高效液相色谱仪使用注意事项-2016
高效液相色谱仪的使用注意事项
高效液相色谱仪的使用注意事项
1.使用前须确定操作者是否具有色谱仪操作资格，如未具有资格，应在专业人士的指导下使用。
2.首次使用前，应检查仪器性能是否正常，适当调整参数，以达到最佳操作状态。
3.使用过程中，应注意仪器的安全，避免过热、过压及调节参数超出正常范围，避免仪器受损。
4.样品质控，应定期使用标准品或有关物质进行质控，确保测试精度。
5.操作时应熟练掌握仪器操作流程，以防误操作。
6.应及时更换仪器液体及耗材，以确保实验准确。
7.使用后，应将仪器关闭，安全放置，勿放在水源附近或潮湿环境中。
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高效液相色谱仪使用注意事项
岛津液相色谱仪使用注意事项1.流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。
2.流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。
3.不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。
4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。
对于柱塞杆外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。
5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水易长霉。
6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。
7.C18柱绝对不能进蛋白样品，血样、生物样品。
8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。
清洗方法；①以异丙醇作溶剂冲洗：②放在异丙醇中间用超声波清洗；⑧用10％稀硝酸清洗。
9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。
10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动相的清洗。
11.要注意柱子的pH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。
12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗，然后插入新的流动相中。
更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。
液相色谱柱使用经验谈色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。
但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。
1、样品的前处理：a、最好使用流动相溶解样品。
b、使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c、使用0.45µm的过滤膜过滤除去微粒杂质。
(完整版)高效液相色谱仪使用注意事项-2016
岛津液相色谱仪使用注意事项1.流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。
2.流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。
3.不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。
4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。
对于柱塞杆外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。
5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水易长霉。
6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。
7.C18柱绝对不能进蛋白样品，血样、生物样品。
8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。
清洗方法；①以异丙醇作溶剂冲洗：②放在异丙醇中间用超声波清洗；⑧用10％稀硝酸清洗。
9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。
10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动相的清洗。
11.要注意柱子的pH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。
12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗，然后插入新的流动相中。
更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。
液相色谱柱使用经验谈色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。
但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。
1、样品的前处理：a、最好使用流动相溶解样品。
b、使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c、使用0.45µm的过滤膜过滤除去微粒杂质。
高效液相色谱仪使用中应注意的几点问题
高效液相色谱仪使用中应注意的问题：
1. 柱温控制：高效液相色谱仪通常需要在一定的温度下进行分析，因此使用过程中需要确保柱温控制系统稳定，并按照要求设置适当的柱温。
2. 流速控制：在使用高效液相色谱仪时，需要准确控制流速以保证分离效果。
不同的分析条件有不同的最佳流速范围，因此在实验前要进行流速校正并按需调节。
3. 样品准备：样品准备是影响分析结果的重要环节，需要确保样品充分溶解，可以使用适当的溶剂和溶解条件。
同时，在样品准备过程中要注意避免造成杂质的污染。
4. 使用试管的问题：注意试管的洁净问题，如果使用不洁净的试管会影响试验结果的准确性；注意塑料试管的溶解问题，有些有机溶剂可能会对管壁有溶解现象；注意被测样品在试管壁上的吸附问题，有些药物可能会吸附在玻璃试管的管壁上。
高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
高效液相色谱仪的操作流程和注意事项引言：高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种重要的分析仪器，广泛应用于化学、生物、医药等领域。
掌握正确的操作流程和注意事项，对保证分析的准确性和结果的可靠性至关重要。
下面将详细介绍高效液相色谱仪的操作流程和注意事项。
一、仪器准备在开始操作高效液相色谱仪之前，需要进行一些准备工作。
首先，检查仪器是否正常工作，例如电源是否正常接通，各个模块是否连接牢固等。
其次，确保色谱柱处于良好的工作状态，即没有泄漏和堵塞等问题。
最后，根据需要，选择合适的检测器，并校准相应的参数。
二、样品准备和进样样品的准备是操作高效液相色谱仪的关键一步。
首先，根据样品的性质选择合适的溶剂体系，并将样品完全溶解。
其次，为了提高分析的准确性，通常需要对样品进行预处理，例如磷酸酯酶的样品需要经过脱磷酸处理。
最后，将样品装入进样瓶中，根据仪器的要求设定进样量。
三、流动相的选择和准备流动相是高效液相色谱仪中的关键因素之一。
在选择流动相时，需要考虑样品的性质以及分析的目的。
常见的流动相包括有机溶剂、水以及它们的混合溶液。
在选择后，需要准备流动相，并进行除气处理以去除气泡。
此外，还要注意流动相的质量，例如pH值、浓度等。
四、色谱条件的设置色谱条件是操作高效液相色谱仪的关键之一。
根据分析的目的和样品的性质，需要设置合适的参数，例如流速、温度、梯度等。
在设置前，需要根据样品性质选择合适的色谱柱，并设定相应的温度以优化分离效果。
此外，还需要根据检测器的要求设定相应的参数。
五、数据采集和结果分析在操作高效液相色谱仪时，需要进行数据采集和结果分析。
首先，确保数据采集系统正常工作，并根据仪器的要求进行设定。
其次，启动数据采集并进行监控，及时记录实验过程中的各项指标。
最后，对采集的数据进行处理和分析，例如峰面积的计算、峰形的分析等。
注意事项：1. 严格按照操作流程进行操作，避免任意更改设置。
高效液相色谱仪在使用和维护中的注意事项
高效液相色谱仪在使用和维护中的注意事项高效液相色谱仪（HPLC）是一种常见的分析仪器，用于分离、检测和定量化合物。
在使用和维护HPLC时，需要注意以下几点：1. 样品处理在样品处理过程中，必须避免样品受到污染，否则会影响分析的准确性。
因此，在样品的制备和处理过程中应该使用高质量的试剂和纯水，并避免使用有机溶剂和其他可能对分析产生干扰的物质。
2. 色谱柱选择选择合适的色谱柱是非常重要的，因为不同的色谱柱会对分析结果产生影响。
在选择色谱柱时，应该考虑要分析的样品和分离的目标化合物，以及柱的反相、离子交换、凝胶过滤等不同类型。
3. 溶液配制HPLC中的溶液应该严格按照配方进行配制，以确保分析结果的准确性。
溶液中可能存在的离子、杂质或气泡都会对流速、峰形和灵敏度产生影响。
4. 色谱条件在进行分析时，需要根据样品和柱的特性，选择适当的流速、洗脱剂和温度等条件。
这些条件对分析结果的准确性和分离效率都有很大的影响。
5. 维护和保养为了保证仪器的长期稳定和良好工作状态，需要定期进行维护和保养。
维护包括冷却系统、压力检测、检测器等组件的检查和清洗。
保养包括柱的定期调整和更换、溶液的更换等。
在使用和维护HPLC时，需要严格按照实验室规程操作，注意安全和环保，并做好记录和统计分析工作。
只有保证仪器操作正确、保养到位，才能获得准确、可重复的分析结果。
6. 检测器选择HPLC检测器的选择对分析结果的准确性和可重复性起着至关重要的作用。
常用的检测器包括紫外线（UV）检测器、荧光检测器、电化学检测器等。
根据需要分析的化合物的性质进行选择。
7. 校正和标定在使用HPLC进行分析之前，必须进行校正和标定，以确保分析结果的准确性。
校正过程中通常涉及标准曲线的制备、内标物的选择和添加等。
8. 数据照实记录HPLC分析结果的准确性需要依赖于实验数据的准确记录。
在使用过程中应保持谨慎和可重复性，制定实验方案，不断记录实验数据，并评估结果的准确性。
实验室高效液相色谱安全使用及注意事项
实验室高效液相色谱安全使用及注意事项高效液相色谱是一种非常常用的分析技术，广泛应用于化学、生物、医药等领域。
在实验室中使用高效液相色谱需要注意一些安全问题，本文将介绍高效液相色谱的使用方法以及注意事项，以帮助实验室工作者更好地使用高效液相色谱。
一、高效液相色谱的使用方法1. 实验前准备在进行高效液相色谱实验前，需要进行一些准备工作。
首先，要检查设备是否正常工作，包括系统的泵、检测器、进样器、柱等是否工作正常。
其次，要检查试剂的浓度和纯度是否符合要求。
最后，要准备好实验所需的溶液和样品，并按照实验要求进行处理和标记。
2. 操作步骤高效液相色谱的操作步骤包括：样品进样、柱温控制、流动相控制、检测器设置等。
具体步骤如下：（1）样品进样将样品注入进样器中，注意不要超出进样器的容积范围。
（2）柱温控制根据实验要求设置柱温，通常情况下柱温为室温或略高于室温。
（3）流动相控制设置合适的流动相组合和流速，以达到最佳分离效果。
（4）检测器设置根据实验要求选择合适的检测器，比如紫外检测器、荧光检测器等，并设置检测器的参数，如波长、灵敏度等。
3. 实验后处理实验结束后，需要对设备和试剂进行清洗和储存。
首先，要将进样器和柱进行清洗，以避免残留样品和流动相对下一次实验的影响。
其次，要将检测器进行清洗和维护，以保证检测器的正常工作。
最后，要妥善储存试剂和设备，以便下一次实验使用。
二、高效液相色谱的注意事项1. 实验室安全在使用高效液相色谱时，需要注意实验室的安全问题。
首先，要穿戴好实验室所需的防护设备，如实验服、手套、护目镜等。
其次，要保持实验室的整洁和干净，避免化学品的混合和交叉污染。
最后，要遵守实验室的规定和操作程序，以确保实验室的安全。
2. 操作注意事项在进行高效液相色谱实验时，需要注意以下几个方面：（1）样品的选择和准备在选择样品时，要注意样品的性质和纯度，以避免对实验结果的影响。
同时，要进行适当的样品处理和标记，以确保样品的准确性和可靠性。
高效液相色谱仪操作注意事项
随着药品检验设备的不断增加，各个地方药品检验所都配备了上海睿析科学仪器生产的高效液相色谱仪。
这也要求药品检验人员不断地提高对高效液相色谱仪的操作技术，高效液相色谱仪的寿命和合理正确的使用是分不开的，所以本人就实际工作中使用高效液相色谱仪时容易忽略的地方，总结几点建议供大家参考。
第一、流动相使用前必
须经脱气和过滤处理。
第二、避免流动相组成
及极性的剧烈变化。
当流动
相中含有缓冲溶液(酸，盐，
碱)，应该先用无缓冲流动相
(即把缓冲液换成水)冲洗
20～30min后,再更换强溶剂，
更换流动相时，流速应不超过0.5ml/min。
如果突然切换到高浓度有机溶剂，可能会使HPLC流动体系中的缓冲液沉淀，这样会导致更大的问题如柱头堵塞、管道堵塞、泵泄漏、活塞损伤或进样阀转轴失灵。
第三、如需要更换色谱柱，须对使用的色谱柱进行冲洗(如应用的流动相含有酸或无机盐，应当用20倍柱体积纯净水冲洗干净)、平衡后，保存在有机溶剂中。
第四、除特殊情况外，一般都应使用预保护柱。
如没有配置的在
取下色谱柱时，应立即将两端接头封口。
第五、样品在分析测试完毕后，须用90%水-10%有机溶剂混合液冲洗至少40min后，再用有机溶剂冲洗30min左右，最后将色谱柱保存在有机溶剂中。
第六、吸滤头每周用5%硝酸水溶液超声清洗1次。
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岛津液相色谱仪使用注意事项1.流动相必须用HPLC级的试剂，使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质(使用0.45um或更细的膜过滤)。
2.流动相过滤后要用超声波脱气，脱气后应该恢复到室温后使用。
3.不能用纯乙腈作为流动相，这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。
4.使用缓冲溶液时，做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时，然后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上，以充分洗去离子。
对于柱塞杆外部，做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。
5.长时间不用仪器，应该将柱子取下用堵头封好保存，注意不能用纯水保存柱子，而应该用有机相(如甲醇等)，因为纯水易长霉。
6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂清洗进样器。
7.C18柱绝对不能进蛋白样品，血样、生物样品。
8.堵塞导致压力太大，按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查并清洗。
清洗方法；①以异丙醇作溶剂冲洗：②放在异丙醇中间用超声波清洗；⑧用10％稀硝酸清洗。
9.气泡会致使压力不稳，重现性差，所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。
10.如果进液管内不进液体时，要使用注射器吸液：通常在输液前要进行流动相的清洗。
11.要注意柱子的pH值范围，不得注射强酸强碱的样品，特别是碱性样品。
12.更换流动相时应该先将吸滤头部分放入烧杯中边振动边靖洗，然后插入新的流动相中。
更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。
液相色谱柱使用经验谈色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。
但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。
1、样品的前处理：a、最好使用流动相溶解样品。
b、使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c、使用0.45µm的过滤膜过滤除去微粒杂质。
流动相的配制液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点：a、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。
b、流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。
c、流动相的黏度要尽量小，以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果；同时降低柱压降，延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。
d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。
如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。
e、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。
f、在流动相配制好后，一定要进行脱气。
除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。
3、流动相流速的选择：因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。
对于一根特定的色谱柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。
对内径为4.6mm的色谱柱，流速一般选择1ml／min，对于内径为4.0mm 柱，流速0.8ml／min为佳。
当选用最佳流速时，分析时间可能延长。
可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时，可适当增加甲醇或乙腈的含量)。
注意：a．由于甲醇廉价，对于反相柱推荐使用甲醇体系(必须使用乙腈的场合除外)。
b．对于正相柱推荐使用沸程为30-60℃的石油醚或提纯后的己烷作流动相，没有提纯的己烷不得使用。
用水最好使用超纯水(电阻率大于18兆欧)，去离子水及双蒸水中含有酚类杂质，有可能影响分析结果。
c．含水流动相最好在临实验前配制，尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要过夜。
最好加入叠氮化钠，防止细菌生长。
d．流动相要求使用0.45 µm滤膜过滤，除去微粒杂质。
e．使用HPLC级溶剂配制流动相，使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命，提高柱性能常见故障的断定及解决方法诊状可能的原因及解决方法(一)保留时间变化1.柱温变化柱恒温，必要时需配置恒温箱2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱3.缓冲液容量不够用》25mmol/L的缓冲液4.柱污染每天冲洗柱5.柱内条件变化稳定进样条件,调节流动相6.柱快达到寿命采用保护柱(二)保留时间缩短1.流速增加检查泵,重新设定流速2.样品超载降低样品量3.键合相流失流动相pH值保持在3~7.5，检查柱的方向4.流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀5.温度增加柱恒温(三)保留时间延长1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱质钝化柱3.键合相流失同前(二)34.流动相组成变化同前(二)45.温度降低同前(二)5(四) 出现肩峰或分叉1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%2.样品溶剂过强采用较弱的样品溶剂3.柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件4.柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品5.进样器损坏更换进样器转子(五)鬼峰1.进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗2.样品中未知物处理样品3.柱未平衡重新平衡柱,用流动相作样品溶剂 (尤其是离子对色谱)4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱) 每天新配,用抗氧化剂5.水污染(反相) 通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水(六) 基线噪声1.气泡(尖锐峰) 流动相脱气,加柱后背压2.污染(随机噪声) 清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂3.检测器灯连续噪声更换氘灯4.电干扰(偶然噪声) 采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)5.检测器中有气泡流动相脱气,加柱后背压(七)峰拖尾1.柱超载降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相2.峰干扰清洁样品,调整流动相3.硅羟基作用加三乙胺,用碱质钝化柱，增加缓冲液或盐的浓度，降低流动相pH值，钝化样品4.同前(四)4 同前(四)45.同前(四)3 5.同前(四)36.死体积或柱外体积过大连接点降至最低,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管7.柱效下降用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱(八)峰展宽1.进样体积过大同(四)12.在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散3.数据系统采样速率太慢设定速率应是每峰大于10点4.检测器时间常数过大设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%5.流动相粘度过高增加柱温,采用低粘度流动相6.检测池体积过大用小体积池,卸下热交换器7.保留时间过长等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱8.柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至最小9.样品过载进小浓度小体积样品液相色谱仪使用操作规程液相色谱仪使用操作规程总流程：超纯水冲洗柱——流动相分离样品——超纯水冲洗柱——纯乙睛保存柱1．电源准备打开稳压器电源开关，须待电压指示至 220V 后，才能开启其他有关设备。
2． HP1100 高效液相色谱仪的准备试剂：三氟乙酸乙腈(Fisher 公司产品色谱纯)超纯水(Millipore 超纯水)冰乙酸溶液配置：贮液瓶与流动相的准备A 液 0.1%三氟乙酸（三氟乙酸 1ml，超纯水 999ml）室温保存B 液 60%乙腈（乙腈 600ml，超纯水 400ml）室温保存样品液 0.01%乙酸（冰乙酸0.01ml，超纯水 100ml）室温保存泵头冲洗液：精滤后超纯水或者是 1%色谱纯甲醇室温保存注：贮液瓶应用超纯水清洗干净，备用。
流动相溶剂用洁净硼砂漏斗精滤除去微小颗粒。
操作者必须清楚并注明 A、B 贮液瓶盛装为何种溶剂。
冲洗泵头：用注射管于软塑料管末端抽吸至有水流出，调节流速开关控制流速为20-30drop/min.。
①流动相管道排气如果管道中气泡较多，可通过弹击管道，排除气泡，并逆时针旋转脱气泵活塞使其松动，用注射管于流动相出口的塑料管末端抽吸至管道内气泡排除完全。
操作时，我们通常已经打开了脱气机（气泡严重影响分离效果，所以观察管道中液体是否有气泡非常重要。
）②开机③进入 HP1100 操作系统a.双击 WIN-95 操作界面中左下角 Instrument 1 online 图标，进入HP1100 工作站软件操作界面。
单击工作站操作界面上方 Run control 菜单，在下拉菜单中找到 Sample Info 子菜单，单击。
在 Sample Info 信息框内定义操作者、样品前缀及编号、保存路径等参数。
在保存路径项下，将可定义子目录分别输入操作者拼音缩写，以方便检索时互不干扰。
b.等待工作站操作界面中泵、柱温箱、检测器各指示图标由灰色转变为绿色后，单击泵、检测器各图标可从其各自弹出的菜单中设定流动相各溶剂比例、流速等。
（1）流速通常为 1ml/min。
检测波长通常为 280，或者 254nm。
（2） A 液设置为 100%，运行 15-30 分钟（目的是色谱柱的预平衡），观察基线走势，基线应为直线，通过单击“Balance”键可将基线调至零点。
待基线平稳后可进样。
（3）调整 A 液为 0，B 液为 100%再运行 60 分钟（此时乙腈实际浓度为 60%）（4）在 A 液冲洗同时进行进样环的冲洗：用 500μl 的针样注射器，在 load 状态，注入超纯水 500μl。
（反复三次，若是 20μl 进样环，则加入 20μl 以上，多余的水可废液管流出。
通常同一样品上样 30 次后应冲洗进样环，如果不同样品，最好，每次上样前均进行冲洗。
）（5）吸取一定量可直接进样的样品溶液（上样液最好用滤器滤过），将进样阀逆时针旋至Load 档，将进样针从进样孔处水平推入，按进样器活塞将样品溶液注射入进样环后，立即将进样阀顺时针方向旋至 Inject 档，与此同时，数据开始自动收集。
（6）此时样品分析已经完成。
在 HP1100 主操作界面的检测器图标，关闭检测器，然后关闭色谱仪主机检测器开关（目的是延长检测器寿命）。
将 B 通道调为 0，A 通道调为 100%，即 A 液冲洗色谱柱约 10-30min。
用 A 液续冲洗色谱柱约 10-30m（目的是冲出柱内残留的杂质）（7） A 通道换为 C 通道（100%乙腈）续冲洗色柱约 10-30min。
（目的主要为保护柱）④数据记录的终止与保存电脑将自动收集并保存数据，终止运行后，将自动弹出数据框，或者可通过 DATA ANALYSIS菜单，调出资料。
3．图谱处理4．关机1） HP1100 的关闭在 HP1100 的主操作界面上分别单击关闭泵、检测器图标，或通过菜单关闭。
然后，单击HP1100 的主操作界面右上方“X”，退出 Instrument 1 online 程序，返回至 WIN-95 操作界面。
单击左下角“Start”菜单，单击“Shut down”,等待关机，待出现“Restart”提示后，按电脑主机电源键，关闭电脑主机及显示器。