马铃薯葡萄糖培养基常备法
PDA培养基的配制方法
PDA培养基的配制方法PDA（Potato Dextrose Agar）是一种富含淀粉和葡萄糖的琼脂培养基，广泛用于真菌和霉菌的培养和鉴定。
下面是PDA培养基的精确配制方法：原料准备：-250克马铃薯-20克葡萄糖-15克琼脂工具准备：-秤-剪刀-玻璃容器或烧杯-培养瓶或琼脂培养皿-灭菌器或压力锅-pH计或pH试纸-搅拌棒或吹球步骤：1.清洁工具：将玻璃容器、培养瓶、搅拌棒等工具用肥皂水洗净，并用自来水冲洗干净。
2.马铃薯的制备：先用清洁的剪刀将250克马铃薯去皮，然后切成均匀的小块。
3.煮马铃薯：将马铃薯块放入玻璃容器或烧杯中，并加入足够的自来水，使其覆盖马铃薯。
然后将容器放入灭菌器或压力锅中，煮沸30分钟杀灭马铃薯中的微生物。
4.过滤溶液：将煮熟的马铃薯溶液用细网过滤器过滤出来，以去除固体残渣。
5.加入琼脂：将过滤后的马铃薯溶液重新倒回玻璃容器或烧杯中，随后加入15克的琼脂。
将容器放入微波炉中，加热溶解至琼脂完全溶解为止。
6.加入葡萄糖：将20克葡萄糖加入琼脂溶液中，搅拌均匀。
7.均匀分配：将培养基溶液分装到培养瓶或琼脂培养皿中。
每瓶或皿中的溶液量应根据需要进行调整，一般为20-25毫升。
8.pH调节：使用pH计或pH试纸检测培养基的酸碱度。
PDA培养基的理想pH值为5.6、如果pH值高于或低于此值，则使用盐酸或碳酸氢钠溶液进行调节，直到达到理想的pH值。
9. 灭菌：将装有培养基的瓶或皿盖好，然后放入灭菌器或压力锅，进行高温高压灭菌。
通常在121℃下压力为15磅（或1.05kg/cm²）下灭菌20分钟。
10.存储：在灭菌后的培养基冷却到接近室温后，将其存储在冰箱中，以防止微生物生长。
注意事项：-所有使用的工具和培养基都必须经过彻底的消毒。
-在煮马铃薯时，要确保马铃薯块完全煮熟，以确保有效杀灭微生物。
-在加入琼脂和葡萄糖时，要确保琼脂完全溶解，葡萄糖均匀分散。
-在调节pH时要小心，因为pH调节对微生物的生长有重要影响。
马铃薯葡萄糖培养基
1、配方：马铃薯（去皮）200g、蔗糖15—20g、琼脂20—30g、蒸馏水1000mL。
PH自然。
2、步骤：
（1）将马铃薯洗净，去皮，切成大小约为1㎝3的小块，称200g，放入1000mL水中煮沸20—30分钟，用双层沙布过滤，
关键词：马铃薯蔗糖马铃薯蔗糖琼脂培养基马铃薯蔗糖琼脂培养基
1、配方：马铃薯（去皮）200g、蔗糖15—20g、琼脂20—30g、蒸馏水1000mL。
PH自然。
2、步骤：
（1）将马铃薯洗净，去皮，切成大小约为1㎝3的小块，称200g，放入1000mL水中煮沸20—30分钟，用双层沙布过滤，取其液滤。
（2）定容：加水补足至1000mL。
（3）加入蔗糖至全部溶化。
（4）加琼脂.至全部溶化。
（5）趁热分装试管及三角瓶。
（6）加棉塞：分装完毕后，在试管口或三角瓶口塞上棉花，以阻止外界微生物进入培养基而造成污染，并保证有良好的通气性能。
（7）包扎：棉塞上包一层牛皮纸，扎紧，即可进行灭菌。
（8）灭菌：将上述培养基以0.1Mpa，121℃，高压蒸汽灭菌20min。
（9）搁置斜面：将灭菌的试管培养基管口端搁在玻璃棒或其他合适高度的器具上，搁置的斜面长度以不超过试管总长度的一半为宜。
（10）无菌检验：灭菌后的培养基放入28℃恒温箱中培养24h，以检验灭菌效果，无污染方可使用。
注：第（8）（9）（10）步需在实验二进行。
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pda培养基
pda培养基
PDA（Potato Dextrose Agar）是一种常用的培养基，以马铃薯和葡萄糖为主要成分。
它适用于真菌和霉菌的培养和鉴定。
PDA培养基的配方如下：
- 马铃薯提取物：200 g/L
- 葡萄糖：20 g/L
- 洋葱提取液：1 g/L
- 干酪膜素：0.1 g/L
- 硫酸镁：0.5 g/L
- 琼脂：15 g/L
- 蒸馏水：1000 mL
1
制备PDA培养基的步骤如下：
1. 将马铃薯洗净去皮，切成小块。
2. 将马铃薯块放入大容器中，加入适量的蒸馏水，煮沸1
小时，然后离心取得汁液。
3. 将马铃薯汁液过滤。
过滤液为马铃薯提取物。
4. 在一烧瓶中加入马铃薯提取物和葡萄糖，搅拌溶解。
5. 在另一烧瓶中加入洋葱提取液和硫酸镁，搅拌溶解。
6. 将两个烧瓶中的溶液混合在一起，调整pH值为5.6-6.2。
7. 在溶液中加入干酪膜素和琼脂，搅拌溶解。
8. 将培养基加热至沸腾，然后倒入培养瓶中。
9. 灭菌培养瓶，通常以121°C高压蒸汽灭菌20-30分钟。
PDA培养基可以用于分离和培养真菌，如酵母菌、霉菌和
子囊菌等。
它提供了合适的营养物质和适宜的条件，促进
真菌的生长和繁殖。
2。
PDA培养基的配制及试管斜面制作
PDA培养基的配制及试管斜面制作PDA（Potato Dextrose Agar）是一种常用的培养基，用于微生物的培养和鉴定。
下面将详细介绍PDA培养基的配制方法以及试管斜面的制作步骤。
一、PDA培养基的配制方法：-马铃薯提取物：200g-葡萄糖：20g-琼脂：15g- 蒸馏水：1000ml1.将马铃薯削皮并切成小块，然后放入锅中加入足够的蒸馏水，煮沸30分钟，使马铃薯溶解。
2. 用纱布或过滤纸过滤烧开的马铃薯，收集滤液，将滤液浓缩至1000ml。
3.将浓缩后的马铃薯提取物与葡萄糖混合，搅拌均匀。
4.将琼脂加入马铃薯提取物和葡萄糖混合物中，加入足够的蒸馏水。
5.在烧杯中加热混合物，使琼脂完全溶解。
6.用自动调节器调节pH值为7.0-7.27.将混合物分装至试管或琼脂培养皿中。
8.将试管或琼脂培养皿密封并高压灭菌，高压灭菌时间为121°C，15-20分钟。
二、试管斜面的制作步骤：1.配制好的PDA培养基倒入装有试管的架子中，大约倒满1/3左右。
2.将试管架放入预热至沸腾状态的水浴中。
3.等待试管内的培养基开始沸腾，并保持沸腾状态2-3分钟。
4.将试管架从水浴中取出，让试管内的培养基冷却至接近凝固的状态。
5.倾斜试管架，使试管内的培养基斜倒在试管壁上，形成斜面。
6.等待培养基凝固完全。
7.使用无菌的环针或棉签，在斜面上划线隔离待培养的微生物。
8.将试管密封，高压灭菌。
PDA培养基配制和试管斜面制作之后，可以用于各种微生物的培养和鉴定。
在使用PDA培养基时，要注意严格无菌操作，避免外界的污染。
在制作试管斜面时，也要确保试管和培养基的完全无菌，以保证培养的准确性和可靠性。
实验室常用培养基
．常用培养基的制备（1）马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）和马铃薯蔗糖琼脂（PSA）培养基培养真菌最常用的培养基，成分如下：去皮马铃薯200 g 葡萄糖或蔗糖20g琼脂15－20g 水1000 ml配制方法：将马铃薯洗净去皮，称取200 g，切成小块（不必大小）放入锅中，加水1000ml，煮沸半小时，稍冷后用双层纱布过滤，在滤液中加蔗糖20g，加水补足到1000ml。
配成的培养基一般呈酸性，用于培养真菌，可以不必调pH。
如配制固体培养基，在加蔗糖前先加15－20g 琼胶加热熔化，最后加入蔗糖，混匀并加水补是至1000ml，趁热分装在试管或三角瓶中。
标准试管（15×150mm）分装量如下：一般用作斜面培养的每试管装培养基3－5ml，用作平面培养的每试管约10ml，加棉花塞后灭菌。
培养细菌用的培养基必须调节其酸度值到中性（pH7．0左右）。
（2）牛肉汁蛋白胨培养基（NA）是培养细菌最常用的培养基，又称营养琼脂或肉汤培养基。
成分如下：酵母浸膏1g 牛肉浸膏3g蛋白胨5-10g 蔗糖（或葡萄糖）l0g琼脂15-20g 水1000mlpH7.0配制方法：称取牛肉浸膏及蛋白胨溶于少量热水中备用，在其余水中加入琼脂，加热溶化后将牛肉浸膏和蛋白胨溶液加入混匀，然后加水补足到1000 ml，用NaOH或HCL调整至pH7.0，趁热分装，加棉花塞后灭菌。
（3）玉米叶培养基取一定数量的玉米叶片，洗净后剪成1㎝2左右的小块，放在250ml的三角瓶中，盛放量一般为三角瓶的1／3，然后加少量的水以保持湿润，加棉花塞后灭菌。
天然培养基一般不必调整pH。
（4）查氏（Czapek）培养基查氏培养基是一种组合培养基，其成分如下：NaNO3 2g K2HPO4 1 gMgSO4·7H2O 0．5g KCl 0．5gFeSO4 0．01g 蔗糖30g水1000ml（5）灭菌水的配制蒸馏水（或自来水）经过灭菌处理即成灭菌水，是实验室用量最大的必备品之一，常用于病原菌的分离、稀释、保湿等。
食用菌母种常用的培养基
食用菌母种常用的培养基
食用菌母种常用的培养基
常用培养基的配制方法
(一)母种常用的培养基
食用菌母种的培养基和分离菌种的培养基，一般都制成斜面试管，因此又常称为斜面培养基。
母种又叫斜面试管菌。
母种培养基常用的基本物质有马铃薯、葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、琼脂和维生素B1。
1，常见的母种培养基主要有以下几种
（1)马铃薯葡萄糖培养基马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂18-20g，水1000ml。
此培养基适合于—般食用菌的母种分离、培养和保藏，广泛地应用于绝大多数的食用菌，它是我们在生产中量常用的培养基，没有葡葡糖时，也可用蔗糖代替。
（2）马铃薯综合培养基马铃薯200g，葡萄糖2g，磷酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，琼脂18-20，维生素B110mg，水1000ml。
此培养基不仅适合于香菇菌种保藏，也适合于一般食用菌的母种分离、培养和保藏，如平菇、双孢菇、金针菇、猴头菌、灵芝、木耳等。
（3）木屑浸出培养基阔叶树木屑500g，米糠或麸皮100g，琼脂20g，葡萄糖20g，硫酸铵1g，水1000ml。
此培养基适于木腐菌类的菌种分离和培养。
（4）豆芽汁培养基黄豆芽200g，葡萄糖20g，琼脂20g，水1000ml。
此培养基主要适用于黑木耳、猴头菌、平菇等代料栽培的母种培养。
（5）棉籽壳煮汁培养基新鲜棉籽壳250g，葡萄糖20g，琼脂20g，水1000ml。
此培养基主要适用于猴头菌、木耳、平菇及代料栽培的母种。
马铃薯葡萄糖培养基实验流程
马铃薯葡萄糖培养基实验流程1. 材料准备
- 马铃薯
- 蒸馏水
- 葡萄糖
- 培养皿或试管
- 酒精灯或加热装置
- 滤纸或纱布
2. 制备马铃薯汁
- 将马铃薯洗净,去皮,切成小块
- 用少量蒸馏水浸泡马铃薯块,捣碎成糊状
- 用纱布或滤纸过滤,获得无色清液(马铃薯汁)
3. 配制培养基
- 称取一定量的葡萄糖,溶于马铃薯汁中
- 通常浓度为0.5%-2%的葡萄糖溶液
- 用蒸馏水定容至所需体积
4. 灭菌和分装
- 将配制好的培养基装入培养皿或试管
- 用酒精灯或高压锅进行高温灭菌,时间约20-30分钟 - 待冷却后,即可使用或储存备用
5. 使用和观察
- 用无菌操作将待培养物种植于培养基中
- 置于恒温培养箱,适当温度为25-30℃
- 定期观察生长情况,记录结果
6. 实验收尾
- 实验结束后,将用过的培养基和器皿进行无害化处理 - 清洗并消毒实验器材,准备下一次实验
注意事项:
- 操作时注意无菌,避免污染
- 配制溶液时精确称量
- 高温灭菌时注意安全
- 保持实验区域清洁有序。
马铃薯葡萄糖琼脂PDA培养基配制
灭菌设备
Ⅰ高压蒸气灭菌锅
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三、菌种生产常用的设备和用具 2、灭菌设备
Ⅱ 常压灭菌锅
目前农村生产栽培种的必备设备，实际上 是一种大型蒸笼式煮灶。底部为铸铁大锅， 上部为圆形木桶，桶内装数层供放培养基的 格架。桶盖装有活络搭及密闭的橡皮圈，由 于锅内温度最高是100℃，所以灭菌时间需维 持10~12h，才能达到灭菌效果。
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菌种瓶
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三、菌种生产常用的设备和用具 5、接种工具
移植菌种于培养基上的工具称接种工 具，主要有以下几种： 接种针、环、刀、钩、铲、锄、枪等；
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三、菌种生产常用的设备和用具 6、常用的消毒药品
⑴ 70%酒精：一般用于手、种菇表面消毒； ⑵ 0.1%升汞：常用于玻璃器皿、非金属器械 及种菇表面消毒； ⑶ 0.1%KMnO4：一般用于用具、器皿消毒；
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6
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超净工作台 8
三、菌种生产常用的设备和用具
2、灭菌设备
Ⅰ
1）手提式：容量小，适于斜面试
高
管及玻璃器皿等；
压 蒸
2）立式： 容量大，投资大；
气 灭
3）卧式：容量大，投资大；
菌
4）家用24或26 cm压力锅：母种、
锅
原种培养基 。
2）、3）一般在菌种场或研究所应用。
优点：省时、省燃料、 效果好
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三、菌种生产常用的设备和用具
3、培养设备 ⑴ 培养室 ⑵ 生化培养箱
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三、菌种生产常用的设备和用具
4、培养菌种的容器
母 种 ： 试 管 ， 常 用 规 格 20×180~200mm ， 18×180mm等。
菌种瓶：盐水瓶、罐头瓶
原种、栽培种 菌种袋
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马铃薯葡萄糖培养基常备法
马铃薯葡萄糖培养基是优良的半合成培养基，因马铃薯营养丰富，性能稳定，适宜大多数真菌类微生物（如食用菌、酵母菌等）的培养，故被微生物工作者视为基础培养基，实际上它确实是四季必备的常用培养基。
但马铃薯的收获是有季节性的，错过季节，往往因购不到马铃薯而无法制备马铃薯培养基，以致影响科研和生产的正常进行。
下面介绍两种制作马铃薯葡萄糖培养基的常备方法。
1．液体马铃薯培养基常备法
（1）制取马铃薯常备液在马铃薯上市季节，选购一批个大，皮滑，无病毒的马铃薯，按常规，将其清洗、削皮、切片，按料水20∶100的比例配方，以80℃的水温浸煮60min，使其营养物质充分溶解水中，过滤，装瓶加塞。
以1.5×105pa的压力灭菌30min，备用。
为使马铃薯常备液更理想，在配制时还需注意以下事项：1、削皮时一定要将马铃薯的芽眼挖尽。
因芽眼中往往存有很多芽孢杆菌，如不挖除不仅消毒麻烦，亦易招致细菌性污染。
2、配制的常备液如短期内使用，则可用棉花塞瓶口。
如欲放置较长时间，应用橡皮塞塞瓶口。
高压灭菌时一定逐渐排除冷空气，如快速排气，会使瓶塞弹出。
3、常备液装瓶时，可以装上几种不同的量，以备制用时按需取液。
4、常备液于常温环境中，一般可保存8个月左右。
保存于冰箱内，可一年不变质。
（2）制马铃薯葡萄糖培养基何时需用马铃薯葡萄糖培养基，可随时将马铃薯常备液取来，加热后溶入2%琼脂，再加2%葡萄糖，然后装入试管，按常规高压灭菌，制成即可。
2．固体马铃薯培养基常备法
（1）制取马铃薯常备粉块同样需选购好马铃薯，然后将其洗净、削皮，挖去芽眼，用蒸具隔水蒸30min。
但切勿放在水中烧煮，致使营养损失。
然后，将马铃薯取出，研成泥浆状，压薄后摊于搪瓷盘中，晒干或置于37℃的恒温箱内烘干，备用。
（2）制马铃薯葡萄糖培养基将已制好备用的马铃薯粉块，按100ml水加马铃薯粉块约15g的比例，先置于沸水中浸煮30min，浸出其营养成份后，过滤。
然后溶入2%琼脂及2%葡萄糖，装入试管按常规高压灭菌，制成斜面即可。