马铃薯葡萄糖琼脂PDA培养基
马铃薯葡萄糖琼脂PDA培养基配制课件
药用真菌培养
在药用真菌培养中，PDA培养基也得到了广泛应用，如灵芝 、冬虫夏草等。通过PDA培养基的精心配制和优化，可以获 得高质量的药用真菌菌丝体，为中药材的制备提供原料。
马铃薯葡萄糖琼脂 (PDA)培养基配制 课件
contents
目录
• PDA培养基简介 • PDA培养基的配制 • PDA培养基的使用方法 • PDA培养基的应用实例 • PDA培养基的优化与改进 • PDA培养基的发展前景与展望
01
PDA培养基简介
PDA培养基的定义
01
PDA培养基是一种常用的真菌培 养基，由马铃薯提取物、葡萄糖 和琼脂粉组成。
02
它是一种半固体培养基，用于支 持真菌的生长和繁殖。
PDA培养基的用途
PDA培养基广泛应用于真菌的分离 、纯化和鉴定。
它也是研究和了解真菌生物学特性的 重要工具。
PDA培养基的发展历程
PDA培养基由法国微生物学家查尔斯·路易斯·帕尼埃（Charles Louis Pastier）于 1880年代发明。
改进保存方式
优化PDA培养基的保存条 件和方法，延长其保存期 限，方便使用。
标准化与质量控制
制定PDA培养基的标准操 作程序和质量标准，确保 培养基的质量和可靠性。
06
PDA培养基的发展前景与 展望
PDA培养基的发展趋势
高效化
随着微生物培养技术的不断发展 ，PDA培养基的配方和制备工艺 将不断优化，提高培养效率，缩
2. 煮沸马铃薯
将切好的马铃薯块放入锅中，加水 煮沸15-20分钟，直到马铃薯变软。
pda培养基结果讨论
pda培养基结果讨论PDA培养基结果讨论引言：PDA（Potato Dextrose Agar）培养基是一种常用的富含碳水化合物和氮源的培养基，广泛应用于真菌和霉菌的生长和研究中。
本文将对PDA培养基的结果进行讨论。
样品来源：本次实验使用了来自不同环境中的真菌和霉菌，包括从野外土壤、植物表面、室内空气等处采集到的样品。
实验方法：1.制备PDA培养基：将500g马铃薯切成小块，加入1000ml蒸馏水中煮沸30分钟，过滤后加入20g葡萄糖、20g琼脂和适量蒸馏水至1000ml。
pH值调整至5.6-5.8，压力灭菌15分钟。
2.接种：将不同来源的真菌和霉菌分别接种在PDA培养基上，并在恒温箱中以25℃孵育7天。
3.观察：观察各个接种点上是否有生长，并记录其形态特征。
结果：经过7天孵育后，我们发现所有样品都在PDA培养基上生长了，其中有些生长得非常快，甚至在2-3天内就出现了大量菌落。
以下是各个样品的观察结果：1.来自野外土壤的真菌：该样品的生长速度较快，7天内形成了大量白色菌落。
观察下来，这些菌落呈圆形或半圆形，表面光滑，质地柔软。
2.来自植物表面的霉菌：该样品在PDA培养基上生长得非常迅速，在3天内就出现了大量白色绒毛状的菌丝。
观察下来，这些菌丝呈无规则分支状，并且很容易扩散到周围。
3.来自室内空气的真菌：该样品在PDA培养基上生长得比较缓慢，在7天内只有少量白色菌落出现。
观察下来，这些菌落呈不规则形状，表面稍微粗糙。
讨论：1.PDA培养基适合真菌和霉菌的生长从我们实验结果可以看出，所有样品都在PDA培养基上成功地生长了。
这说明PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基，其富含碳水化合物和氮源的成分可以提供这些微生物所需的营养。
2.不同来源的样品生长速度不同我们发现，不同来源的样品在PDA培养基上生长速度有所不同。
来自野外土壤的真菌生长得比较快，而来自室内空气的真菌则生长得比较缓慢。
这可能与这些样品所处环境中微生物数量和种类有关。
PDA培养基的配制方法
PDA培养基的配制方法PDA（Potato Dextrose Agar）是一种富含淀粉和葡萄糖的琼脂培养基，广泛用于真菌和霉菌的培养和鉴定。
下面是PDA培养基的精确配制方法：原料准备：-250克马铃薯-20克葡萄糖-15克琼脂工具准备：-秤-剪刀-玻璃容器或烧杯-培养瓶或琼脂培养皿-灭菌器或压力锅-pH计或pH试纸-搅拌棒或吹球步骤：1.清洁工具：将玻璃容器、培养瓶、搅拌棒等工具用肥皂水洗净，并用自来水冲洗干净。
2.马铃薯的制备：先用清洁的剪刀将250克马铃薯去皮，然后切成均匀的小块。
3.煮马铃薯：将马铃薯块放入玻璃容器或烧杯中，并加入足够的自来水，使其覆盖马铃薯。
然后将容器放入灭菌器或压力锅中，煮沸30分钟杀灭马铃薯中的微生物。
4.过滤溶液：将煮熟的马铃薯溶液用细网过滤器过滤出来，以去除固体残渣。
5.加入琼脂：将过滤后的马铃薯溶液重新倒回玻璃容器或烧杯中，随后加入15克的琼脂。
将容器放入微波炉中，加热溶解至琼脂完全溶解为止。
6.加入葡萄糖：将20克葡萄糖加入琼脂溶液中，搅拌均匀。
7.均匀分配：将培养基溶液分装到培养瓶或琼脂培养皿中。
每瓶或皿中的溶液量应根据需要进行调整，一般为20-25毫升。
8.pH调节：使用pH计或pH试纸检测培养基的酸碱度。
PDA培养基的理想pH值为5.6、如果pH值高于或低于此值，则使用盐酸或碳酸氢钠溶液进行调节，直到达到理想的pH值。
9. 灭菌：将装有培养基的瓶或皿盖好，然后放入灭菌器或压力锅，进行高温高压灭菌。
通常在121℃下压力为15磅（或1.05kg/cm²）下灭菌20分钟。
10.存储：在灭菌后的培养基冷却到接近室温后，将其存储在冰箱中，以防止微生物生长。
注意事项：-所有使用的工具和培养基都必须经过彻底的消毒。
-在煮马铃薯时，要确保马铃薯块完全煮熟，以确保有效杀灭微生物。
-在加入琼脂和葡萄糖时，要确保琼脂完全溶解，葡萄糖均匀分散。
-在调节pH时要小心，因为pH调节对微生物的生长有重要影响。
PDA培养基的配制
PDA培养基的配制
•2008年12月10日
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•Biology
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母种培养基的配制
同一种菌类培养基的配方虽然有多种多样，但必须含有各种菌丝生长所需要的养分、水分和适宜的酸碱度。
马铃薯、葡萄糖、琼脂作为各类母种的培养基最为普遍，菌丝都能正常生长。
现将常用的培养基配方和配制方法举例介绍。
1.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)
马铃薯(去皮)：200g
葡萄糖：20g
琼脂：20g
水：1000mL
pH值：自然
2.马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA培养基)
马铃薯(去皮)：200g
蔗糖：20g
琼脂：20g
水：1000mL
pH值：自然
以上两种培养基广泛应用于各种菇、耳、猴头类食用菌的培养。
其具体制作方法是：将200g马铃薯去皮，去芽眼，切成小条放入铝锅中，加入1000mL水，煮沸20～30分钟左右至马铃薯软而不烂时，用6～8层纱布过滤，取滤汁于锅中，补水至1000mL，加入琼脂熔化，再加入糖搅拌均匀，趁热分装于试管中。
牛肉膏蛋白胨培养基（主要是培养细菌用的）
牛肉膏 5.0g
蛋白胨10.0g NaCl 5g
水1000mL pH 7.2~7.4。
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制
（3） 作业
（1）每人制5支试管斜面。 （2）什么叫食用菌菌种？它又有哪些类型？ （3）食用菌菌种生产常用的设备和用具有哪些？ （4）写出食用菌的制种程序。 （5）常用的消毒药品有哪些？
三、菌种生产常用的设备和用具 6、常用的消毒药品
⑷ 5%石炭酸：喷洒墙壁、地面及擦洗桌面等，也 可用来苏尔代替；
⑸ 2%来苏尔、新洁尔灭：用法同上；
⑹甲醛（福尔马林）：用于菇房和接种箱等空气消 毒；
方法：关闭门窗消毒，自行气化；
用量：10ml甲醛＋5g KMnO4／立方米。
四、母种生产技术
食用菌母种培养基的种类繁多，由于不同营养 类型的食用菌对营养物质的要求不同，所以，在 培养不同食用菌母种时，应选择适宜该菌种的培 养基。
胡萝卜葡萄糖琼脂培养基胡萝卜200g葡萄糖或蔗糖1820g琼脂20ghpda培养基配制方法马铃薯去皮去芽眼切成片玉米大小称取20g70mlo煮沸1520min双层纱布过滤取滤液并补足100ml琼脂2g熔化葡萄糖2g分装试管不要倒到试管壁上塞上棉塞捆扎灭菌高压蒸气灭菌1530min制成斜面检查灭菌效果即2830培养23d1每人制5支试管斜面
母种
原种和 栽培种
三、菌种生产常用的设备和用具 1、接种设备 ⑴ 接种室 ⑵ 接种箱 ⑶ 超净工作台
超净工作台
三、菌种生产常用的设备和用具
2、灭菌设备Ⅰ来自1）手提式：容量小，适于斜面试
高
管及玻璃器皿等；
压 蒸
2）立式： 容量大，投资大；
气 灭
3）卧式：容量大，投资大；
菌
4）家用24或26 cm压力锅：母种、
四、母种生产技术
②综合马铃薯培养基
马 铃 薯 200g 、 葡 萄 糖 （ 或 蔗 糖 ） 20g 、 KH2PO4 2g、MgSO4 0.5g、维生素B1 10mg、 琼脂20g、H2O 1000ml、pH自然。 适合培养草菇、猴头菌、灵芝及各种食用菌菌 种分离、保藏。
PDA培养基
用 法： 1． 称取本品 46.0g，加入 1000ml 蒸馏水中， 115℃高压灭菌 20 分钟。 2． 取适宜稀释度样品液 1ml，加入到无菌 平皿中心，将冷至 45~50℃的 PDA 15~20ml 倾注于平皿中。旋转 平皿将培养基 与样液充 分混匀。 3． 凝固后，翻转平板，置于 36±1℃培养 40~48h。
使用须知： 请在培养基保质期内使用。
质量控制：
1． 外观
此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性。制备
好的平板呈透明无色或淡黄色。
2． 微生物实验
在 36 ±1 ℃培养 40~48 h：
质控菌株
CMCC 生长情况 菌落颜色 沉淀环
酵母菌
+++
白色
-
黑曲霉菌
98003
+++
黑色
-
马铃薯葡萄糖琼脂 Potato Dextrose Agar（PDA）
用 理：
产品编号： AKF003
容 量：250g
成 分：（g/L） 马铃薯浸粉･･････････････････････6.0g 葡萄糖･････････････････････････20.0g 琼脂･･･････････････････････････20.0g pＨ值 5.6±0.2･･･････････････････25℃
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制
三、菌种生产常用的设备和用具 6、常用的消毒药品 、
石炭酸： ⑷ 5%石炭酸： 喷洒墙壁 、 地面及擦洗桌面等 ， 也 石炭酸 喷洒墙壁、地面及擦洗桌面等， 可用来苏尔代替； 可用来苏尔代替； ⑸ 2%来苏尔、新洁尔灭：用法同上； 来苏尔、 来苏尔 新洁尔灭：用法同上； 甲醛（福尔马林） ⑹ 甲醛 （ 福尔马林 ） ： 用于菇房和接种箱等空气消 毒； 方法：关闭门窗消毒，自行气化； 方法：关闭门窗消毒，自行气化； 用量： 甲醛＋ 立方米。 用量：10ml甲醛＋5g KMnO4／立方米。 甲醛
四、母种生产技术
②综合马铃薯培养基 马 铃 薯 200g 、 葡 萄 糖 （ 或 蔗 糖 ） 20g 、 KH2PO4 2g、MgSO4 0.5g、维生素B1 10mg、 、 、维生素 、 琼脂20g、H2O 1000ml、pH自然。 自然。 琼脂 、 、 自然 适合培养草菇、猴头菌、 适合培养草菇、猴头菌、灵芝及各种食用菌菌 种分离、保藏。 种分离、保藏。
四、母种生产技术
食用菌母种培养基的种类繁多， 食用菌母种培养基的种类繁多 ，由于不同营养 类型的食用菌对营养物质的要求不同， 所以， 类型的食用菌对营养物质的要求不同 ， 所以 ， 在 培养不同食用菌母种时， 培养不同食用菌母种时 ， 应选择适宜该菌种的培 养基。 养基。 母种培养基要求营养丰富、 完全、 氮源、 母种培养基要求营养丰富 、 完全 、 氮源 、 维生 素的比例应高。 素的比例应高。 现将食用菌常用的母种培养基列举如下 ：
PDA LB培养基
PDA培养基马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基是分离菌物和细菌的常用培养基，其做法是称取200g马铃薯，洗净去皮切成小块，加水1000ml煮沸半个小时或高压蒸煮20分钟，纱布过滤，再加10-20g葡萄糖和17-20g琼脂，充分溶解后趁热纱布过滤，分装试管，每试管约5-10ml（视试管大小而定），15磅蒸气（121℃）灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。
PDA培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。
小技巧：1、做PDA培养基用土豆应去皮，避免带入杂质，产生泡沫，影响通气。
PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar （Medium），依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
一种常用的培养基，宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。
分装于试管按物理性状划分：固体培养基按培养基成分划分：半合成培养基配方马铃薯200克葡萄糖20克琼脂15~20克自来水1000毫升自然PH配制步骤其做法是先洗净去皮,再称取200g马铃薯切成小块，加水煮烂（煮沸20~30分钟，能被玻璃棒戳破即可），用四层纱布过滤，再据实际实验需要加葡萄糖和琼脂，继续加热搅拌混匀，稍冷却后再补足水分至1000毫升，分装试管或者锥形瓶，加塞、包扎，（121℃）灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面或者摇匀，冷却后贮存备用。
其他事项1.培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用。
2.PDA培养基一般不需要调pH。
对于要调节pH的培养基，一般用pH 试纸测定其pH。
如果培养基偏酸或偏碱时，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。
调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。
3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养。
4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为0.1g/L培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰性LB培养基LB一般被解释为Luria-Bertani培养基，其发明人为贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)，这个名字来源於英语的lysogeny broth，即溶菌肉汤。
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马铃薯葡萄糖琼脂PDA培养基
021050 马铃薯葡萄糖琼脂PDA培养基
(Potato Dextrose Agar)
(Potato dextrose agar medium with antibiotics)
PDA培养基用途：
供霉菌和酵母菌计数及分离培养(GB4789.15-2010和ISO标准)。
原理：
马铃薯浸出粉有助于各种霉菌的生长;葡萄糖提供能源;琼脂是培养基的凝固剂;氯霉素可抑制细菌的生长。
PDA培养基配方(每升)：
马铃薯 300g(从中提取浸出粉)
葡萄糖 20g
琼脂 15g
氯霉素 0.1g
最终pH 6.0±0.2
PDA培养基使用方法：
1、称取PDA培养基40.1g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌20min，备用。
2、霉菌和酵母菌计数时，参照环凯021030高盐察氏琼脂培养基使用方法。
3、用于霉菌分离鉴定，参照环凯021020察氏琼脂。
PDA培养基质量控制：
PDA培养基倾注平皿，下列菌株接种后25—28℃培养72h生长情况如下表。
贮存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。
贮存期三年。