马铃薯葡萄糖培养基
培养基配方
干羊粪98
碳酸钙/石灰2
水适量
先把羊粪加水浸湿，堆积过夜，再与碳酸钙拌匀。适用于蘑菇菌种生产。
(8)谷壳木屑培养基
谷壳(粉碎)80
木屑18
石膏粉1
糖1
水适量
适用于香菇、木耳菌种生产。
(9)圆木培养基
圆木500个
木屑100克
米糠/麸皮50克
水适量
适用于段木香菇、木耳栽培种，具有接种速度快、菌丝萌发率高、不需封树皮盖等特点。制作时，选适生树，锯成厚~厘米的圆木片，用口径厘米皮带冲冲下圆木块，晒干备用。使用时清水浸泡过夜，与木屑米糠拌匀。也可用圆木机加工，它具有速度快，生产量大，且粗细、长短可调节。
石膏粉1克
琼脂20克
蘑菇堆料100~150克(煎汁)
水1000毫升
适用于培养蘑菇菌种，菌丝旺盛不易衰老。
(4)小麦琼脂培养基
小麦粒125克
琼脂20克
水1000毫升
小麦粒加水4000毫升煮2小时，24小时后过滤，补足水至1000毫升。为欧洲蘑菇常用培养基。
(5)苹果汁琼脂培养基
苹果100克(绞汁)
蛋白胨2克
(4)稻草麸皮培养基
稻草(切短)79
麸皮/米糠20
碳酸钙/石膏1
水适量
适用于草菇菌种生产，也可用于平菇类制种。
(5)松木屑麸皮培养基
松木屑70
麸皮/米糠20
糖3
石膏粉1
过磷酸钙1
水适量
适用于茯苓制种。
2.栽培种培养基及组分栽培种生产量比原种大，需要原料多，为了便于就地取材，除原种培养基也可作为栽培种培养基应用之外，这里根据不同菇类分别介绍一些实践中行之有效的培养基，供菌种生产中选择。
马铃薯葡萄糖琼脂PDA培养基配制课件
药用真菌培养
在药用真菌培养中，PDA培养基也得到了广泛应用，如灵芝 、冬虫夏草等。通过PDA培养基的精心配制和优化，可以获 得高质量的药用真菌菌丝体，为中药材的制备提供原料。
马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)培养基配制 课件
contents
目录
• PDA培养基简介 • PDA培养基的配制 • PDA培养基的使用方法 • PDA培养基的应用实例 • PDA培养基的优化与改进 • PDA培养基的发展前景与展望
01
PDA培养基简介
PDA培养基的定义
01
PDA培养基是一种常用的真菌培 养基，由马铃薯提取物、葡萄糖 和琼脂粉组成。
02
它是一种半固体培养基，用于支 持真菌的生长和繁殖。
PDA培养基的用途
PDA培养基广泛应用于真菌的分离 、纯化和鉴定。
它也是研究和了解真菌生物学特性的 重要工具。
PDA培养基的发展历程
PDA培养基由法国微生物学家查尔斯·路易斯·帕尼埃（Charles Louis Pastier）于 1880年代发明。
改进保存方式
优化PDA培养基的保存条 件和方法，延长其保存期 限，方便使用。
标准化与质量控制
制定PDA培养基的标准操 作程序和质量标准，确保 培养基的质量和可靠性。
06
PDA培养基的发展前景与 展望
PDA培养基的发展趋势
高效化
随着微生物培养技术的不断发展 ，PDA培养基的配方和制备工艺 将不断优化，提高培养效率，缩
2. 煮沸马铃薯
将切好的马铃薯块放入锅中，加水 煮沸15-20分钟，直到马铃薯变软。
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制
一、食用菌菌种种类
人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。
1）母种（一级菌种）：用孢子分离或组织分 离等培育的菌丝体称为母种。
2）原种（二级菌种）：把母种扩大到木屑、 棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。
3）栽培种（三级菌种）：由原种扩大培养成 为生产上使用的菌种称为栽培种。
4）菌种：实质上就是经过人工培养并进一步 繁殖的食用菌的纯菌丝体。
二、食用菌的制种程序
种菇
孢子分离 组织分离
接种→母种（一级） 接种→培养→原种（二级）
培养
接种→→栽培种（三级）
经过这样三级培养，食用菌菌丝数量大大增加。
一般1支试管菌种可繁殖4~6瓶原种，每瓶原种又 可扩大繁殖60~100瓶栽培种。
母种
原种和 栽培种
三、菌种生产常用的设备和用具 1、接种设备 ⑴ 接种室 ⑵ 接种箱 ⑶ 超净工作台
超净工作台
三、菌种生产常用的设备和用具
2、灭菌设备
Ⅰ
1）手提式：容量小，适于斜面试
高
管及玻璃器皿等；
压 蒸
2）立式： 容量大，投资大；
气 灭
3）卧式：容量大，投资大；
菌
4）家用24或26 cm压力锅：母种、
胡萝卜葡萄糖琼脂培养基胡萝卜200g葡萄糖或蔗糖1820g琼脂20ghpda培养基配制方法马铃薯去皮去芽眼切成片玉米大小称取20g70mlo煮沸1520min双层纱布过滤取滤液并补足100ml琼脂2g熔化葡萄糖2g分装试管不要倒到试管壁上塞上棉塞捆扎灭菌高压蒸气灭菌1530min制成斜面检查灭菌效果即2830培养23d1每人制5支试管斜面
三、菌种生产常用的设备和用具
3、培养设备 ⑴ 培养室 ⑵ 生化培养箱
马铃薯葡萄糖培养基常备法
马铃薯葡萄糖培养基常备法马铃薯葡萄糖培养基是优良的半合成培养基，因马铃薯营养丰富，性能稳定，适宜大多数真菌类微生物（如食用菌、酵母菌等）的培养，故被微生物工作者视为基础培养基，实际上它确实是四季必备的常用培养基。
但马铃薯的收获是有季节性的，错过季节，往往因购不到马铃薯而无法制备马铃薯培养基，以致影响科研和生产的正常进行。
下面介绍两种制作马铃薯葡萄糖培养基的常备方法。
1．液体马铃薯培养基常备法（1）制取马铃薯常备液在马铃薯上市季节，选购一批个大，皮滑，无病毒的马铃薯，按常规，将其清洗、削皮、切片，按料水20∶100的比例配方，以80℃的水温浸煮60min，使其营养物质充分溶解水中，过滤，装瓶加塞。
以1.5×105pa的压力灭菌30min，备用。
为使马铃薯常备液更理想，在配制时还需注意以下事项：1、削皮时一定要将马铃薯的芽眼挖尽。
因芽眼中往往存有很多芽孢杆菌，如不挖除不仅消毒麻烦，亦易招致细菌性污染。
2、配制的常备液如短期内使用，则可用棉花塞瓶口。
如欲放置较长时间，应用橡皮塞塞瓶口。
高压灭菌时一定逐渐排除冷空气，如快速排气，会使瓶塞弹出。
3、常备液装瓶时，可以装上几种不同的量，以备制用时按需取液。
4、常备液于常温环境中，一般可保存8个月左右。
保存于冰箱内，可一年不变质。
（2）制马铃薯葡萄糖培养基何时需用马铃薯葡萄糖培养基，可随时将马铃薯常备液取来，加热后溶入2%琼脂，再加2%葡萄糖，然后装入试管，按常规高压灭菌，制成即可。
2．固体马铃薯培养基常备法（1）制取马铃薯常备粉块同样需选购好马铃薯，然后将其洗净、削皮，挖去芽眼，用蒸具隔水蒸30min。
但切勿放在水中烧煮，致使营养损失。
然后，将马铃薯取出，研成泥浆状，压薄后摊于搪瓷盘中，晒干或置于37℃的恒温箱内烘干，备用。
（2）制马铃薯葡萄糖培养基将已制好备用的马铃薯粉块，按100ml水加马铃薯粉块约15g的比例，先置于沸水中浸煮30min，浸出其营养成份后，过滤。
pda培养基
pda培养基
PDA（Potato Dextrose Agar）是一种常用的培养基，以马铃薯和葡萄糖为主要成分。
它适用于真菌和霉菌的培养和鉴定。
PDA培养基的配方如下：
- 马铃薯提取物：200 g/L
- 葡萄糖：20 g/L
- 洋葱提取液：1 g/L
- 干酪膜素：0.1 g/L
- 硫酸镁：0.5 g/L
- 琼脂：15 g/L
- 蒸馏水：1000 mL
1
制备PDA培养基的步骤如下：
1. 将马铃薯洗净去皮，切成小块。
2. 将马铃薯块放入大容器中，加入适量的蒸馏水，煮沸1
小时，然后离心取得汁液。
3. 将马铃薯汁液过滤。
过滤液为马铃薯提取物。
4. 在一烧瓶中加入马铃薯提取物和葡萄糖，搅拌溶解。
5. 在另一烧瓶中加入洋葱提取液和硫酸镁，搅拌溶解。
6. 将两个烧瓶中的溶液混合在一起，调整pH值为5.6-6.2。
7. 在溶液中加入干酪膜素和琼脂，搅拌溶解。
8. 将培养基加热至沸腾，然后倒入培养瓶中。
9. 灭菌培养瓶，通常以121°C高压蒸汽灭菌20-30分钟。
PDA培养基可以用于分离和培养真菌，如酵母菌、霉菌和
子囊菌等。
它提供了合适的营养物质和适宜的条件，促进
真菌的生长和繁殖。
2。
霉菌和酵母菌计数及分离培养
品种名称：马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)
英译名称：Potato Dextrose Agar
Potato dextrose agar medium with antibiotics
培养基用途：
供霉菌和酵母菌计数及分离培养(GB4789.15-2010和ISO标准)。
马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)使用原理：
马铃薯浸出粉有助于各种霉菌的生长;葡萄糖提供能源;琼脂是培养基的凝固剂;氯霉素可抑制细菌的生长。
马铃薯葡萄糖琼脂配方(每升)：
马铃薯 300g(从中提取浸出粉)
葡萄糖 20g
琼脂15g
氯霉素0.1g
最终pH 6.0±0.2
马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)使用方法：
1、称取马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)40.1g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min，备用。
2、霉菌和酵母菌计数。
3、用于霉菌分离鉴定。
马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)质量控制：
本品倾注平皿，下列菌株接种后25—28℃培养72h生长情况如下表。
菌名菌号生长状况菌落特征
黑曲霉ATCC16404 良好菌丝白色孢子黑色
白色念珠菌ATCC10231 良好菌落表面呈奶油色
大肠埃希氏菌ATCC25922 被抑制——
金黄色葡萄球菌ATCC6538 被抑制——
贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。
贮存期三年。
规格： 250g。
实验室常用培养基
．常用培养基的制备（1）马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）和马铃薯蔗糖琼脂（PSA）培养基培养真菌最常用的培养基，成分如下：去皮马铃薯200 g 葡萄糖或蔗糖20g琼脂15－20g 水1000 ml配制方法：将马铃薯洗净去皮，称取200 g，切成小块（不必大小）放入锅中，加水1000ml，煮沸半小时，稍冷后用双层纱布过滤，在滤液中加蔗糖20g，加水补足到1000ml。
配成的培养基一般呈酸性，用于培养真菌，可以不必调pH。
如配制固体培养基，在加蔗糖前先加15－20g 琼胶加热熔化，最后加入蔗糖，混匀并加水补是至1000ml，趁热分装在试管或三角瓶中。
标准试管（15×150mm）分装量如下：一般用作斜面培养的每试管装培养基3－5ml，用作平面培养的每试管约10ml，加棉花塞后灭菌。
培养细菌用的培养基必须调节其酸度值到中性（pH7．0左右）。
（2）牛肉汁蛋白胨培养基（NA）是培养细菌最常用的培养基，又称营养琼脂或肉汤培养基。
成分如下：酵母浸膏1g 牛肉浸膏3g蛋白胨5-10g 蔗糖（或葡萄糖）l0g琼脂15-20g 水1000mlpH7.0配制方法：称取牛肉浸膏及蛋白胨溶于少量热水中备用，在其余水中加入琼脂，加热溶化后将牛肉浸膏和蛋白胨溶液加入混匀，然后加水补足到1000 ml，用NaOH或HCL调整至pH7.0，趁热分装，加棉花塞后灭菌。
（3）玉米叶培养基取一定数量的玉米叶片，洗净后剪成1㎝2左右的小块，放在250ml的三角瓶中，盛放量一般为三角瓶的1／3，然后加少量的水以保持湿润，加棉花塞后灭菌。
天然培养基一般不必调整pH。
（4）查氏（Czapek）培养基查氏培养基是一种组合培养基，其成分如下：NaNO3 2g K2HPO4 1 gMgSO4·7H2O 0．5g KCl 0．5gFeSO4 0．01g 蔗糖30g水1000ml（5）灭菌水的配制蒸馏水（或自来水）经过灭菌处理即成灭菌水，是实验室用量最大的必备品之一，常用于病原菌的分离、稀释、保湿等。
简述pda培养基的配方及制作方法
简述pda培养基的配方及制作方法PDA（Potato Dextrose Agar）培养基是一种常用的微生物培养基，适用于真菌和细菌的培养和研究。
下面将简要介绍PDA培养基的配方及制作方法。
一、配方：PDA培养基的基本配方包括土豆提取物、葡萄糖和琼脂。
具体配方如下：- 土豆提取物：200克- 葡萄糖：20克- 琼脂：15克- 蒸馏水：1000毫升二、制作方法：1. 准备土豆提取物：将200克土豆削皮，切成小块，放入锅中加水煮沸，煮至土豆变软烂。
2. 过滤土豆提取物：将煮熟的土豆块取出，将土豆提取物过滤获得澄清的液体。
3. 加入葡萄糖和琼脂：将土豆提取物倒入烧杯中，加入20克葡萄糖，搅拌均匀。
然后加入15克琼脂，再次搅拌均匀。
4. 煮沸溶解：将烧杯放入加热板上，加热煮沸溶解琼脂和葡萄糖，搅拌均匀。
5. 装瓶和灭菌：将溶解后的培养基倒入培养瓶中，每瓶约20毫升。
然后用高压灭菌器将瓶内培养基加压灭菌，保持121摄氏度，压力为15磅，时间为15-20分钟。
6. 结果：冷却后，PDA培养基凝固并变成琼脂状，可用于微生物培养。
PDA培养基的配方中土豆提取物富含碳水化合物、蛋白质和维生素，提供了真菌和细菌所需的营养物质。
葡萄糖作为碳源供能，琼脂则使培养基凝固，便于微生物的生长和观察。
制作PDA培养基的过程中需要注意以下几点：- 严格按照配方和比例加入各种原料，确保培养基的质量。
- 加热溶解琼脂和葡萄糖时要充分搅拌，以免结块或糊底。
- 灭菌时要控制好温度、压力和时间，确保杀灭所有的细菌和真菌。
- 倒入培养瓶时要注意卫生，避免污染和外界微生物的侵入。
PDA培养基是一种常用的通用培养基，适用于各种细菌和真菌的培养和研究。
制作PDA培养基的方法简单易行，成本低廉，因此被广泛应用于微生物学实验室和工业生产中。
通过培养基上微生物的生长情况，可以判断其形态、生理特性和代谢活性等，为微生物的研究提供了重要的基础。
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1、配方：马铃薯（去皮）200g、蔗糖15—20g、琼脂20—30g、蒸馏水1000mL。
PH自然。
2、步骤：
（1）将马铃薯洗净，去皮，切成大小约为1㎝3的小块，称200g，放入1000mL水中煮沸20—30分钟，用双层沙布过滤，
关键词：马铃薯蔗糖马铃薯蔗糖琼脂培养基马铃薯蔗糖琼脂培养基
1、配方：马铃薯（去皮）200g、蔗糖15—20g、琼脂20—30g、蒸馏水1000mL。
PH自然。
2、步骤：
（1）将马铃薯洗净，去皮，切成大小约为1㎝3的小块，称200g，放入1000mL水中煮沸20—30分钟，用双层沙布过滤，取其液滤。
（2）定容：加水补足至1000mL。
（3）加入蔗糖至全部溶化。
（4）加琼脂.至全部溶化。
（5）趁热分装试管及三角瓶。
（6）加棉塞：分装完毕后，在试管口或三角瓶口塞上棉花，以阻止外界微生物进入培养基而造成污染，并保证有良好的通气性能。
（7）包扎：棉塞上包一层牛皮纸，扎紧，即可进行灭菌。
（8）灭菌：将上述培养基以0.1Mpa，121℃，高压蒸汽灭菌20min。
（9）搁置斜面：将灭菌的试管培养基管口端搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长度的一半为宜。
（10）无菌检验：灭菌后的培养基放入28℃恒温箱中培养24h，以检验灭菌效果，无污染方可使用。
注：第（8）（9）（10）步需在实验二进行。
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