超声波诱变筛选虾青素高产菌株_刘艳
利用UV和ARTP诱变筛选优良性状的球等鞭金藻
利用UV和ARTP诱变筛选优良性状的球等鞭金藻作者：陈建楠陈由强薛婷来源：《福建农业科技》2020年第02期摘要：为获取优良性状的球等鞭金藻突变藻株，通过紫外和等离子体诱变育种技术对球等鞭金藻进行诱变和高通量筛选。
结果表明：共筛选出了7株优良性状的突变藻株，分别为YB1Z2、ZA2、ZA5、Q2B5ZWYB、Z3YB4、Z3YB11、JN31，其藻液尼罗红染色测定油脂含量的荧光比值都大于原始藻株，突变藻株YB1Z2、ZA2、ZA5、Z3YB4、JN31比生长速率相比于原始藻株提高了1.38、1.22、1.33、1.10、1.37倍，突变藻株YB1Z2的生长速率最快，其次是突变藻株JN31。
突变藻株YB1Z2、Q2B5ZWYB、Z3YB4、Z3YB11、JN31的岩藻黄素单位含量均高于原始藻株，其中突变藻株YB1Z2、Z3YB11提高了1.07、1.08倍。
突变藻株YB1Z2、ZA2、ZA5、Q2B5ZWYB、Z3YB4、Z3YB11的不饱和脂肪酸含量比原始藻株提高了1.22、1.09、1.08、1.18、1.13、1.18倍，突变藻株YB1Z2、ZA5、Z3YB4、Z3YB11、Q2B5ZWYB的多不饱和脂肪酸（C22∶6）DHA含量比原始藻株提高了1.28、1.27、1.26、1.21、1.21倍。
利用紫外和等离子体诱变育种技术对球等鞭金藻进行诱变筛选，获得了7株优良性状的突变藻株，为后续的研究和基础饵料藻提供了很好的种质资源。
关键词：球等鞭金藻;生长速率;岩藻黄素;不饱和脂肪酸;诱变筛选中图分类号：Q938文献标志码：A文章编号：0253-2301（2020）02-0009-08DOI：10.13651/ki.fjnykj.2020.02.002Abstract：In order to obtain the mutants of Isochrysis galbana with excellent characters， the mutation and high throughput screening of Isochrysis galbana was carried out by using the ultraviolet and plasma mutation breeding technologies. The results showed that a total of seven mutants with excellent characters were screened out， which were YB1Z2， ZA2， ZA5， Q2B5ZWYB，Z3YB4， Z3YB11， JN31， respectively. The fluorescence ratio of oil content determined by Nile red staining in the algal solution was higher than that of the original strain. The growth rate of the mutant YB1Z2， ZA2， ZA5， Z3YB4 and JN31 was 1.38， 1.22， 1.33， 1.10 and 1.37 times higher than that of the original strain， and the growth rate of YB1Z2 was the fastest， followed by JN31. The contents of fucoxanthin per unit in the mutant YB1Z2， Q2B5ZWYB， Z3YB4，Z3YB11 and JN31 were all higher than that of the original strain， among which the mutant YB1Z2 and Z3YB11 increased by 1.07 and 1.08 times. The content of unsaturated fatty acids in the mutant YB1Z2， ZA2， ZA5， Q2B5ZWYB， Z3YB4 and Z3YB11 was 1.22， 1.09， 1.08， 1.18，1.13 and 1.18 times higher than that of the original strain. The DHA content of polyunsaturated fatty acids （C22∶6）in the mutant YB1Z2， ZA5， Z3YB4， Z3YB11 and Q2B5ZWYB was 1.28，1.27， 1.26， 1.21 and 1.21 times higher than that of the original strain. In conclusion， the mutation screening of Isochrysis galbana was carried out by using the ultraviolet and plasma mutation breeding technologies， and then seven mutants with excellent characters were obtained， which provided good germplasm resources for the subsequent research and basic bait algae.Key words：Isochrysis galbana;Growth rate;Fucoxanthin;Unsaturated fatty acid;Mutation screening球等鞭金藻Isochrysis galbana是一種富含岩藻黄素和油酸、亚油酸、二十二碳六烯酸（DHA）等多种不饱和脂肪酸的海洋单细胞微藻[1-3]，是我国养殖海产鱼类幼苗和双壳类幼虫的基础饵料藻[4]。
一种高产DHA裂殖壶菌突变菌株的筛选方法[发明专利]
![一种高产DHA裂殖壶菌突变菌株的筛选方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/0e1e873926fff705cd170a21.png)
专利名称：一种高产DHA裂殖壶菌突变菌株的筛选方法专利类型：发明专利
发明人：刘宪华,李建涛,汪光义,叶会科,张赛
申请号：CN201910859437.3
申请日：20190911
公开号：CN112481348A
公开日：
20210312
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：一种高产DHA裂殖壶菌突变菌株的筛选方法，具体是，将野生型裂殖壶菌菌株经过ARTP 诱变处理，经烯草酮平板培养基定向初筛，磷酸香草醛法和摇瓶发酵培养测定的DHA产量为复筛，筛选后获得高产DHA菌株。
本发明涉及到的高产DHA筛选方法具有操作简单，筛选成功率高，能快速获取大量目的菌株等诸多优势。
申请人：天津大学青岛海洋技术研究院
地址：266200 山东省青岛市鳌山卫街道青岛蓝色硅谷核心区莱青路2-2号
国籍：CN
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法夫酵母高产虾青素发酵工艺的建立
法夫酵母高产虾青素发酵工艺的建立
梁玲玲;徐作武;卢越巧;杨一恭;刘燕;邵东;陈克杰
【期刊名称】《化工管理》
【年(卷),期】2022()9
【摘要】为建立与虾青素高产菌株相适应的发酵工艺,研究运用正交试验设计优化了发酵培养基配方成份,并在补料摇瓶上确定了碳源补加工艺,且进一步地在70 L发酵罐上对获得的新工艺进行验证。
结果表明,影响法夫酵母(Phaffia rhodozyma)虾青素生产的因素,按照主次顺序及影响由大到小排列为碳源>酵母抽提物>乳
酸>(NH_(4))_(2)SO_(4)>蛋白胨>KH_(2)PO_(4)>微量元素。
该研究建立了法夫酵母高产虾青素的生产工艺,为虾青素的商业化生产提供了坚实的基础。
【总页数】4页(P137-140)
【作者】梁玲玲;徐作武;卢越巧;杨一恭;刘燕;邵东;陈克杰
【作者单位】浙江医药股份有限公司新昌制药厂
【正文语种】中文
【中图分类】TQ920.6
【相关文献】
1.高产虾青素红法夫酵母的选育和工艺优化
2.诱变筛选高产虾青素法夫酵母及发酵条件优化
3.产虾青素红法夫酵母的发酵工艺优化
4.法夫酵母PLX-All发酵纤维素酶水解物合成虾青素
5.法夫酵母高产虾青素的选育及发酵条件的优化
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产黄原胶微生物的筛选和高产菌株的选育
通讯作者：张彩凤
参考文献 [1] 秦方袁 詹晓北. 黄原胶前提取过程中菌体的去除
[J] . 食品与机械袁 2018袁 3 (14)院 17 ~ 18. [2] 白先放袁 周韶南袁 卢洁. 紫外线诱变高产黄原胶菌
40 s、80 s 和 120 s，设计紫外照射距离分别为 20 cm、 30 cm 和 40 cm。 1.5 黄原胶的纯化提取。通过对诱变结果观察对比， 淘汰生长相对迟缓和菌落较小的黄单胞菌株，选取几
株生长速度较快的菌株再进行摇瓶发酵，得到发酵 液，再通过提取黄原胶，并测定其黄原胶产量。取 200 ml 发酵液置于离心管中，向发酵液中添加 5 g 的 CaCl2，在发酵液温度 65 ℃、pH 值 5.5 的条件下添加 蛋白酶 1 万 U，酶解 3 h；在发酵液温度 40 ℃，pH 值 9.5 的条件下，添加溶菌酶 1 万 U 并维持 6 h，酶 解全部完成后灭酶醇提，称量其干重。并与标准菌株 进行对比，得到高产的正突变菌株。相对提取率(%) = 突变株黄原胶回收量 / 对照株黄原胶回收量。 2 结果与分析 2.1 菌种的获得与培养。经增殖和选择培养分离到菌 株，菌落形态和生理生化鉴定结果符合黄单胞菌属特 征。试验得到菌种生长曲线(图 1)。由图 1 可看出， 适合黄单胞菌的生长温度为 20 ℃ ~ 35 ℃，40 ℃时黄 单胞菌基本停止生长，60 ℃为它的致死温度。
株 [J] . 吉林农业袁 2010袁 11 (2)院 8 ~ 12. [3] 张伊宁. 黄原胶和变性淀粉在提升方便面汤底口感
中的应用 [J] . 现代食品袁 2020袁 13 (1)院 59 ~ 62. [4] 赵兰坤袁 朱心双袁 王均成袁 等. 高透明黄原胶提取
虾青素的功能及国内研究进展
虾青素的功能及国内研究进展作者：刘艳冯印李佳来源：《农业与技术》2013年第07期摘要：虾青素的化学名称为3，3′-二羟基-4，4′-二酮基-β，β′-胡萝卜素，是一种红色素，可以赋予观赏鱼、三文鱼、虾和火烈鸟粉红的颜色。
其化学结构类似于β-胡萝卜素。
虾青素是类胡萝卜组的一种，也是类胡萝素合成的最高级别产物。
本文主要介绍工业上天然虾青素的功能及国内外研究进展。
关键词：虾青素；功能应用；国内外研究进展中图分类号：Q562 文献标识码：A虾青素（astaxanthin）是一种次要的类胡萝卜素，它具有较强的抗氧化性，也被报道称对人体有益，广泛地应用于食品，化妆品和制药行业[1]，虾青素在促进抗体产生、增强动物的免疫功能、抗氧化、淬灭自由基的产生方面起着重要的作用。
抗氧化剂可以消灭人体内的自由基，不但可以缓解衰老、神经系统疾病、心血管疾病等，甚至可以防止这些疾病的发生。
由于这些好的疗效及其无毒害的特点，虾青素一定会在生活中普遍应用，故此进行研究与检测。
目前市场上的虾青素主要是人工合成的产品，利用微藻生产虾青素还存在一些技术性难题。
但是随着人们对天然产品的逐渐认可和微藻生物技术的不断进步，大规模培养红球藻商业化生产天然虾青素是一种很有开发前景的产业。
1 虾青素在化妆品中的应用虾青素作为自然界中最强的抗氧化维生素，具有“超级维生素E”的美誉，其抗氧化活性是维生素E的550倍，能够有效的保护皮肤免受紫外线（UVA，UVB）的损害，在皮肤受到光照时消耗腐胺，作为潜在的光保护剂，用于阻止皮肤光老化防止诱发皮肤癌。
其超强的消灭自由基的能力，可以防止皮肤细胞受到自由基的损伤，减少皱纹及雀斑的产生。
虾青素除了具有许多药用和添加剂用途外，现阶段作为新型化妆品原料以其优良的特性广泛应用于膏霜、乳剂、唇用香脂、护肤品等各类化妆品中。
2 在饲料工业上的应用蛋鸡饲料中加入2.95%的红法夫酵母，蛋黄的最大吸光度从571nm提高到593nm，而加入10.85%的黄玉米时，仅提高到575nm。
一株虾青素产生菌的筛选诱变及初步鉴定
一株虾青素产生菌的筛选诱变及初步鉴定侯旭;闵伟红;赵君;方丽【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2011(032)001【摘要】从土壤中筛选获得一株虾青素高产菌株,命名为CTD004,采用紫外-可见分光光度计测得该菌株虾青素产量为28.8mg/L.通过对该菌株进行菌落形态观察,革兰氏染色和相关生理生化鉴定实验,以及利用16S rDNA序列的系统发育学分析,初步鉴定该菌株为假单胞菌属细菌,与GQ120653.1的亲缘关系较近.采用紫外诱变的方法提高该菌株产虾青素的能力,结果显示:菌液最佳的稀释倍数为10-6,最佳的诱变时间为15s,诱变后虾青素产量为64.6mg/L,比原菌虾青素产量增加了35.8mg/L,5次传代实验结果表现出较好的遗传稳定性.【总页数】4页(P145-148)【作者】侯旭;闵伟红;赵君;方丽【作者单位】吉林农业大学食品科学与工程学院发酵工程实验室,吉林长春,130118;吉林农业大学食品科学与工程学院发酵工程实验室,吉林长春,130118;吉林农业大学食品科学与工程学院发酵工程实验室,吉林长春,130118;吉林农业大学食品科学与工程学院发酵工程实验室,吉林长春,130118【正文语种】中文【中图分类】Q93.331【相关文献】1.高产虾青素红发夫酵母的诱变和筛选方法分析 [J], 田小群;朱明军;梁世中2.红法夫酵母原生质体制备条件优化及紫外诱变高产虾青素菌株筛选 [J], 何璞;任泽焕;何润清;王瑞霞3.虾青素产生菌单线态氧NTG诱变育种 [J], 朱记丰;吕玉华;李世杰4.烷化剂NTG诱变虾青素产生菌红法夫酵母的研究 [J], 吴江;刘子贻;朱寿民5.诱变筛选高产虾青素法夫酵母及发酵条件优化 [J], 刘晓桐;孙欣宇;刘玥;王一惠;刘冰南因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
产虾青素海洋酵母菌YS-185的鉴定及发酵条件优化（可编辑）
产虾青素海洋酵母菌YS-185的鉴定及发酵条件优化第卷第期渔业科学进展. 。
. .,年月产虾青素海洋酵母菌一的鉴定及发酵条件优化何磊刘均忠秦胜利。
于佳民孙谧农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛上海海洋大学食品学院,。
青岛科技大学化工学院,大连海洋大学食品学院,摘要以法将实验室保藏的株产虾青素的海洋酵母菌一鉴定为粘红酵母。
以海洋酵母菌一为试验菌株,运用摇瓶发酵优化的方式,探索培养基组分和发酵工艺条件对该菌发酵的影响。
实验结果表明,该菌生长最适培养基组分为葡萄糖 / 、蛋白胨 / ,最适生长起始值为 . 、转速 / 、接种量、温度℃;虾青素合成的最佳培养基组分葡萄糖 /、蛋白胨 / ,最佳虾青素合成条件:. ,转速/ ,接种量 ,培养温度℃。
发酵优化后的虾青素产量 ./ / ,较优化前的 ./ / 提高了 . 。
温度对酵母菌的生长和虾青素的合成都有显著影响。
海洋酵母菌一优化后的发酵条件有规模化生产虾青素的应用潜力。
关键词虾青素含量发酵优化正交实验中图分类号 ; . 文献识别码文章编号 ? ? ? ? 一? ?。
? , , , , 。
,,。
,,, , . ? . ?. ? / , / , . ,/ , / ,山东省年科学技术发展计划资助通讯作者。
: . .收稿日期: ? ;接受日期:作者简介:何磊 ,男,硕士研究生,主要从事海洋产物资源与酶工程研究。
? : . , : 渔业科学进展第卷℃./ , / , . , / , /℃. . . ?. / . / .?.虾青素化学名称为 , 二羟基一 ,胡萝卜素 , 一二酬,分子式为宋光泉等,是一种非维生素源类胡萝卜素,在体内不转变为维生素 ,发挥多重生理功效,如抗肿瘤活性】; .。
虾青素清除自由基能力比一胡萝卜素高倍,比维生素高倍“ .,因此在食品、医药及饲料添加剂等行业广泛应用祝美云等。
虾青素的合成有两种途径:一是化学方法合成,化学合成虾青素比较困难,合成成本偏高,产品价格昂贵,技术为少数跨国公司掌握梁春梅。
协同诱变法选育虾青素高产优良酵母菌株
ａ ｄ ＮＴＧ ｙ ｅ ｇ ｔ ａｌ ｎ ｃｅ ｎ ｄ ｗｉｈ ａ ｔｍｙ ｉ ａ ｄ ｏ ｔ ｉｅ ｉ ｈ ａ ｔｘ ｎ ｈｎ— ｒ ｄ ｃ ｎ ｔｎｔｓｒ ｉ ｎ ｓ ｎ ｒ ｅｉ ｌｙ ａ ｄ ｓ ｒ ｅ ｅ ｔ ｎｉ ｅｎ Ａ ｎ ｂ ａｎ ｄ ａ ｈ ｇ ｓａ ａ ｔ ｉ ｐ ｏ ｕ ｉ ｇ ｍｕ ａ ｔａｎ ＧＨ １ ｃ ・
野 生 茵株 缩 短 了 ２ ； 生 菌株 Ｇ ４ｈ 野 Ｈ１的 最适 生长 温 度 为 ２ Ｏ℃ ， 于 ２ 高 ８℃ 则 不 生 长 ， 突 变茵 株 Ｇ －． 的 最 而 Ｈ１ １ ７
适 生长 温 度 为 ２ ３ ８— Ｏ℃ 。 比野 生 菌株 Ｇ 提 高 ８—１ Ｈ１ Ｏ℃ 。 首 次 采 用协 同诱 变 的 方 法 成 功 选 育 了虾 青 素 高 产
７． ． Ｔｈ ｅ ｕ ｔ ｈ ｗｅ ｈ ｔｔｅ ｉｓ ｙｅｄ ｏ ｓａ ａ ｔ ｉ ｓａ ｉｈ ａ ０ ｐｇ １ ｅ ｒ ｓ ｌｓ ｓ ｏ ｄ ｔａ ｈ ｔ ｉｌ ｆａ ｔｘ ｎ ｈｎ ｗａ ｓ ｈｇ ｓ １２０ ．／ｇ ＤＣＷ ｏ ｉ ｓｈ ｇ ｒｔａ ｈ ｔ ｆｕｒｔｍｅ ｉｈｅ ｈ ｎ ｔ ａ
初 步 研 究 其 生 长特 性 。 对 野 生 型 茵株 Ｇ 用 紫 外 线 （ Ｖ） 亚 硝 基 胍 （ Ｔ 协 同诱 变 ， Ｈ１ ｕ 和 Ｎ Ｇ） 用抗 霉 素 Ａ 筛 选 ， 选 育 出虾 青素 高产 突 变菌 株 Ｇ －． 。 突 变 菌 株 Ｇ １７ １的 虾 青 素 最 高产 量 达 ｌ２ ０ｐ ／ Ｃ ， Ｈ１ １ ７ Ｈ －． ０ － ｇＤ Ｗ 比野 生 菌 株 ｇ Ｇ Ｉ的虾 青 素 最 高产 量 ２ １ｐ ／ Ｃ 高 出４倍 。 且 生 长 加 快 ， 到 最 高 生物 量和 最 高虾 青 素 产 量 的 时 间 比 Ｈ ７ ， ｇＤ Ｗ ｇ 并 达
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生物技术虾青素（astaxanthin），是一种类胡萝卜素，化学名称为3，3′－二羟基－4，4′－二酮基－β，β′－胡萝卜素，又名虾黄素，虾黄质或龙虾壳色素。
天然虾青素于自然界广泛的存在，尤其是在海洋环境中。
大量研究证明，虾青素具有增强免疫力；抗衰老；降低心血管疾病和由化学因素诱发的癌症发病率；增加对有害生物的抵抗力；维护眼睛和中枢神经健康；抗氧化能力极强，增强肌肉力量和耐受力等重要的生理功能，而且对人体绝对安全。
因此，虾青素在食品工业、饲料工业、化妆品工业、保健品和医药工业等方面具有广阔的应用前景[1-2]。
本论文以CTD004为出发菌株，对其进行超声波诱变，提高了该菌生产虾青素的能力，采用这种传统的生物物理学方法，不但生产出的产品安全无毒副作用，而且可以提高虾青素产量。
１ 材料与方法１．１ 材料与试剂1.1.1 菌株 CTD004菌株（自命名，经初步鉴定属于假单胞菌属）：吉林农业大学发酵工程实验室。
1.1.2 培养基及试剂1.1.2.1 基础培养基 蛋白胨10.0 g，葡萄糖10.0 g，KH2PO4 1.0 g，MgSO4·7H2O 1.0 g，酵母膏2.0 g，定容至1 L蒸馏水中，pH 7.2～7.5，121℃，灭菌20 min。
1.1.2.2 发酵培养基 蛋白胨10.0 g，可溶性淀粉10.0 g，KH2PO4 1.0 g，MgSO4·7H2O 1.0 g，酵母膏2.0 g，定容至1 L蒸馏水中，pH 7.2～7.5，121℃，灭菌20 min。
虾青素标准样品（购于Sigma公司），二甲基亚砜、氯仿、甲醇、冰醋酸、蛋白胨、葡萄糖、可溶性淀粉、酵母膏、KH2PO4、MgSO4·7H2O均为进口分装或国产分析纯。
１．２ 方法1.2.1 菌种超声波驯化和筛选 1.2.1.1 菌悬浮液的制备 将出发菌株接种于固体培养基上，32℃培养16 h（种龄处于对数期），用接种环移一个虾青素菌落至无菌试管中（9 mL装有玻璃珠的生理盐水），振荡10 min 过滤，即得菌体悬浮液。
1.2.1.2 超声波驯化 取菌体悬浮液15 mL在20kHz，200 w，工作电压200 v的超声条件照射不同时间（2 min，1 min，30 s），按10倍系列稀释法稀释，分别取稀释倍数为l0-5、10-6、10-7 3个稀释度0.1mL涂布于平板上，培养120 h，挑取颜色较深的菌落扩大培养，重复上述操作3轮。
1.2.2 诱变筛选方案第一轮诱变：以CTD004为出发菌株，经超声波诱变，在初筛平板上选出200株颜色较深的菌株，进行摇瓶复筛，选出5株发酵产青素良好的菌株进行第二轮诱变。
第二轮诱变：以第一轮所选5株为出发菌株，经超生波诱变，在初筛平板上，每株选出40株颜色较深的菌株，共200株颜色较深的菌株，进行药瓶复筛，选出5株发酵产青素良好的菌株进行第三轮诱变。
第三轮同上。
1.2.3 分析测定 标准曲线的绘制：精确称取0.1g虾青素样品，用混合破壁提取试剂定容至100 mL，分别取1 mL，2 mL，3 mL，4 mL，5 mL，6 mL，7 mL，8 mL 加入8个100mL容量瓶内，定容摇匀，配置成浓度为0.01、 0.02、 0.03 、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08 mg/mL，在480 nm下测定配制溶液的吸光度。
以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作曲线图，所得曲线即为虾青素的标准曲线，其标准曲线的方程为（Y=1.2786X-0.0088）。
胞内虾青素含量测定[3]：发酵液中虾青素的含量采用分光光度法进行测定，由于虾青素是一种细胞内色素，需要混合破壁提取试剂提取。
甲醇与氯仿按体积比5：1配成试剂Ⅰ，冰醋酸与二甲基亚砜按体积比5：1配成试剂Ⅱ，将试剂Ⅰ与试剂Ⅱ按体积比3：1配成混合破壁试剂。
50 mL发酵液经8 000 r/min离心10 min后，用蒸馏水洗两遍，离心得鲜菌体，搅拌后加入混合破壁试剂，环境温度为30℃。
搅拌，于8 000 r/min离心10 min 得提取液，480 nm下，以混合破壁试剂作为参比液调零，测定其OD值。
将OD值代入虾青素的标准曲线，即可算出发酵液中虾青素的含量。
２ 结果与分析２．１ 不同超声波处理时间的诱变效应筛选 超声波对菌株CTD004有明显的致死效应，致死率随照射剂量增大而增大，短时间超声波处理会给筛选带来大量的工作量，而负突变较多的出现在偏高的剂量中，为保证有较高的筛选机率，因此选择死亡率在85%左右的超声波处理：处理时间为1 min。
超声波诱变筛选虾青素高产菌株刘 艳1 李 佳2 冯 印1（1 长春科技学院，长春 130000； 2 辽宁省粮食科学研究所，沈阳 110000）摘 要 以CTD004为出发菌株，经超声波诱变，获得一株高产虾青素菌株，结果显示：此菌株在用20 kHz，200 w，工作电压200 v条件下处理30 s，虾青素的产量明显提高，诱变后虾青素产量为190.6 mg/L，比出发菌株增加了126.0 mg/L。
经5次传代培养，虾青素产量稳定。
关键词 虾青素；超声波；诱变中图分类号 Q 93 文献标志码 B作者简介：刘艳（1981-），讲师，主要从事发酵工程方面的研究。
收稿日期：2013-09-12栽培育种现将其栽培技术介绍如下。
１ 种植模式小麦于10月上旬播种，并预留套种行，6月上旬收获；青蒜于小麦播种后采用地膜覆盖种于套种行内，12月开始收获，3月净地；地膜西瓜于3月底4月初育苗，5月上旬定植，7月上中旬成熟上市；三樱椒于西瓜定植后接着定植，9月末～10月上旬收获。
２ 小麦栽培技术２．１ 品种选择 因为是套种，应缩短共生期，品种应选择高产、优质、早熟综合抗性好的小麦品种，如周麦18、周麦22等。
２．２ 整地播种 整地前施腐熟的有机肥或堆肥45～60 t/hm2，配合施用氮磷钾复合肥750 kg/hm2，锌肥15 kg/hm2，硼肥75 kg/ hm2，然后整地深耕25.0 cm以上，耙平耙细，准备播种，播种时每6行小麦预留1个套种行，小麦行距离22.0 cm，套种行宽80.0 cm，每个种植带的宽度为1.9 m，于10月上旬播种，播种深度为3.0～5.0 cm。
２．３ 田间管理 小麦田间管理重在小麦返青，后视苗情进行追肥浇水，群体大时可推迟到起身拔节期；群体小时在返青后及时追肥浇水，以促进春季分蘖，提高有效穗数和产量，一般追施尿素30 kg/hm2，并注意浇好孕穗、灌浆水，另外在小麦开花后即进入灌浆期，应叶面喷施0.3%～0.5%磷酸二氢钾，每7 d喷小麦-青蒜-西瓜-三樱椒高效栽培技术李新荣（河南省周口市农业干部学校，河南周口 466000）摘 要 小麦-青蒜-西瓜-三樱椒种植模式是太康县在原有的小麦西瓜棉花种植方工的基础上改进而来，此种植模式不仅提高了复种指数和单位面积经济效益，又降低农业生产成本，极大地刺激了农民的生产积极性。
关键词 种植基础；种植模式；经济效益中图分类号 S651 文献标志码 B作者简介：李新荣（1974-），农艺师，从事农技推广工作。
收稿日期：2013-09-11２．２ 三轮超声波诱变结果 通过表1可以看出，出发菌株CTD004经过三轮超声波诱变，处理条件为20 kHz，200 w，工作电压200 v，处理1min，在第三轮里CTD004-102-5-17菌株的产虾青素能力最高，为190.6 mg/L。
３ 讨论CTD004出发菌株是假单胞菌属，是好氧微生物，经超声波处理后能改变菌株的细胞壁膜结构，加大菌株的通透性，使有利物质如氧气，碳源，及产物顺利进出，甚至是发生突变。
经超声处理的菌株CTD004-102-5-17，对其进行胞内及胞外虾青素含量测定，均比出发菌株产虾青素含量提高。
因此采用这种传统的生物物理学方法，不但生产出的产品安全无毒副作用，而且可以提高虾青素的产量。
参考文献[1] 徐学明，金征宇，刘当惠. 饲用色素虾青素的生产与应用.饲料工业，2002，21（2）：12-14.[2] GOMES J，KUMAR D. Production of L-methione by submergedfermentation： a review. Enzyme andMicrobial Technology， 2005， 37（1）： 3-18.[3] 许培雅，郑裕国，沈寅初. 分光光度法测定红发夫酵母中虾青素含量. 浙江工业大学学报，2001，6（29）：121～123.表１ 超声波诱变结果诱变次数出发菌株诱变时间／ｍｉｎ致死率／%代表菌株虾青素含量（ｍｇ／Ｌ）第一轮ＣＴＤ００４１８４．２０%ＣＴＤ００４-１６８．３４ＣＴＤ００４-１０２７０．８９ＣＴＤ００４-１２３７６．２６ＣＴＤ００４-１３４５６．３２ＣＴＤ００４-１６８４９．７８第二轮ＣＴＤ００４-１１８５．３０%ＣＴＤ００４-１-１０７９．８０ＣＴＤ００４-１０２８４．７０%ＣＴＤ００４-１０２-５８９．４０ＣＴＤ００４-１２３８３．６０%ＣＴＤ００４-１２３-２８９６．４０ＣＴＤ００４-１３４８２．５０%ＣＴＤ００４-１３４-３５８７．５０ＣＴＤ００４-１６８８１．６０%ＣＴＤ００４-１６８-１８５．７０第三轮ＣＴＤ００４-１-１０１８２．２１%ＣＴＤ００４-１-１０-５１３５．６０ＣＴＤ００４-１０２-５８３．４１%ＣＴＤ００４-１０２-５-１７１９０．６０ＣＴＤ００４-１２３-２８８４．１１%ＣＴＤ００４-１２３-２８-３１６７．８０ＣＴＤ００４-１３４-３５８２．５７%ＣＴＤ００４-１３４-３５-６１８７．９０ＣＴＤ００４-１６８-１８０．５６%ＣＴＤ００４-１６８-１-２１１６９．８０。