实验八_酶性质——最适PH选择
酶的性质的实验报告
一、实验目的通过本实验，加深对酶性质的认识，了解酶的专一性、温度、pH值对酶活性的影响及其检测方法，掌握其原理及检测方法。
二、实验原理酶是一种生物催化剂，具有高效性、专一性和可调节性等特点。
酶的活性受多种因素的影响，包括温度、pH值、底物浓度等。
本实验通过观察不同条件下酶的活性变化，探讨影响酶活性的因素。
三、实验材料与仪器1. 材料：- 酶制剂- 底物- pH缓冲液- 温度计- 移液器- 试管- 恒温水浴箱2. 仪器：- 酶活性测定仪- 紫外可见分光光度计四、实验方法1. pH对酶活性的影响：- 将酶制剂和底物分别加入不同pH值的缓冲液中，混合均匀。
- 将混合液置于恒温水浴箱中，在不同温度下保温一定时间。
- 使用酶活性测定仪检测酶活性。
2. 温度对酶活性的影响：- 将酶制剂和底物分别加入同一pH值的缓冲液中，混合均匀。
- 将混合液置于不同温度下保温一定时间。
- 使用酶活性测定仪检测酶活性。
3. 底物浓度对酶活性的影响：- 将酶制剂和不同浓度的底物分别加入同一pH值的缓冲液中，混合均匀。
- 将混合液置于恒温水浴箱中，在不同温度下保温一定时间。
- 使用酶活性测定仪检测酶活性。
五、实验结果与分析1. pH对酶活性的影响：- 随着pH值的升高，酶活性逐渐增加，达到最适pH值后，酶活性逐渐降低。
- 最适pH值因酶的种类而异，如胃蛋白酶的最适pH值为1.8-2.2，胰蛋白酶的最适pH值为7.0-8.0。
2. 温度对酶活性的影响：- 随着温度的升高，酶活性逐渐增加，达到最适温度后，酶活性逐渐降低。
- 最适温度因酶的种类而异，如胃蛋白酶的最适温度为37℃，胰蛋白酶的最适温度为40℃。
3. 底物浓度对酶活性的影响：- 随着底物浓度的增加，酶活性逐渐增加，达到一定浓度后，酶活性不再增加。
- 酶活性与底物浓度的关系呈饱和曲线。
六、结论1. 酶的活性受pH值、温度、底物浓度等多种因素的影响。
2. 酶的最适pH值和最适温度因酶的种类而异。
某大学生物工程学院《生物化学》考试试卷(410)
某大学生物工程学院《生物化学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（95分，每题5分）1. 多数寡聚蛋白质分子其亚基的排列是对称的，对称性是蛋白质分子四级结构的最重要的性质之一。
（）答案：正确解析：2. 和其他生物一样，每一种病毒都含有RNA及DNA两种核酸。
（）答案：错误解析：病毒只含有DNA或RNA，分为DNA病毒和RNA病毒两种。
3. 符合米氏方程式的酶促化学反应，其最大反应速度不受添加竞争性抑制剂的影响。
（）。
答案：正确解析：4. 当谷氨酸在pH5.4的醋酸缓冲液中进行电泳时，它将向正极运动。
（）答案：正确解析：5. 羧肽酶A的分子外部主要是α螺旋构象，分子内部主要是β折叠的构象。
（）答案：正确解析：6. 组成多糖的大多数单糖是L型。
（）答案：错误解析：组成多糖的大多数单糖是D型。
7. 功能蛋白质分子中，只要有氨基酸残基发生改变都会引起生物功能的丧失。
（）[武汉科技大学2018研]答案：错误解析：一个典型蛋白质的功能决定于它的三维结构，而蛋白质所采取的三维结构又决定于它的氨基酸序列。
若由于氨基酸残基发生的改变影响了该蛋白质的三维结构，则会引起其生物功能的丧失，但若未影响其三维结构，则不一定会引起生物功能的丧失。
8. 血红蛋白的α链、β链和肌红蛋白的肽链在三级结构上很相似，所以它们都有结合氧的能力。
血红蛋白与氧的亲和力较肌红蛋白更强。
（）答案：错误解析：对一定的氧压而言，肌红蛋白与氧的亲和力较血红蛋白强。
9. 化学本质为蛋白质的酶是生物体内唯一的催化剂。
（）答案：错误解析：10. 糖的变旋现象是由于糖在溶液中起了化学作用。
（）答案：错误解析：糖的变旋现象不是由于糖在溶液中起了化学作用，而是由于其分子结构在溶液中起了变化，从α型变成β型或相反地从β型变成α型。
酶最适ph实验报告
酶最适ph实验报告1. 引言酶是一类生物催化剂，能够加速化学反应，并在催化过程中保持自身不发生变化。
酶的活性和稳定性受多种因素的影响，其中pH是酶活性和稳定性的重要因素之一。
pH指的是溶液的酸碱度，是用来描述溶液中氢离子（H+）的浓度的一个指标。
不同酶对pH的要求不同，每个酶都有一个最适pH值，即酶活性最高的pH值。
本实验旨在确定某一酶的最适pH值。
2. 实验材料和方法2.1 实验材料- 实验酶：X酶- 缓冲液：pH 3、5、7、9、11的缓冲液各一个- 反应底物：底物A和底物B- 试管：5个- 移液器：5个2.2 实验方法1. 准备5个试管，标记为试管1至试管5。
2. 在试管1中加入1ml pH 3缓冲液，试管2中加入1ml pH 5缓冲液，以此类推，试管3至试管5分别加入1ml pH 7、9、11缓冲液。
3. 将试管1至试管5分别放入不同的恒温水浴中，使其温度保持一致。
4. 在试管1中加入1ml X酶和1ml 底物A，立即开始计时。
5. 在反应开始后每30秒取出试管1，向其中加入1ml底物B，再迅速放回水浴中。
6. 重复步骤4和步骤5，记录下每次添加底物B的时间和测得的吸光值。
7. 在试管2至试管5中重复步骤4至步骤6，分别使用对应pH的缓冲液、X 酶、底物A和底物B。
8. 将所得结果整理并绘制曲线图。
3. 实验结果及分析将得到的实验数据整理如下表：时间（s）pH 3 pH 5 pH 7 pH 9 pH 110 0.1 0.1 0.1 0.1 0.130 0.2 0.15 0.25 0.08 0.0560 0.4 0.2 0.3 0.06 0.0290 0.6 0.18 0.35 0.05 0.01120 0.8 0.15 0.4 0.04 0.01150 0.9 0.12 0.45 0.03 0.01根据上表中测得的吸光值数据绘制曲线图，横轴表示时间（s），纵轴表示吸光值。
影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇) 影响酶促反应速度的因素生化实验实验二影响酶促反应速度的因素【目的】观察温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
【原理】唾液淀粉酶催化淀粉水解，生成一系列水解产物，即糊精、麦芽糖和葡萄糖等。
淀粉及其水解产物遇碘会呈现不同的颜色。
在不同温度，不同PH值下，唾液淀粉酶活性不同，催化淀粉水解程度不一，生成的产物也就不同。
此外，激活剂、抑制剂也能影响淀粉酶活性，影响淀粉的水解。
因此可根据在不同反应条件下，溶液加碘呈现的不同颜色来判断淀粉的水解程度，从而验证了温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
淀粉I2 【操作】1. 温度对酶促反应速度的影响取3支试管，编号，按下表操作：2. PH对酶促反应速度的影响取3支试管，编号，按下表操作：3．激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响取4支试管，编号，按下表操作：【结果及分析】观察各管颜色变化，说明温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。
【实验注意事项】篇二：生化实验思考题参考答案生化实验讲义思考题参考答案实验一淀粉的提取和水解1、实验材料的选择依据是什么？答：生化实验的材料选择原则是含量高、来源丰富、制备工艺简单、成本低。
从科研工作的角度选材，还应当注意具体的情况，如植物的季节性、地理位置和生长环境等，动物材料要注意其年龄、性别、营养状况、遗传素质和生理状态等，微生物材料要注意菌种的代数和培养基成分的差异等。
2、材料的破碎方法有哪些？答：(1) 机械的方法：包括研磨法、组织捣碎法；(2) 物理法：包括冻融法、超声波处理法、压榨法、冷然交替法等；(3) 化学与生物化学方法：包括溶胀法、酶解法、有机溶剂处理法等。
实验二总糖与还原糖的测定1、碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间接滴定？两种滴定方法各有何优缺点？答: 我们采用的是碱性铜试剂法中的间接法测定还原糖的含量。
间接法的优点是操作简便、反应条件温和，缺点是在生成单质碘和转移反应产物的过程中容易引入误差；直接法的优点是反应原理直观易懂，缺点是操作较复杂，条件剧烈，不易控制。
唾液淀粉酶最适pH的测定
唾液淀粉酶最适pH的测定【摘要】酶是具有高效催化能力的生物大分子物质,底物浓度相同时,酶的催化活性主要受温度、pH值等因素影响。
温度一定时,酶活力最高时的pH值为该酶在该温度的最适pH。
在不同pH值下,通过测定淀粉酶水解底物的程度,测定唾液淀粉酶的最适pH值。
在不同pH条件下,淀粉被唾液淀粉酶水解,与碘液反应呈现颜色反应,通过对颜色的观察和分光光度计测量产物吸光值的大小,可知底物的反应程度,从而可以判断出唾液淀粉酶的最适pH。
Enzymes are highly efficient catalytic ability of biological macromolecular material, phase at the same time, initial concentration of enzyme catalytic activity was mainly affected by factors such as temperature, pH value. At a certain temperature, the highest enzyme activity of enzyme in the pH value of the temperature of the optimum pH.Under different pH, by measuring the degree of hydrolysis enzyme substrates, determination of salivary amylase optimum pH value. Under the condition of different pH, starch is saliva amylase hydrolysis, and iodine liquid reaction to colors, through the observation of the color and the size of the spectrophotometer absorbance value measurement products, shows the reaction degree of substrates, which can determine the optimal pH of salivary amylase.【关键词】唾液淀粉酶、最适pH、碘-淀粉比色法【引言】新陈代谢是生命活动的基础。
酶的基本性质实验报告
一、实验目的1. 了解酶的基本概念和特性。
2. 掌握酶的催化作用及其影响因素。
3. 学习酶活力测定方法。
4. 通过实验，加深对酶学理论的理解。
二、实验原理酶是一种生物催化剂，具有高效、专一、温和等特性。
酶的活性受温度、pH值、底物浓度、酶浓度等因素的影响。
本实验通过测定酶活力，分析不同因素对酶活性的影响。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 酶制剂- 底物- 水浴锅- 移液器- 计时器- pH计- 温度计2. 实验仪器：- 酶活力测定仪- 分光光度计四、实验方法1. 酶活力测定：- 采用比色法测定酶活力。
- 将底物溶液和酶溶液混合，在一定温度和pH值下反应。
- 使用分光光度计测定反应体系在特定波长下的吸光度。
- 根据吸光度变化计算酶活力。
2. 不同因素对酶活性的影响：- 温度：在0℃、25℃、37℃、50℃、70℃等不同温度下测定酶活力。
- pH值：在pH值分别为3、5、7、9、11的缓冲溶液中测定酶活力。
- 底物浓度：在一定范围内改变底物浓度，测定酶活力。
- 酶浓度：在一定范围内改变酶浓度，测定酶活力。
五、实验结果与分析1. 酶活力测定结果：- 在不同温度下，酶活力随温度升高而增大，在37℃时达到最大值，之后随温度升高而降低。
- 在不同pH值下，酶活力在pH值为7时达到最大值，pH值过高或过低都会使酶活力降低。
- 在一定范围内，底物浓度和酶浓度对酶活力有显著影响。
2. 不同因素对酶活性的影响分析：- 温度：酶活性受温度影响较大，过高或过低的温度都会使酶失活。
- pH值：酶活性受pH值影响较大，不同酶的最适pH值不同。
- 底物浓度：在一定范围内，底物浓度越高，酶活力越大。
- 酶浓度：在一定范围内，酶浓度越高，酶活力越大。
六、实验结论1. 酶具有高效、专一、温和等特性。
2. 酶活性受温度、pH值、底物浓度、酶浓度等因素的影响。
3. 在实际应用中，应根据酶的特性选择合适的反应条件，以提高酶的催化效率。
实验八硝酸还原酶活性的测定
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 结论与讨论 • 参考文献
01
实验目的
了解硝酸还原酶的特性
硝酸还原酶是一种氧化还原酶，负责 将硝酸盐还原成亚硝酸盐，是植物和 微生物进行氮代谢的重要酶之一。
了解硝酸还原酶的特性，有助于深入 理解氮代谢的生物学过程，为农业生 产、生物固氮等领域提供理论支持。
预期结果
在实验前，根据相关文献和理论知识，预测实验 结果并制定预期目标。
结果比较
将实际实验结果与预期结果进行比较，分析两者 之间的差异和一致性。
结果分析
根据比较结果，分析实验中可能存在的问题和误 差来源，提出改进措施和建议。
05
结论与讨论
实验结论总结
硝酸还原酶活性在不同植物组织中存在 差异，表明该酶在不同组织中的功能和 作用可能有所不同。
03
04
在试管中加入适量的酶 液和硝酸盐底物。
将试管放入恒温水浴中， 设定适宜的温度进行反 应。
在反应过程中，定时取 样检测亚硝酸盐的生成 量。
通过分光光度计测定亚 硝酸盐的吸光度值，记 录数据。
数据记录和处理
1
记录每个取样的时间、亚硝酸盐的吸光度值。
2
根据吸光度值绘制亚硝酸盐生成曲线，计算酶活 性。
3
分析实验数据，得出硝酸还原酶活性测定的结果。
04
实验结果与分析
实验数据记录
实验数据记录表
在实验过程中，需要详细记录每 个实验步骤的实验数据，包括酶 液浓度、反应时间、反应温度等。
数据记录的准确性
确保实验数据的准确性是至关重 要的，因此需要使用精确的测量 工具和可靠的记录方法。
实验八酶促反应的影响因素
实验八酶促反应的影响因素一、目的要求1．了解温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
2．学习检定温度、pH、激活剂、抑制剂影响酶促反应速度的方法。
二、实验原理在酶促反应中，酶的催化活性与环境温度、 pH有密切关系，通常各种酶只有在一定的温度、pH范围内才表现它的活性，一种酶表现其活性最高时的温度、pH值称为该酶的最适温度、最适pH。
在酶促反应中，酶的激活剂和抑制剂可加速或抑制酶的活性，如氯化钠在低浓度时为唾液淀粉酶的激活剂，而硫酸铜则是它的抑制剂。
本实验利用淀粉水解过程中不同阶段的产物与碘有不同的颜色反应，定性观察唾液淀粉酶在酶促反应中各种因素对其活性的影响。
淀粉（遇碘呈蓝色）→紫色糊精(遇碘呈紫色)→红色糊精(遇碘呈红色)→无色糊精(遇碘不呈色)→麦芽糖(遇碘不呈色)→葡萄糖(遇碘不呈色)。
所以淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断，以此反映淀粉酶的活性，由此检定温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。
三、实验器材试管和试管架、恒温水浴、冰浴、吸量管（1 mL6支、2 mL4支、5 mL4支）、滴管、量筒、玻棒、白瓷板、秒表、烧杯、棕色瓶。
四、实验试剂1．新鲜唾液稀释液(唾液淀粉酶液)：每位同学进实验室自己制备，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一口蒸馏水，0.5 min后使其流入量筒并稀释至200倍(稀释倍数可因人而异)混匀备用。
2．1%淀粉溶液A(含0.3%NaCl)：将1 g可溶性淀粉及0.3 g氯化钠混悬于5 mL蒸馏水中，搅动后，缓慢倒入沸腾的60 mL蒸馏水中，搅动煮沸1 min，冷却至室温，加水至100 mL,置冰箱中保存。
3．1%淀粉溶液B(不含NaCl)4．碘液：称取2 g碘化钾溶于5 mL蒸馏水中，再加入1 g碘，待碘完全溶解后，加蒸馏水295 mL，混匀贮于棕色瓶中。
5．1%NaCl溶液6．1%CuSO溶液47．缓冲溶液系统按下表混合配制。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
酶性质——最适PH选择
姓名：任建南
学号：201300140073
班级：13级生科四班
同组者：周光明
时间：2015年5月25日
【实验目的】
1、熟悉并掌握用酶最适PH选择的方法。
2、学会寻找酶最适反应时间的方法。
【实验原理】
酶的催化活性与环境PH有密切关系，通常各种酶只在一定PH范围内才有活性，酶活性最高时的PH，称为酶的最适PH。
高于或者低于此PH时酶的活性逐渐降低。
值得指出的是，不同的酶最适PH也不同，如胃蛋白酶的最适PH为1.5-2.5，胰蛋白酶的最适PH为8.0。
酶的最适PH不是一个特征性的物理常数，而对于同一个酶，其最适PH因缓冲液和底物的性质不同而有差异。
如唾液淀粉酶的最适PH为6.8，但在磷酸缓冲液中，其最适PH为6.4-6.6，而在乙酸缓冲液中则为5.6。
【实验试剂】
1.0.3%NaCl‘
2.0.5%的淀粉
3.用0.2M Na2HPO4和0.1M的柠檬酸溶液配制的PH为5.4、6.0、6.4、6.8、7.2、7.6、8.0的缓冲液
【实验步骤】
1、确定合适的保温时间
保温时间是指从加入酶液开始到从水浴中取出试管加入碘液的一般时间。
取一支试管，加入0.3%NaCl、0.5%淀粉各2ml，PH6.8的Na2HPO4-柠檬酸缓冲液3ml和稀释
100-300倍的唾液2ml，充分摇匀，放入37度水浴保温。
计时，每隔1min滴一滴混合液于点滴板上，加1滴碘液，检验淀粉水解程度，呈橙黄色时，加一滴碘液于试管中，若为橙黄色表示反应完全，记录保温时间。
若2-3min内，保温液与碘液作用呈橙黄色，则说明酶活力太高，应再稀释唾液淀粉酶，记录稀释倍数。
若保温时间超过15min，说明酶活力太低，需要提高酶的浓度。
最佳保温时间为8-15min内。
2、确定最适PH
取7支试管按下表操作，保温时间参考步骤1
从各管呈现的颜色，判断不同PH对淀粉水解和淀粉酶活性的影响，并确定其最适PH。
【实验结果】
实验用唾液淀粉酶稀释倍数为200倍，PH 6.8 37°C水浴的时间7min，各试管最终试剂颜色依次深→浅→深，且PH为6.8时颜色最浅，可见唾液淀粉酶最适PH在6.8左右且过高或者过低都会使其活力下降
【思考讨论】
结果分析：
由颜色梯度可以看出，在PH=6.8时，加入碘液后混合液的颜色最浅，因此，唾液淀粉酶的最适PH为6.8，PH值高于或者低于6.8，唾液淀粉酶的活力都会受到抑制。
注意事项：
（1）本次实验成功的关键点之一就是缓冲溶液，一定要保证加入的Na2HPO4和柠檬酸的体积完全符合要求，并且充分混匀。
（2）实验操作过程中，一定要保证唾液淀粉酶酶液一直处于低温状态，这样有利于保证酶的活力，可以防止酶失活。
（3）唾液淀粉酶的稀释倍数要合理，一般为100-300倍，根据不同的人、不同的时间、不同的心情，酶的稀释倍数做略微调整。
酶的稀释倍数以8-15将底物反应完全为佳。
（4）确定合适的保温时间时，尽量是每次滴入点滴板的混合液和碘液体积一样，这样可以防止混合液过少或者碘液过少引起的颜色的误差，干扰最适时间的选择。
（5）最适保温时间一定要确定好，时间太短，最适PH环境下唾液淀粉酶都不能把淀粉消耗尽，时间太长，非最适PH条件下的唾液淀粉酶也能将淀粉耗尽，这些情况都不利于颜色梯度的形成，不利于最终结果的确定。
（6）确定最适PH值时，一定要保证向每只试管中加入的碘液体积一样，以一滴为最佳，这样有利于生成较明显的颜色梯度，也利于最终结果的判断。
（7）在确定最适PH值时，一定要保证每只试管其保温时间是相同的，都是最适保温时间，这样，该实验的单一变量仅为PH，可以准确确定酶的最适PH。