TSK凝胶色谱法测定头孢地尼中高分子杂质含量_朱美容
分子排阻色谱法测定头孢克洛胶囊中高分子杂质的含量
国药 典（ＵＳＰ４０）、 中国药 典 （２０１５年版 二 部）中相 关 的 质 量 标 准 均 未 将 此 项 订入 质 量 标 准 。本 文 参 考 相 关 文献［７．１０］，建立了头孢克洛胶囊 中高分子杂质 的测 定 方 法 并 进 行 方 法 学验 证 ，用 于 检 测 生 产 和 流通 过 程 中产 品 的 杂质 含量 ，保 证 产 品质 量 和 患 者 的 临床 用药 安全 。 １ 仪器 与试 药 １．１ 仪 器
ｐｅａｋｓ ｂｅｆｏｒｅ ｃｅ：ｆａｃｌｏｒ ｉｎ ｔｈｅ ｃｈｒｏｍ ａｔｏｇｒａｍ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈ ｍ ｏｌｅｃｕｌａｒ ｍａｓｓ ｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓ．ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｃｅｆａｃｌｏｒ ａｎｄ ｈｉｇｈ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍａｓｓ ｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓ ｗａｓ ｇｏｏｄ．Ｃｏｎｅｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｉｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ａｃｃｕｒａｔｅ，ｒａｐｉｄ，ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ， ａｎｄ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｈｉｇｈ ｍ ｏｌｅｃｕｌａｒ ｍ ａｓｓ ｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓ ｉｎ ｃｅｆａｃｌｏｒ ｃａｐｓｕｌｅｓ．
关键 词：头孢克洛 ；高分子杂质 ；分子排阻色谱 中 图 分 类 号 ： Ｒ９７８．１ 文 献 标 志 码 ：Ａ
Ｄ ｅｔｅｒｍ ｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｉｇｈ ｍ ｏｌｅｃｕｌａｒ ｉｍ ｐｕｒｉｔｉｅｓ ｉｎ ｃｅｆａｃｌｏｒ ｃａｐｓｕｌｅｓ ｂｙ ａ ｍ ｏｌｅｃｕｌａｒ－ ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ ｃｈｒｏｍ ａｔｏｇｒａｐｈｙ ｍ ｅｔｈｏｄ
中国抗 生素杂志２０ １ ８年７月第４３卷第７期
８６３ 文章编号 ：１００１—８６８９（２０１８）０７—０８６３．０３
凝胶色谱法测定头孢菌素类药物中高分子杂质的应用心得
凝胶色谱法测定头孢菌素类药物中高分子杂质的应用心得作者：申贺来源：《科学与财富》2019年第02期摘要：在物质鉴定技术体系当中。
凝胶色谱法一直以来都是一种非常常用的技术，尤其在头孢菌素药物的高分子杂志测定当中的应用尤其广泛。
和其他成分测定技术相比起来，该技术分离效果出色，同时操作简单，易于使用，设备操作也并不复杂，所以在长期实践当中得到了人们的喜爱。
本文对于凝胶色谱法测定头孢菌素类药物当中高分子杂质的一些应用要点进行了总结和分析，希望可以给相关工作的开展提供一些参考。
关键词：头孢菌素类药物；凝胶色谱技术；高分子杂质由于药物药理以及具体的制备工艺的原因，很多抗生素药物当中有很多高分子杂质的存在，其对于抗生素药物效果的正常发挥而言起到了很大的影响，在严重时，甚至会产生一些副作用，所以不难看出高分子杂质测定的重要性，在其投入市场开始大规模销售之前，首先需要保证高分子杂质数量符合于相关规定。
现在在头孢菌素类药物的高分子杂质测定当中，凝胶色谱法的应用较为广泛，本文针对其中的测定要点进行了分析。
1 仪器准备和实验准备对于这种物质分析类的医学实验而言，准备工作是非常重要的，头孢菌素类的药物高分子杂质测定实验也是如此。
总结起来，作为实验人员来说，首先需要做好各项准备工作，保证各项参数完全符合说明书的要求，让实验可以取得一个更好的结果。
1.1 仪器准备对于仪器准备而言，实验人员首先需要将输液设备、检测设备以及数据处理设施准备好，对于输液设备而言，首先需要保证设别在运行过程中输液流动速度的均匀性，让其符合相关标准的规范，同时监测设备准备工作也要着重考虑紫外检测能力，确保该项能力达到饰演的需要。
设备准备过程中，工作人员也要及时和色谱工作站的人员取得联络，保证数据记录的准确无误，同时工作人员也可以将数据发送到积分记录仪器当中。
仪器准备工作最关键的一个环节就是设置合理的检测标准，及时检测自行配置的仪器设备。
实验人员为了可以保证试验的重现性，在工作中也要随时对设备进行复检。
测量高分子分子量的方法
测量高分子分子量的方法
哇塞，高分子分子量咋测量呢？有个办法叫凝胶渗透色谱法。
把高分子样品弄进去，就像让小火车进隧道一样，不同分子量的高分子在里面跑的速度不一样。
这过程可得注意样品要处理好，别整得乱七八糟的。
安全不？那肯定安全呀，只要按规矩来，没啥危险。
啥地方能用呢？化工厂、科研机构都能使。
优势可不少呢，测量快又准。
就像神枪手打靶，一枪一个准。
还有个光散射法。
哇，这就像用探照灯找东西一样，通过光的散射来确定分子量。
操作的时候要小心光别伤着眼睛。
稳定性也不错呢。
适合那些对精度要求高的地方。
好处是啥？精度高得很呐！就像超级放大镜，啥都看得清清楚楚。
举个例子呗，有个科研团队用凝胶渗透色谱法，一下子就把高分子的分子量给测出来了，那叫一个爽。
为他们的研究提供了超级大的帮助。
所以呀，测量高分子分子量的方法有不少，选对方法就能搞定。
咱可不能瞎整，得用好这些方法。
凝胶渗透色谱法测高聚物的分子量分布
凝胶渗透色谱法测高聚物的分子量分布聚合物的分子量及分子量分布是聚合物性能的重要参数之一，它对聚合物的物理机械性能影响很大。
在聚合物分子量的测定方法中凝胶渗透色谱法（gel permeation chromatography, GPC）由于其快速方便的特点受到了广泛的应用。
一、实验目的1．了解凝胶渗透色谱法测高聚物分子量分布的原理2．熟悉安捷伦型凝胶渗透色谱仪的简单工作原理和操作。
二、GPC简单原理凝胶渗透色谱（Gel Permeation chromarography 简称GPC）为一种液体色谱，是一种很有效的分离技术。
其分离过程在装填有多种固体的“凝胶”小球的谱柱中进行。
凝胶多为高交联度的聚苯乙烯或多孔硅胶。
这些凝胶孔径的大小要与所分离聚合物的分子尺寸相同。
用待测样品的良溶剂不断淋洗色谱柱，当把用相同溶剂制备的试样稀溶液注入柱前淋洗液中后，待高聚物从柱的尾竿流出时，即得分级。
关于GPC的分离机理，目前尚无一完备的理论，但就目前存在的理论可以分为三大类：平衡排除理论；限制扩散理论；流动分离理论。
其中最常用的，认为起主要作用的是平衡排除理论；流速较低时扩散在分离过程中是不重要的；至于液动分离机理则只在液速很高时才起作用。
按照此理论，GPC是基于大分子尺寸不同而进行分级的。
凝胶孔洞的大小有一定的分布，当溶解的聚合物分子液以多孔小球时，扩散到凝胶孔结构内去的程度依赖于分子的尺寸和凝胶孔径的大小和分布。
尺寸大的分子只能进入凝胶内层的一小部分，或完全被排除在外；而尺寸小的分子则能渗透到大部分的凝胶内层中去，因此分子的尺寸越大，在柱中走的路程越短，相反，分子的尺寸越小，在柱中的路程越长，保留时间也就越长。
这样，当高聚物流经色谱柱时，就按其分子量的大小分开，大分子首先流出，达到分级的目的。
分离过程如图1。
图1 GPC 的分离原理柱子的总体积可分为三部分：凝胶粒间体积V 0，凝胶骨架体积V GM ，凝胶总孔洞体积V i ；如果柱子的总体积为V t则： V t ＝V 0＋V i ＋V GM （1）如果某种尺寸的大分子可进入的孔洞体积为V i acc ，则其淋出体积V c 应为：我们定义分配系数为：i i d V acc V /K ⋅= （2） i d c V K V V +=0 （3）如果K d ＝1，则该分子可进入全部孔洞，此时V c ＝V 0＋V i ；如果K d ＝0则该分子完全被排斥在孔洞之外，此时V ＝V 0。
凝胶色谱法测定头孢丙烯及其制剂中的高分子杂质
量 ，确 保用 药 安 全 ，作 者参 考 有关 文 献 ［ｏ ５ ］ 用 葡 － ，采 １
聚 糖 凝 胶 Ｇ一０ 胶 色 谱 法 ，建 立 了测 定 头 孢 丙 烯 高 １凝 分 子杂 质 的方 法 ，并 测 定 了头 孢 丙 烯 及 其 颗 粒 与 分 散片 的高 分子 杂 质 。 １ 实验 材 料
步 关 注 和研 究 的 目标 。 头孢 丙 烯（ｅｐｏ ｉ 属 于 口服 ｃ ｆｒｚｌ ） 第 二 代 头 孢 菌 素类 抗 生 素 ，通 过 阻碍 细 菌 细 胞 壁 合 成 产 生抗 茵 作 用 。它 抗 菌 谱 广 ，对 革 兰 阴性 菌 与革 兰 氏 阳性 菌 均 有较 好 的抗 菌 活 性 ， 尤其 是 进 一步 强 化 了第 二代 头孢 菌 素 的特 色— — 抗 金 葡 菌 活 性 ， 临
摘要 ： 目的 建立测定头孢丙烯及其制剂 中高分子杂质的方法 。方法 采用凝胶色 谱法，色谱填料为葡聚糖凝胶Ｇ—０ ｌ ，流 动相Ａ为ｐ ．的００ ｍｏ／ Ｈ７０ ．５ ｌ Ｌ磷酸盐缓 冲液 ，流动 相Ｂ 水，流速 为每 分钟 １ ｍＬ，检测 波长 为２ ４ ｍ。结 果 头孢丙烯对 照溶液 为 ． ０ ５ｎ 在０２ ０ ｇｍＬ ．￣５ ｇ ／ 浓度 范围 内，峰面积 与浓度呈 良好的线性关系 ，回归方程ｙ ０５ ７ｘ ０３ ２ （ ０９ ９ ） 检 测限为０１ｇ ／ Ｌ， ．４ ２ ＋ ．０ ９ｒ ．９ ４ ， ＝ ．１ ｇｒ ｎ 日内和 日间精密度 的Ｒ Ｄ％分别为２８ ｎ ．％。结论 本法简便 、灵敏 、重 复性好 ，适 于头孢丙烯及其制 剂中 高分 子杂质的测 Ｓ ．％￣ ３７
１１ 仪器 ．
题 ，是 该 类 药 物 临床 使 用 受 限 的一 大 原 因 。大 量 的 临床 试 验 研 究 已证 实 ，过 敏 反 应 并 非 由药 物 本 身 所
凝胶色谱法测定头孢菌素类药物中高分子杂质的应用心得
凝胶色谱法测定头孢菌素类药物中高分子杂质的应用心得刘洪培
【期刊名称】《科学与财富》
【年(卷),期】2015(7)9
【摘要】在对头孢菌素类药物中的高分子杂质进行测定的过程中,主要选择的是凝胶色谱法.主要是由于这种方式不仅测定方式比较简单,而且分离效果比较明显,操作方式比较常见.在实际的研究和测定的过程中,研究人员对对这一技术加强重视,现如今已经在医药研究领域中得到高效地推广.在本文中,笔者主要对凝胶色谱法对头孢菌素类药物中的高分子杂质进行测定的方式进行分析和探讨,希望能够给相关的药物研究人员提供借鉴和参考.
【总页数】1页(P296)
【作者】刘洪培
【作者单位】哈尔滨誉衡药业股份有限公司
【正文语种】中文
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凝胶色谱法测定头孢菌素中高分子杂质心得
凝胶色谱法测定头孢菌素中高分子杂质心得抗生素类药物中的高分子杂质是指药品中分子量大于药物本身的杂质，分子量一般在1000～5000，个别可至10000道尔顿左右。
头孢菌素类药物中的高分子杂质主要成分为蛋白（多肽）类杂质和聚合物杂质两类，前者主要来自生产过程的残留或污染，后者主要是抗生素在生产、贮存和使用条件下发生的分子间的聚合反应产物。
国内外大量的实验及临床研究证明，抗生素所致的速发型过敏反应和其中的高分子杂质有关，其含量对药品的质量有很大影响。
为提高药品纯度，减少不良反应的发生，头孢菌素类品种中高分子杂质的含量，获得很好效果。
中图分类号：o615.4+3 文献标识码：a 文章编号：1009-914x （2013）23-0224-01一、仪器与实验准备仪器。
采用液相色谱仪测定抗生素高分子杂质含量时，液相色谱仪部分应按国家技术监督局国家计量检定规程汇编中实验室液相色谱仪检定规程“（jjg705-90）”的规定作定期检定，应符合规定。
仪器的具体使用应详细参阅各操作说明书。
采用自行配置的简易仪器或系统应包括输液单元、检测单元和记录及数据处理单元三部分。
其中输液单元应能在实验过程中提供1m1/min左右稳定的流速，检测单元应具备满足标准规定波长在内的紫外检测能力，同时检测单元应能向记录单元（色谱工作站或积分记录仪）输出模拟信号，以进行数据的记录和处理。
自行配置的仪器系统可以参照液相色谱仪的检测规定，拟定自检规程和能达到的技术指标，并定期检定，以保证实验的重现性。
二、凝胶色谱柱准备色谱柱体积规格的选择应根据仪器系统的最大进样能力、所分析样品的溶解能力和检测限度要求综合考虑。
通常凝胶色谱柱的载样能力（体积）小于柱床体积的2%。
一般头孢菌素抗生素高分子杂质测定的柱床体积应为60m1以上。
玻璃柱管的分端。
开口的玻璃柱管可以采用玻璃棉加开口橡胶塞封端，或者在一端烧结石英过滤板，也可以直接购买带调节头的商品玻璃柱管。
凝胶色谱法测定头孢菌素类药物中高分子杂质的应用心得
７： ３９．
输卵管妊娠 的治疗过 去均采用输 卵管或 附件切 除， ｌ ＝ Ｉ ＝ １ 于切除 输卵管将 损伤 浚侧卵 巢血运 耐影 响其功 能， 对要求生 育者 ， 丧失 ｒ再次妊 娠的一半 或全部机 率 ［ ３ ］ 。近 年来 输 卵管妊 娠的手 术明显转为保留输卵管的手术及药物保守治疗 。手术方式有 腹腔镜 以 及开腹 手术。 目前认为腹腔镜是异位妊娠最好的手术方式 。腹 腔镜手术效果 与开腹手 术 相当 ， 但手术创 伤小 、 病人痛苦少 ， 术后恢 复快。特别是对术前可 疑异位妊娠 的病人 ， 目 前腹 腔镜检查不仅作为异位妊娠诊 断的金标 准 ， 而且可 以起到 治疗 的作 用。适用 于 原 阑不明的急腹症鉴别及输卵管妊娠 尚未破 裂或流产 早期 。大 量出血 或伴有休 克者 ， 禁 做腹腔镜检查 。本资料采用 手术治疗 ， 治愈率达到 １ ０ ０ ％， 采用氨 甲喋呤肌注配伍
妇女 ， 腹腔镜下及 Ｂ超引导下输 卵管病 变部位 注射药物 ， 腹腔 镜下输 卵管 开窗 造 Ｉ — ｌ 术 （ 输卵管线形切开术）有可能 成为未来治疗 异位 妊娠 的主要模式 ， 患异位妊娠 以后要求 保留生育能力的妇女开辟 ｒ广泛的前景 【 。
参 考 文 献 ［ １ ］ 邹淑华 ， 于建 敏， 从丹风 ， 生育前人工流产与继发性不孕症关系的分析［ Ｊ ］ 现代妇 产科进展 ， １ ９ ９ ８， ７： ９ ３ ． 『 ２ ］ 祝育德 ， 杨燕生， 张彩花 ， 吸、 刮 宫术与继发不孕 ［ 】 ］ ． 实用妇 科与产 科杂志 ， １ ９ ９ １ ，
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流动相 头孢地尼主峰保留时间 （ min） 理论板数 拖尾因子
A2 － 乙腈（ 99∶ 1 ） 28． 364 1 128 1． 57
A2 － 乙腈（ 98∶ 2 ） 25． 910 1 441 1． 38
A2 － 乙腈（ 97∶ 3 ） 24． 007 1 511 1． 46
头孢地尼为头孢菌素类抗菌药物， 对革兰阳性菌 和革兰阴性菌有广泛的抗菌谱， 临床主要用于治疗呼 ， 该类抗 生素导致过敏反应的原因是药物中存在高分子杂质。 吸系统及泌尿系统感染。 已有研究表明 因此， 控制产品中高分子杂质的含量是减少本品过敏 2005 年版二部同 反应的重要途径。 参考《中国药典 》 ， 10 凝胶色 采用 Sephadex G谱系统测定本品中高分子杂质， 头孢地尼对照品在流 类品种聚合物测定方法
2
色谱条件
采用 TSK GEL2500PWXL （ 7． 8 mm × 300 mm， TOSOH， Japan） 色谱柱， 0． 05 以磷酸盐缓冲液（ pH7． 0） ［ mol / L 磷酸氢二钠溶液 － 0． 05 mol / L 磷酸二氢钠溶液 （ 61∶ 39） ］－ 乙腈（ 97∶ 3 ） 为流动相， 流速为 0． 8 ml / min， 检测波长 254 nm， 柱温为 30℃ 。
别注入液相色谱仪， 记录色谱图； 按外标法以峰面积计 算保留时间小于头孢地尼的杂质总量 。
4
4． 1
结果与讨论
磷酸盐缓冲液浓度的选择 《中国药典 》 2005 年版二部同类品种聚合物 参考
1
仪器与试药
LC10Avp 型高效液相色谱仪 （ 日本 SHIMADZU 公 SPDM10Avp 紫 外 检 测 器 （ 日 本 SHIMADZU 公 司） ， 司） ； AE240 型电 子 天 平 （ 瑞 士 METTLER TOLEDO 公 司） 。 200401 ， 头 孢 地 尼 对 照 品 （ 批 号： 130502含 量： 98. 3% ） 由中国药品生物制品检定所提供； 头孢地尼由 珠海联 邦 制 药 股 份 有 限 公 司 研 制 （ 批 号： 400809001 、 400809002 、 400809003 ） ； 头孢地尼胶囊由日本安斯泰 广州白云山光华制药 来富山株式会社高冈工厂生产， 股份有限公司分装， 商品名为全泽 复 （ 批 号： 2241 ， 规 格： 0． 1 g） 。 乙腈为色谱纯， 水为本公司自制超纯水， 其他各试 剂均为国产分析纯。
0． 1 mol / L 注： 流动相 A1 为 0． 1 mol / L 磷酸盐缓冲液 （ pH7． 0） ［ ； 流动 磷酸氢二钠溶液– 0． 1 mol / L 磷酸二氢钠溶液 （ 61∶ 39 ） ］ 0． 05 mol / L 磷酸氢 相 A2 为 0． 05 mol / L 磷酸盐缓冲液（ pH7． 0） ［ ； 流动相 A3 二钠溶液– 0． 05 mol / L 磷酸二氢钠溶液 （ 61 ∶ 39 ） ］ 0． 025 mol / L 磷酸氢二 为 0． 025 mol / L 磷酸盐缓冲液 （ pH7． 0） ［ 钠溶液 － 0． 025 mol / L 磷酸二氢钠溶液（ 61∶ 39） ］
测定方法， 选择以下浓度的磷酸盐缓冲液进行试验， 结 果见表 1 。
表1 不同浓度磷酸盐缓冲液为流动相试验结果 A1 38． 889 3． 41 1 549 1． 64 A2 27． 313 3． 32 1 511 1． 51 A3 20． 327 2． 35 1 449 1． 41 流动相 头孢地尼主峰保留时间 （ min） 分离度 理论板数 拖尾因子
结果表明， 流动相的离子强度可以影响样品中高 分子杂质与主峰的分离度及保留时间。 在保证分离度 符合要求的前提下， 尽量缩短分析时间。 虽然 A3 流动 相主峰保留时间短， 但高分子杂质与主峰的分离度较 低， 且高分子杂质峰之间的分离度也不高， 综合考虑， 选择 pH7． 0 的 0． 05 mol / L 磷酸盐缓冲液 （ A2 ） 为流动 相进行以下试验。 4． 2 流速的选择 以 0． 05 mol / L 磷酸盐缓冲液 （ pH7． 0 ） 为流动相， 分别以流速为 1． 0 和 0． 8 ml / min 进行试验， 结果均能 使头孢地尼主峰与其前的高分子杂质峰完全分离， 但 当流速为 1． 0 ml / min 时， 色谱柱柱压较高， 为保护色谱 柱， 选择流速为 0． 8 ml / min。 4． 3 流动相的优化 以 0． 05 mol / L 磷酸盐缓冲液 （ pH7． 0 ） 为流动相， 取对照品溶液 20 μl 进样， 记录色谱图。结果色谱峰的 峰形较宽， 柱效低， 为改善峰形， 考虑加入一定比例的 乙腈， 并对乙腈比例进行优化。结果见表 2 。
214
·2011 年 04 月第 21 卷第 04 期· 今日药学
结果表明， 当流动相 A2 中加入 3% 的乙腈， 头孢地 尼对照品溶液色谱峰的峰形得到改善， 柱效提高， 且头 孢地尼主峰保留时间缩短， 头孢地尼主峰与其前的高 分子杂质峰完全分离， 故确定流动相为 0． 05 mol / L 磷 0． 05 mol / L 磷酸氢二钠溶液 － 酸盐缓冲液 （ pH7． 0） ［
表3 不同检测波长高分子杂质测定结果 杂质个数 5 5 5 总峰面积 147 021 166 101 319 626 162 571 043
0． 05 mol / L 磷酸二氢钠溶液（ 61∶ 39） ］－ 乙腈（ 97∶ 3 ） 。 4． 4 检测波长的确定 取供试品溶液 20 μl 进样， 检测器为二极管阵列检 224 和 280 nm ） 记录色谱图。 测器， 在 3 个波长下（ 254 、 结果见表 3 。
·2011 年 04 月第 21 卷第 04 期· 今日药学
TSK 凝胶色谱法测定头孢地尼中 高分子杂质含量
莉， 刘俊华， 刘 翠 （ 珠海联邦制药股份有限公司， 广东 中山 528467 ）
摘要：目的 建立 TSK G2500PW XL 凝胶色谱法测定头孢地尼中高分子杂质含量的方法 。方法 采用 TSK GEL2500PW XL 凝胶色谱柱（ 7． 8 mm × 300 mm， TOSOH， Japan） ， 0． 05 mol / L 磷酸氢二钠溶液– 0． 05 mol / L 磷酸二氢钠溶液 （ 61 以 0． 05 mol / L 磷酸盐缓冲液（ pH7． 0） ［ ∶ 39） ］－ 乙腈（ 97∶ 3 ） 为流动相， 检测波长为 254 nm； 流速为 0． 8 ml / min。结果 头孢地尼对照品溶液在 1． 999 ～ 59． 98 μg / ml 浓度范围 内， 溶液浓度和峰面积线性关系良好 。重复性的 RSD 为 3． 2% （ n = 6 ） 。结论 本凝胶色谱法操作简便 ， 专属性强， 重复性好， 结果准确 可靠， 可用于头孢地尼中高分子杂质的测定 。 关键词：TSK 凝胶色谱法； 头孢地尼； 高分子杂质 中图分类号： R927． 2 文献标志码： A 文章编号： 1673 － 4610 （ 2011 ） 04 － 0213 － 04
检测波长（ nm） 224 254 280
主峰面积 146 550 307 100 985 190 162 318 701
总杂面积 470 859 334 436 252 342
总杂含量 （ % ） 0． 32 0． 33 0． 16
结果表明， 不同检测波长检出高分子杂质个数一 致； 以 224 nm 为检测波长， 高分子杂质及主峰响应值 均较高， 但总高分子杂质百分含量与在 254 nm 波长检 出结果基本一致； 以 280 nm 为检测波长， 主成分响应 高分子杂质响应值低， 总高分子杂 质 百 分 含 量 值高， 低。综合考虑， 检测波长选择为 254 nm。 4． 5 溶剂的选择 根据头孢地尼的溶解性， 在磷酸盐缓冲液 （ pH7. 0 ） 中微溶， 在水中不溶。取头孢地尼约 30 mg， 分别用 10 ml 的 pH7． 0 磷酸盐缓冲液（ 《中国药典 》 2005 方法配 0. 1 mol / L 磷酸盐缓冲液（ JP15 方法配制） 及流动相 制） 、
朱美容， 张
Determination of High Molecular Weight Impurities in Cefdinir by TSK Gel Permeation Chromatography
ZHU Meirong，ZHANG Li，LIU Junhua，LIU Cui （ Zhuhai United Laboratories Co． ，Ltd，Zhongshan，Guangdong 528467 ，China） Abstract： Objective To establish an HPLC method for the determination of high molecular weight impurities in cefdinir． Methods The TSK GEL 2500PW XL （ 7． 8 mm × 300 mm，TOSOH，Japan） analytical column was used． The mobile phase （ 0． 05 mol / L disodium hydrogen phosphate and 0． 05 mol / L sodium was 0． 05 mol / L phosphate buffer （ pH7． 0 ） ［ dihydrogen phosphate（ 61∶ 39） ］ acetonitrile（ 97∶ 3 ） ． The detective wavelength was 254 nm，and the flow rate was about 0． 8 ml / min． Results Cefdinir had good linearity in the range of 1． 999 ～ 59． 98 μg / ml． RSD was 3． 2% （ n = 6 ） ． Conclusion The established method is simple，specific accurate，reproducible，and reliable． It can be used to determine the high molecular weight impurities in cefdinir． Key words： TSK Gel permeation chromatography； cefdinir； high molecular weight impurities