薄层色谱操作注意事项

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【最新】薄层色谱法操作注意事项

【最新】薄层色谱法操作注意事项

薄层色谱法操作注意事项
薄层色谱法是一种常用的分离和检测技术,以下是一些操作注意事项:
1. 选择合适的色谱板:根据需要选择合适的色谱板,如硅胶板、氰化纤维素板等。

不同的样品需要不同的色谱板来实现良好的分离效果。

2. 准备色谱层:将色谱板放在合适的托盘上,均匀地涂抹上薄层色谱剂。

涂层应该均匀、细致,避免出现孔隙和不均匀的现象。

3. 样品处理:样品中的杂质和溶剂可能影响色谱的分离结果,因此在样品处理前,需要根据需要进行前处理,如稀释、过滤等。

4. 样品施加:将经过前处理的样品加到色谱层上,可以使用毛细管或者微量移液器进行施加,避免过量的样品施加。

5. 吸附和分离:将施加样品的色谱板放入合适的溶剂系统中,让溶剂自己上升或者使用上下法进行分离。

注意,溶剂上升的速度要适中,避免迅速上升导致分离不完整。

6. 显色和检测:将分离好的色谱板放在适当的显色剂中,让目标物
质显色。

可以使用紫外灯、红外线检测器或者目视观察等方法进行检测。

7. 记录结果和分析:根据实验结果,记录分离和检测的结果,并进行分析解读。

注意,结果必须要有明确的标识和记录,以便于后续的分析和比较。

这些是薄层色谱法操作时需要注意的一些主要事项。

具体操作时还需根据实验要求和仪器设备进行相应的调整和操作。

薄层色谱分析法注意事项

薄层色谱分析法注意事项

(一)有机合成中展开剂的选择做有机合成时走板子是常有的事,展开剂的选择就至关重要了。

选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为:石油迷<己烷<苯<乙醚<THF<乙酸乙酯<丙酮<乙醇<甲醇使用单一溶剂,往往不能达到很好的分离效果,往往使用混合溶剂通常使用一个高极性和低级性溶剂组成的混合溶剂,高极性的溶剂还有增加区分度的作用,展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献中报道的该类化合物用什么样的展开剂,就首先尝试使用该类展开剂,然后不断尝试比例,直到找到一个分离效果好的展开剂。

展开剂的选择条件:①对的所需成分有良好的溶解性;②可使成分间分开;③待测组分的Rf在0.2~0.8之间,定量测定在0.3~0.5之间;④不与待测组分或吸附剂发生化学反应;⑤沸点适中,黏度较小;⑥展开后组分斑点圆且集中;⑦混合溶剂最好用新鲜配制。

一般来说,弱极性溶剂体系的基本两相由正己烷和水组成,再根据需要加入甲醇、乙醇,乙酸乙酯来调节溶剂系统的极性,以达到好的分离效果,适合于生物碱、黄酮、萜类等的分离;中等极性的溶剂体系由氯仿和水基本两相组成,由甲醇、乙醇,乙酸乙酯等来调节,适合于蒽醌、香豆素,以及一些极性较大的木脂素和萜类的分离;强极性溶剂,由正丁醇和水组成,也靠甲醇、乙醇,乙酸乙酯等来调节,适合于极性很大的生物碱类化合物的分离。

很多时候,展开剂的选择要靠自己不断变换展开剂的组成来达到最佳效果。

我们在实验中,为了实现一个配体与其他杂质有效分离,曾经尝试了很多种的溶剂组合,最后才找到石油醚—EtOAc—HCOOH(5.5:3.5:0.1)混合溶剂。

一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂,如果有分开的迹象,再调整比例(或者加入第三种溶剂),达到最佳效果;如果没有分开的迹象(斑点较“拖”),最好是换溶剂。

对于在硅胶中这种酸性物质上易分解的物质,在展开剂里往往加一点点三乙胺,氨水,吡啶等碱性物质来中和硅胶的酸性。

薄层色谱分析步骤及注意事项

薄层色谱分析步骤及注意事项

薄层色谱分解步调及注意事项之阳早格格创做薄层色谱法(thin layer chromatography简写TLC)是物理化教的分散技能,时常使用于药物的分散与分解现对付此要领的分解步调及注意事项提面修议.薄层色谱分解步调完毕TLC分解常常需经制板、面样、展启、检出4步收配.⑴制板正在一仄里收援物(常常玻璃)上,匀称天涂制硅胶、氧化铝大概其余吸附剂薄层、样品的分散、检测便正在此薄层色谱板上举止.普遍采用适合规格的表面光润仄坦的玻璃板.时常使用的薄层板规格有:10cm×20cm、5cm×20cm、20cm×20cm等.称与适量硅胶,加进0.2%~0.5%羧甲基纤维素钠溶液(C MC-Na),充分搅拌匀称,举止制板.普遍去道10cm×20cm 的玻璃板,3~5g硅胶/块;硅胶与羧甲基纤维素钠的比率普遍为1:2~1:4.制佳的玻璃板搁于火仄台上,注意防尘.正在空气中自然搞燥后,置1l0℃烘箱中烘0.5~lh,与出,搁凉,并将其搁于紫中光灯(254nm)下检视,薄层板应无花斑、火印,圆可备用.⑵面样用微量进样器举止面样.面样,先用铅笔正在层析上距终端lcm 处沉沉绘一横线,而后用毛细管吸与样液正在横线上沉沉面样,如果要沉新面样,一定要等前一次面样残存的溶剂挥收后再面样,免得面样乌面过.普遍乌面曲径大于2mm,不宜超出5mm.底线距基线1~2.5cm,面间距离为lcm安排,样面与玻璃边沿距离起码lcm,为预防边沿效力,可将薄层板二边刮去1~2cm,再举止面样.⑶展启将面了样的薄层板搁正在衰正在有展启剂的展启槽中,由于毛细管效率,展启溶剂正在薄层板上缓缓前进,前进至一定距离后,与出薄层板,样品组分固移动速度分歧而相互分散.①展启室应预鼓战.为达到鼓战效验,可正在室中加进脚够量的展启剂;大概者正在壁上揭二条与室一般下、宽的滤纸条,一端浸进展启剂中,稀启室顶的盖.②展启剂普遍为二种以上互溶的有机溶剂,而且临用时新配为宜.③薄层板面样后,应待溶剂挥收完,再搁人展启室中展启.④展启应稀关,展距普遍为8~15cm.薄层板搁进展启室时,展启剂不克不迭出过样面.普遍情况下,展启剂浸进薄层下端的下度不宜超出0.5cm.⑤展启剂屡屡展启后,皆需要换,不克不迭沉复使用.⑥展启后的薄层板用适合的要领,使溶剂挥收真足,而后举止检视.⑦ Rf值普遍统制正在0.3~0.8,当Rf值很大大概很小时,应适合改变震动相的比率.⑷乌面的检出展启后的薄层板通过搞燥后,时常使用紫中光灯映照大概用隐色剂隐色检出乌面.对付于无色组分,正在用隐色剂时,隐色剂喷洒要匀称,量要适度.紫中光灯的功率越大,暗室越暗,检出效验便越佳.展启分散后,化合物正在薄层板上的位子用比移值(Rf值)去表示.化合物乌面核心至本面的距离与溶剂前沿至本面的距离的比值便是该化合物的Rf值.注意事项铺板用的匀浆不宜过稀大概过稀:过稀,板简单出现拖动大概停顿制成的层纹;过稀,火挥收后,板表面较细糙匀浆配比般是硅胶G:火=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠火溶液=1:2.研磨匀浆的时间,根据体味去定,与气氛干度有关,普遍通过拿起研棒时匀浆下滴的情况去推断,越稀越易下滴.匀浆的稀稀除效率板的仄滑中,也效率板涂层的薄度,进一步效率上样量.涂层薄,面样易过载;涂层薄,隐色不那么明隐.常常,板的品量对付薄层鉴别的效率不是很,效率最大的是展启剂的配制战展启系统的鼓战.面样尽管用小的面样管.如果有脚够的耐性,最佳只用1微降的面样管.样,面的乌面较小,展启的色谱图分散度佳,颜色明隐.样品溶液的含火量越小越佳,样品溶液含火量大,面样乌面扩集大.样品溶液的溶剂普遍是无火乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯.面佳样的薄层板用电吹风的热风吹搞大概搁进搞燥器里晾搞.展启剂配制采用符合的量器把各组成溶剂移进分液漏斗,热烈振摇使混同液充分混匀,搁置,如果分层,与用体积大的一层做展启剂.千万于不该该把各组成溶液倒进展启缸,振摇展启缸去配制展启剂.混同不匀称战不分液的展启剂,会制成层析的真足波折.各组成溶剂的比率准确度对付分歧的分解任务有分歧的央供,尽管达到真验室仪器的最下透彻度,比圆:与1ml的溶剂,应使用1ml的单标移液管,移液管应切合计量认证央供,纵然时间那不是必须的.展启系统的鼓战普遍使用的是单槽的展启缸,一槽用去搁展启剂,另一槽可加进氨火大概硫酸.把待展启的板搁进二槽间的仄台,斜架着,盖上展启缸的盖子.让展启剂的蒸气充谦展启缸,并使薄层板吸附蒸气达到鼓战,预防边沿效力,鼓战时间正在半小时安排.展启时易免要挨启盖子把薄层板搁进展启剂中,不过对付薄层板与蒸气的吸附仄稳效率不大,天然动做该当尽管沉、快.温干度的统制温干度对付薄层效率皆很大.不冻结的提下,常常温度越矮分散越佳,较易的分散需正在矮温下分散,比圆人参白苷.干度的效率,预计主假如效率薄层板的吸附本领,引导采用性(容量果子)的变更,干度应根据本量情况决定.温度统制使用空调器大概冰柜,干度统制是通过正在另一展启槽搁置相映浓度的硫酸.隐色喷隐色剂隐色最要害是有佳的雾化器.。

薄层色谱层析操作规程

薄层色谱层析操作规程

薄层色谱层析操作规程1. 引言薄层色谱(TLC)是一种常用的分离和分析技术,适用于有机物和天然产物的检测、纯化和鉴定。

本操作规程旨在提供一种标准化的TLC操作步骤,以确保结果的准确性和可重复性。

2. 实验材料和仪器设备•薄层色谱板:选择合适的固定相和基底材料的薄层色谱板。

•检测溶剂:根据需要选择合适的溶剂,常用的有乙醚、醋酸乙酯、甲醇、正己烷等。

•样品:准备待测物的溶液或提取液。

•试剂:例如显色剂、定位剂等。

•色谱槽:用于放置色谱板的槽状容器。

•喷雾开发箱:用于显色和可视化样品。

3. 操作步骤3.1 准备工作1.检查薄层色谱板是否完整,如有损坏需更换。

2.在色谱板上使用铅笔标记出样品和参比物的位置。

3.2 样品处理1.准备待测物的溶液或提取液,并将其过滤以去除杂质。

2.如需测定混合物中的成分,可先进行分离提取。

3.3 上样1.使用微量锥或玻璃管在标记位置上均匀地涂抹样品。

2.上样后务必避免接触色谱板其他区域。

3.4 开发1.将色谱板放置在色谱槽中,加入适当的检测溶剂。

注意溶剂的选择应根据待测物的性质和溶解性来确定。

2.等待溶剂上升至足够高度,将色谱板取出并迅速标记并扫描涂点位置。

3.5 显色和观察1.将色谱板放入喷雾开发箱中,并加入适当的显色剂。

2.等待显色剂完全插入后,将色谱板取出并进行观察。

3.6 数据处理1.使用适当的测量工具,如图像分析软件,测量色谱带的迁移距离和Rf值。

2.进行定性和定量分析,根据需要绘制色谱图。

4. 安全注意事项1.使用化学品和有机溶剂时必须戴上防护手套和防护眼镜,以防止溅入眼睛或与皮肤接触。

2.所有操作需在通风良好的实验室中进行,避免吸入有害气体。

3.注意操作时避免产生火源,如禁止吸烟和使用明火。

4.做好废弃物的处理工作,避免对环境造成污染。

5. 结论本操作规程提供了一套标准化的薄层色谱层析操作步骤,涵盖了样品准备、上样、开发、显色和观察、数据处理等关键步骤。

通过遵守操作规程和安全注意事项,可以准确、高效地进行薄层色谱层析实验,并获得可靠的结果。

薄层色谱法标准操作规程

薄层色谱法标准操作规程

薄层色谱法标准操作规程1、目的:进行药品的鉴别,杂质检查或含量测定2、原理:薄层色谱法,是将适宜的固定相涂布于玻璃板上,成一均匀薄层。

等点样、展开后,与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比,用以进行药品的鉴别,杂质检查或含量测定的方法。

3、仪器与材料3.1 玻璃板:除另有规定外,用5cm×20cm,10cm×20cm或20cm×20cm的规格,要求光滑,平整、洗净后的不附水珠,晾干。

3.2 固定相或载体:最常用的有硅胶G、硅胶GF、硅胶H、硅胶HF254,其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微晶纤维素、微晶纤维素F254等。

其颗粒大小,一般要求直径为10—40µm。

薄层涂布,一般可分无粘合剂和含粘合剂两种;前者系将固定相直接涂布于玻璃板上,后者系在固定相中加入一定量的粘合剂,一般常用10—15%煅石膏(CaSO4·2H2O在140℃烘4小时),混匀后加水适量使用,或用羧甲基纤维素钠水溶液(0.5—0.7%)适量调成糊状,均匀涂布于玻璃板上。

也有含一定展开液或缓冲液的薄层。

3.3 涂布器:应能使固定相或载体在玻璃板上涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。

3.4 点样器:常用具支架的微量注射器或定时毛细管,应能使点样位置正确集中。

3.5 展开室:应使用适合薄层板大小的玻璃制薄层色谱展开缸,并有严密盖子,除另有规定外,底部应平整光滑,应便于观察。

4、操作方法4.1 薄层板制备:除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的泡后,倒入涂布器中,在玻璃板上平稳地移动涂布器进行涂布(厚度为0.2—0.3mm),取下涂好薄层的玻璃板,置水平台上于室温下晾干,后在110℃烘30分钟。

即置有干燥剂的干燥箱中备用。

使用前检查其均匀度(可通过透射光和反射光检视)。

4.2 点样:除另有规定外,用点样器点样于薄层板上,一般为圆点,点样基线距底边2.0cm,点样直径为2——4mm,点间距离约为1.5—2.0cm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。

薄层色谱法测定标准操作规程

薄层色谱法测定标准操作规程

薄层色谱法测定标准操作规程目的:建立薄层色谱法测定标准操作规程。

(《中华人民共和国药典》2010版附录)范围:适用于薄层色谱法的测定。

职责:检验员,QC主管。

内容:1 简述:薄层色谱法,是将适宜的固定相涂布于玻璃板上,成一均匀薄层。

等点样、展开后,与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比,用以进行药品的鉴别,杂质检查或含量测定的方法。

2 仪器与材料:2.1 薄层板:2.1.1市售薄层板市售薄层板分普通薄层板和高效薄层板,按固定相种类又可分为硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、微晶纤维素、硅藻土、氧化铝、聚酰胺薄膜等薄层板。

2.1.2 自制薄层板在保证色谱质量的前提下,如需对薄层板进行特别处理和化学改性,以适应供试品分离的要求时,也可用实验室自制的薄层板,自制薄层板系指手工(或借助涂布器)将固定相涂布于玻璃板或其他适宜载板上使成为有一定厚度的均匀薄层。

常用的固定相有硅胶G、硅胶GF254、硅胶H、微晶纤维素等,其粒径一般为10~40um。

2.2 点样器:采用手动、半自动或全自动点样器材,手动点样时一般采用微量毛细管。

2.3 展开容器:应使用适合薄层板大小的平底或双槽薄层色谱专用展开缸,并配有严密的盖子。

水平展时使用专用水平展开缸。

2.4 显色与显色装置按各品种项下规定。

可采用喷雾显色、浸渍显色或蒸气熏蒸显色,喷雾显色应使用玻璃喷雾瓶或专用喷雾器,要求用压缩气体使显色剂呈均匀细雾状喷出;浸渍显色可用玻璃容器或适宜的展开缸代替;蒸气熏蒸显色可用双槽展开缸或适宜大小的干燥器代替。

2.5 检视装置为装有可见光或紫外光(254nm及365nm)光源及相应的滤光片的暗箱,可附加摄像设备供拍摄色谱图用,暗箱内光源应有足够的光照度。

3 操作方法:3.1 薄层板制备:3.1.1 市售薄层板临用前一般应在110℃活化30min,聚酰胺薄膜不需活化。

铝基片薄层板或聚酰胺薄膜均可根据需要剪裁,但须注意剪裁后的薄层板底边的涂层不得有破损,如在储放期间被空气中杂质污染,使用前可用甲醇、二氯甲烷与甲醇的混合溶剂在展开容器中上行展开预洗,取出,晾干,活化后使用。

薄层色谱法标准操作规程

薄层色谱法标准操作规程

薄层色谱法标准操作规程依据:《中华人民共和国药典》2000年版二部。

内容:1 简述:薄层色谱法,是将适宜的固定相涂布于玻璃板上,成一均匀薄层。

等点样、展开后,与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比,用以进行药品的鉴别,杂质检查或含量测定的方法。

2 仪器与材料:2.1 玻板:除另有规定外,用5cm×20cm,10cm×20cm或20cm×20cm的规格,要求光滑,平整、洗净后的不附水珠,晾干。

2.2 固定相或载体:最常用的有硅胶G、硅胶GF、硅胶H、硅胶HF254,其次有硅藻土、硅藻土G、氧化铝、氧化铝G、微晶纤维素、微晶纤维素F254等。

其颗粒大小,一般要求直径为10—40µm。

薄层涂布,一般可分无粘合剂和含粘合剂两种;前者系将固定相直接涂布于玻璃板上,后者系在固定相中加入一定量的粘合剂,一般常用10—15%煅石膏(CaSO4·2H2O在140℃烘4小时),混匀后加水适量使用,或用羧甲基纤维素钠水溶液(0.5—0.7%)适量调成糊状,均匀涂布于玻璃板上。

也有含一定展开液或缓冲液的薄层。

2.3 涂布器:应能使固定相或载体在玻璃板上涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。

2.4 点样器:常用具支架的微量注射器或定时毛细管,应能使点样位置正确集中。

2.5 展开室:应使用适合薄层板大小的玻璃制薄层色谱展开缸,并有严密盖子,除另有规定外,底部应平整光滑,应便于观察。

3 操作方法:3.1 薄层板制备:除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的泡后,倒入涂布器中,在玻璃板上平稳地移动涂布器进行涂布(厚度为0.2—0.3mm),取下涂好薄层的玻璃板,置水平台上于室温下晾干,后在110℃烘30分钟。

即置有干燥剂的干燥箱中备用。

使用前检查其均匀度(可通过透射光和反射光检视)。

3.2 点样:除另有规定外,用点样器点样于薄层板上,一般为圆点,点样基线距底边 2.0cm,点样直径为2——4mm,点间距离约为1.5—2.0cm,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。

薄层色谱法注意事项

薄层色谱法注意事项

薄层色谱法注意事项薄层色谱法是一种常用的化学分析技术,用于分离、鉴定和定量分析化合物。

在进行薄层色谱实验时,需要注意以下几点:1. 实验前准备:在进行薄层色谱实验之前,应先准备好所需的试剂、溶剂、色谱板和开发室等实验器材。

同时,要确保色谱板的纯净度和质量良好,避免板上有杂质或损坏。

2. 样品的处理:样品在进行薄层色谱之前需要进行合适的处理,如提取、纯化等操作。

样品的处理要严格控制条件,避免产生不必要的干扰物。

3. 色层施加:色层施加是薄层色谱实验的关键步骤,要注意施加的均匀性和厚度的控制。

色层应均匀地覆盖在色谱板上,厚度一般为0.1-0.3毫米。

施加色层时要避免过程中的振荡或晃动,以确保色层的平整度。

4. 试剂的选择:在进行薄层色谱实验时,要根据不同的分析目的选择适当的试剂和溶剂。

试剂和溶剂的选择要有一定的理论基础,避免对被测物质产生干扰或损坏。

5. 开发条件的控制:开发是薄层色谱的重要步骤,要控制好开发室的湿度和温度。

湿度和温度的变化会影响色层的分离效果,因此要保持开发室的相对稳定。

6. 结果的解读:薄层色谱实验得到的结果需要进行正确的解读和分析。

需要注意结合实验数据和色谱数据来对结果进行推断和判断,避免因误解结果而导致错误的结论。

7. 安全操作:在进行薄层色谱实验时,要注意安全操作,避免接触有毒、易燃、腐蚀性的物质。

实验时要佩戴适当的防护装备,如实验手套、护目镜等。

总之,薄层色谱法是一种常用的化学分析技术,能够在短时间内对混合物进行分离和鉴定。

在进行实验时,注意以上几点,可以保证实验结果的准确性和可靠性。

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薄层色谱操作注意事项
影响薄层色谱分析的因素有很多,比如样品处理方法、薄层板制备技巧、点样方法、展开剂的遴选、温湿度的掌控等等很多方面,在这里对其操作要点作一下简单介绍:
1铺制薄层板:铺板用的匀浆不宜过稠或过稀:过稠,板容易出现拖动或停顿造成的层纹;过稀,水蒸发后,板表面较粗糙。

匀浆配比一般是硅胶G:水=1:2~3,硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。

研磨匀浆的时间,根据经验来定,与空气湿度有关,一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断,越稠越难下滴。

匀浆的稀稠除影响板的平滑外,也影响板涂层的厚度,进一步影响上样量。

涂层薄,点样易过载;涂层厚,显色不那么明显。

通常,板的质量对薄层鉴别的影响不是很大,影响最大的是展开剂的配制和展开系统的饱和。

2点样:尽量用小的点样管。

如果有足够的耐性,最好只用1微升的点样管。

这样,点的斑点较小,展开的色谱图分离度好,颜色分明。

样品溶液的含水量越小越好,样品溶液含水量大,点样斑点扩散大。

样品溶液的溶剂一般是无水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。

点好样的薄层板用电吹风的热风吹干或放入干燥器里晾干。

薄层色谱用于定量时,点样是最主要的误差来源。

供试液的溶剂均有不同程度的洗脱力,所以在点样的同时,样品在原点就可是成环形展开,原点直径的扩散促进了这种展开,Kaiser称之为“上样环形色谱效应”。

如果样品在溶剂中的溶解度很大,原点将变成空心环。

这种效应对随后的先行展开造成很不利的影响。

供试液的溶剂在原点的残留,也会改变展开的选择性,特别是供试液的溶剂与展开剂的极性相差较大时更明显。

再者,亲水性溶剂残留在原点吸收大气中的水分(特别在高湿度环境)对色谱的影响也不可低估。

因此点样时的同步干燥或继后干燥以除去原点残存的溶剂是需要的。

但应尽可能避免高温加热,如用吹风筒加热,样品变为固态后,部分或全部强烈的吸附在吸附剂的颗粒上,而促进了硅胶的有催化作用的活性表面故态化学反应,导致样品的变性(尤其热不稳定物质),至少移动相在展开时对这部分样品的溶解速度比移动速度慢得多而形成拖尾(斑点拖尾的原因之一)。

3 展开剂配制选择合适的量器把各组成溶剂移入分液漏斗,强烈振摇使混合液充分混匀,放置,如果分层,取用体积大的一层作为展开剂。

绝对不应该把各组成溶液倒入展开缸,振摇展开缸来配制展开剂。

混合不均匀和没有分液的展开剂,会造成层析的完全失败。

各组成溶剂的比例准确度对不同的分析任务有不同的要求,尽量达到实验室仪器的最高精确度,比如:取1ml的溶剂,应使用1ml 的单标移液管,移液管应符合计量认证要求,尽管多数时候这不是必须的。

4 展开系统的饱和
一般使用的是双槽的展开缸,一槽用来放展开剂,另一槽可加入氨水或硫酸。

把待展开的板放入两槽间的平台,斜架着,盖上展开缸的盖子。

让展开剂的蒸气充满展开缸,并使薄层板吸附蒸气达到饱和,防止边沿效应,饱和时间在半个小时左右。

展开时难免要打开盖子把薄层板放入展开剂中,不过对薄层板与蒸气的吸附平衡影响不大,当然动作应该尽量轻、快。

5 温湿度的控制
温湿度对薄层影响都很大。

不冻结的前提下,通常温度越低分离越好,较难的分离需在低温下分离,例如人参皂苷。

湿度的影响,估计主要是影响薄层板的吸附能力,导致选择性(容量因子)的变化,湿度应根据实际情况确定。

温度控制使用空调器或冰柜,湿度控制是通过在另一展开槽放置相应浓度的硫酸。

6 TLC通用显色方法
通用显色方法主要有:
1、紫外照射法:方便、不破坏样品;
2、碘蒸气法:通用性强,与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用;
3、荧光试剂:制造荧光背景,使原来紫外下无荧光物质被鉴别,有荧光物质更明显;
4、硫酸溶剂:对绝大多数有机物有效,但有破坏性。

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