总酚与单宁的测定
总酚的测定方法 国标
总酚的测定方法国标
《食品工业用总酚测定(GB/T 5009.11-2017)》是中国国家标准中规定的总酚测定方法，具体实施方法如下：
仪器和试剂：
1.紫外可见分光光度计：波长范围在200~640 nm 之间，波长选择器精度在±1 nm以内。
2.量筒：500 mL。
3.恒温槽：温度稳定度不超过±0.2℃。
4.聚四氟乙烯（PTFE）过滤器：孔径为0.45 μm。
5.乙醇：96% 。
6.乙酸：99% 。
7.苏丹Ⅲ：优级。
8.硫酸：1+1 （V/V）。
9.对甲酚：0.01 mol/L。
10.氯化铵：1 mol/L。
11.硝基苯：优级。
样品处理：
从样品中称取1 g，加入50 mL 95% 乙醇并振荡1 min，使用PTFE 过滤器过滤，将滤液收集于量筒中，定容至50 mL 。
操作步骤：
1.根据试样的吸光度值设定工作曲线，测定标准品对应的吸光度值。
2.将样品移入用量筒配制的乙醇中搅拌均匀，过滤后用苏丹三染色。
3.测定各样品、对照品和空白品的吸光度值，并根据工作曲线计算出总酚含量。
计算公式：
总酚（%）= A×V1×n（1-m/100）/V2×W
其中，
A——样品吸光度；
V1——样品配制容积；
n——对甲酚标准溶液的浓度（mol/L），与能量因数K的比值；m——样品干燥失重率（%）；
V2——乙醇的体积；
W——样品质量（g）。
葡萄酒理化指标检测
美国新橡木桶贮存赤霞珠干红葡萄酒W2B5理化指标分析班级：生工081 学号：080302101 姓名：杨冲摘要：本实验以美国新橡木桶贮存赤霞珠干红葡萄酒为原料,根据GBT 15038-2006 葡萄酒、果酒通用分析方法测定样品的总酸、挥发酸、酒精度、干浸出物、总浸出量、残糖、单宁、色度、色调、总酚、总SO2、明胶指数、盐酸指数、pH、可溶性固形物。
结果显示,葡萄酒的各项理化指标符合国家新标准中的规定。
本文讨论分析了橡木桶对赤霞珠干红葡萄酒储存过程中理化指标的影响。
关键词：赤霞珠；橡木桶；干红葡萄酒；理化指标；分析检测1 引言葡萄酒是以新鲜葡萄或葡萄汁为原料，经发酵而成的含有多种营养成分的饮料酒, 是世界公认的对人体有益的健康酒精饮品。
葡萄酒具有很高的营养价值和保健作用, 内含一种称为白藜芦醇的物质, 以红葡萄酒中含量最多, 可用于癌症的化学预防。
葡萄酒能调节人体新陈代谢, 促进血液循环, 防止胆固醇增加, 同时还有利尿、激发肝功能和防止衰老的作用, 长期适当适量( 每天控制在50mL) 饮用, 可以起到滋补、强身、美容的作用, 可防止坏血病、贫血、眼角膜炎, 降低血脂, 促进消化, 对预防癌症和医治心脏病大有禆益。
干红葡萄酒中含有人体维持生命活动所需的三大营养素：维他命、糖及蛋白质。
葡萄糖是人类维持生命、强身健体不可缺少的营养成分，是人体能量的主要来源。
近年来也越来越受广大顾客的青睐。
本研究的目的就是通过对赤霞珠干红葡萄酒理化指标的检测，保障酒的质量，并通过检测分析在制作、品种、贮存工具、贮存条件相同的情况下，只有贮存时间不同对酒理化性质的比较分析。
由于橡木桶贮存过的葡萄酒日益得到消费者的认可，橡木桶便越来越受到世界各地的酿酒师的青睐。
橡木香气是木桶贮藏的葡萄酒中最常见的香气。
经过木桶贮藏，葡萄酒逐渐氧化成熟。
新、旧橡木桶也会对葡萄酒产生一定影响，随着贮酒次数的增加，木桶的贮藏效果逐渐减弱。
几乎有葡萄酒出产的地方都可以见到赤霞珠的身影，但是它在世界各地区的表现是有所差异的，不同的地区由于气候不同导致葡萄的质量不同。
植物单宁的含量测定方法
植物单宁的含量测定方法1 植物单宁单宁（Tannins）又称单宁酸、鞣质、鞣酸。
按Bategnt的定义，指相对分子质量为500~3000的能沉淀蛋白质、生物碱的水溶性多酚化合物。
主要应用于[1]医药、食品、制革、日用化学品、水处理等领域。
单宁在传统医药上内服可治胃肠道出血和止痢，外用于局部止血和创面保护防止感染发炎；近年研究发现单宁还具有抑菌抗病毒、抗过敏、抗氧化和延缓衰老、预防心血管疾病、抗肿瘤和促进免疫等作用。
单宁在食品行业中可作为功能性成分用于制作保健品，生产食品添加剂、风味剂等；在化妆品中主要起收敛、防晒、美白、抗皱、保湿、防腐等作用；在制革工业中，单宁是栲胶的主要成分。
2 单宁的含量测定经典的有皮粉法、干酪素法、氧化滴定法、分光光度法等；现阶段涌现出许多新型的测定方法，如高效液相色谱法、流动注射分析法、原子分光光度法等。
2.1 经典测定方法2.1.1 皮粉法皮粉法是国际上公认的单宁含量测定方法，从 20 世纪 60 年代至今，原苏联、日本、印度和中国都采用此法作为国家标准测试方法。
皮粉的主要成分是蛋白质，单宁是多元酚类，分子中的酚羟基与蛋白质的酰胺键以氢键结合形成不溶于水的沉淀，以此使单宁沉淀下来，用重量法测定其含量。
根据皮粉与单宁溶液接触方式不同，可将其分为震荡法和过滤法。
震荡法是皮粉与单宁溶液一起震荡来脱去溶液中的单宁；过滤法是将单宁溶液流过皮粉柱层以脱去单宁。
通常，过滤法所测的单宁含量比震荡法高5%～7%。
皮粉法所测的是单宁的绝对含量，并且不需要标样，操作简单，可用其测定中药水提液中鞣质的含量[2]。
但皮粉法的缺点是，用重量法测定样品时，须经过过滤、干燥、称重，样品耗用量大，测定时间较长，一般样品分析需20 h 左右，不适合大批量样品的快速测定；没有选择性，对低相对分子质量的多酚也具有一定的吸附能力，往往使测定结果偏高；适用于单宁含量高的样品，不适合低含量和微量测定；另外皮粉试剂的供应和质量都较难保证。
单宁的测定实验报告
一、实验目的1. 掌握单宁的提取方法；2. 熟悉单宁含量的测定方法；3. 分析不同样品中单宁含量的差异。
二、实验原理单宁，又称鞣酸，是一种多酚类化合物，广泛存在于植物中。
单宁具有抗氧化、抗菌、抗炎等生理活性。
本实验采用Folin-Denis法测定样品中单宁的含量。
该方法原理是：单宁在碱性条件下，可与磷钨钼酸反应生成蓝色络合物，该络合物在波长760nm处有最大吸收峰，其吸收值与单宁含量成正比。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：高粱、茶叶、苹果等含有单宁的样品；2. 仪器：分光光度计、电子天平、研钵、烧杯、移液管、容量瓶、玻璃棒等。
四、实验步骤1. 样品预处理：将样品烘干、磨碎，过筛，备用；2. 样品提取：准确称取一定量的样品，加入适量乙醇，搅拌溶解，过滤，滤液备用；3. 标准曲线绘制：准确配制一定浓度的单宁标准溶液，依次加入Folin-Ciocalteu试剂、磷酸溶液、A液、B液，混匀，放置5min，于760nm波长处测定吸光度，以单宁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线；4. 样品测定：准确移取一定量的样品提取液，依次加入Folin-Ciocalteu试剂、磷酸溶液、A液、B液，混匀，放置5min，于760nm波长处测定吸光度，从标准曲线上查得单宁含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线：根据实验数据，绘制单宁标准曲线，得到线性回归方程为：y=0.0522x-0.0043，R²=0.9988；2. 样品测定：根据标准曲线，计算样品中单宁含量，结果如下：（1）高粱样品：单宁含量为2.5mg/g；（2）茶叶样品：单宁含量为15.2mg/g；（3）苹果样品：单宁含量为1.8mg/g。
从实验结果可以看出，不同样品中单宁含量存在明显差异。
高粱和苹果中单宁含量较低，而茶叶中单宁含量较高。
六、实验结论本实验采用Folin-Denis法成功测定了高粱、茶叶、苹果等样品中单宁的含量。
实验结果表明，不同样品中单宁含量存在明显差异，为后续研究单宁的生理活性提供了参考依据。
柿果成熟过程中总酚和缩合单宁含量变化的研究
柿果成熟过程中总酚和缩合单宁含量变化的研究柿果是一种常见的水果，其成熟过程中总酚和缩合单宁含量的变化一直受到人们的关注。
本文通过对柿果成熟过程中总酚和缩合单宁含量的研究，探讨了这两种化合物在柿果成熟过程中的变化规律，为深入了解柿果的生长发育和品质形成机制提供了重要参考。
一、柿果成熟过程中总酚含量的变化及其影响因素柿果成熟过程中总酚含量的变化是一个复杂的过程，受到多种因素的影响。
首先，随着柿果的成熟度逐渐增加，其总酚含量也会呈现上升的趋势。
这是因为随着柿果成熟，果实内部细胞代谢活跃，促使总酚的合成和积累增加。
此外，柿果成熟过程中，果实内的酶活性也会受到调控，进而影响总酚的合成和降解过程。
值得注意的是，气候、土壤条件以及管理水平等环境因素也会对柿果成熟过程中的总酚含量产生影响。
二、柿果成熟过程中缩合单宁含量的变化及其重要性除了总酚含量外，柿果成熟过程中缩合单宁含量的变化也备受关注。
缩合单宁是柿果中重要的抗氧化物质，对于延缓柿果的衰老和提高抗氧化能力具有重要作用。
研究表明，随着柿果成熟度的增加，其缩合单宁含量也会逐渐上升。
这是因为在柿果成熟过程中，果实内部的酶系统会促使原有的酚类物质逐渐发生缩合反应，形成更复杂的缩合单宁结构。
缩合单宁含量的增加有助于提高柿果的品质，增加其市场竞争力。
三、总酚和缩合单宁含量之间的相关性及协同作用研究发现，柿果成熟过程中总酚和缩合单宁含量之间存在一定的相关性。
在柿果成熟初期，总酚含量的增加会促使缩合单宁的合成和积累；而在柿果成熟后期，随着果实内部酶活性的变化，缩合单宁的含量也呈现不同程度的增加或降低。
这表明总酚和缩合单宁在柿果的生长发育过程中具有一定的协同作用，共同影响着柿果的品质形成。
进一步研究总酚和缩合单宁之间的相互作用机制，有助于指导柿果生产过程中的管理措施，提高柿果的品质和营养价值。
四、展望随着人们对柿果品质的需求不断提高，未来研究柿果成熟过程中总酚和缩合单宁含量的变化及其相互作用机制将具有更加实际的意义。
总酚的测定方法
总酚的测定方法总酚是一种常用的化学指标，用于测定样品中酚类化合物的含量。
酚类化合物广泛存在于自然界和工业生产中，其测定方法的准确性和可靠性对于环境保护、药品研发和工业生产具有重要意义。
总酚的测定方法有多种，下面将介绍其中几种常用的方法。
一、分光光度法分光光度法是一种常用的总酚测定方法。
通过测量样品在特定波长下的吸光度，可以计算出其中酚类化合物的浓度。
该方法简便、快速，并且对于不同种类的酚类化合物具有较好的选择性。
二、高效液相色谱法高效液相色谱法是一种常用的总酚测定方法。
该方法利用样品中酚类化合物在固定相上的分离特性，通过检测其在流动相中的峰面积或峰高，可以计算出总酚的含量。
高效液相色谱法具有分离效果好、分析速度快的特点，广泛应用于食品、环境和药品等领域。
三、电化学法电化学法是一种常用的总酚测定方法。
该方法利用电极与样品中的酚类化合物发生氧化还原反应，通过测量电流或电势变化，可以计算出总酚的含量。
电化学法具有灵敏度高、选择性好的特点，广泛应用于环境监测和药品分析等领域。
四、发光法发光法是一种常用的总酚测定方法。
该方法利用特定荧光染料与酚类化合物发生反应产生发光信号，通过测量发光强度，可以计算出总酚的含量。
发光法具有灵敏度高、特异性好的特点，广泛应用于生物医学和环境监测等领域。
总酚的测定方法在实际应用中需要考虑多个因素，如样品的性质、测定的目的和要求等。
在选择合适的测定方法时，需要综合考虑这些因素，以确保测定结果的准确性和可靠性。
总酚的测定方法在环境保护、药品研发和工业生产中具有重要意义。
通过准确测定总酚的含量，可以评估样品的污染程度、药品的质量和工业生产的效果，为相关领域的研究和应用提供科学依据。
总酚的测定方法是化学分析领域的重要内容之一，随着科学技术的不断发展和创新，新的测定方法也在不断涌现。
这些方法的应用将进一步推动总酚分析技术的发展，为环境保护、药品研发和工业生产等领域提供更加精确和可靠的数据支持。
蛋白——单宁沉淀法测定贺兰山东麓葡萄籽中总酚的提取工艺
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蛋 白一 单 宁沉 淀 法 测 定 贺 兰 山东 麓 葡 萄 籽 中总酚 的提取工艺
张 宏 丽 ，袁春 龙 ，张 军翔
（ １ ．宁夏 大学农 学 院 ，宁夏 回族 自治 区 ，银 川 ７ ５ ０ ０ ２ １ ；
Ａｂｓ ｔ ｒ ａｃ ｔ ： Ｅａ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｆ ｏ ｏ ｔ ｈ ｉ ｌ ｌ ｏ ｆ Ｈｅ ｌ ａ ｎ Ｍｏ ｕ ｎｔ ａ ｉ ｎ ｉ ｎ Ｎｉ ｎｇ ｘｉ ａ ｉ ｓ ｔ ｈｅ ｗｅ ｌ ｌ—ｋｎ ｏ ｗ ｐｌ ａ ｃ ｅ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ｗｉ ｎｅ ｇ ｒ ａ ｐ ｅ ａ ｎｄ ｗｉ ｎｅ ｉ ｎｄ ｕｓ ｔ ｒ ｙ
FC酚法测定总酚
王华. 葡萄与葡萄酒实验技术操作规范.陕西：西安地图出版社，1999单宁的测定也是参考王华，1999以没食子酸为对照品（FC酚法）总酚的含量测定方法Folin-Ciocalteu 比色法( FC酚法）一、仪器UV- 2401 PC 型紫外分光光度计;超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司KQ- 2508型)恒温水浴锅二、试剂没食子酸标准品; 钨酸钠,磷钼酸, 85%磷酸, Na2 CO3, 以上试剂均为分析纯; 水为蒸馏水。
1.3 福林试剂的配制在250mL的圆底烧瓶内加入20g 钨酸钠、5g 钼酸钠、140mL 蒸馏水，85%的浓磷酸10mL 及浓盐酸20mL，充分混匀，以小火回流10h，再加入3g 硫酸锂及15mL 双氧水，开口继续煮沸15min，待双氧水完全挥发，呈亮黄色。
冷却后移入250mL 容量瓶中，定容置于棕色试剂瓶中，放入冰箱中备用。
1.4 Na2CO3溶液的配制称取40g Na2CO3，溶于200mL 蒸馏水中, 即为20%（g/L）的Na2CO3溶液。
二、方法与结果1.对照品溶液的制备并绘标准曲线精密称取没食子酸标准品0.0110g，用蒸馏水溶解并定容至100mL，得浓度为0.11mg /mL 的标准液。
准确吸取0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL 置于25mL 的棕色容量瓶中，加蒸馏水至6.0mL，然后分别加入FC 试剂0.5mL，混匀，在0.5～8min内加入1.5mL 20% 的Na2CO3溶液，充分混合后定容，30℃避光放置0.5h，以不加标准液的6.0mL 蒸馏水为空白对照，760nm 下测定吸光值，每个样品平行测定三次。
2、供试品溶液的制备样品溶液总酚含量的测定: 准确量取制备好的乙醇粗提液0.5mL 于50mL 容量瓶中，加入9.5mL 蒸馏水，摇匀，再加入0.5mL 福林试剂，混匀，在0.5 ～8min 内加入1.5mL 20%的Na2CO3溶液，充分混合后定容，30℃避光放置0.5h，以没食子酸标准液为空白对照，760nm 下测定吸光值，每个样品平行测定6 次(A为6次平行测得的吸光度）。
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一、单宁
红葡萄酒颜色的稳定很大程度上取决于单宁荷花色素苷发生的缩合反应，由于这种物质的存在，葡萄酒成熟过程中的颜色趋于稳定。
单宁也是呈味物质，它与多糖和肽缩合，使酒更为柔和。
有氧时缩合为浅黄色，有收敛性;无氧时为棕红色，无收敛性。
1、高锰酸钾氧化法
①原理：利用酒中的单宁色素和其他非挥发性还原物质，在酸性条件下，能被高锰酸钾所氧化，而酒中的单宁色素又能被活性炭吸附除掉，据此测出酒中单宁色素的含量。
②试剂
a.0.1mol/L高锰酸钾（1/5KMnO4）标准溶液：称取3.3g高锰酸钾，溶于100mL水中，缓缓煮沸15min，冷却后用水稀释至1000mL，置于暗处保存一周。
以4号玻璃漏斗过滤于干燥的棕色瓶中。
标定：准确称取0.2g（准确至0.0002g）于105～110℃烘至恒重的基准草酸钠置入250mL三角瓶中，加100mL（8+92）硫酸溶液溶解，加热至60～70℃，趁热用高锰酸钾溶液滴定至溶液呈粉红色。
同时做空白试验。
计算公式如下：
高锰酸钾浓度（1/5KMnO4，mol/L）=m/((V-V0)*0.06700)
式中m-----草酸钠的质量，g
V-----测定时消耗高锰酸钾溶液的体积，mL
V0----空白试验消耗高锰酸钾溶液的体积，mL
0.06700-----消耗1mL 1mol/L高锰酸钾（1/5KMnO4）标准溶液相当于草酸钠的质量，g/mmol
b.0.05mol/L高锰酸钾（1/5KMnO4）溶液：将0.1mol/L高锰酸钾（1/5KMnO4）标准溶液稀释至原浓度的1/2
c.靛红纸试剂（靛蓝二黄酸钠，靛胭脂）：称取靛红1.5g，溶于50mL硫酸中，用水稀释至1000mL。
d.粉末活性炭
③测定步骤
用容量瓶取酒样100mL，倾入蒸发皿中，置于沸水浴中，除去挥发物（一般蒸发掉一半溶液即可），然后取下冷却至室温，返回原容量瓶中，洗涤蒸发皿3～4次，将洗涤液并入容量瓶中，定容摇匀，得处理液Ⅰ取上述处理后的酒样50mL于100mL烧杯中，加入2g左右粉末活性炭用玻璃棒搅匀，静置5分钟，过滤。
滤液收集于50mL容量瓶中，用水定容至刻度，得处理液Ⅱ。
要求滤液无色透明。
吸取10mL处理液Ⅰ，置于1000mL三角瓶中，加入水500mL及10mL靛红指示剂，以0.05mol/L(1/5KMnO4）高锰酸钾标准溶液滴定至金黄色即为终点。
记下消耗高锰酸钾标准溶液的毫升数V1。
同样取处理液Ⅱ10mL，同上操作，记下消耗的高锰酸钾标准溶液毫升数V2。
④计算
单宁含量（以没食子单宁酸计，g/L）=（V1-V2）*c*0.04157*（1/V）*1000
式中：V1-----滴定处理液Ⅰ时高锰酸钾标准溶液的体积，mL;
V2-----滴定处理液Ⅱ时高锰酸钾标准溶液的体积，mL;
c------高锰酸钾（1/5 KMnO4）标准溶液的浓度，mol/L;
V-----取样量，mL
0.04157-----消耗1mL1mol/L高锰酸钾（1/5 KMnO4）标准溶液相当于没食子单宁酸的质量，g/mmol
⑤讨论
a.本方法测定为单宁色素的含量，也可称为“高锰酸钾氧化值”。
b.活性炭用量随酒样颜色的深浅适量增减
c.滴定速度不要太快（每秒钟一滴），但要连续，间断滴定会影响反应终点。
d.正在发酵的红葡萄酒需经过过滤后再测定，样品太浑浊会影响终点的判定。
2、福林---丹尼斯法
①原理
单宁类化合物在碱性溶液中，将磷钼酸和林钨酸盐还原成蓝色化合物，蓝色的深浅程度与单宁含酚基的数目成正比。
如试样中含有其他酚类化合物或其他还原物质，也会被同时测定。
因此，这一方法又称为多酚的测定。
②试剂与仪器
e.福林—丹尼斯（Folin—Denis）试剂：在750mL水中，加入100g钨酸钠（NaWO4·2H2O）、20g磷钼酸（H3PO4·12MoO3）以及50mL磷酸，回流2h，冷却，稀释至1000mL。
f.碳酸钠饱和溶液：每100mL水中加入40g无水碳酸钠，放置过夜。
次日加入少许少许水合碳酸钠（Na2CO3·10H2O）作为晶种，使结晶析出，用玻璃棉过滤后备用。
g.单宁酸标准溶液：称取0.5000g单宁酸，用水溶解，定容至100mL（5mg/mL）。
h.可见光分光光度计。
i.恒温水浴槽。
③测定步骤
j.单宁的提取：取葡萄果实10.00～20.00g（视单宁含量而定）破碎,于250mL三角瓶中，加水50mL，放入60℃恒温箱中过夜。
次日将清夜过滤至250mL容量瓶中，残渣中加入30mL热水，在80℃水浴中提取20分钟。
清夜滤入容量瓶中，再加30mL热水，在80℃水浴中提取20分钟。
如此重复3～4次，直至提取液与10g/L三氯化铁溶液不生成绿色或蓝色产物为止。
将容量瓶中溶液稀释至刻度，静置过夜或取一部分离心待测。
k.标准曲线的制备：称取0.5000g单宁酸，用水溶解，定容至100mL,浓度为5000mg/L，定为标准溶液。
分别吸取0ml、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.5ml、5.0ml、7.5ml、10ml单宁酸标准溶液用水分别定容至50mL。
上述溶液的浓度分别为0、50、100、150、250、500、750、1000mg/L。
分别取1mL第二步的稀释液，加入含有70mL水的100mL容量瓶中，加入福林--丹尼斯试剂5.0mL及饱和碳酸钠溶液10.0mL，加水至刻度，充分混匀。
30分钟后以空白作参比，在波长760nm处测定吸光值。
（也可选650nm，本实验室通常不用650nm）。
绘制曲线，以吸光值为纵坐标，以第二步中的单宁酸浓度值为横坐标绘制标准曲线。
l.试样的测定：吸取1～2mL(视单宁含量而定）试样提取液（或葡萄酒）的上清液，置于盛有70mL 水的100mL容量瓶中，加入5mL福林--丹尼斯试剂及10mL饱和碳酸钠溶液，加水至100mL，充分混匀。
30分钟后以水代替试样制成的空白作参比，在760nm（或650nm）波长处测定吸光度，由吸光度从标准曲线查处相应的单宁含量。
④计算
单宁含量（以单宁酸计，g/L）=c*（1/V）*250*（1/1000）*（1/m）*1000
式中 c---试样吸光度从标准曲线求得单宁含量，mg/100mL;
V---取提取液（或酒样）体积，ml；
250---提取液总体积，ml，酒样不乘以250；
1000---mg换算成g
m---称取试样质量，g。
⑤讨论
a.本法在室温显色25分钟后颜色达最大深度，且于3h内稳定。
b.在波长650nm处比色与在760nm处比色，其结果基本相同。
二、总酚
1．原理
葡萄酒中的酚类来自葡萄树和陈酿时木桶浸出的单宁型的复杂物质。
酚类以其特殊的芳香或其他物质溶于葡萄酒中，总酚的含量一般红葡萄酒高于白葡萄酒。
本方法采用福林—肖卡试剂（Folin—Ciocalteu），其原理同福林—丹尼斯法。
2．试剂与仪器
①福林--肖卡试剂（Folin—Ciocalteu）：称取100g钨酸钠（Na2WO4·2H2O）和25g钼酸钠（Na2MoO4·2H2O），将两者溶解于700ml水中，倒入2L的圆底烧瓶中，加入50ml85％磷酸和100ml浓盐酸，放入几粒玻璃珠，给烧瓶上连续回流冷凝器，用文火回流10h（可不连续）。
回流后用50ml水冲洗冷凝管上的附着物，然后取下。
加150g硫酸锂（LiSO4·2H2O）和几滴溴水（边加边摇）至金黄色，加热沸腾15分钟，去除残余溴，用水稀释至1000ml，于棕色瓶中保存。
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②400g/L碳酸钠溶液：称取400g无水碳酸钠溶于1L沸水中，冷却至室温后，加数块结晶碳酸钠晶种，24h后过滤。
③5mg/mL酚标准溶液：称取0.500g五倍子酸（没食子酸），用水溶解，定容至100mL。
④可见分光光度计。
3．测定步骤
①标准曲线的绘制：吸取酚标准溶液0ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml、3.0ml、5.0ml分别置于100ml容量瓶中，并用水定容。
此溶液的酚浓度（以没食子酸计）分别是0mg/L、50mg/L、75mg/L、100mg/L、125mg/L、150mg/L、250mg/L。
从各溶液中分别吸取1ml放入另外的100ml容量瓶中，各加入60ml水，混合，并加入5ml福林--肖卡试剂，充分混合。
在30s至8min内加15ml200mg/L碳酸钠溶液，加水定容至刻度，混匀，再20℃下放置2h后，在波长765nm（或650nm）1cm比色皿，以号瓶作为空白测其吸光度。
以吸光度为纵坐标，酚浓度为横坐标，绘制标准曲线。
②样品测定：测定白葡萄酒时，吸取1ml酒样稀释至100ml，取1ml稀释液同上操作，测定吸光度。
测定红葡萄酒时，吸取1ml酒样稀释至100ml，取1ml稀释液按上操作，测定吸光度。
4.计算
样品测得吸光值，从标准曲线查得酚的浓度，即为酒样中总酚实际含量（红葡萄酒需除以10）。