单宁的测定方法
单宁含量测定三种方法
旳比较研究
测定单宁含量旳措施
一、比色法 二、EDTA络合滴定法 三、高锰酸钾滴定法
三种措施旳比较
措施一、 比色法
一、 试验目旳
了解单宁旳性质及熟练掌握单宁含量旳测定措施
二、试验原理
样品中旳单宁在碱性溶液中将磷钨钼酸还原，生成深蓝 色化合物，其颜色旳深浅与单宁旳含量成正比，可与原则 进行比较定量。
上表面皿，加热至沸并保持微沸状态约1h。冷却后，放暗处约一周后用垂熔 玻璃漏斗或玻璃丝过滤。将滤液转至棕色瓶内暗处保存。用NaC2O4标定KMnO4 。
②2.5 mol/L硫酸溶液：取138.8mL浓硫酸稀释至1000mL。
③活性炭
四、操作环节
1、称取5g样品在研钵中研磨成匀浆，用漏斗转移容量瓶定容至 100mL，混匀后 用干燥滤过滤，保存滤液。
1/10进行滴定。
措施三、高锰酸钾法
一、目旳
了解单宁性质及熟练掌握单宁含量旳测定措施
二、原理
作为多酚，单宁是一种强还原剂，极易被氧化剂氧化，还可 被活性炭吸附。本测定以高锰酸钾为氧化剂，根据样品中单宁 能够被活性炭吸附，测定样品液用活性碳吸附前后旳氧化值之 差，计算单宁物质旳含量。
三、材料、仪器与试剂
三、材料、仪器与试剂
1、材料： 香蕉（未熟透）50g 2、仪器： 天平 组织捣碎机 烧杯 移液管
分光光度计 容量瓶 恒温箱 （30℃） 3、试剂 ：
① 原则单宁酸溶液（0.5mg/mL）：精确称取原则单宁
酸50 mg，溶解后用水稀释至100 mL，用时现配。 ② F-D( Folin-Donis)试剂：称取钨酸钠（Na2WO4· H2O） 50g、磷钼酸10g，置于500mL锥形瓶中，加375mL水溶解， 再加磷酸25mL，连接冷凝管，在沸水浴上加热回流2h，冷却 后用水稀释至500mL。 ③ 60g/L 偏磷酸溶液。 ④ 1 mol/L碳酸钠溶液：称取无水碳酸钠53g，加水溶解并稀释 至500mL。 ⑤ 95%和75%乙醇溶液。
单宁的测定实验报告
一、实验目的1. 掌握单宁的提取方法；2. 熟悉单宁含量的测定方法；3. 分析不同样品中单宁含量的差异。
二、实验原理单宁，又称鞣酸，是一种多酚类化合物，广泛存在于植物中。
单宁具有抗氧化、抗菌、抗炎等生理活性。
本实验采用Folin-Denis法测定样品中单宁的含量。
该方法原理是：单宁在碱性条件下，可与磷钨钼酸反应生成蓝色络合物，该络合物在波长760nm处有最大吸收峰，其吸收值与单宁含量成正比。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：高粱、茶叶、苹果等含有单宁的样品；2. 仪器：分光光度计、电子天平、研钵、烧杯、移液管、容量瓶、玻璃棒等。
四、实验步骤1. 样品预处理：将样品烘干、磨碎，过筛，备用；2. 样品提取：准确称取一定量的样品，加入适量乙醇，搅拌溶解，过滤，滤液备用；3. 标准曲线绘制：准确配制一定浓度的单宁标准溶液，依次加入Folin-Ciocalteu试剂、磷酸溶液、A液、B液，混匀，放置5min，于760nm波长处测定吸光度，以单宁浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线；4. 样品测定：准确移取一定量的样品提取液，依次加入Folin-Ciocalteu试剂、磷酸溶液、A液、B液，混匀，放置5min，于760nm波长处测定吸光度，从标准曲线上查得单宁含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线：根据实验数据，绘制单宁标准曲线，得到线性回归方程为：y=0.0522x-0.0043，R²=0.9988；2. 样品测定：根据标准曲线，计算样品中单宁含量，结果如下：（1）高粱样品：单宁含量为2.5mg/g；（2）茶叶样品：单宁含量为15.2mg/g；（3）苹果样品：单宁含量为1.8mg/g。
从实验结果可以看出，不同样品中单宁含量存在明显差异。
高粱和苹果中单宁含量较低，而茶叶中单宁含量较高。
六、实验结论本实验采用Folin-Denis法成功测定了高粱、茶叶、苹果等样品中单宁的含量。
实验结果表明，不同样品中单宁含量存在明显差异，为后续研究单宁的生理活性提供了参考依据。
单宁含量皮粉法测定误差
单宁含量皮粉法测定误差摘要：1.引言2.单宁含量的测定方法3.皮粉法测定单宁含量的误差4.误差的影响因素5.结论正文：1.引言单宁是一种广泛存在于植物果实、种子和树皮等中的有机化合物，具有收敛、抗氧化等多种生理活性。
在食品、医药和日化等行业中，单宁及其衍生物被广泛应用。
因此，准确测定单宁含量具有重要的实际意义。
目前，有多种方法可用于测定单宁含量，如皮粉法、光电比色法等。
本文主要讨论皮粉法在测定单宁含量时的误差问题。
2.单宁含量的测定方法单宁含量的测定方法有很多种，如皮粉法、光电比色法、高效液相色谱法等。
其中，皮粉法是一种简单、快速、灵敏的测定方法，被广泛应用于实验室和现场测定。
皮粉法的基本原理是，将样品与一定量的氢氧化钠溶液混合，通过加热，使单宁与氢氧化钠发生反应，生成不溶于水的钠盐。
然后，通过离心、过滤等操作，将沉淀物洗涤干净，最后，将沉淀物烘干至恒重，称取重量，从而计算出单宁含量。
3.皮粉法测定单宁含量的误差皮粉法在测定单宁含量时，可能会出现一定程度的误差。
这种误差主要来自于以下几个方面：（1）样品的前处理：样品的粉碎、干燥和称取等操作过程中，可能会引入误差。
如粉碎时，样品的粒度过大或过小，可能导致单宁的提取率发生变化，从而影响测定结果。
（2）氢氧化钠溶液的配制：氢氧化钠溶液的浓度对单宁的提取率有较大影响。
如果浓度过高，可能会使部分单宁分解，导致测定结果偏低；如果浓度过低，则可能使单宁的提取率降低，导致测定结果偏高。
（3）沉淀物的处理：在沉淀物的洗涤和烘干过程中，可能会出现误差。
如洗涤次数过少，可能会导致沉淀物中残留的氢氧化钠等杂质影响测定结果；烘干温度过高，可能会使沉淀物失去部分水分，导致测定结果偏高。
4.误差的影响因素皮粉法测定单宁含量的误差受多种因素影响，包括以下几个方面：（1）样品的种类和质量：不同种类的样品，其单宁含量和结构可能有较大差异，导致测定结果的误差。
此外，样品的质量也会影响测定结果，如样品中的杂质、水分等。
单宁含量的测定
单宁含量的测定1、采用风光光度法，先用苯抽提除去有机溶剂抽出物后，用乙醇处理将单宁溶解，采用分光光度计测定溶出液在波长500nm处的光密度，由标准曲线即可得到单宁含量。
2、精确量取不同量标准单宁酸溶液与50ml容量瓶中（瓶中预先放好25ml水），假如2ml乙醇、5ml1mol/LNa2CO3溶液及2.5ml钨酸钠-磷钼酸试剂，再加水冲稀至刻度，摇匀后在25℃水浴中放置30min。
将此有色溶液倒入比色皿中，用分光光度计，以波长500nm （或红色滤光片）分别测定其光密度。
以单宁含量（mg）为横坐标，光密度为纵坐标，绘制成标准曲线。
3、精确称取1g（称准至0.0001g）已磨细的试样（同时另称试样测定水分），用滤纸包好，用苯在索氏抽提器中抽提8h。
而后将试样风干，将风干后的试样放入100ml具磨口玻塞的锥形瓶中，加入20ml乙醇，于沸水浴中加热回流1h。
过滤于50ml干容量瓶中，用平头玻璃棒用力挤压瓶中的残渣，将挤出的抽提液也滤入同一容量瓶中，然后向锥形瓶中再加入20ml乙醇，继续在沸水浴中抽提1h，再滤入同一容量瓶中，并用乙醇分次洗涤残渣，直至容量瓶刻度，摇匀，即为样品溶液。
4、用移液管吸取2ml样品溶液于50ml容量瓶中（瓶中预先放好25ml水），按上述绘制标准曲线的操作，进行分光光度法测定，记录其样品溶液的光密度，再根据标准曲线，求的样品中相当的单宁含量。
5、结果计算原料中单宁含量X （%）按下式计算： X= 11000100(1)25m m w ⨯⨯⨯-⨯ m 1——根据标准曲线求得相当样品中的单宁含量，mg m ——风干试样质量,gw ——试样水分，%分光光度法的再现性较好，准确度符合要求，但必须严格按规定条件进行。
——————摘自（石淑兰等，纸浆造纸与分析，2003）。
单宁含量测定
单宁含量测定单宁是一种广泛存在于植物中的化合物，对于食品、药品和化妆品等行业具有重要的意义。
因此，准确测定单宁的含量是非常重要的。
在本文中，将介绍三种常用的单宁含量测定方法：Folin-Ciocalteu法、酶法和高效液相色谱法。
一、Folin-Ciocalteu法Folin-Ciocalteu法是一种经典的测定单宁含量的方法，常用于测定果实、蔬菜、茶叶和酒类等样品。
该方法的基本原理是单宁与Folin-Ciocalteu试剂反应，生成蓝色化合物，通过比色测定蓝色化合物的吸光度，从而确定单宁的含量。
具体操作步骤如下：1.准备样品溶液：将待测样品粉碎并称取适量加入溶剂中，使其浓度在1-1000µg/mL范围内。
2. 加入Folin-Ciocalteu试剂：向样品溶液中加入一定量的Folin-Ciocalteu试剂，混匀后静置一段时间，使反应充分进行。
3.加入碱液：向反应溶液中加入碱液，混匀后静置一段时间，使反应继续进行。
4.比色测定：将反应溶液转移到比色皿中，使用紫外可见光谱仪测定反应溶液的吸光度，得到单宁的含量。
二、酶法酶法是一种基于单宁酶的反应原理分析单宁含量的方法，常用于测定茶叶、果汁和葡萄酒等样品的单宁含量。
该方法的基本原理是单宁酶可以与单宁结合，并生成可测定的产物，通过测定产物的光吸收来确定单宁的含量。
具体操作步骤如下：1.准备酶溶液：将单宁酶溶解于合适的缓冲液中，制备一定浓度的酶溶液。
2.准备样品溶液：将待测样品粉碎并称取适量加入缓冲液中，使其浓度在1-1000µg/mL范围内。
3.加入酶溶液：向样品溶液中加入一定量的酶溶液，混匀后静置一段时间，使反应进行。
4.比色测定：将反应溶液转移到比色皿中，使用紫外可见光谱仪测定产物的吸光度，得到单宁的含量。
三、高效液相色谱法高效液相色谱法是一种快速、准确的测定单宁含量的方法，常用于测定茶叶、葡萄酒和草药中单宁的含量。
该方法的基本原理是利用色谱柱将样品中的单宁与其他组分分离，通过测定峰面积来确定单宁的含量。
饲料中单宁的测定
饲料中单宁的测定
饲料中单宁的测定对于了解饲料质量、保障动物健康具有重要意义。
下面将从测定方法、测定步骤和注意事项三个方面进行详细介绍。
一、测定方法
饲料中单宁的测定通常采用分光光度法。
该方法基于单宁与某些金属离子反应生成有色络合物的特性，通过比色法或分光光度法测定其吸光度，从而确定单宁的含量。
二、测定步骤
样品制备：将饲料样品粉碎并过筛，取适量样品用适量甲醇或乙醇溶解，过滤后收集滤液。
显色反应：向滤液中加入适量的金属离子溶液（如铁离子或铝离子），在一定温度下反应一定时间，使单宁与金属离子生成有色络合物。
比色测定：将显色后的溶液在分光光度计上进行比色测定，记录吸光度值。
计算：根据吸光度值和标准曲线，计算饲料中单宁的含量。
三、注意事项
样品制备过程中，应确保样品粉碎均匀，避免影响测定结果。
显色反应过程中，应严格控制反应温度和时间，确保反应完全。
比色测定时，应选择合适的波长，保证测定的准确性。
在计算过程中，应注意标准曲线的绘制和线性关系的确定，以保证结果的准确性。
总之，饲料中单宁的测定需要严格按照操作步骤进行，确保每一步的准确性和规范性。
同时，在测定过程中应注意细节和注意事项，以确保结果的准确性和可靠性。
单宁的测定方法范文
单宁的测定方法范文
单宁测定是一种确定植物材料中单宁含量的方法，其结果可以衡量植物材料的酸性和抗氧化特性。
本文将介绍几种常用的单宁测定方法，包括显色法、比色法、重量法和高效液相色谱法。
1.显色法：
显色法是一种简单易行且常用的方法，可以用于测定单宁含量。
常见的显色试剂有菲洛蓝、酸性丙酮、硫酸铁三阳离子等。
测定过程包括提取单宁样品，加入显色试剂，观察反应产生的显色程度。
然后可以通过比较样品与标准曲线之间的差异来确定单宁含量。
2.比色法：
比色法是利用一些试剂与单宁反应生成有色产物的方法。
通常使用的试剂包括苯酚、硼酸、吡啶和黄原胶等。
这些试剂与单宁反应后，可以通过分光光度计或比色计测定产生的有色产物的吸光度，并从标准曲线中确定单宁含量。
3.重量法：
重量法是一种通过测量单宁提取物的干燥样品的重量来测定单宁含量的方法。
首先，从植物样品中提取单宁，然后将提取物置于恒温恒湿条件下干燥，最后测量干燥后的重量。
通过计算提取物中单宁的含量，可以确定原始材料中的单宁含量。
4.高效液相色谱法：
高效液相色谱法（HPLC）是一种准确、重复性好的分析方法，可以用于测定单宁含量。
该方法基于单宁化合物的分离和检测，可用于定性和定
量分析。
它通过将样品溶液通过色谱柱，并利用不同单宁化合物的保留时
间和峰面积来确定样品中的单宁含量。
需要注意的是，不同植物材料可能含有不同类型和形式的单宁化合物。
因此，在选择测定方法时，应根据样品的特性和研究目的来决定最适合的
方法。
此外，多种方法的综合使用可以提高测定结果的准确性。
植物单宁的含量测定方法
植物单宁的含量测定方法1 植物单宁单宁（Tannins）又称单宁酸、鞣质、鞣酸。
按Bategnt的定义，指相对分子质量为500~3000的能沉淀蛋白质、生物碱的水溶性多酚化合物。
主要应用于[1]医药、食品、制革、日用化学品、水处理等领域。
单宁在传统医药上内服可治胃肠道出血和止痢，外用于局部止血和创面保护防止感染发炎；近年研究发现单宁还具有抑菌抗病毒、抗过敏、抗氧化和延缓衰老、预防心血管疾病、抗肿瘤和促进免疫等作用。
单宁在食品行业中可作为功能性成分用于制作保健品，生产食品添加剂、风味剂等；在化妆品中主要起收敛、防晒、美白、抗皱、保湿、防腐等作用；在制革工业中，单宁是栲胶的主要成分。
2 单宁的含量测定经典的有皮粉法、干酪素法、氧化滴定法、分光光度法等；现阶段涌现出许多新型的测定方法，如高效液相色谱法、流动注射分析法、原子分光光度法等。
2.1 经典测定方法2.1.1 皮粉法皮粉法是国际上公认的单宁含量测定方法，从 20 世纪 60 年代至今，原苏联、日本、印度和中国都采用此法作为国家标准测试方法。
皮粉的主要成分是蛋白质，单宁是多元酚类，分子中的酚羟基与蛋白质的酰胺键以氢键结合形成不溶于水的沉淀，以此使单宁沉淀下来，用重量法测定其含量。
根据皮粉与单宁溶液接触方式不同，可将其分为震荡法和过滤法。
震荡法是皮粉与单宁溶液一起震荡来脱去溶液中的单宁；过滤法是将单宁溶液流过皮粉柱层以脱去单宁。
通常，过滤法所测的单宁含量比震荡法高5%～7%。
皮粉法所测的是单宁的绝对含量，并且不需要标样，操作简单，可用其测定中药水提液中鞣质的含量[2]。
但皮粉法的缺点是，用重量法测定样品时，须经过过滤、干燥、称重，样品耗用量大，测定时间较长，一般样品分析需20 h 左右，不适合大批量样品的快速测定；没有选择性，对低相对分子质量的多酚也具有一定的吸附能力，往往使测定结果偏高；适用于单宁含量高的样品，不适合低含量和微量测定；另外皮粉试剂的供应和质量都较难保证。
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油菜籽皮中单宁含量的测定Folin-Denis比色法[3]。
原理单宁类化合物在碱性溶液中,可将磷钨酸钠还原并生成蓝色化合物,颜色的深浅与单宁含量正相关,在760 nm最大吸收处比色,以单宁酸为标样作标准曲线,再根据测得的吸光值在标准曲线上查得对应的单宁含量。
标准曲线的制作准确配制01100 mg/mL的单宁酸标准溶液,分别吸取0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5 mL标准液加入装有25 mL水的50 mL容量瓶中,再各加215 mL Folin-Denis显色剂, 10 mLNa2CO3饱和溶液,摇匀定容,室温下放置30 min后比色,用0 mL标准液的反应体系作参比,每个样品作3次平行测定,以平均吸光值与标准溶液的反应体系作线性回归分析,得到回归方程。
标准曲线如图1所示。
图1 Folin-Denis法测定单宁含量的标准曲线
油菜籽皮中单宁含量的测定取油菜籽皮5 g,用50%乙醇(料液比1：6)在70℃下搅拌40min,超声波辅助提取。
提取3次,将油菜籽皮单宁的提取液合并,定容至250 mL,取提取液1 mL于含约25 mL水的50 mL容量瓶中,加215 mL Folin-Denis显色剂, 10 mLNa2CO3饱和溶液,摇匀定容至50 mL,室温下放置30 min后于760 nm处进行比色测定。
再根据标准曲线查找所测吸光值对应的单宁浓度,计算出油菜籽皮中单宁含量。
单宁含量(% )=单宁量(g) /样品重(g)*250。