糖的生物学功能、生物合成途径具有重要意义。
二、多糖含量测定方法1. 硫酸-蒽醌法硫酸-蒽醌法是一种常用于测定多糖含量的方法。
该方法通过硫酸水解多糖,生成差向性的蒽醌,并用蒽醌的颜色深浅来反映多糖的含量。
该方法简单快捷,适用于多种多糖的含量测定。
3. 酚-硫酸-钼酸法酚-硫酸-钼酸法是一种用于测定多糖含量的方法。
该方法结合了酚-硫酸法和硅钼酸显色反应,能够提高多糖的测定精确度和灵敏度。
该方法简单易行,适用于各种类型的多糖。
4. 紫外分光光度法紫外分光光度法是一种通过多糖在紫外光区域的吸收来测定多糖含量的方法。
该方法适用于对多糖进行定量和定性分析。
通过分析多糖在不同波长下的吸光度,可以得到多糖的含量和结构信息。
5. 碘液滴定法三、结语多糖含量的测定是研究多糖生物学功能的重要手段。
本文综述了常用的多糖含量测定方法,包括硫酸-蒽醌法、酚-硫酸法、酚-硫酸-钼酸法、紫外分光光度法和碘液滴定法。
研究人员可以根据不同类型的多糖选择合适的测定方法,以准确测定多糖含量。
希望本文能够为多糖研究领域提供帮助,促进多糖研究的进展。
第2篇示例:多糖是一类重要的生物大分子,包括淀粉、半纤维素、纤维素、果胶、均聚糖等多种成分。
多糖在食品工业、医药领域、环境保护等领域具有重要的应用价值,因此测定多糖含量的方法也备受关注。
本文将综述几种常用的多糖含量测定方法,包括酚-硫酸法、硫酸-酚法、差减酶法、红外光谱法等,希望能给相关研究者提供参考。
酚-硫酸法是一种经典的多糖含量测定方法。
多糖含量的测定方法

多糖含量的测定方法
多糖含量的测定方法有很多种,以下是常用的几种方法:
1. 偏光法:利用在特定波长下,糖溶液对光的旋光性质进行测定来确定多糖含量。
常用的仪器有偏光仪和旋光仪。
2. 毛细管电泳:将糖溶液置于细毛细管中,通过电场作用,使糖分子在毛细管中迁移,并测定迁移速度来确定多糖含量。
3. 酶解法:使用特定的酶对糖进行降解,然后测定产生的小分子糖或产生的酶活力来确定多糖含量。
常用的酶有α-淀粉酶、葡萄糖氧化酶等。
4. 光谱法:利用红外光谱或核磁共振等技术,通过检测糖分子特征吸收峰或共振信号来确定多糖含量。
5. 硫酸-苯酚法:将多糖与硫酸混合,然后加入苯酚,生成可测定的色素化合物,通过比色法测定吸光度来确定多糖含量。
以上方法都是常用的多糖含量测定方法,选择适合的方法需要根据实验目的、样品性质和仪器设备的可用性等因素综合考虑。
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第九章多糖的测定
第一节淀粉的测定
●一、测定淀粉含量对于决定用途具有重要意义:
●1、淀粉是供给人体热量的主要来源。
●2、淀粉在食品中的作用是作为增稠剂、胶体生成剂、保潮剂、乳化剂、粘合剂等。
●二、淀粉的测定方法:
●(一)淀粉的物理检验法:淀粉因其品种不同,淀粉的大小和形状也不同。
用显微
镜分析法可鉴别不同品种的淀粉。
●(二)淀粉含量的测定方法:
●1、酶水解法:
●(1)概念:淀粉用麦芽淀粉酶水解成二糖,再用酸将二糖水解为单糖,然后测定由
水解所得到的单糖。
(还原糖)
●(2)常用于液化的淀粉酶是麦芽淀粉酶。
它是⍺—淀粉酶和ß—淀粉酶的混合物。
●(3)酸直接水解法:淀粉的测定方法也可采用酸直接水解法,但酸水解法不仅是淀
粉水解,而且也能分解半纤维素,结果产生了具有还原力的木糖、阿拉伯糖等单糖,使淀粉测定所得的结果较实际含量偏高。
●(4)酶水解法的优点:在一定条件下,用⍺—淀粉酶处理样品,则能使淀粉与半纤
维素等某些多糖分开来。
因为⍺—淀粉酶具有严格的选择性,它只使淀粉液化变成低分子糊精和可溶性糖分,而对半纤维素不起作用。
在用⍺—淀粉酶液化淀粉除去半纤维素等不溶性残留物后,再用酸水解使生成葡萄糖,所得结果比较准确。
这种酶水解作用,叫作选择性水解。
●(5)酶水解法测定淀粉的具体步骤:
●a:样品的处理:将磨碎样品置漏斗中,用乙醚50ml分数次洗涤,除去脂肪,再用10%
乙醇洗去可溶性糖分,先5次。
●b:酶水解:将滤纸上残留物用水移至烧杯内,水浴加热直到淀粉糊化。
冷却至60℃,
加麦芽汁20ml在60℃保温1小时,再重复加热冷却,保温冷却过滤,将滤液定容250ml。
●c:酸水解,吸取滤液加入1:4硫酸,放在120—130℃油浴中保持沸腾5—6min用
40%NaOH 滴定至碱性。
●d:用非林氏试剂测定葡萄糖含量,同时做空白试验。
●e:计算:淀粉=[(A-B)*0.9*100]/[W*(50/250)*(V/100)*100]
A:样品中淀粉相当于还原糖重量(mg)
B:空白相当于还原糖的重量0.9:还原糖换算为淀粉因数
V/100:样液酸解后稀释100ml取Vml W:样品重量(g)
第二节纤维的测定
●植物性食品内含有粗纤维,它集中存在于谷类的麸、糠、果蔬的表皮及其纤维样组
织之中。
从现代营养学的观点来看,我们膳食中每天需要摄入一定数量的纤维(称为膳食纤维),它可防止包括阑尾炎、心脏病和结肠癌等多种疾病,所以,深入了解膳食纤维的特性及其分析方法更具有迫切的现实意义。
此外,粗纤维的含量是果蔬制品的一项质量指标,借此可以鉴定果蔬的鲜嫩度。
例如:青豌豆按其鲜嫩程度分为三级,其粗纤维含量分别为:一级1.8%左右,二级2.2%左右,三级2.5%左右。
●一、概念:
●粗纤维:指动物饲料中那些对稀酸、稀碱难溶的,家畜(特别是反刍动物)不容易
消化的部分,其中主要的成分是果胶、半纤维、纤维素和木质素。
测定粗纤维,可估算出食品中不能消化的部分,借此可评定该食品的营养价值及其经济价值,历来的食品成分表都提供植物性食品的粗纤维含量。
●膳食纤维:是指人们的消化系统或者消化系统中的酶不能消化、分解、吸收的物质。
包括纤维素、半纤维素、木质素、果胶物质。
●二、粗纤维的测定
●测定粗纤维常用的方法是将热的稀酸稀碱与样品相继共煮,并分别经过滤、
洗涤残留物等操作。
这时,酸可将淀粉、果胶物质和部分半纤维素水解除去;而碱能溶解除去蛋白质、部分半纤维素及部分木质素,还除去了脂肪。
●1、测定原理:在硫酸作用下,样品中的糖、淀粉、果胶质和半纤维素水解除去后,
再用碱处理除去蛋白质和脂肪酸,残留物为粗纤维,如其中含有不溶于酸、碱的杂质,可灰化后除去。
●2、具体步骤:
●(1)取20—30g捣碎样品,移入500ml锥形瓶,加入200ml煮沸1.25%硫酸溶液,
维持30min
●(2)过滤(亚麻布)用沸水洗至洗液不呈酸性
●(3)再用200ml煮沸12.5g/L KOH将麻布上残留物洗入原锥形瓶中,煮沸30min,
取下过滤、洗涤。
放入重融坩埚(漏斗)中抽滤。
再依次用乙醇和乙醚洗涤一次。
●(4)将坩埚和内容物放在105℃烘箱中烘干称重至恒重。
●(5)计算:x%=G/m *100
●G----残余物的质量
●M----样品重量
第三节果胶物质的测定
●果胶物质是一种植物胶,可作为食品生产中的胶冻材料和增稠剂,它的用途甚广.
●一、果胶主要用途:
●1、用果胶制造果冻和糖果。
●2、果胶物质是影响果酱制品稠度和凝冻性的重要因素。
●3、果胶在柑桔汁生产中对混浊体起稳定剂的作用等。
果胶在医药上的应用,也具有
重要意义。
●4、它可以作为治疗胃肠道及胃溃疡等疾病的良好药剂。
●5、果胶,特别是低甲氧基果胶,因为它能与铅、汞等有害金属形成人体不能吸收的
溶解物,因而可用作金属中毒的一种良好解毒剂和预防剂。
●二、果胶的测定方法
●1、重量法:是用沉淀剂使果胶物质沉淀析出,而后测定重量的方法。
●(1)沉淀剂有两类:电解质、如氯化钠、氯化钙
●有机溶剂:如甲醇、乙醇、丙酮等。
●(2)测定步骤:
● a.准确称取新鲜样品,加水煮沸一小时。
冷却后定容250ml.
● b.过滤吸取滤液25ml,加入0.1molNaOH溶液100ml,再加入50ml1mol醋酸溶液,
和50ml2molCacL2溶液,加热沸腾5min后立即用烘干至恒重的滤纸过滤,用热水洗。
c.把带滤渣的滤纸放在预先烘干至恒重的称量瓶内,置105℃烘箱中烘至恒重。
● d.计算:
●果胶质(%)=(0.9235*G)/[W*(25/250)]*100
●G:滤渣重量克数=W1-W2
●W:样品重量克数
●W1---以果胶酸钙重和玻璃灯芯漏斗
●W2 ---玻璃灯芯漏斗
●0.9235:果胶酸钙换算为果胶质的系数
●2、咔唑比色法:基于果胶物质水解,生成物一(半乳糖醛酸)在强酸中与咔唑的缩
合反应。
生成紫红色化合物,其呈色强度与半乳糖醛酸浓度成正比。
可进行比色定量测定。