PCR仪操作方法
PCR仪标准操作规程

PCR仪标准操作规程一、操作程序(一)开始运行仪器插上MyCycler的电源,仪器会自动开始运行一个快速的自检步骤。
当自检步骤结束后,显示屏上显示主屏幕“Home Screen”。
在仪器前部面板上的一个发光二极管(LED)灯会发亮,提示仪器处于开机状态。
(二)使仪器进入待机“Standby Mode”状态当仪器打开时,按下面板上的待机“Standby Mode”键3秒。
如果此时仪器正处于空闲状态,仪器会进入待机“Standby Mode”状态;如果此时仪器正处于运行状态或处于修改程序并且未保存的状态,仪器会提示您进入待机“Standby Mode”状态前确认您的选择。
(三)运行一个储存过的程序1. 在主屏幕“Home Screen”状态下,按F1-Protocol Library键,可以显示菜单中已存的程序。
2. 使用方向键选择您所需要的程序,按回车“Enter”键。
3. 在选项中选择运行程序“Run Protocol”。
4. 在运行设置“Run Setup”屏中确认您的选择。
您可以指定温控模式“temperaturemeasurement mode”,或者在运行程序前包括或不包括一个热启动“Hot Start”步骤。
(四)创建一个新的程序1. 在主屏幕“Home Screen”状态下,按F2-Create键,可以显示菜单中已有的程序模板。
2. 选择一个预编好的模板程序来修改,或者在选项中选择“Custom”选项,按回车“Enter”键。
程序中可编辑的地方可以通过使用方向键和数字键来修改:如果要添加或删除Step或Cycle,按F4-Add/Del键。
如果要做时间或温度的递增或递减,移动指示符到要调节的时间或温度上,按F3-Option。
3. 当您完成修改后按F5-Done在选项栏中选择“Run Protocol”来在不保存的情况下直接运行被修改过的程序。
在选项栏中选择“Save Protocol”或“Save Protocol as…”来在运行之前保存您的修改。
PCR仪器的使用及注意事项

PCR仪器的使用及注意事项PCR仪器(聚合酶链式反应仪)是用于在体外合成DNA的关键仪器,其具有高灵敏度、高特异性和高效率的特点。
在科研领域,PCR仪器被广泛应用于基因克隆、基因表达分析、基因突变分析等实验中。
本文将介绍PCR仪器的使用方法及注意事项。
1.使用方法(1)准备样品:将需要进行PCR的DNA模板、引物、dNTPs和聚合酶按照配比加入PCR反应管中,并确保样品完全溶解。
(2)设置PCR程序:根据实验需要设置PCR程序,包括温度梯度、循环次数等参数。
(3)装载PCR反应管:将混合好的PCR反应管放入PCR仪器的样品槽中,注意不要产生气泡。
(4)运行PCR程序:启动PCR程序,跟踪反应过程中的温度变化,确保程序正常运行。
(5)分析PCR产物:将PCR产物进行电泳分析或其他实验操作,检查PCR反应的效果。
2.注意事项(1)严格遵守无菌操作规范:在进行PCR实验前,必须保证实验操作环境和操作工具的无菌干净,以防止外源DNA的污染影响PCR反应结果。
(2)避免反应管交叉污染:在操作PCR反应管时,要避免反应液的溅出和反应管之间的交叉接触,保持每个反应管的PCR反应独立进行。
(3)严格控制温度:PCR反应的温度是影响反应结果的重要因素,必须严格控制PCR仪器的温度梯度和循环次数,避免因温度波动导致PCR 反应不稳定。
(4)避免电泳误判:在对PCR产物进行电泳分析时,要注意区分PCR产物和非特异产物,避免因PCR产物的数量或大小而误判实验结果。
(5)及时清理PCR仪器:使用完PCR仪器后,要及时清理反应槽和反应管槽,避免因污染影响下次实验的结果。
总之,PCR仪器的正确使用方法和注意事项对实验结果的准确性和可靠性至关重要。
科研人员在使用PCR仪器时,务必严格遵守操作规范,保证实验操作的准确性和可重复性,从而获得稳定可靠的实验数据。
PCR技术的应用将为生物学、医学和其他领域的研究提供重要支持和帮助。
pcr仪操作规程

pcr仪操作规程PCR仪操作规程一、实验前准备1. 确保PCR仪及其相关设备工作正常,温度控制准确。
2. 检查所需试剂和试验用品是否齐全,并确保其完好无损。
3. 充分准备好所需样品和试剂。
二、实验操作步骤1. 打开PCR仪电源,将仪器温度设置为所需温度。
2. 准备PCR试管,根据实验需要选择合适的试管尺寸和材质。
3. 将待测样品转移到试管中,确保样品转移时避免污染。
4. 加入适量的引物、模板DNA和酶,确保试管中各组分加入正确。
5. 轻轻混匀试管中的液体,尽量避免产生气泡。
6. 紧贴试管盖,将试管放入PCR仪保护套中,确保密封。
7. 将试管架放入PCR仪中,确保试管数量合适,不要过多或过少。
8. 关上PCR仪盖,开始PCR扩增反应。
三、PCR程序设置1. 打开PCR仪操作面板,选择“PCR”模式。
2. 设定所需的扩增程序参数,包括温度和时间等。
3. 设置好反应程序后,按下“开始”按钮,启动PCR 反应。
四、PCR扩增反应1. PCR反应过程中要保持实验环境的干净和整洁,避免污染。
2. 定时观察PCR反应状态,确保仪器温度控制准确。
3. 扩增反应完成后,关闭PCR仪电源,停止反应。
五、PCR反应后处理1. 打开PCR仪盖,将试管从仪器中取出。
2. 迅速将试管放入冰浴中,以停止反应。
3. 根据实验需要,可进行进一步的处理,如电泳分析或提取目标产物等。
六、实验结束后1. 清洗PCR试管,避免残留物的污染。
2. 关闭PCR仪电源,确保仪器处于安全状态。
3. 整理实验台面,注意清理实验区域,保持实验环境的清洁。
七、实验数据记录与分析1. 记录实验过程中的相关数据,如PCR仪设置温度、反应时间等。
2. 对实验结果进行分析和解读,根据需要进行数据处理和统计。
八、实验安全注意事项1. 在实验过程中要注意个人防护,佩戴实验手套、实验服等。
2. 注意对PCR试管的正确处理和处置,避免造成污染和危险。
3. 遵守实验室规范,注意实验场所的卫生和安全。
PCR仪(使用方法)

PCR仪
操作指南
一、开机
连接电源线后,打开机器后部的主开关(在机器的左下角)。
开机后机器进行自检“Self Test”,自检结束后出现用户主界面,显示加热模块“Block”格式和温度“Temp”和热盖温度“Lid”,在屏幕左上角显示“Ready”。
二、程序设置
1.建立新程序
按“File”→“New”→“Program”,进入一个编辑窗口输入程序名称按“Enter”键确认,之后进入程序编辑器;在“Header”中设置热盖的参数,输入温度和压力,温度默认值为96℃,一般设置为99℃,如变性温度较低时默认值也可以满足使用要求,压力默认值为90N。
按“Step”设置PCR循环在“Temp”中输入温度后按“Enter”,“Time”中输入时间按“Enter”,依次编辑步骤。
输入“Goto”要返回的步骤序号,形成PCR 循环,输入循环数。
2.编辑模板程序
按“File”→“Edit”→“Program”,进入编辑窗口后按“Edit”键开始修改程序,修改完毕后按“Save”键保存后关闭该窗口返回主界面。
三、运行程序
程序设置好后,按“Run”+“Start”,打开一个子窗口选择要运行的程序(最后一次修改的程序将自动被选中),确认选择的程序后按“Start Now”开始运行程序。
四、暂停与终止
如果要暂停或终止正在运行的程序,按“Run”+“Pause”或“Run”+“Stop now”,暂停后要继续原来的程序按“Run”+“Continue”。
五、关机
程序运行结束后,界面返回至主菜单。
关闭仪器后部的主开关。
PCR仪操作规程

PCR仪操作规程一、PCR仪的准备工作1.将PCR仪放置在坚固平稳的工作台上。
2.确保PCR仪能够正常通电,并连接稳定的电源。
3.检查PCR仪是否有足够的耗材,如:PCR试剂盒、PCR板、PCR管等。
4.确保PCR仪的外壳干净整洁,无尘。
5.检查PCR仪的温控系统是否正常运作,温度探头是否正确连接。
二、程序设置1.打开PCR仪的电源,等待仪器启动。
2.进入PCR仪的操作界面,在设置中选择需要运行的PCR程序。
3.设置PCR程序的相关参数,包括:反应体系、产物大小、温控方式、梯度设置等。
4.确认无误后,保存设置。
三、样本处理1.根据实验需求,准备所需的样本和试剂。
2.将待测样本和控制样本分别加入PCR管中,并按照试剂盒说明书的要求,分别加入PCR试剂。
3.小心混匀,避免产生气泡。
4.使用电动移液器,将样品转移到PCR板的相应孔中。
5.确保试管盖扣紧并密封,避免蒸发和污染。
四、样品放置1.使用PCR板架,将PCR板放入PCR仪中。
2.确保PCR板放置稳定,不晃动。
3.在关闭仪器时,检查所有的孔位是否已经满。
4.根据实验要求选择合适的PCR模式。
五、运行PCR程序1.确保PCR仪处于关机状态,将PCR板放入PCR仪中。
2.关闭PCR仪的盖子,并轻轻按下,确保盖子紧密贴合。
3.打开PCR仪的电源,启动PCR程序。
4.开始运行程序后,定期检查PCR仪的运行状态,确保温度的稳定和反应的正常进行。
5.在PCR反应过程中不要移动或震动PCR仪。
6.必要时对PCR反应进行监测,可使用实时荧光PCR功能。
六、PCR反应后处理1.PCR反应结束后,停止PCR程序运行。
2.打开PCR仪盖子,取出PCR板。
3.将PCR板置于洗涤台上,进行样本的后续处理。
4.根据实验要求,可以选择对PCR产物进行凝胶电泳分析或进一步测序。
七、清洁和维护1.每次使用后,将PCR仪的工作台面、盖子等部位用75%乙醇擦拭干净。
2.定期清洁PCR仪的内部,检查温控系统的工作情况。
EPPENDORFPCR仪简易操作说明

EPPENDORF PCR仪简易操作说明1、打开仪器的电源开关,仪器显示完软件版本号及型号后,进入主菜单(如下图)。
2、新建、编辑程序1)新建程序:在Main-Menu主菜单下通过光标移动键移动光标到FILES菜单上,按ENTERN 键进入,在FILES子菜单下选择STANDAND按ENTERN确认,即可将STANDARD标准程序调用修改,修改完后可另存为其它程序名(也可选择NEW子菜单建立全新的程序)。
如下图:在上图界面上,移动光标到BLOCK选项上,通过SEL键选择BLOCK(对热模块进入温控)或TUBE(对样品管温控),再将光标移到LID,设置热盖温度为103度。
NOWAIT和AUTO 同BLOCK选项一样的设置过程。
再将光标下移到空格行,按一次SEL键,出现1 T=* *,将光标移到*上设置温度,再将光标后移设置时间,再将光标下移设置下一个温度过程;若要在该步温度下设置温度或时间递增或递减条件,则将光标移动该语句行号的正下方,按再OPTION键,即可设置递增或递减条件;若程序中需要循环语句,则可反复按SEL键直至出现GOTO ** REP **,设置返回到第几步共有多少个循环(目标循环数减1),依此类推设置完整个程序即可。
程序保存:设置完程序后按EXIT键退出程序,仪器将提示是否保存程序,通过SEL键选择YES,再给程序取个名称,先用光标移动键移动原程序名称上,用DELE键逐个删除原名称名称,输入新的程序名称(名称中通过反复按SEL键可输入字母),最后按ENTERN保存程序。
2)编辑程序同上过程。
3)在Main-Menu主菜单下选择DELE按ENTERN进入删除程序界面,用光标移动键选择需要删除的程序,再按ENTERN键即可删除程序。
4)在Main-Menu主菜单下选择START子菜单,通过光标移动键选择需要运行的程序,按START键即可运行该程序。
5)程序运行过程中可按OPTION键显示程序运行时间及结束时间(只显示5秒钟)。
PCR仪操作指南

PCR仪操作指南
引言:
PCR(聚合酶链反应)是一种常用的分子生物学技术,用于检测和扩
增特定DNA序列。
PCR仪是进行PCR实验的必备设备之一,本操作指南将
详细介绍PCR仪的使用流程和操作注意事项,旨在帮助使用者正确操作PCR仪,提高实验的成功率。
一、实验前的准备工作:
1.根据实验需要,选择合适的引物,设计PCR反应体系。
2.准备好PCR反应物,包括DNA模板、引物、核酸酶、脱氧核苷酸三
磷酸、聚合酶等。
3.根据PCR仪的使用手册,检查设备的工作状态,保证设备正常运行。
4.准备PCR反应管,确保干净无污染。
二、操作步骤:
1.打开PCR仪电源,启动设备。
根据使用手册,设置合适的温度和时
间参数,并选择合适的热启动模式(立即开始或延迟开始)。
2. 调整PCR仪的温度设置。
根据PCR实验需要,设置热循环的温度
范围和时间参数,包括Denaturation(变性)、Annealing(退火)和Extension(延伸)步骤的温度和时间。
3. 预热PCR仪至所需的初始温度。
根据实验需要,将PCR仪的温度
调整至Denaturation步骤所需的温度(通常为95℃)。
4.添加PCR反应物至PCR反应管中。
按照预先设计的PCR反应体系,
将DNA模板、引物、核酸酶、脱氧核苷酸三磷酸、聚合酶等加入PCR反应
管中。
5.将PCR反应管放置在PCR仪的样品架中。
确保PCR反应管放置稳定,避免管内反应物溢出。
6.关闭PCR仪的上盖。
PCR仪的使用步骤及原理

PCR仪的使用步骤及原理引言聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,简称PCR)是一种在分子生物学研究中广泛应用的技术。
PCR仪作为PCR操作的关键工具,能够快速无误地扩增目标DNA 序列,为科学研究和临床诊断提供了重要的支持。
本文将介绍PCR仪的使用步骤及原理。
PCR仪的使用步骤以下是PCR仪的使用步骤:步骤一:准备反应体系1.准备PCR反应液,包括DNA模板、引物、核酸酶、缓冲液等。
2.将反应液分配到PCR试管中,确保每个试管的反应体系一致。
3.在一个试管中加入水作为空白对照。
步骤二:设置PCR仪的程序1.打开PCR仪,确保仪器处于正常工作状态。
2.设置PCR仪的反应程序,包括温度、时间等参数。
根据不同的PCR实验设计,设置合适的程序。
步骤三:装载样品1.将准备好的PCR试管放置在PCR仪的样品架上。
2.检查样品架是否放置正确,确保试管紧密接触PCR仪的加热块。
步骤四:运行PCR程序1.关闭PCR仪的盖子,启动程序运行。
2.PCR仪将根据设定的程序依次进行加热、变性、退火和延伸等反应步骤。
3.在PCR反应结束后,PCR仪会保持在设定温度,以保持PCR产物的稳定。
步骤五:PCR产物分析1.关闭PCR仪的电源,打开PCR试管。
2.可通过凝胶电泳、PCR产物可视化试剂等方法对PCR产物进行分析。
3.根据实验需求,进一步处理PCR产物。
PCR仪的原理PCR仪采用了温度循环技术,利用特定的酶(聚合酶)和核酸引物来引导DNA链的复制。
其原理主要包括以下三个步骤:1.变性(Denaturation):通过升高温度(通常为95℃),使DNA双链分离成两条单链DNA。
2.引物结合(Annealing):降低温度(通常为55-60℃),使引物与目标序列的单链DNA互补结合。
3.延伸(Extension):增加温度(通常为72℃),使聚合酶在引物的引导下合成新的DNA链。
通过不断重复这三个步骤,PCR仪可以在短时间内扩增特定的DNA序列。
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美国伯乐公司MyCycler PCR仪操作步骤:
1.接通电源,打开开关,如果仪器处于备用状态,可直接按显示屏上的standby键,在通过一个快速自动诊断程序后,初始界面将会出现。
2.按F2键,初始界面上将会出现选择菜单。
3.选择“Custom”项,并按Enter键以建立新的运行程序。
如果菜单已有的程序与你需要的程序相近,那么你也可以在选择菜单对已有的模板程序进行编辑。
4.编辑运行程序:
仪器默设的运行程序有3个简单的步骤组成。
95℃30秒,55℃30秒,72℃0秒。
你将根据需要按如下步骤更改。
(1)按F4键增加或删除部分步骤,注意竖线把不同的循环周期搁开,正在运行的循环次数在第一次循环的左下脚标出。
(2)采用方向键在不同的步骤之间转换,调定点温度将显示在温度曲线上方。
相反运行时间将显示在温度曲线下方。
循环次数将在每一个循环最后一步的右下角,后跟随“x”符号。
(3)在用方向键选择要更改的温度调定点以及运行时间后,按F3,选择要更改的操作,此时会弹出一个新的界面,在此界面下,可以输入所需的时间或温度。
(4)程序编辑完成后按F5。
5.在选择菜单中点“Save Protocol As…”保存编辑程序,以字母与数字组合命名。
然后按Enter键完成操作。
6.此时初始界面会出现,按F1键进入程序储存库,用箭头键选择你新编辑的程序,随后按Enter键,将会出现一个选择菜单。
选择“Run Protocol”
7.随之出现运行方案界面。
提示是否想热启动(如果你选择“YES”将会进一步提示你所需要的热启动温度),如果你选择“Algorithmic Measurement”,界面上还会让你选择温度标准以及取样容积标准。
8.按F5开始运行程序。
9.运行完毕后按Stop键完成操作。