常见血红蛋白电泳图
血红蛋白电泳正常值范围
血红蛋白电泳正常值范围
血红蛋白电泳正常值范围是一个经常被人提及的问题，特别是对于广大患者来说，血红蛋白电泳正常值范围变得尤为重要。
血红蛋白电泳又称为血红蛋白电泳分析法，主要作用是检测血液中的血红蛋白，以观察病人血液中的血红蛋白水平是否正常。
正常的血红蛋白电泳值范围一般在110~160g / L之间，偏低的血红蛋白电泳值范围一般在90~110g / L之间，偏高的血红蛋白电泳值范围一般在160~200g / L之间。
此外，病人血液中血红蛋白含量还受年龄、性别、种族以及体重等多种因素影响，假如病人血液中血红蛋白偏低时，医生会根据病情诊断病人血液中血红蛋白质量和水平受损情况，同时制定相关治疗措施，以调整血液中血红蛋白质量和水平，保护血液中血红蛋白含量的正常，并有利于患者的健康状况的改善。
总的来说，血红蛋白电泳正常值范围一般在110~160g / L之间，偏低的血红蛋白电泳值范围一般在90~110g / L之间，偏高的血红蛋白电泳值范围一般在
160~200g / L之间。
病人血液中血红蛋白含量受多种因素影响，如果不正常及时医治会严重危害患者的健康。
因此，血液中血红蛋白偏高或偏低时患者应立即去医院就诊，对血红蛋白水平进行检测，同时就其血红蛋白水平异常情况采取必要的措施，以保护患者的健康。
血红蛋白电泳检查(电泳法)
血红蛋白电泳检查（电泳法）1. 原理血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。
每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。
所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。
所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。
正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。
血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。
氨基酸不同可形成不同的血红蛋白，其表面电荷不同，在电场中的泳动率不同。
本实验在碱性（PH=8.60）条件下，以琼脂糖凝胶电泳的方法进行，对红细胞洗涤后造成溶血，电泳分离血红蛋白后以氨基黑染色。
多余的染色液用酸性液体洗去。
待琼脂糖凝胶板干燥后，肉眼可直接判别有无电泳条带异常。
运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。
血红蛋白异常有二种类型：血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。
血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常，称之为地中海贫血。
2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：受检者应空腹。
2.2 标本种类：抗凝血2.3 标本要求：抗凝剂选用EDTA，柠檬酸或肝素均可，避免碘乙酸。
常规静脉采血1.8ml，加入含有109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的干燥。
清洁试管中，充分混匀。
3. 标本储存：储存于2-8℃冰箱中，5天。
4. 标本运输：储存于2-8℃状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。
6. 试剂6.1 试剂名称：血红蛋白电泳检查试剂6.2 试剂生产厂家：法国Sebia公司6.3 包装规格：150tests6.4 试剂盒组成琼脂糖凝胶 10块溶血素 1瓶缓冲液条带 10包×2条薄滤纸1×10张氨基黑（浓缩液）1瓶×100ml点样模具滤纸 10条×1盒6.5 试剂储存条件及有效期：贮存于室温（15～30℃）或冰箱（2～8℃），不能冷冻。
有效期两年。
7. 仪器设备7.1 仪器名称：SEBIA电泳仪7.2 仪器厂家：法国Sebia公司7.3 仪器型号：HYDRASYS8. 操作步骤8.1 血红蛋白液制作：抗凝血离心，5000rpm，5分钟，去掉血浆，用10倍体积的生理盐水洗涤红细胞3次，若红细胞体积小于10ul，需特别小心。
血红蛋白异常所致的贫血及其实验诊断考点总结
血红蛋白异常所致的贫血及其实验诊断考点总结<大纲要点>一、血红蛋白的结构与功能二、血红蛋白异常的检验及其应用三、血红蛋白病的实验诊断一、血红蛋白的结构与功能（1）血红素血红素是Hb、肌红蛋白、多种酶（如过氧化氢酶）和多种细胞色素的辅基，其合成的场所主要在骨髓内的幼红细胞和肝细胞线粒体。
与临床有关的是尿卟啉、粪卟啉和原卟啉，当卟啉代谢障碍时，血红素合成不全，并可能产生卟啉病。
（2）珠蛋白人类的珠蛋白肽链有α、β、γ、δ、ε、ζ链；这些肽链按四级结构形成Hb。
（3）生理性血红蛋白几种正常生理性血红蛋白在胎儿时期和出生后有明显的不同。
新生儿期内HbF （α2γ2）仍高，以后2～4个月渐下降，1岁左右接近成人水平。
成人血红蛋白HbA（α2β2）出生后逐渐增多，占95%～97%，HbA2（α2δ2）出生后占1.2%～3.5%。
（熟练掌握）血红蛋白结构及功能示意图正常生理性珠蛋白链的合成二、血红蛋白异常的检验及其应用1.血红蛋白电泳（原理了解，其余掌握）2.抗碱血红蛋白测定（熟练掌握）3.异丙醇沉淀试验（掌握）4.红细胞包涵体试验（掌握）5.HbA2测定（熟练掌握）6.珠蛋白肽链分析（掌握）7.红细胞镰变试验（掌握）1.血红蛋白电泳原理：根据不同的血红蛋白带有不同的电荷，等电点不同，在一定的pH缓冲液中，缓冲液的pH大于Hb的等电点时其带负电荷，电泳时在电场中向阳极泳动，反之，Hb带正电荷向阴极泳动。
经一定电压和时间的电泳，不同的血红蛋白所带电荷不同、相对分子质量不同，其泳动方向和速度不同，可分离出各自的区带，同时对电泳出的各区带进行电泳扫描，可进行各种血红蛋白的定量分析。
参考值：pH8.6TEB缓冲液醋酸纤维膜电泳，正常血红蛋白电泳区带：HbA＞95%、HbF＜2%、HbA2为1.0%～3.1%。
pH8.6TEB缓冲液适合于检出HbA、HbA2、HbS、HbC，但HbF不易与HbA分开，HbH与HbBarts不能分开和显示，应再选择其他缓冲液进行电泳分离。
糖化血红蛋白电泳
检测HbA1c (或相当于HbA1c)
测定仪器、方法30多种
BEYOND SEPARATION
糖化血红蛋白的检测
基于 电荷差异
• 液相色谱法 • 电泳法
基于 结构差异
• 亲和层析法 • 免疫法 • 酶法
BEYOND SEPARATION
亲和层析法
A：患者的红细胞裂解液注入到含有结合了硼 酸基团的树脂的分析柱中。
糖基化和非糖基化的链N末端六肽片段
HbA1c (m/z= 429.2)
Val
His
Le u
Thr Pro Glu Glu Lys
HbA0 (m/z= 348.2)
BEYOND SEPARATION
IFCC建立国际统一的参考方法
2nd step: 检测
1. 酶解
B：在pH高于8.0时，血红蛋白被糖化后产生 一个特殊的顺式二糖醇基团与硼酸基团发生 反应。
C：糖化的血红蛋白被绑定在分析柱中，而非 糖化的血红蛋白组分直接流出。
D酸性缓冲液被使用，使得糖化的血红蛋白从 分析柱内释放出来。
图E是一种简化的色谱图（蓝线），显示了非 糖化和糖化血红蛋白组分的分离。
Hb
成人 Hb
HbA (ßß)
97%
HbA2 ()
2.5%
HbF ()
胎儿 Hb
0.5%
非糖化的
HbA1b HbA1c 60%~70%
BEYOND SEPARATION
糖化血红蛋白概述
糖基化血红蛋白
亚基：α链、β链、 γ链、δ链、异常 血红蛋白链 位点：任何氨基酸
酶法
A： 图示是糖化的HbA的β链的前 8个氨基酸，患者的红细胞裂解液 在蛋白酶存在的情况下，氨基酸和 小段肽链被释放, 包括HbA1c的氨 基酸末端糖化的缬氨酸
血红蛋白电泳实验报告
实验汇报实验名称：血红蛋白电泳项目名称：两种碱性血红蛋白样品处理方法的电泳结果实验时间：2018年9月17日实验室：龙泉驿区妇幼保健院检验科实验人员：杨松报告单位：成都温伦科技有限公司一、实验目的：1、掌握生理盐水处理血红蛋白样品的方法2、掌握四氯化碳处理血红蛋白样品的方法3、掌握电泳仪实验的操作4、分析两种碱性血红蛋白样品处理方法电泳结果的不同二、实验原理：血红蛋白电泳就是利用在电场的作用下, 由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小, 形状等性质的差异, 使带电分子产生不同的迁移速度, 从而对样品进行分离, 鉴定或提纯的技术，在临床检验中, 主要用于分离各类蛋白分子。
三、实验方法：琼脂糖电泳法四、实验器械：样品：10个EDTA抗凝管抽取的病人全血样品试剂：0.9%生理盐水500ml，四氯化碳500ml，界面液250ml，美国Helena Spife3000血红蛋白电泳检测试剂盒器材：移液枪，一次性移液枪头若干，EDTA抗凝管10个，玻璃试管10个设备：美国Helena Spife3000 全自动电泳仪五、实验步骤：1、取得医院检验科EDTA抗凝管抽取的病人全血样品10个，编号为1，2,3......10。
2、将1-10号十个个样品分别用移液枪取200ul到玻璃试管中，编号为1-1,2-1,3-1,.....10-1。
3、将1-10号10个样品进行生理盐水前处理，处理方法如下：-用0.9%生理盐水混匀，3500 rpm离心10分钟.-吸走弃去清液。
-以上步骤连续进行三次。
-完全吸走弃去上清液。
-20ul制作后的样本+80ul溶血素，混匀。
-取溶血后的样本17ul加入样品孔。
4、将1-1到10-1号10个样品进行四氯化碳前处理，处理方法如下：-用0.9%生理盐水溶液5000μL与样品混合。
-3000rpm离心5分钟。
-弃去上清液，只留下红细胞。
-加入200ul 蒸馏水溶解红细胞。
-加入300ul 的四氯化碳，混合均匀，3000rpm离心5分钟。
血浆蛋白的电泳和血红蛋白的电泳的本质 电泳方法学
血浆蛋白的电泳和血红蛋白的电泳的本质电泳方法学蛋白电泳ALB是血浆蛋白的缩写，一般正常值在35-55g/L之间，是肝功能检查中的一项，尿液中的ALB正常参考值为0.62-11.7。
血红蛋白电泳目的是检出和确认各种正常和异常的血红蛋白。
根据不同的血红蛋白带有不同的电荷，等电点不同，在一定的pH缓冲液中，血红蛋白的等电点小于缓冲液的pH时带负电荷，电泳时在电场中向阳极泳动，反之，Hb带正电荷向阴极泳动。
在一定电压下，经过一定时间的电泳，不同的血红蛋白所带电荷不同，分子量不同，其泳动方向和速度不同，可分离出各自的区带，同时对电泳出的各区带进行比色或电泳扫描，可进行各种血红蛋白的定量分析。
一般最常用的是pH8.6醋酸纤维薄膜电泳。
胞浆内存在糖原或多糖类物质（如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等）中的乙二醇基（CHOH-CHOH）经过碘酸（periodic acid）氧化，转变为二醛基（CHO-CHO），与雪夫(Schiff )试剂中的无色品红结合，形成紫红色染料而沉积于细胞内多糖所在处。
该反应称为过碘酸-雪夫(PAS)阳性反应，以前也称为糖原染色。
血红蛋白电泳是用于检查血红蛋白结构是否正常的一种检查方法，尤其用于检查血红蛋白疾病和地中海贫血的鉴别诊断。
血红蛋白电泳就是在琼脂糖凝胶两侧通电。
由于正常的血红蛋白的分子结构是一样的，所带的电荷也一样，向两侧移动的速度也就一样，经过处理以后会形成一致的色素沉着带。
通过分析能够了解其中的血红蛋白的结构是否正常。
如果异常的血红蛋白，由于分子肽结构发生了变化，所携带的电负荷也发生了变化，再向两侧游动的时候，速度也就不同。
会产生不同的染色带,经过处理以后就会分析出这些肽链结构，哪些部分发生了异常。
所以通过血红蛋白电泳能够发现血红蛋白的结构是否发生了改变，如果发现了异常血红蛋白结构，基本上久可以确定血红蛋白病了。
带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动，称为电泳。
利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。
血红蛋白的提取和分离
血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色 来判断什么时候应该收集洗脱液。这使血红蛋白的分离过程非常 直观，大大简化了实验操作。
三、结果分析与评价
（一）是否完成对血液样品的处理 观察你处理的血液样品离心后是否分层（见图5-18），如果
血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步，包括：样品处理、 粗分离、纯化和纯度鉴定。首先通过洗涤红细胞、血红蛋白的释 放、离心等操作收集到血红蛋白溶液，即样品的处理；再经过透 析去除分子量较小的杂质，即样品的粗分离；然后通过凝胶色谱 法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化；最后经聚 丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
在一定的范围内，凡是能够抵制外加少量强酸或强碱的影响使原 来溶液pH值基本保持不变的混合溶液。
2、作用: （课本P70练习2）
能够抵制外界的酸和碱对溶液pH值的影响，维持pH基本不变。
3、缓冲溶液的配制：
通常由1－2 种缓冲剂溶解于水中配制而成。调节缓冲剂的使用 比例就可以制得在不同pH范围内使用的缓冲液。
分层不明显，可能是洗涤次数少、未能除去血浆蛋白的原因。此 外，离心速度过高和时间过长，会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀， 也得不到纯净的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度。 （二）凝胶色谱柱的装填是否成功。
由于凝胶是一种半透明的介质，因此可以在凝胶柱旁放一支 与凝胶柱垂直的日光灯，检查凝胶是否装填得均匀。此外，还可 以加入大分子的有色物质，例如蓝色葡聚糖－2000或红色葡聚糖， 观察色带移动的情况。如果色带均匀、狭窄、平整，说明凝胶色 谱柱的性能良好。如果色谱柱出现纹路或是气泡，轻轻敲打柱体 以消除气泡，消除不了时要重新装柱。 （三）血红蛋白的分离是否成功
血清电泳临床意义图标
各位临床医生：我科新购入的全自动蛋白电泳分析仪，可进行血清蛋白电泳及血红蛋白电泳检测，现开展将近一个月了，从开展的情况看，血红蛋白电泳检测项目比较多，可血清蛋白电泳开单比较少，现用图表的格式将血清蛋白电泳检测的临床意义提供给各位，敬请各位临床医生多开单检查！血清蛋白电泳临床意义图表图1 典型的正常的血清蛋白电泳图谱图2 多发性骨髓瘤异常的血清蛋白电泳带型。
请注意gamma区域的带型特点表3.表4：1）持续高浓度型：诊断的特异性高，中晚期肝癌居多；2）马鞍型：较少见，但容易漏诊，当AFP增高在后峰时，往往已出现明显的肝癌表现；3）急剧上升型：多见于肿瘤发生迅速，恶性程度较高的肝癌，但是偶见AFP急剧升高，又迅速下降伴ALT升高的急性肝坏死；4）稳定上升型，定期检查，稳定上升，最有诊断价值；5）反复波浪型，多见于急慢性良性肝病。
并且人血清中的甲胎蛋白浓度的升降对于病情的发展、疗效的观察、肝癌的复发观察有很大的价值。
本公司推出的甲胎蛋白试剂盒是检测人血清中的甲胎蛋白水平，胶乳增强的免疫方法，有较高的准确性和重复性。
HCY:用于检测血浆或血清中的同型半胱氨酸同型半胱氨酸（Hcy）是蛋氨酸代谢产生的一种含硫的氨基酸，80%的Hcy在血中通过二硫键与蛋白结合，只有很少一部分游离同型半胱氨酸参加循环。
Hcy水平与心血管疾病密切相关。
是心血管疾病发病的一个重要危险因子。
血液中增高的Hcy因为刺激血管壁引起动脉血管的损伤，导致炎症和管壁的斑块形成，最终引起心脏血流受阻。
高同型半胱氨酸尿症患者，由于严重遗传缺陷影响Hcy代谢，造成高Hcy血症。
轻微的遗传缺陷或VB营养缺乏会伴随中度或轻度的Hcy升高，也会增加心脏病的危险。
Hcy升高还可引起神经管畸形及先天性畸形等出生缺陷类疾病HbA1C：糖化血红蛋白是美国糖尿病协会，英国糖尿病研究计划和糖尿病控制和临床实验室推荐的一项重要检测项目。
目前，糖化血红蛋白实验反映糖尿病病人近2－3个月的平均血糖水平，用于糖尿病病人的监测管理。
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