大鼠急性心肌缺血模型
化浊通瘀法对实验性大鼠急性心肌缺血模型血浆及心肌组织内皮素含量的影响
ｂ ｏ ｌｉＯ ｌ ｔｌ ｏ ｌｌ ｎ ｙ－ ｌ ｄｓｌｓ ｎｅｌ ｌｌ ｔ ｅｌ ｏ ＇ｓ ｌＯ ｌ￣ Ｓ＇ｎａ ｄｍ ｏ ｔ ｄ ｔ ｔ ｌ ｆ ｌ
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１４ １
２１ ０ ０年 １月第 ３ ２卷 第 １ 期
Ｈ ｂｉ Ｃ Ｊｎ ａｙ ００ Ｖ ｌ ２ Ｎ ． ｅｅ Ｊ Ｍ．ａｕｒ ２ １ ． ｏ ３ ． ｏ １ Ｔ
化 浊 通 瘀 法 对 实验 性 大 鼠急性 心 肌 缺血 模 型 血浆 及 心 肌组 织 内皮 素含 量 的影 响 ※
心肌组 织 Ｅ Ｔ的改变。结果
模型组血浆、 心肌组 织 Ｅ Ｔ含量与正常组 比较差异有统计 学意义 （ ＜ ． １ ； Ｐ ０ Ｏ ） 复
方丹参滴丸对照组、 化浊通瘀 中药高剂量组、 浊通瘀 中药低 剂量组血浆及 心肌 组织 Ｅ 化 Ｔ含 量与模型组 比较 差异有统计学意义（ ＜ ．５ ； 浊通瘀 中药高剂量组及化 浊通瘀 中药低 剂量组血浆及心肌 组织 Ｅ Ｐ ００ ）化 Ｔ含 量与 复方丹参滴丸对照组 比较差异无统计学意义（ ＞ ．５ 。讨论 Ｐ ００ ） 化 浊通瘀法可降低大鼠急性心肌缺血模 型
唐 晓亮 胡 静 卢 贤荣 王培 林 台 凡 李双成 （ 北省石 家庄市 中 医院 ， 河 河北 石家庄
【 摘
００ ５ ） ５０ １
要】 目的 观察化 浊通瘀 中药对 实验性 大鼠急性 心肌 缺血模型血 浆及心肌 组织 内皮素 Fra bibliotek Ｔ 含 Ｅ）
鬼箭羽抗心肌缺血作用的实验研究
鬼箭羽抗心肌缺血作用的实验研究赵成国;秦书芝;张瑶;夏婷;肖洪彬【摘要】目的：探讨鬼箭羽抗大鼠急性心肌缺血损伤的作用机制。
方法：将健康Wistar大鼠经ECG筛选后随机分为鬼箭羽高、中、低剂量组，模型组，假手术组，阳性对照组，每组10只。
采用冠状动脉结扎法建立大鼠急性心肌缺血模型，检测血清中肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、一氧化氮(NO)等指标。
结果：鬼箭羽高、中剂量组能降低模型大鼠血清CK、CK-MB、AST、LDH和MDA水平，提高模型大鼠血清SOD、NO含量，与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。
结论：鬼箭羽对急性心肌缺血大鼠的心肌细胞具有一定的保护作用，有一定防治心肌缺血的作用。
%cute myocardial ischemia (AMI) in rats. Methods:After performed ECG screening, the healthy Wistar rats were ran-domly divided into the high, middle and low dose groups of GuiJianYu, the model group, the sham group as well as the positive control group with 10 cases in each. The AMI models were established by coronary artery ligation and the levels of serum creatine kinase (CK), creatine kinase MBmass (CK-MB), aspartate aminotransferase (AST), lac-tate dehydrogenase (LDH), serum malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD) and nitric oxide (NO) were detected in different groups. Results:The levels of rats serum CK, CK-MB, AST, LDH and MDA markedly de-creased in the high and middle dose groups of GuiJianYu and the serum SOD and NO significantly increased, and the differences in comparing these groups with the model group had statistical meaning (P<0.05). Conclusion:Gui-JianYu has certain protectivefunction for the the myocardial cells of the AMI rats and can prevent AMI occurrence in a certain degree.【期刊名称】《西部中医药》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】3页(P19-21)【关键词】急性心肌缺血;冠状动脉结扎;鬼箭羽;心肌酶【作者】赵成国;秦书芝;张瑶;夏婷;肖洪彬【作者单位】吉林大学珠海学院，广东珠海 519041;吉林大学珠海学院，广东珠海 519041; 黑龙江中医药大学;吉林大学珠海学院，广东珠海 519041;吉林大学珠海学院，广东珠海 519041;黑龙江中医药大学【正文语种】中文【中图分类】R285.5鬼箭羽为卫矛科植物(Euonymusalatus B u c h.)，又名卫矛。
碧血胶囊对大鼠急性心肌梗死模型心功能和血流动力学的影响
碧血胶囊对大鼠急性心肌梗死模型心功能和血流动力学的影响*李娟莉1，2，苏式兵1＊＊（1上海中医药大学复杂系统研究中心，上海201203；2上海中医药大学生理教研室，上海201203）摘要目的：观察碧血胶囊对大鼠急性心肌梗塞（AMI）后血流动力学变化及心功能的影响，探讨其预防AMI的机制。
方法：结扎大鼠冠状动脉左前降支造成AMI模型，成年雄性SD大鼠50只随机分为6组：假手术组、急性心肌梗塞模型（AMI）组、通心络胶囊组、碧血胶囊高、低剂量组、地尔硫卓组。
观察药物对各组大鼠心率（HR）、左心室收缩峰压均值（LVSP）、左心室舒张压均值（LVDP）、左心室收缩压最大上升速率（+dp/dtmax）、左心室舒张压最大下降速率（-dp/dtmax）、左心室开始收缩至达到室内压最大上升速率时间（t-dp/dtmax）、心律失常、血清游离脂肪酸（FFA）和天冬氨酸氨基转移酶（AST）的影响。
结果：大鼠AMI后，HR、mlVSP、ʃdp/dtmax明显降低，LVDP，AST明显升高（P＜0．05），并且随着缺血时间的延长，各指标呈逐渐恢复的趋势。
与AMI组相比，碧血胶囊高（968mg/kg，结扎后120分钟）、低剂量组（484mg/kg，结扎时）可显著提高LVSP，碧血胶囊高（结扎时及结扎后120分钟时）、低剂量组（结扎后30分钟）可显著提高+dp/dtmax，碧血胶囊高（结扎时及结扎后30、120分钟时）可显著提高-dp/dtmax（P＜0．05），同时碧血胶囊高、低剂量组均能降低血清AST及心律失常的发生次数（P＜0．05）。
结论：碧血胶囊能显著改善左室收缩和舒张功能，减轻大鼠心肌缺血后心功能的下降和降低血清AST含量，对AMI后血流动力学改变有明显的改善作用，这可能是其保护心肌梗死的机制之一。
关键词碧血胶囊；心肌梗塞；心功能；血流动力学急性心肌缺血可以造成心肌收缩和舒张功能的降低和血流动力学改变［1，2］，观测心脏血流动力学指标是研究药物对心功能影响的较为常用的一种手段。
股静脉置管注射垂体后叶素制作大鼠心肌缺血模型
股静脉置管注射垂体后叶素制作大鼠心肌缺血模型黄汉超;吴永刚【摘要】目的:探讨垂体后叶素(Pit)制作大鼠心肌缺血模型的的最佳方法.方法:通过比较肌肉注射、股静脉、腹腔注射Pit方法,股静脉置管注入不同剂量Pit,结合心电监测及心肌肌钙蛋白等生化指标和病理切片,评估不同给药方法和股静脉置管注入不同剂量Pit的造模效果.结果:股静脉滴注Pit造成心肌缺血时间＞60min,与其它给药方式比较,P＜0.01;动物模型的心肌缺血效应及不良反应事件与Pit用量呈正相关.结论:股静脉置管滴注Pit制作大鼠心肌缺血模型的方法可靠.【期刊名称】《贵阳医学院学报》【年(卷),期】2010(035)006【总页数】3页(P584-586)【关键词】垂体激素类,后叶;心肌缺血;模型,动物;大鼠【作者】黄汉超;吴永刚【作者单位】广东省第二中医院,急诊科,广东,广州,510095;广东省第二中医院,急诊科,广东,广州,510095【正文语种】中文【中图分类】R542.2垂体后叶素(Pit)是制作大鼠心肌缺血模型中较为理想的造模药物[1,2],常采用腹腔注射或尾静脉、舌下静脉注射等方式给药[3,5]。
腹腔注射由于首过效应以及个体吸收差异等问题,模型稳定性不确定,并且由于造模过程中肠腔缺血,不利于观察灌胃药物的干预效应。
静脉注射有尾静脉及舌下静脉注射两种,前者由于大鼠尾巴皮肤厚,尾静脉难以暴露清楚,一次注射成功率不高;后者虽操作成功率较高,但多为瞬时给药,心肌缺血效应多为一过性,难以造成稳定的大鼠心肌缺血模型。
相对于舌下静脉和尾静脉,股静脉位置固定、变异小、管径较粗,可做置管操作,有利于进行持续的静脉注射观察,并可同时进行药物灌胃观察,本实验采用该法进行造模研究。
1 材料与方法1.1 材料 SD大鼠由广东省医学实验动物中心提供[合格证号SCXK(粤)2003-0002],均为SPF级,雌雄各半,共计52只。
垂体后叶素注射液来自上海第一生化药业有限公司(批号20090501),规格为6 U/2 m l,麻醉用药为乌拉坦,配制浓度25%。
冠脉通对大鼠急性心肌缺血的保护作用观察
GM T 高 (P < 0. 01 )、 中 (P < 0. 05)、 低 (P < 0. 05) 剂 量组 SOD
号: 10622004, 6U �支)、 盐酸 异丙肾上腺 素 (上 海禾丰制 药有限 公司, 批号: 6E20008) 、 肝素钠注射液 (天津药业焦作 有限公司, 规格: 2m l: 12500U , 批号: 06022521 )、 SOD 试 剂盒、 M DA 试 剂 盒 (南京建成生物工程研究所第一分所)。
量组; 每组 10 只 , 除空白对照组外, 上述 五组 动物 连续 给药 14d 后, 于末次给药 40m in 后 10% 水合氯 醛 (0. 3m l�100g ) 麻醉, 仰 卧固定, 连接生理多导仪, 记录标准� 导联心电图 。待心电图平 稳后, 记录时间 约 2m in 后, 舌下 静脉注 射垂体 后叶素 (0. 05Λ� 100g ) , 于 5 ～ 10s 内注射完。 立即描记 此点即记录 注射完毕时 的时间, 以供以后 心电图 各指标 的测定; 心电 图描记 10m in 后
冠脉通是由西南交通大学药 学院研制的中药复方制 剂, 由 丹参、 黄芪等五味中药组成。 本文采用垂体后叶素 ( P it ) 和 异丙
血府逐瘀汤诱导内皮祖细胞对心肌缺血模型大鼠缺血区血管新生的影响
血府逐瘀汤诱导内皮祖细胞对心肌缺血模型大鼠缺血区血管新生的影响李蕾，何莉，苏畅，梁昊，张秋雁，杨漾，谢辉，谭精培湖南中医药大学，湖南长沙 410208摘要：目的 观察血府逐瘀汤诱导内皮祖细胞（EPCs）对心肌缺血模型大鼠缺血区血管新生的影响，探讨其作用机制。
方法 采用结扎冠状动脉左前降支方法制备急性心肌缺血模型。
实验大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、他汀组和血府逐瘀汤低、中、高剂量组。
造模后将荧光标记的EPCs尾静脉注射植入模型大鼠体内，成模后灌胃给药，给药第3日和第7日分别采血，取材缺血坏死部位肉芽组织和肌肉组织，行冰冻切片分析荧光表达，HE染色观察样本坏死病变情况，免疫组化检测心肌组织CD106、CD146的表达，计数新生血管数量，硝酸还原酶法检测血清和心肌缺血区一氧化氮（NO）表达。
结果 与模型组比较，血府逐瘀汤各剂量组均能促进EPCs迁移至大鼠心肌缺血区，提高CD106、CD146的表达，促进心肌缺血区血管新生，明显升高血清和心肌组织NO含量，差异均有统计学意义（P＜0.01），血府逐瘀汤高剂量组效果最佳。
结论 血府逐瘀汤可诱导EPCs促进心肌缺血区血管新生，其作用机制与促进内皮细胞CD106、CD146表达及升高血清和心肌组织NO水平有关。
关键词：血府逐瘀汤；内皮祖细胞；血管新生；一氧化氮；大鼠中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2021)02-0069-07DOI：10.19879/ki.1005-5304.202006290 开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Effects of Endothelial Progenitor Cells Induced by Xuefu Zhuyu Decoction on Angiogenesis of Ischemic Region in Rats with Myocardial IschemiaLI Lei, HE Li, SU Chang, LIANG Hao, ZHANG Qiuyan, YANG Yang, XIE Hui, TAN JingpeiHunan University of Chinese Medicine, Changsha 410208, ChinaAbstract:Objective To observe the effects of endothelial progenitor cells (EPCs) induced by Xuefu Zhuyu Decoction on angiogenesis in ischemic region of rats with myocardial ischemia; To explore its mechanism. Methods Acute myocardial ischemia model was prepared by ligating the left anterior descending coronary artery. Experimental rats were randomly divided into normal group, sham-operation group, model group, atorvastatin group, Xuefu Zhuyu Decoction low-, medium-, and high-dosage groups. After successful modeling, fluorescently labeled EPCs were injected into the model mice by tail vein injection. After modeling, the rats received gavage. On the 3rd and 7th day after administration, blood was collected and the granulation tissue and muscle tissue of the ischemic necrosis were taken. The fluorescence expression was analyzed by frozen section. HE staining was used to observe the necrotic lesions of each group and count the number of local blood vessels. Immunohistochemistry was used to detect the expressions of CD106 and CD146 in neovascularization. NO expression levels in serum and myocardial ischemic areas were determined by nitrate reductase assay. Results Compared with model group, Xuefu Zhuyu Decoction groups could promote the migration of EPCs to myocardial ischemia area in rats, increase the expressions of CD106 and CD146, promote angiogenesis in myocardial ischemic area, and significantly increase the NO content in serum and ischemic tissue, with statistical significance (P<0.01), and the high-dosage group achieved the best efficacy. Conclusion Xuefu Zhuyu Decoction can induce EPCs to promote angiogenesis in myocardial ischemic area. The mechanism of action is related to the promotion of endothelial cell CD106 and CD146, as well as the expression of基金项目：国家自然科学基金（81574039、81503627）通讯作者：张秋雁，E-mail：*****************NO in serum and myocardial tissue.Keywords:Xuefu Zhuyu Decoction; endothelial progenitor cells; angiogenesis; NO; rats缺血性心脏病（ischemic heart disease，IHD）是由于冠状动脉循环改变引起的冠状动脉血流供应与心肌需求之间不能平衡所导致的心肌损害。
冠脉结扎法制作大鼠心肌缺血模型
冠脉结扎法制作大鼠心肌缺血模型1.1实验材料1.1.1实验动物清洁级Wistar近交系大鼠100只(购自中国科学院上海实验动物中心)，均为雄性，体重245～320g(平均278.2±22.2g)，饲养环境为清洁级。
1.1.2试剂3%戊巴比妥钠，1%肝素钠，Evans蓝和N-BT磷酸缓冲液(Sigma公司)。
1.1.3实验仪器心电图机，动物呼吸机(浙江医科大学医疗仪器设备厂，DH150型动物呼吸机)，Buxco系统(Buxco公司)。
1.2模型制作1.2.1动物分组根据研究目的，实验动物共分六组；其中五个组需手术制作模型，合称手术组，另一个组为假手术组。
为满足每组12只的要求，先后有100只动物随机进入手术组(85只)与假手术组(15只)。
1.2.2制作方法1.2.2.1手术组用3%戊巴比妥钠(30mg/kg)行腹腔注射麻醉，麻醉满意后置于手术台，四肢及头部仰卧固定于手术台上，四肢皮下连接心电图电极，记录标准Ⅱ导联心电图，颈部皮肤备皮消毒，胸骨上窝上正中切开皮肤0.5cm，向上钝性分离推开下颌下腺，剪除气管前肌肉，使气管在没有任何拉钩牵引的情况下能充分显露，彻底止血后于第2～3气管环间行气管横行切开，注意不要切断气管软骨环，切口长度不超过气管周径的1/3，擦干其内分泌物后插入气管插管(用小儿吸痰管自制)，深度为0.5～1cm。
连接空气呼吸机进行人工控制呼吸，呼吸频率90次/分，潮气量10～12ml，吸呼比设为1﹕1。
左前胸去毛，消毒铺巾，顺肋间隙方向于胸骨左旁第3～4肋间切开皮肤，长约1cm，逐层分离皮下组织、肌肉，于2～3肋骨间撑开进胸，向右上方推开胸腺，可暴露心脏及大血管根部，切开心包，轻挤大鼠胸廓，将心脏挤出，有部分动物在左心耳下缘与肺动脉圆锥间可以看见左冠脉前降支起始部，用6-0Prolene线缝针，进针深度控制在0.1cm，宽度为0.1～0.2cm(图1)；回纳心脏入胸廓，待动物的数十次心动周期后，收线打结；观察数分钟后，彻底止血后逐层关胸。
实验性大鼠急性心肌缺血超微结构变化的观察
实验性大鼠急性心肌缺血超微结构变化的观察摘要】通过电镜观察大鼠急性心肌缺血时超微结构的变化，得出结论：急性心肌缺血性可以导致心肌细胞超微结构的损伤和凋亡的发生。
【关键词】急性心肌缺血大鼠超微结构本实验试图通过观察心肌细胞急性缺血时超微结构的变化，为在急性心肌缺血时，心肌细胞凋亡的发生以及凋亡发生的时间性提供一定的形态学依据。
1 材料和方法1.1材料健康成年的Wistar大鼠72只，由山西医科大学动物中心提供。
JEM100-CX型透射电镜观察。
1.2 方法1.2.1动物分组和动物模型制备大鼠随机分为6组：0.5h组、1h组、2h组、3h组、4h组和6h组，每组12只。
0h组为对照组，即每组中取2只，共12只构成对照组：打开胸腔，丝线穿过左冠状动脉前降支下心肌，但不结扎。
其他6组为实验组，实验组大鼠结扎左冠状动脉前降支制备急性心肌缺血模型。
分别于0.5h、1h、2h、3h、4h和6h，剪开胸壁，摘取心脏，切取左冠状动脉前降支供血区心肌，进行以下研究。
1.2.2 电镜标本的制作及观察处死大鼠后立刻取左前降支冠状动脉供血区心肌1×1×1mm3,用20%的戊二醛和1%的锇酸双固定，系列丙酮脱水，618环氧树脂包埋，LKB-Ⅳ型超薄切片机切片，醋酸铀和枸橼酸铅双染色后用JEM100-CX型透射电镜观察。
2 结果对照组的心肌超微结构正常：粗面内质网和线粒体结构清晰，基质中电子密度中等，胞浆内有丰富的糖原，A带和I带清晰，肌节等距。
实验组：缺血0.5h 组：A带和I带较清晰，肌节轻微紊乱，线粒体和粗面内质网肿胀，线粒体中出现一些小的电子致密物质，糖原减少，胞浆电子密度降低。
缺血1h组：A带和I带模糊，肌节严重紊乱，线粒体嵴断裂，空泡变性，粗面内质网肿胀，空泡变性，其上的核糖体脱落，糖原几乎不能见到。
缺血2h组：A带和I带已不能辨认，肌节严重破坏，线粒体空泡变性加重，甚至形成髓鞘样结构，即：细胞内或细胞外出现的一些螺旋状或同心圆状卷曲的结构，糖原不能见到，细胞核中的染色质凝聚于皱缩的核膜下。
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TECHNIC!!!
1、麻醉(腹腔注射 、麻醉 腹腔注射 腹腔注射)
• 下腹部腹中线稍向左或右1mm的位置 • 以45度角刺入腹肌，可觉抵抗力消失 • 麻药前1/3快注，后2/3缓慢注射并且观察 麻药前1/3快注， 2/3缓慢注射并且观察 1/3快注 • 动物头部放低，尾部提高 • 麻醉后心率为350-420/min
EVALUATION?
• 心脏： 结扎部位以下心肌紫绀 • ECG： II导心电图显示S-T段升高
PROCEDURE!
• • • • • • • • • 动物选择： 大鼠， 动物选择 SD大鼠，250～300g 大鼠 ～ 麻醉：乌拉坦，腹腔注射， 麻醉：乌拉坦，腹腔注射，7ml/kg 固定（把舌头往侧边拉出） 固定（把舌头往侧边拉出） 记录心电图（麻醉后心率控制在350 420/min） 350记录心电图（麻醉后心率控制在350-420/min） 气管插管 上呼吸机 通气量： 视不同型号呼吸机有所调整） 通气量：40ml （视不同型号呼吸机有所调整） 频率： 频率：70 呼吸比 1:1
TECHNIC!!!
2、心电图 、
（cont.）
• 进针部位：右手:白；左腿:红；右腿:黑 • 进针手法：用左手提起肢体皮肤，右手皮下 进针手法： 进针（切勿插入肌肉，避免肌电干扰） （切勿插入肌肉，避免肌电干扰） • 记录Ⅱ导联 Ⅱ导联心电图 • 调整参数，最佳显示
TECHNIC!!!
（cont.）
• 3、气管插管： • 喉结到胸骨切口，正中线部位开始钝 喉结到胸骨切口， 性分离肌肉； 性分离肌肉； • 打结技术！ 打结技术！ • 4、上呼吸机： • 确认管道通畅、检查潮气量、监控心 确认管道通畅、检查潮气量、 电图
TECHNIC!!!
• 5、冠脉结扎
（cont.）
• 注意：冠状动脉在静脉下面，所 冠状动脉在静脉下面，
PROCEDURE!（cont.）
开胸： 开胸： • 剪毛 • 平腋下水平，胸骨左侧旁切口（T型切口） 平腋下水平，胸骨左侧旁切口（ 型切口 型切口） • 钝性横向分离肌肉 • 在第三、四肋间分开（大小弯之间） 在第三、四肋间分开（大小弯之间） • 把心脏往上拨，于左心耳旁可见左冠状动 把心脏往上拨， 脉左前降支（白线，位于静脉下） 脉左前降支（白线，位于静脉下） • 5个零缝合针线结扎 个零缝合针线结扎 个零缝合针线 • 钳闭胸壁，观察心电图 钳闭胸壁，
大鼠急性心肌缺血 模型
• 主讲人：
ＷＨＹ？
• 心血管疾病！！！ • 心肌缺血病因！！！ • 研究方法：动物模型建立 • 大鼠：易于操作，容易存活
ＷＨＡＴ？
• 结扎大鼠的左冠状动脉前降支均可引起急性心肌梗死。 结扎大鼠的左冠状动脉前降支均可引起急性心肌梗死。
ＨＯＷ？பைடு நூலகம்
梁天文,陈健文等. 梁天文,陈健文等. 通心活脉灵对大鼠实验性心肌缺血的保护作用
以结扎时要扎深一点，但不能扎 以结扎时要扎深一点， 进心房！ 进心房！
• PS：技术难度高，示范时再详细讲解，大家一起 努力吧……