4.凝聚胺试验技术操作规程

凝聚胺试验操作规程(SOP)

实验室名称项目编号制定日期血库血型TY-XK-04 2017年8月14日

凝聚胺是一种多价阳离子聚合物，能中和红细胞表面的负电荷，使红细胞Zeta电位降低，缩短红细胞之间距离，引起正常红细胞可逆性的非特异性凝聚。如果是抗体致敏的红细胞在凝聚胺的作用下发生凝集，凝集是不可逆的。在凝聚胺试验中，首先让红细胞和血清在低离子介质中孵育，促进抗体与红细胞抗原结合，然后加入凝聚胺，离心使红细胞凝聚，加入含有枸橼酸钠的重悬液中和凝聚胺正电荷，恢复红细胞表面的负电荷。如果是非特异性的凝聚，则由于红细胞表面负电荷的排斥作用，红细胞散开，结果为阴性；若是由于抗原抗体引起的特异性凝集则不会散开。

（一）目的规范凝聚胺试验操作。

（二）职责输血科技术人员采用凝聚胺法进行血型血清学检查。

（三）适用范围适用于血型抗原抗体反应的检测。

（四）所需材料和设备凝聚胺试剂盒、3%A、B、O型反定型试剂红细胞、患者血标本、试剂血清、普通离心机、血型血清学专用离心机。

（五）操作步骤

1、在试管中加入2滴受检血清或试剂，1滴3%试剂红细胞、或受检红细胞，混匀。

2、加LIM溶液0.6ml，混合均匀，室温孵育1min。

3、加入2滴凝聚胺溶液，混合后静置15s。

4、1300g离心15s，倾去上清液，不要沥干。

5、轻摇动试管，目测细胞有无凝集，如无凝集需重复2-5步。

6、加入2滴重悬液，轻轻混匀，观察结果。

7、如凝集散开，为阴性反应；如凝集不散开，则为阳性反应。

（六）注意事项

1、加入凝聚胺液离心后，不要混悬细胞。

2、加入混悬液后，应尽快观察结果，最好在1min内，最长不要超过3min，以免弱反

应消失。

3、凝聚胺溶液若放在透明的玻璃瓶太久会变弱，所以必须保存在黑色塑料瓶中。

4、凝聚胺是一种抗肝素药物，所以使用含肝素血标本要稍多加凝聚胺来中和肝素。有

时需要重复步骤五、2-五、5。

5、凝聚胺对Kell系统的检出不理想，所以阴性结果要转入抗球蛋白试验，以免漏检。