IAA检测应用
血清GAD-Ab、ICA、IAA联合检测在糖尿病诊断及分型中的意义
太和医院武当山分院内科
引言一
糖尿病是临床内分泌科常见的疾病，是由不同病因引起的胰岛素β
细胞胰岛素分泌不足和（或）周围组织细胞对胰岛素产生抵抗性或 耐受所致。
引言二
糖尿病是内分泌科的一种常见疾病。糖尿病的早期诊断和分型对其 治疗有着十分重要的意义。以往糖尿病的分型主要依据患者的临床 表现和血清胰岛素水平，但此分型方法对成人隐匿性免疫糖尿病不 容易察觉，因此具有一定的局限性。
引言三
近年来，随着糖尿病免疫标志物的出现，对糖尿病的临床分型又有 了新的依据。 GAD-Ab（谷氨酸脱羧酶抗体） ICA(胰岛β细胞抗体) IAA(胰岛素抗体)
GAD-Ab（谷氨酸脱羧酶抗体）
谷氨酸脱羧酶抗体是一种催化谷氨酸脱羧生成γ-氨基丁酸的酶。
Ⅰ型糖尿病是遗传易感人群通过自身抗原介导的免疫反应引起胰岛β细胞破坏 的自身免疫性疾病。
ICA(胰岛β细胞抗体)
ICA为胰岛β细胞所有抗体，是一种混合抗体。
ICA是胰岛β细胞特异性的胞浆抗体。
ICA会对胰岛β细胞的胞浆成分产生细胞毒效应。 在Ⅰ型糖尿病患者中存在一个可持续多年的特异的无症状的糖尿病前期，在这 个时期，潜在患者可表现出对口服或静脉注射葡萄糖的胰岛素早期释放反应产 生减退，而在这些个体中大多携带有循环的ICA。 70%的Ⅰ型糖尿病患者血清中存在ICA，但其存在时间较短，仅会出现在Ⅰ型糖 尿病的初期。 在Ⅰ型糖尿病患者中，ICA检出阳性率明显低于GAD-Ab检出阳性率。但ICA的阳 性能够预示β细胞的自身免疫损害，可作为糖尿病的高危指标。
谷氨酸脱羧酶是引发此免疫反应的始动靶抗原，能够抑制其引起的特异性自身 免疫反应，从而诱导免疫耐受。 GAD-Ab是Ⅰ型糖尿病特异性较强的免疫学指标，具有特异性强、敏感性高的特 点。 GAD-Ab是Ⅰ型糖尿病患者血清中最早出现的自身抗体，可在Ⅰ型糖尿病患者出 现临床表现前数年甚至数十年出现。对于初发Ⅰ型糖尿病患者血清中大多能够 检测出GAD-Ab，而在正常人和2型糖尿病患者血清中的阳性率检出率较低。
吲哚乙酸IAA检测方法及氧化酶活性的测定
吲哚乙酸IAA检测方法及氧化酶活性的测定吲哚乙酸IAA检测方法及氧化酶活性的测定一、原理1、吲哚乙酸产品概述:吲哚乙酸可占植物体内吲哚乙酸的50-90%，可能是生长素在植物组织中的一种储藏形式，它们经水解可以产生游离吲哚乙酸。
吲哚乙酸可刺激形成层细胞分裂;吲哚乙酸刺激枝的细胞伸长、抑制根细胞生长;促进木质部、韧皮部细胞分化，促进插条发根、调节愈伤组织的形态建成。
吲哚乙酸在器官和整株水平上，吲哚乙酸从幼苗到果实成熟都起作用。
吲哚乙酸控制幼苗中胚轴伸长的可逆性红光抑制;当吲哚乙酸转移至枝条下侧即产生枝条的向地性;当吲哚乙酸转移至枝条的背光侧即产生枝条的向光性;吲哚乙酸造成顶端优势;延缓叶片衰老;施于叶片的生长素抑制脱落，而施于离层近轴端的生长素促进脱落;吲哚乙酸促进开花，诱导单性果实的发育，延迟果实成熟。
2、试验原理:吲哚乙酸在吲哚乙酸氧化酶的作用下，被氧化破坏失去活性。
植物体内吲哚乙酸氧化酶活力的大小，对调节体内吲哚乙酸的水平，起着重要的作用，而影响植物的生长。
酶活力的大小可以其破坏吲哚乙酸的速度表示之。
吲哚乙酸的含量可用比色法测定。
二、准备仪器及药品T6新悦型分光光度计离心机恒温水浴锅天平研钵试管移液管烧杯20mmol/L磷酸缓冲液，pH6.0(见附表2)。
1mmol/L2，4—二氯酚:称取二氯酚16.3mg用蒸馏水配制成100ml。
1mmol/L氯化锰:称取MnCl?4HO 19.8mg用蒸馏水配制成100ml。
221mmol/L吲哚乙酸:称取IAA 17.5mg用少量乙醇溶解，然后将其倒于盛有约90ml蒸馏水的容量瓶中(100ml)，稀释至刻度。
吲哚乙酸试剂A或B(任备其中之一):试剂A:15ml 0.5mol/L FeCl3，300ml浓硫酸(比重为1.84)，500ml蒸馏水，使用前混合之即成，避光保存。
用时1ml样品中加入试剂4ml。
试剂B:10ml 0.5mol/L FeCl3,500ml 35%过氯酸，使用前混合之即成，避光保存。
ICA、GAD-Ab、IAA联合检测在成人隐匿性自身免疫性糖尿病诊断中的应用
ICA、GAD-Ab、IAA联合检测在成人隐匿性自身免疫性糖尿病诊断中的应用秦雪鸽，马斌，关慷慷,苗媛媛(郑州大学附属洛阳中心医院核医学科，河南洛阳471000)【摘要】目的分析胰岛素细胞抗体(insulin cell antibody袁ICA)、谷氨酸脱羧酶抗体(glutamic acid decarboxylase an-tibody,GAD-Ab)、胰岛素自身抗体(insulin autoantibody袁IAA)联合检测在成人隐匿性自身免疫性糖尿病(latent autoimmune diabetes mellitus in adults袁LADA)诊断中的应用价值。
方法选取2019年1~12月期间收治的LADA患者30例为观察组，选取同期收治的2型糖尿病患者30例为对照组。
分别测定并比较两组研究对象的ICA、GAD-Ab、IAA 水平，应用ROC曲线下面积(AUC)评价ICA、GAD-Ab、IAA联合检测对LADA的诊断价值。
结果观察组ICA、GAD-Ab、IAA阳性表达率均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)曰绘制ROC曲线显示,ICA预测LADA的AUC 为0.650；GAD-Ab预测LADA的AUC为0.767；IAA预测LADA的AUC为0.617；联合检测预测LADA的AUC为0.783；联合检测的诊断价值较好。
结论ICA、GAD-Ab、IAA联合检测在LADA患者中的诊断效果较好，可提高对LADA诊断的准确性，为后续治疗及患者预后评估提供较为客观的参考价值。
【关键词】成人隐匿性自身免疫性糖尿病;胰岛素细胞抗体;谷氨酸脱羧酶抗体;胰岛素自身抗体;诊断价值中图分类号:R587.1文献标志码:A DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2021.03.013Application of combined detection of ICA,GAD-Ab and IAA in diagnosis of LADAQIN Xuege,MA Bin,GUAN Kangkang,MIAO Yuanyuan(Nuclear Medicine Department,Luoyang Central Hospital Affiliated toZhengzhou University,Luoyang471000,Henan,China)揖Abstract]Objective To analyze the application value of combined detection of insulin cell antibody(ICA),glutamate decarboxylase antibody(GAD-Ab)and insulin autoantibody(IAA)in the diagnosis of latent autoimmune diabetes mellitus in adults.Methods30patients with LADA who were treated in hospital from January2019to December2019were selected as observation group，and30patients with type2diabetes who treated in hospital during the same period were selected as control group.The ICA，GAD-Ab and IAA levels of the two groups were measured and compared，and the area under ROC curve(AUC)was used to evaluate the diagnostic value of combined detection of ICA,GAD-Ab and IAA in LADA.Results The positive expression rates of ICA，GAD-Ab and IAA in the observation group were higher than those in the control group，and difference was statistically significant(P<0.05)；the ROC curve was drawn to show that the AUC of LADA predicted by ICA was0.650，predicted by GAD-Ab was0.767，predicted by IAA was0.617，and predicted by combined test was0.783.The diagnostic value of the combined test was better.Conclusion Combined detection of ICA，GAD-Ab and IAA has a better diagnosis effect in LADA patients，which can improve the accuracy of LADA diagnosis and provide a more objective reference value for subsequent treatment and prognosis evaluation of patients.揖Key words]LADA；ICA；GAD-Ab；IAA；diagnostic value成人隐匿性自身免疫性糖尿病(latent autoim-mune diabetes mellitus in adults,LADA)是1型糖尿作者简介:秦雪鸽，女，主管技师，医学学士，研究方向：胰岛素抗体研究。
血清C肽及胰岛自身抗体联合检测的临床应用
血清Ｃ肽及胰岛自身抗体联合检测的临床应用摘要目的：探讨联合检测抗胰岛细胞抗体（ICA）、抗胰岛素抗体（IAA）和抗谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）对于从临床上诊断为2型糖尿病（T2DM）的患者中发现成人隐匿性自身免疫性糖尿病（LADA）的意义。
方法：选择从2008年6月至2008年9月间来吉林大学第二医院内分泌科住院的临床诊断为T2DM 的患者100例，正常对照组50例，采用酶联免疫法（ELISA）分别检测ICA、IAA、GADA。
采用放射免疫法（RIA）分别检测空腹和餐后2小时的血清C肽水平。
结果：在100例T2DM中，43%胰岛自身抗体阳性，57%胰岛自身抗体阴性，胰岛自身抗体阳性组血清C肽水平：空腹为576.5±227.2pmol/L，餐后2小时为1186.7±489.6 pmol/L，明显低于胰岛自身抗体阴性组血清C肽水平：空腹为823.8±411.6pmol/L，餐后2小时为2017.9±672.3pmol/L，经统计学处理，两者有非常显著性差异（P3讨论从表1联合检测结果可以看出：在正常对照组只检出2例（4%）ICA阳性和1例（2%）GADA阳性，IAA均为阴性。
而在T2DM患者中ICA阳性率为35%（35/100）；IAA阳性率为12%（12/100）；GADA阳性率为32%（32/100）。
与相应的正常对照组比较，经统计学分析均有非常显著性差异（P<0.01）。
在T2DM的患者中胰岛自身抗体总阳性率（三种胰岛自身抗体中有一种或一种以上阳性即为阳性）为43%（43/100）。
从表2结果来看：胰岛自身抗体阳性组的患者无论空腹还是餐后2小时的血清C肽水平与胰岛自身抗体阴性组比较，结果均显著降低，经统计学处理，两组间有非常显著性差异（P<0.01）。
自身免疫介导的β细胞破坏是T1DM的发病基础。
由于破坏程度、速度的不同以及残存β细胞数量的差异，临床表现有以酮症方式起病的速发型和缓慢型，后者又称为成人隐匿性自身免疫性糖尿病（latent autoimmune diaetes of adults,LADA），此类患者的特点为成年发病，病情进展缓慢，早期可表现为非胰岛素依赖，胰岛β细胞存在自身免疫损伤，最终发展为胰岛素依赖。
血清ICA、IAA、GAD-AB检测在糖尿病分型中的临床意义
血清ICA、IAA、GAD-AB检测在糖尿病分型中的临床意义目的评价联合检测胰岛细胞抗体（ICA）、胰岛素自身抗体（IAA）、谷氨酸脱羧酶抗体（GAD-Ab）对糖尿病分型的诊断价值。
方法采用酶联免疫吸附法（EL ISA）检测107例糖尿病患者血清中的GADA、ICA 和IAA抗体，其中1型糖尿病患者31例，2型糖尿病患者76例，正常人群33例；GADA、ICA和IAA抗体不同组合结果地诊断率运用矩阵决策法。
结果1型糖尿病患者的GADA、ICA和IAA阳性率分别为67.7％、41.8％和38.7％，显著高于2型糖尿病患者和正常组（Ρ <1.01），其中GADA阳性率显著高于ICA和IAA（Ρ<1.05 ）。
3种自身抗体联合检测的敏感性、阳性预报率和符合率均显著高于单项或双项测定。
结论GADA、ICA和IAA三种抗体是1型糖尿病自然病程中β细胞功能损伤的一个预测指标，也是1型糖尿病与2型糖尿病相鉴别的重要免疫学标志，对糖尿病分型和指导治疗有一定意义，宜在糖尿病临床诊疗中推广应用。
22型糖尿病中糖尿病控制状况评价量表（CSSD70）的应用目的了解和评估上海地区2型糖尿病患者的糖尿病控制状况、生活质量及其相关因素。
方法上海瑞金医院内分泌门诊中随机抽取136名2型糖尿病患者，男59例，女77 例，年龄（57.88±9.27）岁。
采用自行设计的糖尿病控制状况评价量表（CSSD70），共有70 道选择题，包括：糖尿病及并发症自觉症状（11题）、生活习惯（15题）、治疗情况（8题）、生存技能（15题）、治疗目标（7题）和糖尿病知识结构（14题）。
按照5点量表设计原理，每一题给予5种不同程度的表述作为答案，由0分到2分，间隔为0.5分，分数越高意味着糖尿病患者综合控制状态越佳。
本研究比较了CSSD70得分与136例2型糖尿病年龄、性别、病程、文化程度、胰岛素使用、拥有的糖尿病工具、糖尿病家族史、首发症状、并发症、随机血糖、HbA1c等诸多因素的相关性研究，同时也分析了CSSD70与另一个国际糖尿病生活质量通用量表DQOL得分的内在相关性，并在1周内两次重复测定CSSD70的得分情况以了解CSSD70有效性和稳定性。
血清GADA、ICA、IAA检测对2型糖尿病患者的临床意义
血清GADA、ICA、IAA检测对2型糖尿病患者的临床意义谢玮;陶国华;赵枰【摘要】目的分析2型糖尿病患者中GADA、ICA和IAA的阳性率,探讨自身抗体检测在2型糖尿病患者中的临床意义.方法采用化学发光法测定129例2型糖尿病患者和40名正常对照组人群血清GADA、ICA、IAA、INS和CP;离子交换高压液相法(HPLC)测定HbA1c;己糖激酶法测定GLU;酶法测定TC和LDL-C,并对检测数据进行统计学分析.结果 2型糖尿病患者性别、BMI、年龄、空腹血糖和糖化血红蛋白在自身抗体阳性组和阴性组中比较差异无统计学意义.自身抗体阳性组的2型糖尿病患者TC和LDL-C水平明显低于阴性组,差异有统计学意义.自身抗体阳性组与阴性组空腹胰岛素水平比较差异无统计学意义,但阳性组空腹C肽水平明显低于阴性组,差异有统计学意义.结论 2型糖尿病的患者GADA、ICA和IAA的检测有助于早期发现自身免疫损伤,保存残存β细胞功能,延缓胰岛素依赖阶段的出现和减少酮症酸中毒的发生.【期刊名称】《标记免疫分析与临床》【年(卷),期】2016(023)004【总页数】3页(P439-441)【关键词】谷氨酸脱羧酶抗体;胰岛细胞抗体;胰岛素自身抗体;2型糖尿病【作者】谢玮;陶国华;赵枰【作者单位】南通大学第二附属医院检验科,江苏南通226001;南通大学第二附属医院检验科,江苏南通226001;南通大学第二附属医院检验科,江苏南通226001【正文语种】中文糖尿病是一种常见且多发的内分泌系统性疾病，以高血糖为主要临床表现，各种不同的病因导致胰岛β细胞分泌胰岛素不足及/或周围组织胰岛素作用不足而致血糖升高［1］。
1型糖尿病是由于自身免疫系统错误地攻击和损伤胰岛β细胞，从而使胰岛素的合成和分泌减少或完全缺乏的自身免疫性疾病；2型糖尿病以胰岛素抵抗为主，伴胰岛素分泌不足。
随着生活水平和生活方式的改变，糖尿病的发病率正逐年升高，糖尿病的早期诊断和分型对其治疗和预后有着十分重要的意义［2］。
吲哚乙酸(IAA)检测
吲哚乙酸（IAA）检测
吲哚乙酸（Indole-3-acetic acid，IAA），又称为吲哚-3-乙酸，属于吲哚类化合物，是一种植物内源生长素，广泛分布于多种植物体内。
此外，生长素（Auxin）是最早被发现的植物激素，其化学本质是吲哚乙酸，因而习惯上常把吲哚乙酸作为生长素的同义词。
吲哚乙酸及其分子结构式
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和液相色谱质谱联用(HPLC-MS或LC-MS/MS)的方法，可检测各类植物和土壤样品中吲哚乙酸含量变化。
此外，我们还提供其他植物激素检测服务，以及植物激素系列检测试剂盒产品，以满足您的不同需求。
样品制备
吲哚乙酸提取方法（此部分涉及到公司的核心工艺，以下提供常规的提取工艺）
1）称量约0.5 g的新鲜植物样品；
2）液氮研磨至粉碎；
3）加入5 mL异丙醇/盐酸缓冲液，4℃震荡30 min；
4）加入10 mL二氯甲烷，4℃震荡30 min；
5）4℃，13000 rpm离心5 min，取下层有机相；
6）避光，氮气吹干有机相，用250 μL-500 μL甲醇(0.1%甲酸)溶解；
7）0.45 μm的微孔滤膜过滤，用HPLC-MS/MS检测。
HPLC和LC-MS测定吲哚乙酸样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目报告
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 吲哚乙酸含量信息
相关服务
植物激素HPLC检测植物激素LC-MS检测。
糖尿病自身抗体的检测及临床意义
糖尿病自身抗体的检测及临床意义熊东林;黄芬【摘要】目的探讨糖尿病患者血清谷氨酸脱羧酶抗体(GADA)、胰岛细胞抗体(ICA)和胰岛素自身抗体(IAA)的变化及联合检测的临床意义.方法用免疫印迹技术检测67 例1 型糖尿病(T1DM)患者、133 例2 型糖尿病(T2DM)患者血清中的GADA、ICA、IAA 阳性率,并进行对比分析.结果 T1DM 组中GADA、ICA、IAA 的阳性率分别为66%、40%、24%,至少一种抗体呈现阳性的比例为92%,T2DM 组中3 种抗体的阳性率分别为9%、16%、11%,至少一种抗体呈现阳性的比例为30%.T1DM 患者的GADA、ICA、IAA 阳性率明显高于T2DM 患者(P ＜ 0.05),三种抗体联合检测优于单一抗体.结论血清GADA、ICA 和IAA 的联合检测对早期、准确诊断1 型糖尿病,及时规范治疗、预测B 细胞功能衰竭、预测疗效及在高危人群中筛查1 型糖尿病有重要临床意义.【期刊名称】《中国医药指南》【年(卷),期】2012(010)017【总页数】2页(P66-67)【关键词】糖尿病;谷氨酸脱羧酶抗体;胰岛细胞抗体;胰岛素自身抗体【作者】熊东林;黄芬【作者单位】江西省宜春市人民医院急诊科,江西,宜春,336000;江西省宜春市第二人民医院内二科,江西,宜春,336000【正文语种】中文【中图分类】R587.1目前国内外对于糖尿病的分型多是根椐患者年龄、发病的急缓、有无酮症酸中毒及胰岛素的测定，但成人迟发自身免疫性糖尿病（LADA）有着2型糖尿病的发病特点，且有时患者已经使用胰岛素治疗，使得诊断非常困难[1]。
近年研究表明，谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）、胰岛素自身抗体（IAA）和胰岛细胞抗体（ICA）等多种针对胰岛相关分子的自身抗体可以作为对T1DM诊断和分型的临床免疫学指标[2]。
本文对67例T1DM和133例T2DM患者进行了血清GADA、IAA及ICA检测，旨在探讨这3种抗体的联合检测在DM临床分型的重要意义。
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IAA检测的临床应用
胰岛素抗体的出现有两种情况，一种出现于接受外源性胰岛素治疗的病人，主要和胰岛素制剂的纯度有关系，一种出现于从未接受胰岛素治疗的病人，称为胰岛素自身抗体。
接受异源性胰源素治疗的糖尿病病人，其血清中常有抗胰岛素抗体(IAB)存在，这种抗体能结合胰岛素形成复合物，使胰岛素失活，这是糖尿病病人对胰岛素抵抗的主要原因之一。
现已证实5种Ig类型的抗胰岛素抗体都存在，但以IgG类为主，测定该抗体的方法有多种，如RIA、ELISA、血凝和微晶纤维素等方法。
抗人胰岛素抗体主要为IgG类型，通常是使用胰岛素制剂的患者，由于外源胰岛素的异源性或免疫源性，刺激患者免疫反应二产生相应抗体。
胰岛素抗体的大量生成可导致病人对胰岛素的不敏感，胰岛素自身抗体（IAA）同用胰岛素治疗的糖尿病患者体内其它胰岛素自身抗体相似。
IAA的检测可用来评价高危人群的未来I型糖尿病发病几率和I型糖尿病早期阶段的确诊。
IAA出现原因
临床上，使用胰岛素治疗的2型糖尿病患者可观察到IAA的出现，高滴度的抗体可影响胰岛素的降糖效果，并导致明显的高胰岛素血症。
IAA的出现有以下原因：（1）从未接受胰岛素治疗的患者，称为胰岛素自身抗体，常见于1型糖尿病。
（2）接受外源性胰岛素治疗的患者，主要和胰岛素制剂纯度有关，除胰岛素分子结构差异外，皮下注射后胰岛素分子的聚合状态也有可能改变其免疫源性，使IAA增加。
（3）感染后IAA升高可能是某些外来抗原的表面决定簇构想刺激机体合成IAA增加。
动物胰岛素制剂连续注射3个月以上糖尿病者，90%以上患者血中可检测出IAA；使用人胰岛素制剂者，IAA的检出率高达10%-30%。
临床意义:
胰岛素抗体对糖尿病和低血糖的诊断、鉴别诊断及治疗具有非常重要的意义。
(1)1型糖尿病的早期发现：正常人群如在血中发现胰岛素抗体则很容易罹患1型糖尿病。
胰岛素自身抗体可能系β细胞破坏所产生，因此胰岛素自身抗体的检测可作为自身免疫性β细胞损伤的标志，可用于早期发现和预防1型糖尿病。
(2)诊断胰岛素抵抗，指导糖尿病治疗：血液中存在胰岛素抗体是产生胰岛素抵抗的重要原因，糖尿病患者在使用胰岛素治疗的过程中可因胰岛素抗体的产生而出现胰岛素抵抗，表现为胰岛素用量逐日增加但血糖控制并不理想。
此时应检测胰岛素抗体，若出现阳性或滴度增高可作为胰岛素抵抗的客观依据。
换用单组分胰岛素、高纯度胰岛素及停用胰岛素、口服降糖药或应用糖皮质激素皆有助于降低胰岛素抗体的浓度，改善胰岛素抵抗。
(3)胰岛素自身免疫综合征：自Hirata等于1970年首次报告后，国内外报告逐年增多。
胰岛素自身免疫综合征(insulin autoimmune syndrome，IAS)的特征为严重低血糖、高胰岛素血症、胰岛素抗体(IAA)阳性及从未接受外源性胰岛素治疗。
IAS低血糖发作呈自限性，82%
不经治疗1年内自行缓解，但发作时多较严重且诊断困难。
除对症治疗外，应用肾上腺皮质激素可能有一定价值。
遗传易感性在IAS发生中可能起重要作用。