大鼠压力负荷增加心肌肥厚模型中核仁素的表达_严思敏
压力负荷增加大鼠模型左室心肌局部血管紧张素Ⅱ水平的改变
关键 词 ： 左室重构 ； 压力负荷 ； 血管紧张素 Ⅱ； 组织 Ｒ Ｓ Ａ
Ｃｈ ｎ ｉ ｇ ｏ ｅ ｔ ｖ ｎ ｒｃ ｌ ｒ ｍ ｙ ｃ ｒ ｉ ｌ ａ ｇ ｎ ｆ ｌ ｆ ｅ ｔ ｉ ｕ ａ ｏ ａ ｄ ａ
ｔ ｓ ｅｌｃ ｌ ｎ ｉｔｎ ｉ Ⅱ ｉ ａ ｔ ｒ ｓｕ ｅｏ ｅ ｌａ ｉ ｕ ｏ ａ ｇｏｅ ｓｎ ｓ ａ ｎ ｒ ｔｗｉｈ ｐ ｅ ｓ ｒ ｖ ｒｏ ｄ
２０ ０ ） １０ ２ （ 京 军 区 南京 总 医 院 中 西 医结 合 科 ， 苏 南 京 南 江
摘要 ： 目的
观察压 力负荷增 加大鼠左 室心 肌局部血管 紧张素 Ⅱ水平 的变化 ， 探讨 压力负荷增 加致 左室重构的可 能机制 。方法
加 只Ｓ Ｄ大 鼠随机分为假手术组和模型组 （ 手术组 ） 利用腹主动脉缩 窄法制备压 力负荷增加大 鼠模型 ， ， 观察 造模 ８周后观 察左 室重量指数 ， 采用放射免疫分析法测定 左室 心肌局 部血管 紧张素 Ⅱ水 平。结果 模 型组 大鼠造模 ８周 后左室 重量指数 （Ｖ ） Ｌ ＭＩ较假手术组显著 升高 （ ００ ）模 型组左室心肌组织 Ａ ｇ Ｐ＜ ． １ ， ｎ Ⅱ水 平较假手术 组也有 明显上 升（ Ｐ＜０ ０ ） ． １ 。结论 Ⅱ水平有关 。 压力 负荷增加 大鼠左室心肌局部血管 紧张素 Ⅱ水平是升高 的； 压力 负荷增 加大 鼠左室 重构 的作用 可能与左室心 肌局部血管 紧张素
Ｙ —ｉ ，Ｈ Ｏ Ｚ ｉ ｉｇ Ａ ｉＺ Ａ Ｇ Ｑ ｎｙｎ Ｄ Ｎ ｉ ｌ ，ＨＡ Ｇ Ｗｅ， Ａ ｕｂｎ Ｚ Ａ ｈ－ ｎ Ｈ ｏｅ ｇ ｍ
（ ｅａｔ ｅｔｆＩｔ ｒｔ ｒｄ ｉ ａ Ｃ ｉｅ ｎ ｅｅｎＭｅｉｎ ， Ｄｐ ｒ ｎ ｅ ａｅ Ｔａ ｉｏ ｌ ｈｎｓ ａ Ｗ ｓ ｒ ｄ ｉ ｍ ｏ ｎｇ ｄ ｔｎ ｅｄ ｔ ｃｅ
压力负荷增加大鼠模型血浆内皮素水平的改变
压力负荷增加大鼠模型血浆内皮素水平的改变[摘要] 目的:观察压力负荷增加对大鼠血浆内皮素水平的影响。
方法:采用腹主动脉狭窄法所致压力负荷增加诱发大鼠左室肥厚模型,观察左室重量指数(LVMI),采用放射免疫分析法检测血浆内皮素水平。
结果:LVMI模型组明显高于假手术组(P＜0.01);血浆内皮素水平模型组较假手术组显著升高(P＜0.01)。
结论:腹主动脉缩窄所致压力负荷增加可诱发大鼠左室肥厚,该作用可能与血浆内皮素水平升高有关。
[关键词] 慢性心力衰竭; 压力负荷; 内皮素; 大鼠[Key words] chronic heart failure; pressure overload; endothelin; rats心室重塑是导致心力衰竭(heart failure,HF)不断进展的病理生理学基础,HF 时心室重塑的病理刺激主要来自两方面:一方面神经内分泌的过度激活,另一方面为血流动力学异常。
研究发现,异常升高的血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、去甲肾上腺素(NE)、醛固酮和内皮素(ET)等可直接作用于心肌,促进心肌肥厚、心肌细胞凋亡和间质纤维化[1]。
ET是目前已知最强烈持久的血管收缩因子,不但直接刺激或激活多种激素和细胞因子,而且参与心血管疾病的病理生理过程[2]。
作者通过观察压力负荷增加对大鼠血浆ET水平的影响,以探讨血浆ET在HF病理生理过程中的作用。
1 材料和方法1.1 实验材料动物:雄性SD大鼠20只,体重180~200 g;血浆ET放免药盒(解放军总医院科技开发中心放射免疫所提供)。
1.2 方法1.2.1 造模方法参考Doering等[3]的方法,2%戊巴比妥钠40 mg·kg-1腹腔注射麻醉,固定,剃毛,常规消毒,分层打开腹腔,在左肾上缘分开后腹膜等软组织暴露腹主动脉,并在双肾动脉上方分离腹主动脉,用银夹造成腹主动脉狭窄(银夹内径0.7 mm),分层关闭腹腔。
1.2.2 实验分组所有动物随机分为模型组和假手术组2组,均常规喂养。
压力超负荷性肥大心肌中血管紧张素Ⅱ和肿瘤坏死因子α表达的变化及其相互关系
[文章编号] 100723949(2003)1120620517203・实验研究・压力超负荷性肥大心肌中血管紧张素Ⅱ和肿瘤坏死因子α表达的变化及其相互关系苏兴利1,高广道2,张润岐1,王佐贤1,王新凤2,刘进军2,林元喜2(1.陕西医学高等专科学校病理生理学教研室,陕西省西安市710068;2.西安交通大学医学院病理生理学教研室,陕西省西安市710063)[关键词] 病理学; 心肌肥大机制; 酶联免疫吸附法; 心肌肥大; 血管紧张素Ⅱ; 肿瘤坏死因子α; 开搏通[摘 要] 为探讨压力负荷性肥大心肌中肿瘤坏死因子α和血管紧张素Ⅱ的表达及其与心肌肥大的关系,采用腹主动脉缩窄法复制压力超负荷心肌肥大动物模型,于术后42天测定心肌肥大指数,并用放射免疫法测定血浆及左心室肌血管紧张素Ⅱ含量;用酶联免疫吸附法测定血清及左心室肌肿瘤坏死因子α含量。
结果发现,术后42天左心室心肌明显肥大;心室肌肿瘤坏死因子α、血管紧张素Ⅱ含量分别比假手术组增高约6倍和1倍(P <0.01);主动脉缩窄术后开搏通干预能显著抑制心肌肥大的发展,使心室肌肿瘤坏死因子α含量下降64.14%(P <0.01),但未恢复到假手术组水平(P <0.01);心室肌血管紧张素Ⅱ含量下降45.73%(P <0.01),与假手术组无显著性差异。
结果提示,压力负荷增加心肌血管紧张素Ⅱ含量,引起心肌组织肿瘤坏死因子α含量升高,可能是压力超负荷心肌肥大的主要调控路径之一。
[中图分类号] R36[文献标识码] AR elation of Expression of Tumor N ecrosis F actor 2αand Angiotensin Ⅱin H ypertrophic Mayocardial on Stress LoadS U X ing 2Li 1,G AO G uang 2Dao 2,ZH ANG Run 2Qi 1,W ANG Zuo 2X ian 1,W ANG X in 2Feng 2,LI U Jin 2Jun 2,and LI N Y uan 2X i2(1.Department o f Pathophysiology ,Shanxi Medical College ,Xi ’an 710068,China ;2.Department o f Pathophysiology ,Medical college o f Xi ’an Jiaotong Univer sity ,Xi ’an 710063,China )[KE Y WOR DS ] Cardiac Hypertrophy ; Angiotensin Ⅱ; Tum or Necrosis Factor 2α; Captopril ; Enzyme 2Linked Immu 2noads ordent Assay ; Ratio 2Immunity[ABSTRACT ] Aim T o clarify the relation of expression change of tum or necrosis factor 2α(T NF 2α)and angiotensin Ⅱ(Ang Ⅱ)in hypertrophic may ocardial on stress load. Methods Sampling blood and extirpate heart after 42days in the cardi 2ac hypertrophy m odel of exceed stress load were made by abdomen aorta 2constriction ;determining hypertrophic exponent and theconcentration of Ang Ⅱin the plasma and my ocardium by Ratio 2immunity ;determining T NF 2αin serum and left ventricle by enz 2yme 2linked immunoads ordent assay. R esults Left ventricle showed obvious hypertrophy after operation 42days ;the concen 2tration of T NF 2αand Ang Ⅱin my ocardium heighten 6folds and 1fold than controls (P <0.01);Being treated by Captopril can restrain the progress of left ventricle hypertrophy after operation and descend the content of T NF 2αin my ocardium 64.14%(P <0.01),but can not descend to the level of sham 2operated group (P <0.01). Being the content of Ang Ⅱdescend 45.73%(P <0.01)and had no marked significance to the level of sham 2operated group. Conclusions The activation of cardiac renin 2angiotensin system (RAS )by excess stress load result to heighten T NF 2αin my ocardium and it is probably one of the major adjust 2ing path of my ocardial hypertrophy.[收稿日期] 2003205228 [修回日期] 2003211205[基金项目] 陕西省卫生厅青年科研基金(200009)项目[作者简介] 苏兴利,男,1971年4月出生,陕西省长安县人,讲师,硕士研究生,研究方向为心肌肥大的发生机制。
压力负荷增加大鼠模型左室心肌局部血管紧张素Ⅱ水平的改变
压力负荷增加大鼠模型左室心肌局部血管紧张素Ⅱ水平的改变蔡辉;张群燕;董晓蕾;商玮;姚茹冰;赵智明【摘要】目的观察压力负荷增加大鼠左室心肌局部血管紧张素Ⅱ水平的变化,探讨压力负荷增加致左室重构的可能机制.方法 20只SD大鼠随机分为假手术组和模型组(手术组),利用腹主动脉缩窄法制备压力负荷增加大鼠模型,观察造模8周后观察左室重量指数,采用放射免疫分析法测定左室心肌局部血管紧张素Ⅱ水平.结果模型组大鼠造模8周后左室重量指数(LVMI)较假手术组显著升高(P<0.01),模型组左室心肌组织AngⅡ水平较假手术组也有明显上升(P<0.01).结论压力负荷增加大鼠左室心肌局部血管紧张素Ⅱ水平是升高的;压力负荷增加大鼠左室重构的作用可能与左室心肌局部血管紧张素Ⅱ水平有关.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2010(014)001【总页数】3页(P20-22)【关键词】左室重构;压力负荷;血管紧张素Ⅱ;组织RAS【作者】蔡辉;张群燕;董晓蕾;商玮;姚茹冰;赵智明【作者单位】南京军区南京总医院中西医结合科,江苏,南京,210002;南京军区南京总医院中西医结合科,江苏,南京,210002;南京军区南京总医院中西医结合科,江苏,南京,210002;南京军区南京总医院中西医结合科,江苏,南京,210002;南京军区南京总医院中西医结合科,江苏,南京,210002;南京军区南京总医院中西医结合科,江苏,南京,210002【正文语种】中文Ⅱ水平有关。
充血性心力衰竭(CHF)的发生发展是一个有众多神经体液因素参与并共同调节的过程,肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)被认为是重要的调节机制之一[1]。
近年来研究发现,心、肝、肺、肾、脑和皮肤等多种组织器官均能合成 RAAS的全部或大部分成分,称为局部 RAAS,其效应与循环 RAAS有所区别[2]。
本研究采用腹主动脉缩窄法致压力负荷增加形成CHF左室肥厚大鼠模型,观察心肌局部血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的表达变化及左室心肌病理形态HE染色、左室心肌细胞超微结构等,以探讨压力负荷增加大鼠左室重构的可能机制。
压力超负荷大鼠心肌血红素加氧酶-1表达与氧化应激水平的相关性
压力超负荷大鼠心肌血红素加氧酶-1表达与氧化应激水平的相关性朱凯媛;蔡辉;赵凌杰;赵智明;董晓蕾;沈思钰【摘要】目的:探讨压力超负荷大鼠心肌血红素加氧酶-1(HO-1)表达水平与心肌氧化应激水平的关系.方法:将40只SD大鼠随机抽取8只作为假手术组(Sham组),其余32只大鼠采用腹主动脉缩窄术制备压力负荷模型,将术后存活的22只大鼠随机分为模型组(Model组,n=7)、丹参酮ⅡA组(TanⅡA组,n=7)及丹参酮ⅡA+HO-1抑制剂组(TanⅡA+ZnPP组,n=8).术后4周造模成功并开始给药,疗程为4周.8周后检测心脏质量指数、左心室质量指数,观察心肌组织HE染色,比色法检测心肌氧化应激水平,Western blotting法检测心肌HO-1的蛋白表达水平.结果:1)与Sham组比较,Model组大鼠心脏质量指数和左心脏质量指数明显升高(P<0.01);与Model组比较,TanⅡA组和TanⅡA+ZnPP组心脏质量指数和左心脏质量指数均有不同程度下降,而TanⅡA组下降更为显著(P<0.01).2)HE染色结果显示,与Sham组比较,Model组大鼠心肌纤维化程度加重;与Model组相比,TanⅡA组和TanⅡA+ZnPP组心肌组织形态学均有不同程度的改善,而TanⅡA组改善更为明显.3)TanⅡA组血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平高于Model组和TanⅡA+ZnPP组(P<0.01),MDA水平低于Model组和TanⅡA+ZnPP组(P<0.01).4)TanⅡA组心肌HO-1的蛋白表达水平高于其余3组(P<0.01).结论:丹参酮ⅡA可以提高心肌HO-1表达水平,增强压力负荷大鼠心肌抗氧化能力,减缓心室重构进程.%Objective: To discuss the relationship between the expressions of myocardial haem oxygenase (HO)-1 and oxidative stress level of pressure overloaded rats. Methods: Eight rats were randomly chosen as sham operation group (Sham group) from forty SD rats, theother 32 rats accepted abdominal aortic constriction to prepare pressure overloaded models, 22 rats remaining alive after the surgery were randomized into three groups: the model group (Model group, n=7), tanshinone ⅡA group (Tan ⅡA group, n=7) and tanshinone ⅡA and HO-1 inhibitor group (Tan ⅡA+ZnPP group, n=8). The models were suc cessfully made in four weeks after the surgery and began to dose, and the course was four weeks. In eight weeks, cardiac mass index and left ventricular mass index were detected in eight weeks, myocardial tissue was observed after HE staining, myocardial oxidative stress level detected by colorimetry and the expressions of HO-1 protein by Western blotting method. Results: 1) compared with Sham group, cardiac mass index and left ventricular mass index of the rats in Model group raised obviously (P＜0.01); compared with Model group, cardiac mass index and left ventricular mass index of the rats in Tan ⅡA+ZnPP group decreased to different degrees, while the decrease of Tan ⅡA group was more notable (P＜0.01). 2) HE staining results showed that, compared with Sham group, myocardial fibrosis in the rats of Model group aggravated; compared with Model group, myocardial histomorphologyin Tan ⅡA group and Tan ⅡA+ZnPP group improved to different degrees, while the improvements of Tan ⅡA group were more notable. 3) Tan ⅡA group was higher than Tan IIA+ZnPP group in the levels of SOD and GSH Px (P＜0.01), while lower than Model group and Tan ⅡA+ZnPP group in the level of MDA (P＜0.01). 4) Tan ⅡA group was higher than the other three groups in the expression of myocardial HO-1 protein (all P＜0.01). Conclusion: Tan ⅡA could raise theexpression of myocardial HO-1, enhance myocardial oxidation resistance of pressure overloaded rats and slow down the progression of ventricular remodeling.【期刊名称】《西部中医药》【年(卷),期】2017(030)011【总页数】4页(P24-27)【关键词】丹参酮ⅡA;血红素加氧酶-1;氧化应激;心室重构【作者】朱凯媛;蔡辉;赵凌杰;赵智明;董晓蕾;沈思钰【作者单位】南京军区南京总医院中西医结合科,江苏南京 210002;南京军区南京总医院中西医结合科,江苏南京 210002;南京军区南京总医院中西医结合科,江苏南京 210002;南京军区南京总医院中西医结合科,江苏南京 210002;南京军区南京总医院中西医结合科,江苏南京 210002;南京军区南京总医院中西医结合科,江苏南京 210002【正文语种】中文【中图分类】R541.6有研究［1］提出氧化应激参与了心室重构发生、发展的各个环节，正常情况下，机体氧化与抗氧化系统之间维持动态平衡，但压力超负荷导致细胞活性氧(reactive oxygen species，ROS)产量明显升高，抗氧化防御功能代偿不足。
异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚中核仁素的表达
异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚中核仁素的表达严思敏;吴双;蒋碧梅;涂自智;王慷慨;肖献忠【期刊名称】《中南医学科学杂志》【年(卷),期】2013(041)002【摘要】目的探讨异丙肾上腺素（ISO）所致小鼠心肌肥厚（hypertrophy）中核仁素的表达情况。
方法采用体重18—22g小鼠，随机分为3组（n=10）：生理盐水组、小剂量异丙肾上腺素组（ISO每天100mg／kg）、大剂量异丙肾上腺素组（ISO每天150mg／kg），连续注药l周后，称体重（uw），从心脏取血测定MDA、LDH和CK含量，取全心称重（HW）；光镜下观察心肌病理形态学改变；免疫组织化学法及Western—blot检测核仁素的表达情况。
结果（1）小剂量异丙肾上腺素组小鼠心肌纤维增粗，心肌细胞呈柬状分布，排列较整齐，而大剂量异丙肾上腺素组心肌纤维增粗，排列紊乱，纤维组织增生，染色不均匀。
与生理盐水组相比，小剂量异丙肾上腺素组、大剂量异丙肾上腺素组小鼠心脏重量参数HW／BW显著增加（P〈0．05）；（2）与生理盐水组相比，大、小剂量异丙肾上腺素组小鼠血清MDA、LDH、CK含量升高（P〈0．05）；（3）与生理盐水组相比，小剂量异丙肾上腺素组小鼠心肌核仁素蛋白表达上调（P〈0．05），而大剂量异丙肾上腺素组小鼠心肌核仁素的表达无明显改变。
结论小剂量异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚中核仁素的表达上调，而犬剂量异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚中核仁素的表达改变不明显。
【总页数】5页(P113-117)【作者】严思敏;吴双;蒋碧梅;涂自智;王慷慨;肖献忠【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】R542.2【相关文献】1.白藜芦醇对异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚的保护作用 [J], 张静怡;张博男;张春来;韩淑英2.锰-超氧化物歧化酶、过氧化氢酶在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的表达 [J], 朱玉林;米立国;郝连军;杜建文;王瑞芬3.PI3K和Akt蛋白在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的表达 [J], 穆灵敏;王文锋;郭志坤;张光谋;杨廷桐4.异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚中核仁素的表达 [J], 严思敏;吴双;蒋碧梅;涂自智;王慷慨;肖献忠5.黄芪甲苷对异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚的保护作用 [J], 许晓乐;季晖;谷舒怡;黄秋菊;陈艳萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同类型心脏肥大大鼠模型心肌中炎症细胞因子表达差异
Ａ Ｂ Ｓ Ｔ Ｒ Ａ Ｃ Ｔ Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ： Ｔ ｏ ｃ ｏ ｍｐ ａ ｒ ｅ ｔ ｈ ｅ ｄ ｉ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｓ ｏ ｆ ｃ ａ ｒ ｄ ｉ ａ ｃ ｉ ｎ ｌ ｆ ａ ｍｍ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ ｃ ｙ ｔ ｏ ｋ ｉ ｎ ｅ ｓ ｉ ｎ ｃ ｌ ｕ ｄ ｉ ｎ ｇ ｔ ｕ ｍ ｏ ｒ ｎ ｅ ｃ ｒ ｏ ｓ ｉ ｓ ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ — ａ ｌ ｐ ｈ ａ（ Ｔ Ｎ Ｆ — ｏ ｔ ） ， ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｌ ｅ ｕ ｋ ｉ ｎ 一 １ Ｂ （ Ｉ Ｌ 一 １ Ｂ ） ， ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｌ ｅ ｕ ｋ ｉ ｎ － ６（ Ｉ Ｌ ６ ）ｉ － ｎ ｔ ｗ ｏ ｔ ｙ ｐ ｅ ｓ ｏ ｆ ｃ ａ ｒ —
・
论 著
・
不 同类型心脏肥大大 鼠模型心肌 中炎症细胞 因子 表达差异
张敏 莉 ｈ， 李 昭屏 ， 肖 晗 ， 白 燕 ， 张 幼怡
（ １ ． 北京大学第三 医院心 内科 ， 北京 １ ０ ０ ０ ８ ３ ； ２ ． 北 京大学第三医院血管 医学研究所 ， 分子心血管学教育 部重点实
维普资讯
Байду номын сангаас
北
・
京
大
学
学
报 （ 医
学
版 ）
５ ７０ ・
Ｊ Ｏ Ｕ Ｒ Ｎ Ａ Ｌ Ｏ Ｆ Ｐ Ｅ Ｋ Ｉ ＮＧ ＵＮ Ｉ Ｖ Ｅ Ｒ Ｓ Ｉ Ｔ Ｙ （ ＨＥ ＡＬ Ｔ Ｈ Ｓ Ｃ Ｉ Ｅ Ｎ Ｃ Ｅ Ｓ ） Ｖｏ １ ． ３ ９ Ｎ ｏ ． ６ Ｄ ｅ ｃ ．２ ０ ０ ７
ｉ ｎ ｒ ａ ｔ ｓ
ＺＨＡＮ Ｇ Ｍｉ ｎ — ｌ ｉ ，Ｌ Ｉ Ｚ ｈ ａ ｏ — ｐ ｉ ｎ ｇ ，ＸＩ ＡＯ Ｈａ ｎ ，Ｂ ＡＩ Ｙａ ｎ ，ＺＨＡＮ Ｇ Ｙｏ ｕ — ｙ ｉ
压力超负荷下大鼠左心室活性氧水平及凋亡信号调节激酶蛋白表达
压力超负荷下大鼠左心室活性氧水平及凋亡信号调节激酶蛋白表达邱敏;马康华【期刊名称】《第三军医大学学报》【年(卷),期】2006(28)12【摘要】目的研究凋亡信号调节激酶(apoptosis signal regu lating k inase1,ASK1)在高血压心脏肥大中的作用。
方法复制腹主动脉缩窄高血压大鼠模型,用比色法测定假手术组和高血压组左心室活性氧(reactive oxygen spec ies,ROS)水平,用免疫印迹法测定ASK1蛋白表达。
结果高血压大鼠左心室质量指数、ROS水平、ASK1蛋白表达均显著高于假手术组(P<0.05)。
结论压力超负荷下随着ROS的升高,激活的ASK1可能在心脏肥大信号传导途径中发挥重要作用。
【总页数】3页(P1314-1316)【关键词】高血压;心脏肥大;活性氧;凋亡信号调节激酶【作者】邱敏;马康华【作者单位】重庆医科大学附属第一医院心血管内科【正文语种】中文【中图分类】R322.11;R345【相关文献】1.中药补阳还五汤对大鼠脑出血神经元凋亡及磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶蛋白表达的影响 [J], 孟杰;刘云霞;吴晓光;李蒙蒙;仇志富;孙大永2.凋亡信号调节激酶1在扩张型心肌病大鼠中的表达及其与左心室射血分数的相关性 [J], 刘丽萍;何学华;袁勇华;李双杰;毛定安3.凋亡信号调节激酶1在扩张型心肌病大鼠中的表达及其与左心室射血分数的相关性 [J], 刘丽萍;何学华;袁勇华;李双杰;毛定安;4.川芎嗪对大鼠压力超负荷心肌细胞外信号调节激酶1mRNA表达的抑制作用 [J], 邓江;吴芹;黄燮南5.基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路探讨针刺对超负荷运动致骨骼肌损伤大鼠氧化应激损伤及骨骼肌细胞凋亡的影响 [J], 刘祥华;罗湘筠;李文倩因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
中南大学学报（医学版）J Cent South Univ (Med Sci)2014, 39(2) htt p://; htt p://124大鼠压力负荷增加心肌肥厚模型中核仁素的表达严思敏1，吴双1，孙丽2，蒋碧梅2，涂自智2，肖献忠2(中南大学湘雅医学院 1. 2008级临床医学系；2. 病理生理学系，长沙 410078)[摘要]目的：探讨腹主动脉缩窄致压力负荷增加大鼠心肌肥厚模型中核仁素的表达情况。
方法：采用体质量180~220 g SD 大鼠40只，随机分为假手术组和腹主动脉缩窄模型组，利用腹主动脉缩窄法制备压力负荷增加心肌肥厚模型，分别于术后2周、4周观察心脏质量指数、左心室质量指数；采用RT-PCR 检测心肌组织中β-MHC mRNA 的表达；采用Western 印迹检测心肌、脑、肾组织中核仁素的表达情况。
结果：腹主动脉缩窄模型组4周以后心脏质量指数、左心室质量指数较假手术组显著增加(P <0.01)；4周以后心肌组织中β-MHC mRNA 的表达较假手术组显著升高(P <0.05)；2周以后心肌组织中核仁素蛋白的表达较假手术组显著升高(P <0.05)，而在脑、肾组织中无明显升高。
结论：核仁素蛋白在大鼠压力负荷增加心肌肥厚模型中的表达上调，表明核仁素可能参与了压力负荷增加心肌肥厚的发生发展。
[关键词] 核仁素；心肌肥厚；大鼠；压力负荷增加Expression of nucleolin in pressure overload-inducedcardiac hypertrophy ratsYAN Simin 1, WU Shuang 1, SUN Li 2, JIANG Bimei 2, TU Zizhi 2, XIAO Xianzhong 2(1. Clinical Medical Major, Grade 2008; 2. Department of Pathophysiology, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China)ABSTRACT Objective: To detect the expression of nucleolin in cardiac hypertrophy rats induced by pressureoverload.Methods: A total of 40 SD rats with body weight 180 g and 220 g were recruited and randomlydivided into 2 groups: a transverse aortic constriction (TAC) group and a sham surgery group. Cardiac hypertrophy model was employed by transverse aortic constriction surgery. Th en 2 weeks and 4 weeks aft er the experiment, the heart mass index (HMI), left ventricle mass index (LVMI) were measured. β-MHC mRNA in the heart tissue was detected with RT-PCR. Nucleolin in the heart, brain and kidney was respectively detected with Western blot.收稿日期(Date of reception)：2013-04-02作者简介(Biography)： 严思敏，主要从事心肌的内源性保护的研究，现为湘雅二医院心胸外科硕士研究生。
通信作者(Corresponding author)：蒋碧梅，Email ：jiangbimei@基金项目(Foundation item)：国家自然科学基金(81170113)；教育部新世纪优秀人才支持计划(NECT-12-0545)。
This work was supported by the grants from the National Natural Science Foundation of China (81170113) and Education Ministry's New Century Excellent T alents Supporting Plan, P . R. China (NECT-12-0545).DOI:10.11817/j.issn.1672-7347.2014.02.003htt p:///xbwk/fileup/PDF/201402124.pdf大鼠压力负荷增加心肌肥厚模型中核仁素的表达严思敏，等125心肌肥厚是心肌对各种心血管刺激因子如血流动力学负荷、生长因子以及激素等的适应性反应，是心肌细胞体积增大和蛋白含量增多为主要特征的代偿反应[1]。
临床研究[2-5]发现预防或逆转心肌肥厚能明显改善患者的预后，但如何预防及逆转心肌肥厚的发生成为现在研究的热点。
核仁素为一种重要的RNA结合蛋白，是目前发现的271种核仁蛋白质中含量最多的一种，约占核仁蛋白质总量的10%。
它具有多种生物学功能，包括调控核糖体的生物合成与成熟，调控细胞增殖、生长、胚胎发生等过程。
近年来的研究[1]发现核仁素是一个心肌保护蛋白，然而，核仁素在心肌肥厚的发生发展中是否起作用，目前还不清楚。
本研究探讨核仁素蛋白在大鼠压力负荷增加心肌肥厚模型中的表达，为进一步研究核仁素在心肌肥厚发生发展中的作用提供理论依据。
1 材料与方法1.1 材料RIPA中性裂解液、苯甲基磺酰氟(PMSF)、牛血清白蛋白(BSA)、兔抗核仁素单克隆抗体购于美国Sigma-Aldrich公司，辣根过氧化物抗兔IgG，DAB显色试剂盒为武汉博士德生物技术公司产品。
1.2 动物及分组清洁级雄性SD大鼠40只，体质量180~220 g，由中南大学实验动物中心提供，随机分为假手术组和腹主动脉缩窄模型组(模型组)。
腹主动脉缩窄模型组大鼠麻醉后(水合氯醛0.8~1.0 mL 腹腔注射)沿腹中线打开腹腔，将肠管轻轻推开，暴露后腹膜，于右肾动脉上方分离长约3 mm的腹主动脉，穿单线，放置1根7号针管，结扎腹主动脉，拔出针管，制备腹主动脉缩窄模型。
假手术组除了结扎以外，其余操作均同模型组。
1.3 心脏质量指数(HWI)、左心室质量指数(LVMI)测定末次给药后禁食24 h，称量体质量，麻醉后迅速开胸取出心脏，剪去心脏周围组织和血管称取全心质量，计算HWI=全心质量(HW)/体质量(BW)，然后去除左右心房、右心室游离壁，将左心室加室间隔准确称重作为左心室质量，计算LHWI=左心室质量/体质量，来判断心肌肥厚程度。
1.4 β-MHC 的mRNA 检测用T R I z o l方法抽提心肌组织中总R N A[6]。
以G A P D H为内参，通过R T-P C R 方法进行检测[6]。
G A P D H上游引物为：5'-G C T G A G TAT G T C G T G G A G T-3'，下游：5'-TCTTCTGAGTGGCAGTGAT-3'；β-MHC上游引物为：5'-CTGGCACCGTGGACTACAAC-3'，下游：5'-CGCACAAAGTGAGGATAGGGT-3'，扩增产物约270 bp，均由上海生物工程公司合成。
1.5 免疫印迹分析称取组织质量，按每100mg组织加1m L的比例加入R I PA中性裂解液和PMSF(按每1 g组织30 μL)，冰上孵育30 min后，用组织匀浆器于冰上研磨。
将研磨液移入离心管，于4 ℃以14 000 r/min 离心30 min，取上清液收集组织总蛋白。
分装后置于-80℃冰箱保存备用。
取30 μg蛋白裂解液，加入等体积2×SDS电泳加样缓冲液混合，100 ℃煮沸10 min。
样品经12% SDS-PAGE电泳分离，电转移法将胶上蛋白质转至醋酸纤维膜上。
用封闭缓冲液(2% BSA，50 mmol/L Tris-HCl，0.15 mol/L NaCl，pH7.5)室温下封闭4 h。
然后加入兔抗核仁素单克隆抗体(1:1 000稀释)于摇床上，室温下孵育2 h。
Results: Compared with the sham surgery group, HMI, LVMI in the TAC group increased significantly (P<0.01) 4 weeks after the surgery; the expression of β-MHC mRNA in the hearttissue increased (P<0.05) in the TAC group 4 weeks after the surgery; and the expression ofnucleolin protein in the heart tissue of the TAC group was remarkably upregulated (P<0.05) 2weeks aft er the surgery, with no change in the brain and kidney tissue between the 2 groups.Conclusion: Expression of nucleolin protein has been upregulated in response to pressure overload, which may suggest that nucleolin plays a role in cardiac hypertrophy induced by pressureoverload.KEY WORDS nucleolin; cardiac hypertrophy; rat; pressure overload中南大学学报(医学版), 2014, 39(2) http://; htt p:// 126用洗膜液洗去一抗后，加入辣根过氧化物酶偶联的抗兔IgG 二抗(1:1 000稀释)于摇床上，孵育1 h ，洗膜液洗去二抗。
用DAB 显色，进行灰度扫描及定量分析。
GAPDH 抗体作为内对照。