ABTS_法测定葡萄酒抗氧化活性的研究
葡萄酒中的抗氧化物质及测定方法
葡萄酒中抗氧化物质及检测方法姓名：冯朝朝指导老师：阎贺静河北科技师范学院食品科技学院酿酒工程专业摘要：目的: 建立高效液相色谱.二苯基三硝基苯肼在线法评价葡萄酒清除自由基的活性，研究其抗氧化活性物质基础方法: 葡萄酒样品经分离，在柱后与工作液在三通处混合，于管中充分反应后，流经检测器记录反应信号，以水溶性维生素类似物为标准计算活性成分的抗氧化当量，比较不同地区葡萄酒总抗氧化能力及活性成分差异；结果: 通过定性分析得出葡萄酒样品中没食子酸、原儿茶酸、原花青素、咖啡酸和没食子酸乙酯对自由基具有清除活性自由基的作用，但原花青素二聚体香草酸、丁香酸和对香豆酸没有清除活性自由基的作用，不同地区葡萄酒总抗氧化能力不同，所含抗氧化活性成分也有较大差异，其中原花青素二聚体与没食子酸活性最强，目的: 建立高效液相色谱.二苯基三硝基苯肼在线法评价葡萄酒清除自由基的活性，研究其抗氧化活性物质基础方法: 葡萄酒样品经分离，在柱后与工作液在三通处混合，于管中充分反应后，流经检测器记录反应信号，以水溶性维生素类似物为标准计算活性成分的抗氧化当量，比较不同地区葡萄酒总抗氧化能力及活性成分差异；结果: 通过定性分析得出葡萄酒样品中没食子酸、原儿茶酸、原花青素、咖啡酸和没食子酸乙酯对自由基具有清除活性自由基的作用，但原花青素二聚体香草酸、丁香酸和对香豆酸没有清除活性自由基的作用，不同地区葡萄酒总抗氧化能力不同，所含抗其次是儿茶素和未知物，活性较弱的是咖啡酸#原儿茶酸和没食子酸乙酯；结论: 葡萄酒中含有多种抗氧化活性物质; 该法能够实现对天然产物抗氧化活性的分析，具有在线无损高通量筛选快速分析的特点。
关键词：葡萄酒；抗氧化活性；测定方法人们的生活水平一直在不断提高，葡萄酒也渐渐地在中国得到普及和流行，它已经发展成为新时代大众所喜爱的时尚饮品。
适量的消费葡萄酒可以降低心血管疾病、动脉粥样硬化、血小板聚集和癌症等多种疾病的发病率。
葡萄酒的各种保健功效被认为与这些物质的抗氧化能力有关。
抗氧化物活性测定方法总结
抗氧化物活性测定方法总结抗氧化物活性测定方法是通过对样品中的抗氧化物质含量和抗氧化活性进行定量分析，评估其对自由基的清除能力和抗氧化能力。
随着抗氧化研究的不断深入，测定方法也逐渐完善。
以下是对常见的抗氧化物活性测定方法的总结。
1. ORAC法（氧化应激反应活性测定法）：该方法通过测定样品清除自由基的能力来评估其抗氧化活性。
实验中，将样品与荧光试剂（如2,2'-azobis(2,4-dimethylvaleronitrile)）共同作用，观察其清除自由基的能力，并通过建立标准曲线计算样品的ORAC值。
2.DPPH法（1,1-二苯基-2-苦味基-苦味酸磷）：该方法是一种常用的快速测定抗氧化活性的方法。
实验中，将样品与DPPH稳定自由基共同作用，通过比色反应观察DPPH自由基被样品清除的程度，从而评估抗氧化活性。
3.ABTS法（2,2'-联氮双5-苯砜酸）：该方法通过ABTS离子自由基的生成和清除反应来测定样品的抗氧化活性。
实验中，ABTS与过氧化氢反应生成ABTS离子自由基，通过观察样品对其的清除能力来评估抗氧化活性。
4.FRAP法（亚铁离子还原能力）：该方法基于样品对人造抗坏血酸（Fe3+）的还原能力，通过测量还原后的Fe2+离子的生成量来评估抗氧化活性。
实验中，将样品与Fe3+离子反应生成Fe2+离子，通过比色反应来测定Fe2+的含量。
5. 碘标法（Iodine value）：该方法用于测定油脂、脂肪等样品的抗氧化活性。
实验中，将已知量的碘与样品中的不饱和化合物反应，在光反应下观察反应终点的颜色变化，并根据标准曲线计算样品的抗氧化活性。
6. 硝酸盐法（Nitrite method）：该方法用于测定样品中亚硝酸盐的含量，从而评估其抗氧化活性。
实验中，样品经过还原反应生成亚硝酸盐，然后与DANO（N-乙基-N-（2-苯基乙基）-对硝基苯胺）反应生成稳定的偶氮染料，通过比色测定反应终点的吸光度来计算样品中亚硝酸盐的含量。
抗氧化物活性测定方法总结
抗氧化物活性测定方法总结引言：抗氧化物活性测定在食品、医药、化妆品以及生命科学等领域具有重要应用。
目前，常用的抗氧化物活性测定方法主要包括化学法、生物法和物理法。
本文将对这几种方法进行总结。
一、化学法1.1.DPPH自由基法该方法是目前应用最广泛的抗氧化活性测定方法之一、通过DPPH自由基与抗氧化物发生反应，使DPPH自由基得以还原为无色溶液，测定溶液的吸光度来评估抗氧化活性。
1.2.ABTS自由基法该方法通过生成具有特定吸光度的ABTS自由基，评估抗氧化物对自由基的清除能力。
与DPPH自由基法相比，ABTS自由基法具有更高的灵敏度和稳定性。
1.3.羟自由基清除法该方法利用特定的化学反应，测定样品对羟自由基的清除能力，评估其抗氧化活性。
该方法适用于抗氧化物活性测定和体外抗氧化活性评价。
1.4.过氧化物清除法该方法测定样品对过氧化物的清除能力，通过测定生成的不稳定的自由基产物的分解速率，评估抗氧化活性。
该方法适用于测定生物样品的抗氧化活性。
二、生物法2.1.脂质过氧化抑制能力测定法该方法通过测定样品对脂质过氧化的抑制能力，评估其抗氧化活性。
常用的指标包括丙二醛生成量、硫代巴比妥酸反应物（TBA）生成量等。
2.2.DNA损伤保护能力测定法该方法通过测定样品对DNA损伤的保护能力，评估其抗氧化活性。
常用的指标包括DNA链断裂率、碱基损伤率等。
2.3.超氧化物歧化酶（SOD）活性测定法该方法测定样品中SOD的活性，评估其清除超氧自由基的能力。
常用的指标包括抑制率、相对酶活等。
2.4.过氧化氢酶（CAT）活性测定法该方法测定样品中CAT的活性，评估其清除过氧化氢的能力。
常用的指标包括催化剂浓度、酶单位等。
三、物理法3.1.相对电子自旋共振法该方法通过测定样品中的自由基产物的电子自旋共振信号的强度，评估抗氧化物的活性。
常用的指标包括g值、线宽等。
3.2.高温氧化法该方法利用样品在高温条件下的氧化反应，评估其抗氧化活性。
3种抗氧化活性测定方法
3种抗氧化活性测定方法抗氧化活性测定方法是评估化合物或材料抗氧化性能的一种重要手段。
随着抗氧化活性的研究日益深入，目前已经发展出很多种测定方法。
以下将介绍三种常用的抗氧化活性测定方法：DPPH自由基清除法、Fe2+/Fe3+还原能力法和ABTS自由基清除法。
1.DPPH自由基清除法：DPPH（2,2-二苯基-1-苦味肼）是一种紫色的自由基，常用于评估化合物或材料的抗氧化活性。
该方法基于DPPH自由基与抗氧化物质发生反应后，颜色由紫色变为淡黄色或无色。
测定方法简单，操作方便。
其原理是待测样品与DPPH混合后，通过电子或氢的转移反应，DPPH自由基将被清除，溶液颜色由紫色转变为淡黄色。
根据吸光度变化可以计算出自由基清除率，进而评估抗氧化活性。
2.Fe2+/Fe3+还原能力法：该方法基于还原能力测定抗氧化物质对Fe3+离子的还原能力。
常用的试剂是FeCl3溶液和TPTZ（2,4,6-三聚吡啶甲酸）、酸性pH缓冲液。
其原理是待测样品能够还原Fe3+离子为Fe2+离子，Fe2+离子与TPTZ反应生成有颜色的络合物，通过分光光度计测定络合物的吸光度变化，进而计算出还原能力。
较高的吸光度变化表示较高的抗氧化活性。
3.ABTS自由基清除法：ABTS（2,2'-联氨基双(3-乙基苯并噻唑啉-6磺酸)）自由基是一种蓝绿色自由基，其浓度在紫外可见光区域有最大吸收。
该方法基于ABTS自由基清除率来评估抗氧化物质的抗氧化活性。
该方法较DPPH法和还原能力法更为灵敏。
其原理是待测样品与ABTS自由基反应后，ABTS自由基将被清除，溶液颜色由蓝绿色变为无色或浅黄色。
通过测定吸光度的变化，可以计算出自由基清除率，进而评估抗氧化活性。
除了上述常用的抗氧化活性测定方法外，还有很多其它方法也被广泛应用于抗氧化活性的评估，如氧化还原测定法、Fenton反应法、还原剂抑制能力法等。
每一种测定方法都有其独特的原理和适用范围，研究人员可以根据具体的研究目的和样品性质选择合适的测定方法。
红酒中多酚化合物的提取及抗氧化性能评估
红酒中多酚化合物的提取及抗氧化性能评估红酒是一种古老而神秘的饮品，它在全球范围内都备受喜爱。
除了其美妙的香味和口感外，红酒中还含有丰富的多酚化合物，这对于我们的健康具有重要意义。
多酚化合物被广泛认为具有抗氧化的作用，可以帮助我们抵抗自由基的损伤，从而保护我们的身体免受疾病的侵害。
那么，如何提取红酒中的多酚化合物呢？首先，我们需要从红酒中分离出多酚化合物。
一种常用的方法是固相萃取法。
通过将红酒样品通过固相萃取柱，多酚化合物会被吸附在柱上，然后通过洗脱剂将其释放出来。
此外，还有一种更常见的方法是液-液萃取法。
通过将红酒样品与有机溶剂混合，多酚化合物会从水相转移到有机相中。
然后，通过蒸发有机溶剂，我们可以得到纯净的多酚化合物。
得到红酒中的多酚化合物后，我们接下来就需对其抗氧化性能进行评估。
抗氧化性能评估是衡量多酚化合物对抗自由基损伤能力的重要方法。
在这个过程中，我们通常会使用一些化学试剂来模拟体内的自由基环境，例如2,2-二苯基-1-苦肼基-苦肼（DPPH）和超氧阴离子自由基。
通过将多酚化合物与这些化学试剂反应，我们可以测量其抗氧化活性。
另外，还有一种常用的评估多酚化合物抗氧化性能的方法是通过细胞模型。
在这种方法中，我们通常会使用细胞培养技术来培养人体细胞。
然后，将多酚化合物加入培养基中，观察其对细胞的保护作用。
比如，我们可以通过测量细胞内的玻璃酸洗出物来评价多酚化合物的抗氧化能力。
除了提取和评估红酒中的多酚化合物，红酒的酿造过程也对其多酚化合物的含量和抗氧化性能有着重要影响。
事实上，红酒中的多酚化合物主要来自于葡萄皮和葡萄籽中的原花色素。
在葡萄酒的酿造过程中，这些原花色素会渗出到酒液中，进而形成多酚化合物。
此外，发酵的过程中也会产生一些酿酒酵母或乳酸菌等微生物，它们能够进一步转化葡萄中的化合物，使其具有更好的抗氧化性能。
总结起来，红酒中的多酚化合物是一种珍贵的天然物质，具有重要的抗氧化性能。
通过适当的提取方法和抗氧化性能评估，我们可以更好地了解红酒中多酚化合物的特性和功效。
3种抗氧化活性测定方法
3种抗氧化活性测定方法抗氧化活性是指物质对氧化过程的抑制作用，能够减缓或阻断自由基对细胞和组织的损害。
目前，常用的抗氧化活性测定方法主要包括DPPH 自由基清除法、ABTS自由基清除法和铁还原能力测定法。
以下将对这三种方法进行详细介绍。
1.DPPH自由基清除法：DPPH（2,2-二苯基-1-若氧基-苯基-π-苦味噁唑）自由基清除法是一种常用的抗氧化活性测定方法。
该方法是通过测定样品对DPPH自由基的清除能力来评估其抗氧化活性。
DPPH自由基是一种紫色稳定的自由基，在接触到氢供体（抗氧化剂）后，会发生颜色变化从紫色转变为黄色。
可以通过测定样品溶液的吸光度来评估其抗氧化能力。
吸光度的降低表明样品对DPPH自由基的清除能力较强。
2.ABTS自由基清除法：ABTS（2,2'-联氨基双（3-乙基苯并噻唑））自由基清除法也是一种常用的抗氧化活性测定方法。
ABTS自由基是一种无色可溶性自由基，其生成主要通过氧化剂与ABTS反应而产生。
测定方法是将ABTS与过氧化氢反应，生成蓝色自由基溶液，然后将样品加入到溶液中，通过测定吸光度的变化来评估样品的抗氧化活性。
吸光度的降低表明样品对ABTS自由基的清除能力较强。
3.铁还原能力测定法：铁还原能力测定法是一种评估抗氧化活性的常用方法，通过测定样品对Fe3+还原为Fe2+的能力来评估其抗氧化能力。
在这个方法中，还原剂（如抗氧化剂）会与Fe3+反应，生成Fe2+，并且Fe2+的浓度可以通过测量其吸光度来确定。
浓度越高，吸光度越高，表明样品的抗氧化能力越强。
这三种抗氧化活性测定方法各有其优势和适用范围。
DPPH自由基清除法适用于评估样品对自由基的清除能力，但其结果受其他化合物的影响较大；ABTS自由基清除法对于水溶性和脂溶性样品均适用，但其结果也受其他化合物的影响；铁还原能力测定法适用于样品中还原型物质的测定，可评估样品对金属离子的还原能力。
因此，在实际应用中，可以根据需要选择适合的方法来评估样品的抗氧化活性。
改良的ABTS_法及其在优化抗氧化活性物质提取中的应用_韩光亮
第5期
韩光亮 , 等 . 改良的 ABTS+ 法及其在优化抗氧化活性物质提取中的应用
621
倍子 酸 ) 、 catechin ( 儿 茶 素 ) 、 naringenin ( 柚 皮 素 ) 、 及 p coumaric acid( 香豆酸 ) 由 Sigma ( Saint Louis, MO) 公 司购 买。 Rutin( 芸香素 ) 由 Aldrich 化学试剂公司购买 , Cyanidin chloride ( 盐 酸 花 青 素 ) 、 kuromanin chloride 由 Extrasynthese ( Genay, France) 公司 购 买。Sodium metabisulphite ( Na2 S2 O5 ) ( 重 亚 硫酸 钠) 则由 BDH ( Toronto, ON ) 公 司 购买。 Blackcurrants ( Ribes nigrum L. cv. Ben Lomond) ( 黑 醋 栗 ) 来 自 加 拿 大 BC 省 Abbotsford 的 M & G Bros 农 场。所有 使用的试剂均为优级纯 , 标准样品为色谱 纯 , 用 乙酸来调 节 pH 值 , Milli Q 水被 用来配 制试剂 , 无水乙醇被用来稀释 ABTS + 和配制标准品。 酶标仪、 5 100 l 和 50 300 l 八通道移液器为分子生物学仪 器 公 司 产 品 ( Spectra max Plus384 型 , Molecular Devices Corporation, Sunnyvale, CA) 。Wiley 粉碎 机 ( ED 5 型 , Arthur H Thomas Co, Philadelphia, PA) 。Beckman 离心机 ( Avanti J25 I 型 , JLA 10 5 转 子 , Beckman Instruments Inc. , Mississauga, ON ) 。 Beckman 分光光度 计 ( Beckman DU 640 型 , Beckman Instruments Inc. , Fullerton, CA ) 。 Whatman N 541 滤 纸 ( Fisher Scientific, Nepean, ON) 。直径 25 mm 、 孔 径 0 45 m 的 PVDF 一 次性滤膜 ( Pall Gelman Sciences, Ann Arbor, MI) 。5ml 注射器。平底 96 孔 ELISA 板 ( Molecular Devices Corporation, Sunnyvale, CA) 。 1 2 方法 1 2 1 水果中抗氧化物质的提取 Blackcurrants 采集来后 , 立 即单个冷冻 , 存放于 - 36 的避光冷库中。使 用时取出 水果 , 加入一定量的液氮 , 在冷 库中以 用液氮 预冷的 粉碎机 粉碎样 品 , 粒度为 1 6 m, 密封保存于 - 36 的避光冷库中。 提取时 , 使用两种提 取液进 行提取。乙 醇的 浓度分 别为 39% 、50% 、67% 、84% 和 94% , 重亚 硫 酸钠 的 浓 度 分别 为 28 、 300、 700、 1100、 和 1372mg L。提 取液用 乙酸调 节 pH 至 3 8 ~ 4 1, 分别在 6 、 17 、 20 、 30 、 40 、 60 和 74 的条件 下完全提取 ( 以分光光度仪在 280nm 检测吸光度 , 当达到平台 时为提取完全 , 大约需要 1h) 。提取 后 , 以 8000~ 10000 g 的速 度 , 在 10~ 20 的总体积。 条件下离心 30min, 分离 上清 液 , 测量提 取液
抗氧化活性研究方法
ABTS法优缺点
3.优缺点
简便，快速，适合于大量样品的检测。 ABTS在与氢原子供体的反应中选择性差是此法的一个不足 ，它可与任何羟基化的芳香族化合物反应，这与它们的实 际抗氧化能力关，因此,TEAC值也包括对抗氧化不起作用 的羟基。
六.TBARS法
简介
脂质体系中氧化反应抑制或中止的判断主要通过测量被氧 化物的浓度，氧的去除或氧化产物的形成。因此，反应物 (不饱和脂肪酸，自由基等)的消失，氧化产物的定量可能 是判断氧化阶段的最合适方法。通过直接或者间接检测氧 的消失和自由基的电子自旋光谱，适用于氧化过程的初始 阶段。通常采用TBARS法来评价脂质的过氧化.
抗氧化活性研究方法
以酶标法清除DPPH自由基为主
目录
一.检测抗氧化活性的原因 二.自由基的产生及抗氧化的重要性 三.检测方法 四.DPPH法（原理，一般方法，酶标法） 五.ABTS法 六.TBARS法 七.铁离子还原能力(FRAP)
一.检测抗氧化活性的原因
1.天然植物中许多化学物质具有抗氧化活性 2.抗氧化剂有延缓衰老等功效，越来越受到人们关注 3.据文献记齐墩果酸型三萜有较好的抗氧化活性 4.抗氧化活性测试简单，快捷，经济
实验步骤 2.实验步骤
将样品用甲醇配制成一系列浓度,取0.15mL样品加入 2.85mLABTS自由基工作液，混合，放置10min后,在734nm 处测定吸光度。每份样品平行操作3次。 计算公式为：清除率(％)=[A(溶剂)- A(样品)] /A（溶剂）× 100％
A（溶剂）为2.85 mLABTS溶液与0.15mL甲醇混合后的吸度， A（样品）为2.85mLABTS溶液与0.15mL样品混合后的吸光度。
VitE清除DPPH自由基抗氧化量效曲线
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第37卷 第11期2009年11月西北农林科技大学学报(自然科学版)Journal of Northwest A&F University(Nat.Sci.Ed.)Vol.37No.11Nov.2009ABTS・+法测定葡萄酒抗氧化活性的研究3李 华,李 勇,吴 莹,王 华(西北农林科技大学葡萄酒学院,陕西省葡萄与葡萄酒工程技术研究中心,陕西杨凌712100)[摘 要] 【目的】确定AB TS・+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间和葡萄酒的最佳稀释倍数。
【方法】应用福林肖卡比色法(FC)测定36种葡萄酒样品的总酚含量(Total phenol index,TPI),从中选出9种总酚含量具代表性的葡萄酒样品,并采用AB TS・+法测定反应不同时间和稀释不同倍数葡萄酒样品的抗氧化活性。
【结果】AB TS・+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间为2～5min;红葡萄酒的最佳稀释倍数为0.2∶10～0.4∶10,桃红葡萄酒的最佳稀释倍数为1∶10～4∶10,白葡萄酒的最佳稀释倍数为3∶10～7∶10。
【结论】得到了AB TS・+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间和葡萄酒的最佳稀释倍数,且无需事先测定总酚含量,简化了试验步骤。
[关键词] 葡萄酒;抗氧化活性;AB TS・+法;反应时间;稀释倍数[中图分类号] TS262.6[文献标识码] A[文章编号] 167129387(2009)1120090208Research of antioxidant activity of wine s determinedby the ABTS・+methodL I Hua,L I Y ong,WU Y ing,WAN G Hua(College of Enolog y,Engineering Research Center f or V iti2V i nicult ure,N ort hwest A&F universit y,Yangli ng,S haanx i712100,China)Abstract:【Objective】The p resent st udy aimed to confirm t he best reaction time and wine dilution of t he AB TS・+met hod.【Met hod】The Folin2Ciocalteu colorimetry was used to measure t he total p henol in2 dex of36kinds of wines and t hen9kinds of rep resentative samples were selected f rom t hem,AB TS・+ met hod was used to measure t he antioxidant activities of wines wit h different reaction time and different di2 lutio ns,and was analyzed t he experiment result.【Result】The result s showed t hat t he best reaction time of t he AB TS・+met hod is2to5minutes,t he best dilution range,0.2∶10to0.4∶10for red wines,1∶10to 4∶10for ro se wines,and3∶10to7∶10for white wines.【Conclusion】The st udy has obtained t he best re2 action time and wine dilution to measure antioxident activity of wines by AB TS・+met hod,and t here is no need to measure total p henol content beforehand,so t he test p rocedure is simplified.K ey w ords:wine;antioxidant activity;AB TS・+met hod;reaction time;dilution 经过研究和分析发现,葡萄酒中含有大量的多酚类物质,如白藜芦醇、儿茶酚、表儿茶精、槲皮酮和芸香苷等,这些多酚类物质具有抗氧化活性,除了抑制低密度脂蛋白的氧化、预防心血管疾病以外,还有抗癌、抗炎症和抗血小板凝聚等功能[1],但不同的品种、气候、地理条件和工艺措施,导致葡萄酒中酚类物质在数量和种类上都有明显不同[223]。
因此,如何评价葡萄酒中酚类物质的抗氧化活性很有现实意义。
AB TS・+在414,645,734和815nm处均有特征吸收[4]。
Miller等[5]在1993年首次介绍了用AB TS・+法来评价一些化合物的抗氧化活性,即根据待测化合物清除AB TS・+引起的吸光度变化来评价其抗氧化活性。
此后,AB TS・+法成为一种被广泛采用的抗氧化活性测定方法,用于饮料和食3[收稿日期] 2009203206[基金项目] 陕西省“13115”科技创新工程重大科技专项“陕西省葡萄与葡萄酒产业关键研究”(2007ZD KG209) [作者简介] 李 华(1959―),男,重庆市梁平人,教授,博士生导师,主要从事葡萄与葡萄酒研究。
E2mail:lihuawine@品[629]以及一些植物提取物[10211]抗氧化活性的测定,同时也被广泛用于测定葡萄酒的抗氧化活性[6,12214]。
但众多研究者未明确提出测定的最佳条件,不同的研究者采用的样品稀释方案和反应时间也不相同,使所得数据难以比较。
一些研究者运用AB TS・+法研究了酚类标准品浓度对其抗氧化活性的影响[6,14215]。
在此领域,Yu等[16]找到了标准品浓度与其抗氧化活性的线性关系,即抗氧化活性与其浓度的增加呈正相关;López2Vélez等[17]研究发现, 4种葡萄酒酒多酚纯品的浓度与抗氧化活性呈正相关,但很少有人以混合物为材料进行研究。
此外,抗氧化活性也与反应时间有关,一些研究者只设定几个时间点进行分析[7,14,16],而有些研究者观察、检测整个反应时间的动力学曲线[13,16219]。
这两种方法共同的缺点是没有考虑最佳反应时间,研究者采用不同反应时间得到的Trolox等价抗氧化能力T EA C (Trolox Equivalent Antioxidant Capacity,以1L葡萄酒的AB TS・+清除能力以达到相同自由基清除能力所需Trolox的量表示)各不相同,而且对AB TS・+和葡萄酒样品的反应曲线还不明确。
本试验对AB TS・+法测定葡萄酒抗氧化活性的反应时间和样品稀释倍数进行研究,以确定AB TS・+法测定葡萄酒抗氧化活性的最佳反应时间和葡萄酒的最佳稀释倍数。
1 材料与方法1.1 材料、试剂与仪器供试36种葡萄酒样品由国内11个厂家提供,其中红葡萄酒23种,桃红葡萄酒3种,白葡萄酒10种(表1)。
AB TS[2,2′2Azino2bis2(32et hylbenzot hiazo2 line262sulfonic acid)]、Trolox(62hydroxy22,5,7,82 Tet ramet hylchroman222carboxylic acid)和没食子酸(Gallic acid),均为Sigma公司产品;其他化学试剂均为国产分析纯。
ΜV21700紫外可见光分光光度计,由上海精密科学仪器有限公司生产。
表1 供试的葡萄酒样品Table1 Wine samples样品Sample 编号Num葡萄品种Cultivar产地Location年份Vintage酒精度/%(V/V)Alcohol是否橡木桶陈酿Barrel aged红葡萄酒R21赤霞珠Cabernet Sauvignon宁夏Ningxia200312是Yes Red wine R22赤霞珠Cabernet Sauvignon宁夏Ningxia200312.5是Yes R23赤霞珠Cabernet Sauvignon宁夏Ningxia200611.5-R24赤霞珠Cabernet Sauvignon河南Henan200412是YesR25赤霞珠Cabernet Sauvignon河南Henan200412.5是YesR26赤霞珠Cabernet Sauvignon内蒙Neimeng200513是YesR27赤霞珠Cabernet Sauvignon北京Beijing200612否NoR28赤霞珠Cabernet Sauvignon河北Hebei200611.5否NoR29赤霞珠Cabernet Sauvignon河北Hebei---R210赤霞珠Cabernet Sauvignon新疆Xinjiang---R211蛇龙珠Cabernet Gernischt河南Henan200412是YesR212蛇龙珠Cabernet Gernischt宁夏Ningxia200611.5-R213蛇龙珠Cabernet Gernischt甘肃Gansu---R214三珠Blend宁夏Ningxia2005--R215三珠Blend新疆Xinjiang---R216梅鹿辄Merlot宁夏Ningxia200612-R217梅鹿辄Merlot甘肃Gansu---R218赤霞珠(30%)、玫瑰香(70%)Cabernet Sauvignon(30%)&Muscat Hamburg(70%)河南Henan200512否NoR219蛇龙珠、赤霞珠Cabernet Gernischt&CabernetSauvignon山东Shandong---R220解百纳Cabernet Sauvignon河北Hebei---R221玫瑰蜜Rose Honey云南Yunnan200512否NoR222法国野Blend云南Yunnan200312否NoR223玫瑰香Muscat Hamburg河南Henan200511.5否No 桃红葡萄酒S21玫瑰香Muscat Hamburg河北Hebei200611.5否No Rose wine S22玫瑰香Muscat Hamburg河北Hebei---S23水晶Blend云南Yunnan200312否No 19第11期李 华,等:AB TS・+法测定葡萄酒抗氧化活性的研究续表1 Contiued Table1样品Sample 编号Num葡萄品种Cultivar产地Location年份Vintage酒精度/%(V/V)Alcohol是否橡木桶陈酿Barrel aged白葡萄酒W21霞多丽Chardonnay河北Hebei2006 11.5否NoWhite wine W22霞多丽Chardonnay宁夏Ningxia200611-W23贵人香Italian Riesling河南Henan200412是Yes W24贵人香Italian Riesling北京Beijing200412否No W25贵人香Italian Riesling宁夏Ningxia200611-W26霞多丽、贵人香Chardonnay&Italian Riesling山东Shandong---W27雷司令Riesling宁夏Ningxia200611是Yes W28白诗兰Chenin Blanc新疆Xinjiang2006--W29赛美蓉Semillon甘肃Gansu---W210龙眼Longyan内蒙Neimeng200512否No1.2 总酚含量的测定参照王华[20]的方法,利用福林肖卡比色法(FC)测定总酚含量。