小鼠膜性肾小球肾炎的形态学计量研究

合集下载

抗GBM肾小球肾炎发病机制研究进展

抗GBM抗体
抗GBM抗体
其致病性在动物实验和临床研究中已得到充分证明
——患者抗GBM抗体可诱发猴的急进性肾炎
Lerner RA, et al. J Exp Med, 1967,126:989-1013
——抗GBM抗体水平与病情严重程度和预后有高度的相关性
Salama AD, et al. Lancet, 2001,358:917-920 Couser WG, et al.Am J Kidney Dis, 1988,11:449-464
——抗体未转阴情况下行肾移植，移植肾会再次发生抗GBM肾炎
Wilson CB, et al.Kidney Int, 1973,3:74-89
天然抗GBM抗体
➢正常人血清中存在天然抗GBM抗体，占血清总IgG的 0.5%
➢均为IgG2和IgG4亚型
➢天然抗GBM抗体所识别的靶抗原仅限于α3（IV） NC1，不能识别其他α链
DBA/1小鼠
DBA/1小鼠
DBA/1小鼠
Hopfer H, et al. FASEB J, 2003 May;17(8):860-8
CD4+T细胞被动转移可以诱导抗GBM肾病的产生
以人α3（IV）NC1刺激后CD4+T细胞免疫小鼠，可导致无免疫复合物沉积的新月体
肾炎。
IgM（+）
IgG（-） Wu J, et al.J Clin Invest, 2002, 109(4):517-24
P38/JNK MAPK通路参与发病
肾小球内皮细胞、巨噬细胞、T细胞、成肌纤维细胞上均有该通路存在
Stambe C, et al. Kidney Int, 2003 Dec;64(6):2121-32

C3肾小球肾炎小鼠模型

Nature Genetics, 2002:424-428.
所有年龄组都受到影响，DDD的平均年龄低于C3GN
大多数患者的血清C3水平较低
MPGN Ⅲ
C3肾小球肾炎-肾脏病理
C3肾小球病是一种组织病理学诊断
该疾病的定义是在肾活检样本中，免疫荧光染色存在
唯一(或至少显著) C3阳性，其强度至少比任何其他免疫
荧光高两个数量级
光学显微镜结果多种多样，范围从无肾小球细胞增生
American Society of Nephrology (ASN), 2021(1).
B
多处肾小球病变，包括膜增生性肾小球病（图C）、系膜细胞肥大
（图D）、节段性至整体性肾小球硬化（图E）、纤维蛋白沉积伴坏死
和白细胞浸润（图F和G）以及上皮新月体（图G）。
C3 hu/hu小鼠表现出BUN（肾小球滤
可能表现为边界不清的内皮下(膜内和/或上皮下)包涵体
动物模型Ⅰ-C3人源化小鼠（C3hu/hu）
• C3hu/hu小鼠具有许多与人类C3GN相似的病理学特征，是一种理想的C3GN模
型。 C3hu/hu小鼠的表型可能源于人C3蛋白与多种小鼠补体蛋白的相互作用
失调，导致通过旁路途经（AP）的C3激活不受调节。
过的标志物）显著升高，表明肾衰竭
（图A）。尿白蛋白显著升高，表明肾
小球损伤（图B）
动物模型Ⅱ-补体H因子敲除小鼠（
−/−
Cfh ）
C3 and C9 in 2-month Cfh–/– mice
雄性Cfh−/−敲除小鼠表现出更低的死亡率和更高的成模率；2月龄小鼠免疫荧光结果显示肾脏
有明显的C3和C9沉积，和少量IgG。
C3肾小球肾炎

小鼠膜性肾病肾脏中MMP-2的表达及意义

小鼠膜性肾病肾脏中MMP-2的表达及意义孙兴旺;曹灵;马跃荣;刘俊;王有模【期刊名称】《现代预防医学》【年(卷),期】2006(33)10【摘要】目的:探讨肾脏MMP-2的表达与膜性肾病发病机制间的关系。

方法:把小鼠随机分为膜性肾病模型组和对照组,用免疫组织化学(SABC法)检测肾脏组织中MMP-2的表达,用图像分析系统检测基底膜厚度。

结果:模型组和对照组肾脏中均有MMP-2表达,且主要表达在肾小管上皮细胞胞浆中。

模型组肾组织中MMP-2表达明显强于对照组(P<0·01),且模型组中MMP-2表达与GBM厚度呈正相关(0·01<P<0·05),对照组MMP-2表达与GBM无相关性(P>0·05)。

结论:在MN过程中,肾脏中MMP-2参与了GBM增厚形成的调节机制,提示在MN发病中,细胞外基质(ECM)聚集的同时,可能通过反馈调节机制促使肾脏组织中MMP-2表达上调,从而可能在一定程度上减少ECM的过度堆积。

【总页数】3页(P1758-1760)【关键词】膜性肾病(MN);ECM;MMP-2;小鼠动物模型【作者】孙兴旺;曹灵;马跃荣;刘俊;王有模【作者单位】泸州医学院病理学教研室;泸州医学院附属医院肾脏病内科【正文语种】中文【中图分类】R692【相关文献】1.小鼠膜性肾病肾脏中TIMP-1的表达及意义 [J], 曹灵;孙兴旺;马跃荣;许红梅;刘俊;王有模;侯静;欧三桃2.ROP小鼠视网膜组织中MMP-2、VEGF的表达变化及意义 [J], 姜双;陈晓隆3.MMP-2、TIMP-1在小鼠膜性肾病肾脏中的表达及意义 [J], 曹灵;孙兴旺;马跃荣;刘俊;王有模;陈明4.FKBP52、PR、MMP-2和ER在小鼠腺肌症子宫内膜组织中的表达和意义 [J], 郭凤羽;王宁5.MMP-2、MMP-9在系统性硬化病小鼠模型中的表达及意义 [J], 陶志清; 雷玲; 鲁伊; 郑乐婷; 文静; 李晞; 赵铖因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

急性肾炎实验报告

急性肾炎实验报告摘要(Abstract)急性肾炎是一种常见的肾脏疾病，其特征是肾小球的炎症和肾小管的损害。

本实验旨在模拟急性肾炎的发生过程，并观察其对肾功能的影响。

通过实验结果，我们可以更好地了解急性肾炎的病理生理过程，并为其治疗提供参考。

引言(Introduction)急性肾炎是一种以急性肾小球肾炎为主要病变的肾炎类型。

其主要特点是发病急、病情重，常由感染或免疫损伤引起。

急性肾炎患者常有全身症状，如发热、头痛、乏力等，并出现尿检异常。

尿蛋白、红细胞和管型等均会增加，而尿比重则会降低。

为了深入了解急性肾炎的发生机制，本实验通过模拟实验，观察急性肾炎对肾功能的影响。

材料与方法(Materials and Methods)实验动物本实验使用15只健康的实验小鼠，雄性，体重为20-25g。

实验设计1. 实验组：将10只小鼠随机分为两组，每组5只。

实验组小鼠注射一定剂量的肾炎诱导剂（如肾小球基底膜抗原），引发急性肾炎模型。

2. 对照组：将剩余的5只小鼠作为对照组，注射等量的生理盐水。

术前准备1. 准备所需药物和实验器材，包括肾炎诱导剂、生理盐水、注射器、动物秤等。

2. 检查小鼠的健康状况，确保符合实验要求。

实验操作1. 实验组小鼠注射肾炎诱导剂，剂量根据体重计算。

2. 对照组小鼠注射生理盐水，剂量与实验组相同。

3. 每天观察小鼠的行为和食物摄入情况，并记录体重变化。

4. 在实验结束后10天（或适当时间），收集小鼠的尿液样本。

实验数据分析1. 比较实验组与对照组小鼠的体重变化情况。

2. 分析尿液样本中尿蛋白、红细胞和管型的数量和比例。

3. 通过统计学方法分析实验数据，比较实验组与对照组之间的差异。

结果(Results)1. 对照组小鼠的体重变化平稳，没有明显异常。

而实验组小鼠在注射肾炎诱导剂后，体重增长速度明显下降。

2. 实验组小鼠的尿液样本中，尿蛋白、红细胞和管型的数量和比例均明显增加，与对照组相比存在显著差异。

C57BL／6小鼠系膜增生型肾小球肾炎的复制

ｗｉｈｔ６ｍｇ／ｋ＇ｇＨａｂｕ・ｓｎａｋቤተ መጻሕፍቲ ባይዱｅｖｅｎｏｍ
．
ｈｅＴＨａｂｕ — ｓｎａｋｅｖｅｎｏｍｗａｓｐｒｅｐａｒｅｄｉｎｔｏａ～ｏｌｕｍｅｏｆ０．２ｍＬ．ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｒｅｑｕｉｒｅｄｄｏｓｅ
率高达５０％，且集中于前３ｄ内死亡，３ｄ后中毒小鼠的活动基本如常。Ｂ组与正常对照组小鼠无死亡。中毒小鼠的肾功能与正常对照组相较无明显差别，但均出现了肾小球系膜细胞增生，系膜基质增多，肾小球及间质内炎性细胞浸润等病理学改变。结论
＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝
第１７卷
第６期
技术方法￥
ｅ；；、
Ｃ５７ＢＬ／６小鼠系膜增生型肾小球肾炎的复制
张懿，李保春
２００４３３）
（第二军医大学附属长海医院。肾内科，上海
ＲｅｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＭｅｓａｎｇｉｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅＧｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓｉｎＣ５７ＢＬ／６Ｍｉｃｅ
ＺＨＡＮＧＹｉ，Ｌ１Ｂａｎ — ｃｈｕｎ
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｓｅｔｕｐａｍｅｔｈｏｄｔｏｒｅｐｌｉｃａｔｅｍｅｓａｎｇｉｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｇｌｏｍｅｎｌｒｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓｉｎＣ５７Ｂ１＿／６ｍｉｃｅ。

小鼠膜性肾小球肾炎脾脏淋巴细胞表面Fas的表达

外周淋巴细胞表面Ｆｓａ功能障碍或缺陷是ＭＧＮ发生发展的重要因素之一。关键词肾小球肾炎，增生性膜免疫组织化学ＦｓＣ９）ａ（Ｄ５抗体
ＵＸｉ — ｕ
ＥｘｒｓｉｎｏａｎｌｍｐｏｙｅｐｅｎｏｃｔｅａｇａｌｍｅｕｏｅｈｉｉＨＵ — ｐｅｓｆＦｓｏｙｏｈｃｔｓｉｓｌｅｆｍｉｅｗｉｍｓｎｉｌｏｒｌｎｐｒｔｎｈｇｓＡＮＧＫａｔｅ．
【ｂｔｃ】ＯｊｃｖＴｖｓｇｔｔｌｉｓｉｂｔｅｅａＣ９）ｅｒｓｎｏｍｈｃｔＡｓａｔｒｂｅｔｅｏｎｅｉｅｈｒａｏｈｅｅｔｓ（Ｄ５ｘｅｉｎｙｐｏｙｓｎｉｉｔａｅｅｔｎｐｗｎｈＦｐｓｏｌｅｉ
ｔｅｆｒｔｎｏａｅｐｇｎｅｆｓｎｏｏｒｃｓ．Ｔｅｎｍｂｒｏａ — ｏｉｖｍｐｏｙｅｎｓｌｅｎｅｐｒｎａｈｍａｉｆｒｔｅｓａｄｔｕｉｆｏｔｏｅｓｏｏｈｏｆｐｈｕｅｆｓｐｓｔｅｌＦｉｙｈｃｔｓｉｐｅｎｉｘｅｍｅｔｌｉ
ｅｔｂｉｅｂＢｒｅ ’ ｍｅｈｄ，ｓａｌｈｄｙｏｄｒＳｓｔｏｓｗｔ１ｎｒｌｉｈ０ｏｍａｍｉｅｓｄｓｃｎｒｌｒｕ．ｃｕｅａｏｔｇｏｐｏＴｅｓｌｅｓｃｉｎｗｅｅｈｐｅｎｅｔｓｏｒ
ｌｇＺＡＧＨｕｘｎ，ＨＮＬｎｉ，ＨＮｎ —ｉｇＣＥｉ，ＷＡａＮＧＡｎＸａＤｐｒｅｔｆＰｔｏｏｙｉｔｆｌｔｄＨｏｉ！Ｗｅｚｏ，ｙｉ．ｅａｔｎａｈｌ，ＦｒＡｉｅｍｏｇｓｉａｓｔｏｐａｆｎｈｕ

肾小球肾炎动物模型研究概述(一)

肾小球肾炎动物模型研究概述(一)【摘要】慢性肾小球肾炎（choronicglomerulonephritis）的发病机制有多种，设计模型时都是针对某一发病机制，使动物出现类似人类肾炎的情况而建模。

本文对肾小球肾炎动物模型的造模机制、造模方法等方面进行了归纳和总结，简要阐明其中存在的问题。

【关键词】肾小球肾炎；动物模型；造模机制；造模方法肾小球肾炎是由多种病理类型的原发性肾小球疾病发展而来的，以血尿、蛋白尿、高血压和水肿为主要临床表现的慢性疾病。

目前认为肾小球肾炎是一种自身免疫反应性疾病，通过免疫作用而造成肾脏损害。

1Heymann肾炎模型本模型是通过针对自身抗原的免疫复合物（IC）诱发而成，故称其为自身免疫复合物性肾炎（autologousimmunecomplex，AIC）。

Heymann肾炎模型根据是否由同种动物提供抗体分为主动型和被动型两种模型。

主动型Heymann肾炎模型机制:动物由自体抗肾抗体或自体抗原抗体复合物刺激引起肾小球基膜产生免疫反应形成肾炎。

被动型Heymann肾炎模型机制：用甲种动物的肾皮质匀浆免疫乙种动物,使后者产生抗甲种动物的抗肾血清（抗肾抗体）,然后将这种抗肾血清注射给健康的甲种动物,而使其产生肾炎。

主动型Heymann肾炎，孙永宁〔1〕用大鼠肾皮质匀浆加弗氏完全佐剂制备乳化液,同种大鼠腹腔注射次乳化液，2ml/只，每周注射1次，共注射7次。

现研究常用模型为被动型Heymann肾炎模型。

其具体造模方法〔2〕为大鼠后足垫注射含6.5mg免疫γ球蛋白的完全弗氏佐剂0.25ml后，由大鼠尾静脉注射1.0ml兔抗FXIA抗血清，qd，共2天，造模完成。

这一实验模型与人类原发性膜性肾病非常相似，其特征为弥漫性基膜增厚伴钉突形成。

2原位免疫复合物性肾炎模型该模型的特点是在肾小球基膜上直接形成免疫复合物。

由细菌感染合并异种免疫蛋白联合作用造成模型。

杨宏等〔3〕制作家兔原位免疫复合物肾小球肾炎模型:将大肠杆菌毒素和阳离子化牛血清白蛋白（BSA）溶于0.15mol/L、pH值为7.2的磷酸缓冲液（PBS）溶液中,最终浓度为每1ml溶液中含1μg大肠杆菌毒素和1mg牛血清白蛋白,每只兔经耳缘静脉注射2ml预免疫,7天后开始正式免疫造模:每只免疫兔每天经耳缘静脉给予阳离子化牛血清白蛋白20mg（预先溶于PBS溶液中）,共7周。

IgA肾病小鼠模型的建立与鉴定

IgA肾病小鼠模型的建立与鉴定【摘要】目的建立小鼠IgA肾病模型，为临床研究IgA肾病提供实验依据。

方法昆明种小鼠30只，分为正常对照组(10只)、模型组(20只)。

采用口服牛血清白蛋白(BSA)联合尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B(SEB)的方法制作小鼠IgA肾病模型。

第12周末收集新鲜尿液，显微镜下尿红细胞定性检验;摘眼球取血，检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);光镜法观察肾小球系膜细胞及基质变化;电镜法检测系膜区有无电子致密物沉积;免疫荧光法观察系膜区IgA沉积情况。

结果第12周末，模型组小鼠均出现不同程度的血尿;Scr、BUN较正常对照组显著增高(P<0.01);光镜下系膜细胞及基质明显增生;电镜下系膜区电子致密物沉积;免疫荧光示系膜区大量的IgA沉积，而正常对照组则无上述表现。

结论 IgA肾病小鼠模型效果良好，病理、电镜及临床指标与人类IgA肾病临床病理相似。

【关键词】 IgA肾病;模型;血尿;免疫荧光;小鼠Abstract: Objective To establish mouse model of IgA nephropathy in order to provide experiment basis for the clinical research of IgA nephropathy. Methods 30 Kunming mice were randomly assigned into the control group (n=10) and the model group (n=20). Mouse model of IgA nephropathy was established by the method of oral intake of bovine serum albumin (BSA) together with injection of staphylococcus enterotoxin B (SEB) via the caudal vein. At the end of the 12 weeks, fresh urinewas gathered for the quantitative test of hematuria; blood was taken through orbital sinus after eyeball extirpation to determine the serum creatinine (Scr) and blood urea nitrogen (BUN); the changes of mesangial cells and matrix in the kidneys were observed by light microscopy; electron microscopy was employed to detect electron-dense deposits in the mesangial area; the expression of IgA deposition was measured by immunofluorescence staining in the mesangial area. Results By the end of 12 weeks, there were different degrees of hematuria in model group mice. BUN and Scr levels in model group were significantly higher than in the normal control group (P<0.01). Light microscopy showed evident proliferation of mesangial cells and matrix. Electron microscopy demonstrated a high electron dense deposition in the mesangial area, while the above abnormalities were not observed in the normal control group.Conclusion The mouse model of IgA nephropathy proves effective, with pathological electron microscopic and clinical parameters similar to the clinical pathology of human IgA nephropathy.Key words: IgA nephropathy; model; hematuria; immunofluoresence staining; miceIgA肾病世界范围内广发的一种系膜增生型肾小球肾炎，占原发性肾小球疾病的10%～20%，中国、日本、新加坡等发病率较高，其中有20%～30%的患者进展到肾衰[1]。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

Ｃｈｉｎａ）［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｈｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｍｅｍｂｒａｎｏｕｓｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ（ＭＧＮ）ｉｎｍｉｃｅｓｗｅｒｅａｎａｌｙｓｅｄ．ＭｅｔｈｏｄＭＧＮｍｏｄｅｌｉｎｍｉｃｅｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｔｈｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄａｎｄｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｓｔｕｄｙ（ＬＭ）ａｎｄｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ（ＥＭ）．ＲｅｓｕｌｔＯｂｓｅｒｖａｔｉｏｎｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｐａｔｈｏｌｏｇｙｇｒｏｕｐｈａｓｔｙｐｉｂｙｌｉｇｈｔｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅｃａｌＭＧＮｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓ．ＱｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｓｔｕｄｙｏｆＬＭａｎｄＥＭｉｍａｇｅｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｐａｔｈｏｌｏｇｙｇｒｏｕｐｗｅｒｅｒｅｍａｒｋａｂｌｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｒｏｍｔｈｏｓｅｏｆｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＱｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｃｏｕｌｄｏｂｊｅｃｔｉｖｅｌｙｒｅｆｌｅｘｔｈｅｇｌｏｍｅｒｕｌｕｓｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｃｈａｎｇｅｓｏｆｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ，ａｎｄｐｒｏｖｉｄｅｓｏｍｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｐａｔｈｏｌｏｇｅｎｅｓｉｓ、ｃｌｉｎｉｃａｌｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｔｈｅｒａｐｙｏｆｍｉｃｅｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ．［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］Ｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓ，ｍｅｍｂｒａｎｏｕｓ；Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ；Ｍｉｃｅ，ＩｎｂｒｅｄＢＡＬＢ／Ｃ
（温州医学院附属第一医院，ａ病理科，ｂ急诊科，温州３２５０００）
［摘要］目的通过光镜、电镜定量研究分析小鼠膜性肾小球肾炎（ＭＧＮ）的病理变化。方法制备小鼠ＭＧＮ模型，对模型小鼠肾小球进行光镜、电镜形态学观察，并予定量分析。结果光镜、电镜观察均显示病理组具有典型的ＭＧＮ病变。病理组基底膜（ＧＢＭ）厚度分别为０．２７３ｎｍ，对照组为０．１３５４ｎｍ，病理组与对
— — —
Ｐ＜０．０１）。病理组肾小球的平均直径（Ｄ），平均周长（Ｂ），平均体积（Ｖ），平均照组比较，差异有统计学意义（
—
截面积（Ａ），以及体密度（Ｖｖ），面密度（Ｓｖ）均大于对照组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。数密度（Ｎｖ）与比表面（） δ 则相反，对照组大于病理组（Ｐ＜０．０１）。结论光镜、电镜定量研究较为客观地反映肾小球肾炎小鼠肾小球的病变程度，为肾小球肾炎发病机理研究及临床治疗提供有价值的参考。［关键词］肾小球肾炎，膜性；显微镜检查；小鼠，近交ＢＡＬＢ／Ｃ中图分类号：Ｒ６９２．３１；Ｒ４４文献标识码：ＡＤＯＩ：１０．３９６９／Ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２６７９０．２０１１．０２．０２２
膜性肾小球肾炎（ＭＧＮ）是由免疫复合物沉积在肾小球基底膜并引起基底膜弥漫性增厚的一组疾病。本文制备小鼠ＭＧＮ模型，对其肾小球进行光镜、电镜形态学观察、定量分析，以明确其病变特点。１材料和方法１．１动物模型复制
［１］
（ＩＦＣＡ，自配，羊毛脂１０ｇ＋液体石蜡２０ｍｌ）０．５ｍｌ进行预免。１．２实验分组及用药方法本实验所用纯系ＢＡＢＬ／Ｃ小鼠，体质量（２０．４± １．８）ｇ，雌雄各半，采用成组设计随机分为两组：病理组（ｎ＝１５只，隔日注射１０ｍｇ／ｍｌＣＢＳＡ０．２ｍｌ），连续４周；对照组（Ｎ组，ｎ＝１５只）全程用０．９％氯化钠注射溶液０．２ｍｌ（Ｎ．Ｓ）作对照，４周末杀检，取肾皮质做光镜、电镜观察，并做定量分析。１．３观察项目１．３．１光镜定性观察 ① ＨＥ染色：一般观察肾小球的大小、小球细胞数、系膜区及上皮细胞有无增生以及毛细血管壁有无增厚，有无渗出及新月体形成等。② ＰＡＳＭ染色：主要观察膜性肾炎的特征性病变— — —“ 钉突” 。
Ｂ）。ＥＭ定量参数选择：ＧＢＭ厚度；足突密度（Ｎｓ）、（
— —
Ｄｘ）、足突间隙平均面积（Ｓｘ）。足突间隙平均直径（１．４统计学处理本实验资料采用ＳＰＳＳ１３．０软件进行方差分析及ｑ检验。２结果２．１肾小球病理形态学观察与对照组相比，病理组肾小球轻度肿胀，系膜细胞增生，基质增宽，毛细血管壁增厚，部分显示膜性病变，脏层上皮细胞轻度ＡＳＭ染色显示少量“ 钉突” 形成。病肿胀与增生。Ｐ理组电镜观察显示：ＧＢＭ弥漫性显著增厚，足突融ＢＭ内可见小圆点样分布稀疏的沉积合，上皮下Ｇ物，部分可见少量粗大颗粒状致密沉积物。２．２肾小球形态计量分析光镜与电镜立体学定
—
次级样品：从中任取６块组织包埋（国产６１８环氧树脂）制成ＥＭ包埋块。③三级样品：随机选２包埋块切超薄切片数张，各随机选１张观察。④四级样品：０００倍照片１张，再光学放大１．５倍，每一视野摄８制成５寸放大照片。（２）光镜（ＬＭ）三级取样： ①初级样品：取肾皮质２ｃｍ ×２ｃｍ ×１ｃｍ大小一块，２０％甲醛固定，乙醇脱水，石蜡包埋。 ② 次级样品：每隔２００ｍ切片１张，切片厚度５μ ｍ，共３张。 ③ μ 三级样品：每张切片各保存图像２张，拷入软盘，送电子科技大学金盘公司作定量分析。１．３．３摄像条件（１）ＥＭ：每铜网摄像恒定在肾小球的血管极、尿极和两侧周边及小球中央。一铜网各摄片５张。（２）ＬＭ：每切片恒定在２个角上保存图片，每只小鼠取３张切片。每张切片各取２张图片。（３）放大倍数：Ｍ：根据一张照片需观察 ①Ｅ基底膜厚度、窗孔密度的原则，摄像倍数为８０００倍，．５倍５寸照片。全部照片放大倍数恒再光学放大１定在１２０００倍。②ＬＭ：据北京医科大学电镜室郑富盛教授著《细胞形态计量学》一书，要求测试数目在１００～４００个不等，方能达到变异系数（ＣＶ）在５％以Ｍ放大倍数为１００倍，每张图片包含７下。本实验Ｌ～１０个肾小球，每组３０～３６张照片内肾小球个数能满足此要求。肾小球ＬＭ定量参数选择：体密度（Ｖｖ）、面密度
用碳化二亚胺（ＥＤＣ上海
产）和无水乙二胺（ＥＤＡ，成都产）将天然牛血清白蛋白（等电点４．５，国产电泳纯）阳离子化成为阳离子化牛血清白蛋白（ＣＢＳＡ等电点９．０以上）。注射前用０．０１ｍｏｌ／ＬＰＢＳ溶解，１５０００ｒ／ｍｉｎ离心，去除不溶性物质，配制成１０ｍｇ／ｍｌ浓度的溶液。正式注射前１周每只小鼠皮下多点注射不完全弗氏佐剂
— —
Ｄ），平均周量分析表明：病理组肾小球的平均直径（
— — —
Ｂ），平均体积（Ｖ），平均截面积（Ａ），以及体密长（度（Ｖｖ），面密度（Ｓｖ）均大于对照组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。数密度（Ｎｖ）与比表面（）则相反，对照 δ 组大于病理组（Ｐ＜０．０１），以上说明病理组肾小球ＧＢＭ）厚度分别为０．２７３明显增大。病理组基底膜（ｎｍ，对照组为０．１３５４ｎｍ。病理组与对照组比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０１），说明病理组肾小球基底膜度明显增加。病理组足突密度（Ｎｓ）明显下降，与对照组有显著性差异（Ｐ＜０．０１），说明病理组足突触
ＱｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｓｔｕｄｙｏｆｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｉｍａｇｅｓｏｎｍｅｍｂｒａｎｏｕｓｇｌｏｍｅｒｕｌｏｎｅｐｈｒｉｔｉｓｏｆｍｉｃｅＺＨＡＮＧＨｕｘｉａｎｇ，ＺＨＡＮＧＨａｉｙａｎ，ＷＡＮＧＬｉ，ＹＡＮＧＫａｉｙａｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙ，ＷｅｎｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｗｅｎｚｈｏｕ３２５０００，