Removed_大鼠急性心肌缺血模型制备详细图解

模型的背景,心肌缺血模型分全心缺血和左心室缺血两种,全心缺血主要靠注射药物(如异丙肾上

腺素等),左心室缺血主要靠手术对动物的冠状动脉左降支进行紧扎实现。由于左心室缺血对临床的意义

更大,所以研究心肌缺血药物时这个模型是必须的。

(1)术前12小时给动物禁食

(2)将动物注射10%水合氯醛(0.4mL/100g)麻醉后固定在手术台上

(3)用笔型静脉置留针进行气管插管,插好后可用手术刀柄靠近气管,如果见气雾,就证明成功

,连接动物呼吸机,参数为:呼吸频率85;呼吸比1:1;潮气量为18ml

(4)胸部被毛、酒精棉消毒,在胸部左侧3~4肋间剪开皮肤,如图1

(5)分离肌肉露出肋骨,切口位置有两块肌肉,胸浅肌和胸深肌,注意按照肌肉的纹路分离可以

避免将肌肉扯烂,如图2

(6)在第三根肋骨下用止血钳将肌肉分离开,然后左手用止血钳挑住肋骨,右手持剪刀剪开第三

根肋骨,如图3

(7)用止血钳将剪断的肋骨夹住掰开,放入开睑器,用止血钳剥离心包膜,如图4(8)用止血钳将胸腺(心脏上面白的像脂肪一样的东西)夹住拉出,如图5

(9)在左心耳与肺动脉圆锥间穿6~0号线,拉紧丝线,形成心肌缺血,观察线扎紧的部位上下大

约2mm范围的心肌是发白色的,如图6

(10)闭合胸腔,注意将胸腔内的空气挤出(这点非常关键,这个模型最容易失败导致大鼠死亡的

就是这个地方),对肌肉和皮进行缝合,挤空气的手法如图7(11)结扎术后6小时可进行TTC染色:将大鼠脱颈处死,打开胸腔,将心脏剪下,用生理盐水

将心脏清洗干净并排出心脏内的淤血,沿冠状沟将心房切除留下心室,用刀片将心脏切成1mm厚的切片

,放入0.1%的TTC磷酸盐缓冲液(pH 7.4)37℃水浴7~10分钟,取出切片用生理盐水冲洗数次,观察

结果。非梗死区因脱氢酶还原TTC而呈红色,梗死区因脱氢酶流失而呈白色,将梗死区和非梗死区分离

并分别称重,梗死范围以梗死心肌占缺血心肌重量的百分比表示。下图是染色的结果,图8

结扎位置,梗死的地方其实肉眼大致能看出,和其他地方相比发白,图9:

下面再发正常大鼠和梗死大鼠的心电图区别,是用的PowerLab做的,正常的如下

22小时后的心电

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心肌梗死动物模型具体方法及步骤

心肌梗死动物模型具体方法及步骤

心肌梗死动物模型具体方法及步骤

原型物种人

来源结扎冠状动脉左前降支(LAD)导致心梗

模式动物品系SPF级SD大鼠,健康,3-4W,雌雄各半,体重为180g-200g。

实验分组实验分六组:正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。

实验周期72h

建模方法心肌梗死是指心肌的缺血性坏死,是一种急性及严重的心脏状态。心脏作为血液循环动力中心这一功能的实现,需要冠状动脉不断提供的血流供应,当冠状动脉发生病变而狭窄或堵塞,使得冠状动脉的血流急剧减少或中断,便会使相应的心肌出现严重而持久地急性缺血,心肌无法得到足够氧气,最终导致心肌不可逆的缺血性坏死,心脏的收缩和舒张功能降低,机体供血不足,严重者最终导致机体死亡。

1. 大鼠用3%戊巴比妥钠(30mg/kg),腹腔注射麻醉,用小动物剃毛器剃除大鼠胸部及腋下毛发(充分暴露手术区),用碘酒和75%乙醇术区消毒。

2.气管插管:麻醉后,夹趾检测无反应即可进行MI手术。打开外置光源、显微镜开关,打开呼吸机,设置好各参数(呼吸比 2:1,潮气量 6-8 mL,频率

70 次/min),将气管插管沿声门插入气管,取下大鼠接上呼吸机,观察大鼠呼吸状况,胸廓起伏与呼吸机频率一致表示插管成功,即可进行MI手术。3.

大鼠采用右侧卧位,用眼科剪在左前肢腋下,用显微剪于三、四肋间打开胸腔充分暴露心脏,显微直镊轻轻夹起少量心包并于左心耳下撕开少许心包,充分暴露左冠状动脉前降支(LAD)或所在区域。

4. 结扎冠状动脉:于显微镜下找到LAD走向或可能所在位置,持针器持取5-0带针缝合线,于左心耳根部下方肺动脉圆锥旁以 5-0 无创缝合线穿过左冠状动脉前降支( LAD),以完全阻断LAD血流。

5.关胸:结扎完成后,5-0缝线完全缝合胸腔开口(保证无缝隙、无错位)关闭胸腔,由内向外逐层缝合各层肌肉和皮肤。

6.术后管理:术后密切关注大鼠状态,有无呼吸异常等。待大鼠自然苏醒后将大鼠从呼吸机上取下并取下气管插管,正常饲养。

【CN109700557A】一种大鼠急性心肌缺血动物模型的建立方法【专利】

【CN109700557A】一种大鼠急性心肌缺血动物模型的建立方法【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910200489.X(22)申请日 2019.03.16(71)申请人 河南中医药大学地址 450046 河南省郑州市郑东新区金水东路156号(72)发明人 闫奎坡 朱翠玲 孙彦琴 朱明军 徐亚洲 李彬 高原 谢世阳 陈磊 (74)专利代理机构 西安研创天下知识产权代理事务所(普通合伙) 61239代理人 杨凤娟(51)Int.Cl.A61D 1/00(2006.01)

(54)发明名称一种大鼠急性心肌缺血动物模型的建立方法(57)摘要本发明公开了一种大鼠急性心肌缺血动物模型的建立方法,其步骤为:步骤1、LAD结扎位置的确定:在距SD大鼠的左心耳下缘1mm处,在左冠状静脉主干附近的室间沟内,将LAD连同少量心肌组织一起缝扎,进针深度控制在1-2mm,宽度为2-3mm;步骤2、注射麻醉,在胸骨左侧第四五肋间处直接剪开胸部皮肤,留一荷包备用,用止血钳钝性分离肌肉层,看到肋骨后用止血钳头端直接插入第四或五肋间隙,适当挣开肋间隙,暴露心脏,将心脏挤出,用拇指、食指固定心脏按照常规组方法结扎冠脉,将心脏复位,拉紧荷包结扎胸部切口,用小动物呼吸机验证模型的成功。本发明采用改良结扎前降支的方法成功复制出大鼠

急性心肌缺血模型。

权利要求书1页 说明书2页 附图1页CN 109700557 A2019.05.03

CN 109700557

A1.一种大鼠急性心肌缺血动物模型的建立方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、LAD结扎位置的确定:在距SD大鼠的左心耳下缘1mm处,在左冠状静脉主干附近的室间沟内,将LAD连同少量心肌组织一起缝扎,进针深度控制在1-2mm,宽度为2-3mm;步骤2、用3%戊巴比妥钠腹腔内注射麻醉,四肢皮下连接心电图电极记录实验全过程。常规消毒,在胸骨左侧第四五肋间处直接剪开胸部皮肤,留一荷包备用,用止血钳钝性分离肌肉层,看到肋骨后用止血钳头端直接插入第四或五肋间隙,适当挣开肋间隙,暴露心脏,将心脏挤出,用拇指、食指固定心脏按照常规组方法结扎冠脉,将心脏复位,拉紧荷包结扎胸部切口,用小动物呼吸机验证模型的成功。2.根据权利要求1所述的大鼠急性心肌缺血动物模型的建立方法,其特征在于,步骤2中,没有呼吸机的支持,胸腔打开后必须快速闭合,

大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估-最新文档资料

大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估-最新文档资料

大鼠急性心肌梗死动物模型的建立和评估

1 对象与方法 ?

1. 1研究对象 清洁级雄性Spreague-Dawley (SC)大鼠20 只,体质量250〜300 g (275± 15. 3) g,由广州中医药大学实

验动物中心提供。随机分为假手术组和心肌梗死组。

1 . 2 研究方法 ?

1 . 2. 1 MI 模型的建立 [2-3] 氯胺酮( 75 mg/kg )腹腔注射

麻醉,经口人工呼吸(导管置于大鼠的舌体与上颌之间),连接 小动物呼吸机予以正压通气,潮气量 3〜5 ml/100 g ,呼吸频率

60次/min,吸呼比1? : ?1。左侧胸部备皮,消毒手术区域,经

胸骨左缘第 4 肋间开胸, 钝性分离肌肉, 以眼科开睑器撑开肋间 肌切口,暴露心脏,剪开心包,于肺动脉圆锥与左心耳之间距主 动脉根部2~3 mm处,用7-0眼科无创缝合针,穿过前降支深部

连同一小束心肌一并结扎。 根据心电图和心肌组织颜色确定冠脉 结扎成功。逐层缝合胸壁,自主呼吸恢复后拔出通气导管。大鼠 清醒后送动物房饲养,规律照明,自由进食和饮水。术后连续 3 d 予以青霉素 40 万 U

腹腔注射以预防感染。假手术对照组除不 结扎冠状动脉外,其余步骤相同。

1. 2. 2 超声心动图检查 [4]3% 戊巴比妥钠( 45 mg/kg )腹 腔注射麻醉,用 Philips Sonos 5500型多功能超声诊断仪( S12

探头,频率5~12 MHz),在胸骨旁以二维超声和 M型超声测量

左室收缩末径(LVSd、左室舒张末径(LVDd、舒张期左室后 壁厚度(PWd、舒张期左室前壁厚度(AWd Ml组为梗死区室

壁厚度)、左室射血分数(LVEF和短轴缩短率(FS),分别计 算梗死区变薄指数(BBZS即舒张期左室前壁厚度/后壁厚度) 和非梗死区增厚指数(ZHZS即舒张期左室后壁厚度/前壁厚度)。 所有参数均在 3 个连续的心动周期中进行测量并取平均值。

实验性大鼠急性心肌缺血超微结构变化的观察

实验性大鼠急性心肌缺血超微结构变化的观察

实验性大鼠急性心肌缺血超微结构变化的观察

摘要】 通过电镜观察大鼠急性心肌缺血时超微结构的变化,得出结论:急性心肌缺血性可以导致心肌细胞超微结构的损伤和凋亡的发生。

【关键词】 急性心肌缺血 大鼠 超微结构

本实验试图通过观察心肌细胞急性缺血时超微结构的变化,为在急性心肌缺血时,心肌细胞凋亡的发生以及凋亡发生的时间性提供一定的形态学依据。

1 材料和方法

1.1材料 健康成年的Wistar大鼠72只,由山西医科大学动物中心提供。JEM100-CX型透射电镜观察。

1.2 方法

1.2.1动物分组和动物模型制备 大鼠随机分为6组:0.5h组、1h组、2h组、3h组、4h组和6h组,每组12只。0h组为对照组,即每组中取2只,共12只构成对照组:打开胸腔,丝线穿过左冠状动脉前降支下心肌,但不结扎。其他6组为实验组,实验组大鼠结扎左冠状动脉前降支制备急性心肌缺血模型。分别于0.5h、1h、2h、3h、4h和6h,剪开胸壁,摘取心脏,切取左冠状动脉前降支供血区心肌,进行以下研究。

1.2.2 电镜标本的制作及观察 处死大鼠后立刻取左前降支冠状动脉供血区心肌1×1×1mm3,用20%的戊二醛和1%的锇酸双固定,系列丙酮脱水,618环氧树脂包埋,LKB-Ⅳ型超薄切片机切片,醋酸铀和枸橼酸铅双染色后用JEM100-CX型透射电镜观察。

2 结果

对照组的心肌超微结构正常:粗面内质网和线粒体结构清晰,基质中电子密度中等,胞浆内有丰富的糖原,A带和I带清晰,肌节等距。实验组:缺血0.5h组:A带和I带较清晰,肌节轻微紊乱,线粒体和粗面内质网肿胀,线粒体中出现一些小的电子致密物质,糖原减少,胞浆电子密度降低。缺血1h组:A带和I带模糊,肌节严重紊乱,线粒体嵴断裂,空泡变性,粗面内质网肿胀,空泡变性,其上的核糖体脱落,糖原几乎不能见到。缺血2h组:A带和I带已不能辨认,肌节严重破坏,线粒体空泡变性加重,甚至形成髓鞘样结构,即:细胞内或细胞外出现的一些螺旋状或同心圆状卷曲的结构,糖原不能见到,细胞核中的染色质凝聚于皱缩的核膜下。缺血3h组:大部分线粒体和内质网空泡化,粗面内质网上的核蛋白体数目进一步减少。缺血4h组,线粒体和内质网空泡变性进一步加重,部分线粒体和内质网的结构破碎,但能较清楚的分辨其结构。缺血6h组,大部分线粒体和内质网的结构破碎,但仍能分辨其结构,可以观察到一些由单位膜包绕的类圆形结构,这些类圆形结构的内部可以看到脂质小泡和一些破碎线粒体的轮廓,这些类圆形结构即凋亡小体。

大鼠心肌缺血模型制备方法的比较及改进浅析

大鼠心肌缺血模型制备方法的比较及改进浅析

大鼠心肌缺血模型制备方法的比较及改进浅析

张世田;庞路路;唐汉庆;黄岑汉

【期刊名称】《中国比较医学杂志》

【年(卷),期】2017(27)7

【摘 要】虽然大鼠冠心病心肌缺血模型的制备方法在许多文献记载中描述比较详细,实用价值比较高,并被诸多学者选择作为研究人类疾病及药物药理作用的动物疾病模型,但其操作性和可行性仍有一定不足.本文通过实验重新选择冠脉结扎部位、简化操作步骤、改进实验方法重新造模,取得了满意的效果.本文就大鼠冠心病心肌缺血模型制备方法的选择、具体操作过程、影响因素等进行综合评述,为研究者选择合适的动物疾病模型提供参考.%The method for preparation of models of

myocardial ischemia in rats have been well described in the literature, are

of practical value and have been chosen by many researchers for

pharmacological studies of drugs for human diseases.However, there is still

lack in some details of their operability and practicability.We re-selected

the coronary artery ligation site, simplified the procedures and improved

the experimental method for preparation of the models, and made

satisfactory result.In this paper we will review the selection of method for

线栓法大鼠脑缺血再灌注模型制备方法-图文并茂

线栓法大鼠脑缺血再灌注模型制备方法-图文并茂

线栓法MACO模型制备-图文并茂 皮皮 作品

第 1 页 2005-8-30

线栓法大鼠脑缺血再灌注模型制备方法

Pipilulu

目 录:

第一部分 线栓模型制备理论及经验

1插线法局灶性脑缺血模型简介

2大鼠颈部及颅内动脉解剖及常用插线位置

3大鼠大脑中动脉阻断实验的总结和心得(zhuqing0506战友)

4 也谈大鼠MCAO模型的实验体会(bladeflyer战友)

5 我的做MCAO模型的一些体会(intelligentwang战友)

6 线栓法大鼠脑缺血再灌注模型(MCAO)制备技巧(ysf2k战友)

第二部分 线拴模型制作过程(雨后天晴 战友)

第三部分 灌注取脑(pipilulu战友)

第四部分 TTC染色(pipilulu战友)

丁香园 线栓法MACO模型制备-图文并茂 皮皮 作品

第 2 页 2005-8-30

前 言

相信不少神经内科的研究生都作过或将要作大鼠线栓模型,都有一个从查文

献了解方法到跟师兄、师姐学习再到自己体会摸索直至熟练的过程,在模型制作

的过程中可能的经历了从模型不成功的郁闷到熟练后成功的喜悦(我们是有这样

的感觉)。为了缩短各位将要作或刚开始作MCAO 模型的战友的摸索过程,提高模型制作

的成功率,我们愿意将自己的经验与大家分享,相信各位战友看过后将对制作大鼠线栓模型

有更深的认识,并以其为乐趣,同时欢迎各位熟练的战友与我们交流经验。

第一部分 线栓模型制备理论及经验

⒈ 插线法局灶性脑缺血模型简介

八十年代Koizumi和Longa创用了不开颅的大鼠MCA可逆性脑梗塞模型,此后,应用插

线法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的方法不断改进和完善,已渐趋成熟,目前该法已逐

渐取代开颅法而成为最流行的方法。该模型先阻断颈外动脉(ECA)及其分支,且阻断翼腭

动脉(PPA),以切断颅外来源的侧副循环血流。从ECA插入尼龙线,经颈内动脉(ICA)到

大脑前动脉(ACA),机械性阻断大脑中动脉(MCA)发出处的血供来建立大脑中动脉缺血模

心肌缺血动物模型制备方法

心肌缺血动物模型制备方法

心肌缺血动物模型是研究心血管疾病,如心肌梗死、心绞痛等的常用方法。本文将介绍制备心肌缺血动物模型的具体步骤。

材料与仪器

1. 大鼠或小鼠

2. 氧气和二氧化碳混合气体

3. 麻醉仪

4. 灭菌扫描仪

5. 心电图仪

6. 鼠标心脏解剖仪

7. 组织染色和电镜检查仪

8. 淬灭钳和缝合针

9. 氧气麻醉设备

10. 细胞色素标记试剂盒

方法

1. 麻醉动物:选择体重在200-300g的大鼠或小鼠,放入麻醉仪中,将氧气和二氧化碳混合气体注入到呼吸气道,使动物处于深度麻醉状态。

2. 在鼠胸部上方剃毛并用消毒酒精擦拭,再使用灭菌扫描仪对鼠胸部进行消毒处理。

3. 开始进行手术:使用淬灭钳,穿刺胸骨左侧的第三根肋骨,插入心包中,直到感觉到心脏跳动。

4. 使用鼠标心脏解剖仪,在心脏上滑动,找到左前降支冠状动脉并用缝合针把它们包扎。包扎的宽度应约为1毫米。

5. 撤回钳子,使心脏恢复跳动,观察心电图,以确认心肌缺血已有效制备。

6. 等待适当的时间进行操作,最好在10-30分钟内制备完毕心肌缺血。

7. 消毒手术部位,关闭氧气和二氧化碳混合气体,将动物放回代表室,进行观察。

8. 24小时后,给予动物一次肟酸钾(16mg/kg)注射治疗。

分析

心肌缺血动物模型制备完成后,需要进行心脏和组织染色检查,以及电镜检查。在实验中,可以使用细胞色素标记试剂盒来检测细胞色素C的排放情况,以评估心肌细胞受损程度。另外,观察动物濒临死亡时的行为变化,可以对模型的制备成立发挥较为重要的作用。

使用心肌缺血动物模型,以生成动物模型来模拟心肌缺血的病理过程,进行心血管系统方面的研究,对制定相应治疗措施有重要意义。

冠脉结扎法制作大鼠心肌缺血模型

- 1 - 冠脉结扎法制作大鼠心肌缺血模型

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 清洁级Wistar近交系大鼠100只(购自中国科学院上海实验动物中心),均为雄性,体重245~320g(平均278.2±22.2g),饲养环境为清洁级。

1.1.2 试剂 3%戊巴比妥钠,1%肝素钠,Evans蓝和N-BT磷酸缓冲液(Sigma公司)。

1.1.3 实验仪器 心电图机,动物呼吸机(浙江医科大学医疗仪器设备厂,DH150型动物呼吸机),Buxco系统(Buxco公司)。

1.2 模型制作

1.2.1 动物分组 根据研究目的,实验动物共分六组;其中五个组需手术制作模型,合称手术组,另一个组为假手术组。为满足每组12只的要求,先后有100只动物随机进入手术组(85只)与假手术组(15只)。

1.2.2 制作方法

1.2.2.1 手术组 用3%戊巴比妥钠(30mg/kg)行腹腔注射麻醉,麻醉满意后置于手术台,四肢及头部仰卧固定于手术台上,四肢皮下连接心电图电极,记录标准Ⅱ导联心电图,颈部皮肤备皮消毒,胸骨上窝上正中切开皮肤0.5cm,向上钝性分离推开下颌下腺,剪除气管前肌肉,使气管在没有任何拉钩牵引的情况下能充分显露,彻底止血后于第2~3气管环间行气管横行切开,注意不要切断气管软骨环,切口长度不超过气管周径的1/3,擦干其内分泌物后插入气管插管(用小儿吸痰管自制),深度为0.5~1cm。连接空气呼吸机进行人工控制呼吸,呼吸频率90次/分,潮气量10~12ml,吸呼比设为1﹕1。左前胸去毛,消毒铺巾,顺肋间隙方向于胸骨左旁第3~4肋间切开皮肤,长约1cm,逐层分离皮下组织、肌肉,于2~3肋骨间撑开进胸,向右上方推开胸腺,可暴露心脏及大血管根部,切开心包,轻挤大鼠胸廓,将心脏挤出,有部分动物在左心耳下缘与肺动脉圆锥间可以看见左冠脉前降支起始部,用6-0Prolene线缝针,进针深度控制在0.1cm,宽度为0.1~0.2cm(图1);回纳心脏入胸廓,待动物的数十次心动周期后,收线打结;观察数分钟后,彻底止血后逐层关胸。关胸过程中于切口内放置排气管(用小儿头皮针的软管自制),关胸毕,抽空胸腔积气后拨除。恢复大鼠自主呼吸,拨出气管内插管,清除气管内分泌物,气管切口及颈部切口开放,不作缝合。手术过程中分开胸后、缝针后、结扎后和关胸后四个点记录心电图变化;合格动物2周及6周后均复查心电图。以上手术均在严格无菌条件下进行。术后肌肉注射青霉素钠20万单位/d,连续5天抗感染。

大鼠心肌梗死模型图解

大鼠心肌梗死模型制作图解 庄瑜制作

南京市第一医院南京医科大学附属南京第一医院南京市心血管病医院心胸外科 / - 1 -制作前准备 1.器械:动物呼吸机,开胸制作心梗模型,维持呼吸至关重要。虽然据说某些牛人可以不用呼吸机,但是我想这是经验积累的结果,开始时必然要用;况且需要看此说明的人应该没有牛到这个程度。当然,如果你经费异常充足,不在乎死亡成千上万的大鼠也可以。 显微器械,最主要的是针持,大鼠胸腔、心脏均很小,常规器械无法进入胸腔缝扎。其他手术器械以眼科器械为主。 2.动物:应选择成年健康大鼠,耐受性较好。最重要的是要充分利用每一只动物,包括死亡的大鼠。许多人都知道制作大鼠模型需要多练习,但是练习不是买一大批大鼠,不停地缝扎,然后不停地扔掉死的大鼠;当然,制作心梗模型死亡一些大鼠是很正常的事情。练习的前提是对大鼠解剖及操作过程的熟悉,如果可能的话,最好先找一份大鼠的解剖图谱,熟悉手术区域的解剖结构;同时研究实验流程,熟悉每一个实验步骤。大鼠死亡后,不要急着扔掉,利用它练习每一个你不熟悉的操作步骤,直到熟练为止。 3.实验者:实验者必须具有一种平和的、耐得住寂寞的心态,制作模型需要时间,尤其是早期,需要耐心、仔细的摸索;必须对每一个步骤进行认真地研究。最熟练的制作者做一只大鼠模型也需要30到40分钟的时间,加上准备及扫尾的时间,制作十只模型就需要一天的时间,如果你废寝忘食多用用功也可能做到15只左右,这样一天下来腰酸背痛是必然的,你能坚持多久?不熟练的话,一只就要两、三个小时;同时还要看着大鼠在你的手中死亡,这是很揪心的事情。因此,实验者必须具备良好的心态,急于求成、难耐寂寞者不适合做此实验。 本人系气管切开插管,缝扎LAD制作模型。亦有人经口插管,液氮冷冻制作模型;不在本人讨论范围之内,哪位有经验的话可以传上来,一起讨论。最后祝各位早日成功!! - 2 -导师简介 陈 鑫 主任医师、教授,1963年2月出生于江苏靖江,1985年毕业于南京铁道医学院,同年进入南京市第一医院工作,1993年2月获南京医科大学硕士研究生学位,1993.3 - 1994.2至 Ocala Heart Institute, Ocala, FL, USA.学习,回国后从事心胸血管外科的临床、科研及教学工作,1999年成为南京医科大学硕士研究生导师,培养多名专业人才。 1994年初率先成功独立地开展了冠状动脉旁路移植,结束了南京地区不能独立开展冠心外科的历史。1997年率先在我国开展并报道了急性心梗心源性休克和急性心肌缺血病人的急诊冠状动脉搭桥和应用主动脉球囊反搏抢救危重冠心病人。1998年以来开展了多项新技术:常规动脉类旁路材料-乳内动脉用于冠状动脉搭桥,提高远期疗效;同期冠状动脉搭桥+心脏瓣膜置换/成型,冠状动脉搭桥+室壁瘤手术,常规“快通道”技术用于心脏手术病人等。1999年开展了激光心肌打孔联合冠状动脉搭桥治疗终末期冠心病的临床和基础研究,并开展了内镜辅助大隐静脉制备在冠状动脉搭桥中的应用,进一步减少手术创伤。2000开展了非体外心脏不停跳冠脉搭桥,2000年10月通过电视台进行心脏不停跳搭桥的现场直播,提高了公众的健康知识水平,并在全国多家省市医院推广应用。2001年8月,完全依靠自身力量成功为一名51岁伴严重糖尿病的终末期扩张性心肌病人施行了同种异体原位心脏移植 (手术前15天,病人心跳骤停,成功心、脑复苏),填补多项国内空白。2002年大胆开展了深低温停循环升主动脉置换、主动脉弓置换等高难度技术治疗主动脉瘤和急性主动脉夹层,效果满意。2003年在省内率先成功开展了再次冠状动脉旁路移植术治疗冠心病填补省内空白。2004年常规深低温停循环升主动脉置换、主动脉弓置换等高难度技术治疗主动脉瘤和急性主动脉夹层。2005年已经完成心肺联合移植的动物实验研究。目前已经完成各类心脏搭桥1500余例,总手术成功率在98%以上。完成各类非体外循环心脏搭桥600余例,手术死亡率在1.5%以下,达到国际领先水平。完全依靠自身力量成功完成同种异体原位心脏移植14例,手术后最长病人已经良好生存近5年。 - 3 -1998和1999年分别举办了两届江苏省继续教育项目。2001和2002年分别举办了两次全国《冠心病外科治疗实践与进展研讨会》,推动和促进了我国冠心外科的发展与推广。2003年举办了《江苏省国际心血管外科学术会议》。2004年举办《全国非体外循环冠状动脉搭桥实践与进展会议》。2004年举办《江苏省心脏移植进展与实践会议与学习班》。2005年举办国家级继续教育学习班,《国际微创冠状动脉搭桥研讨会》。参与编辑医学著作5部,在国内外著名杂志上发表专业论文百余篇,其中SCI收录两篇,推动和促进了我国冠心外科和心脏移植工作的发展。 目前任江苏省医学会常务理事;江苏省胸心血管外科学会副主任委员;南京市胸心血管外科学会副主任委员;《中国体外循环杂志》、《江苏医药杂志》、《实用老年医学杂志》、《南京医科大学学报》、《国外医学-心血管分册》等杂志编委。 先后主持多项省市重大课题包括省卫生厅重点课题、省和市科委课题、省333工程专项基金课题、省135重点学科课题等。 已经获得江苏省科技进步三等奖3项,江苏省卫生厅科技进步奖7项,南京市科技进步一等、二等和三等奖共4项。南京市政府科技进步特别奖(课题组获奖金20万),江苏省卫生厅新技术引进一等奖一项,二等奖两项,南京市科技进步三等奖三项。南京市政府应用形新技术特别奖一项。 主要的奖励和荣誉:国务院政府特殊津贴、全国百名优秀医生、全国人大代表、南京市中青年行业技术学科带头人、江苏省有突出贡献的中青年专家、南京市十大科技功臣、南京市十大青年科技之星、江苏省卫生系统先进工作者(享受市级劳动模范待遇)、江苏省333科技工程学科带头人 ( 第二层次)、南京市213工程杰出中青年医学专家、江苏省135重点学科带头人、南京优秀留学回国人员先进个人等。 电子秤称量大鼠体重

心肌缺血模型制备的实验方案

心肌缺血模型制备的实验方案

心肌缺血是指心肌组织血液供应不足,通常由于冠状动脉狭窄或阻塞引起。为了模拟心肌缺血的病理生理过程,通常采用离体心脏或动物模型进行实验研究。下面是一种常见的实验方案,仅供参考:

材料:

体外或动物模型(例如,离体心脏、大鼠或小鼠)

模拟心肌缺血的缺氧/低氧环境

组织染色剂(如TTC染色剂)

生理盐水或PBS缓冲液

透明贴膜

步骤:

制备缺氧/低氧环境。可采用以下方法之一:

体外模型:将心脏取出后置于含有缺氧/低氧气氛的培养皿中。

动物模型:通过冠状动脉结扎、氧气供应中断等方式诱导心肌缺血。

确认心肌缺血程度。使用心肌缺血标志物(如心肌细胞色素C释放)或可视化方法(如TTC染色)确定心肌缺血的程度。

对缺血心肌进行处理。可以使用药物或其他治疗手段(如再灌注)来减轻心肌缺血造成的伤害。

分析结果。通过对处理后的心肌组织进行染色或其他实验方法来评估心肌缺血的程度、处理方法的有效性以及可能的作用机制。

需要注意的是,心肌缺血模型制备的实验方案因具体实验目的和条件而异。在进行实验之前,应根据实验目的、研究问题和实验条件等因素制定合适的实验方案。此外,需要遵守实验室安全操作规程,并严格按照动物伦理审批程序进行动物实验。

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