血涂片的操作方法
显微镜镜检血涂片的操作流程
显微镜镜检血涂片的操作流程显微镜镜检血涂片，这事儿可有趣啦。
咱先说说准备工作。
那得有个干净的显微镜呀，就像战士上战场得有把好枪一样。
显微镜得提前调试好，各个部件都得正常运转。
目镜和物镜要擦得干干净净的，要是上面有脏东西，就像眼睛里进了沙子，看啥都模糊。
载物台也得清理好，不能有灰尘杂物啥的。
接着就是血涂片啦。
这血涂片可得做得漂亮。
取血的时候要小心点哦，就像对待小宝贝一样。
一般呢，用采血针采一点血，然后轻轻地把血滴在载玻片的一端。
再拿个推片，这个推片就像小铲子一样。
把推片和载玻片保持一定的角度，然后慢慢地推过去，就像在画画一样，把血涂成薄薄的一层。
要是涂得太厚了呀，那在显微镜下看就像一锅粥，啥都分不清；涂得太薄了呢，又找不到几个细胞。
血涂片做好了就可以放在显微镜的载物台上啦。
这时候要从低倍镜开始看哦。
就像找宝藏一样，先大概地扫视一下，看看有没有啥特别的地方。
低倍镜下能看到很多细胞，就像一群小蚂蚁一样密密麻麻的。
看到感兴趣的地方了，再转到高倍镜下仔细看。
在高倍镜下看细胞可有意思啦。
红细胞就像一个个小圆盘，扁扁的，中间还凹下去一点。
白细胞呢，就比较大啦，而且有各种各样的形状。
有的白细胞就像个大胖子，圆滚滚的；有的白细胞就像个变形金刚，形状不规则。
血小板就比较小了，像小碎片一样。
看着这些细胞，就感觉像是在微观世界里探险一样。
观察的时候呀，要特别仔细。
眼睛得瞪得大大的，就像小猫盯着老鼠洞一样。
细胞的大小、形状、颜色都要留意。
要是看到有不正常的细胞，那就像发现了新大陆一样。
比如说，如果红细胞长得奇形怪状的，或者白细胞的数量特别多或者特别少，那可能就有问题啦。
做完镜检之后呢，也要好好收拾东西。
把显微镜关掉，擦干净，放回原来的地方。
载玻片和推片也要清洗干净，留着下次还能接着用。
这就像吃完饭要洗碗一样，要有始有终嘛。
镜检血涂片其实不难，只要有耐心，就像跟细胞交朋友一样，慢慢地去了解它们的小秘密，就能把这事儿干得漂漂亮亮的。
血涂片的制备注意事项
血涂片的制备注意事项血涂片是一种常见的临床检查方法，用于观察血液中各种血细胞的数量、形态和功能状态。
它是通过将血液标本涂在载片上，经过染色和镜检来进行分析。
下面将介绍血涂片的制备注意事项。
首先，准备工作要充分。
操作人员需要戴上手套，清洁双手，确保操作环境无尘。
同时，需要准备好所需的试剂和仪器，如载玻片、血样采集针、消毒盘、无菌生理盐水、染色剂等。
其次，采集血样要注意技巧。
在采集血样前，患者需要保持适当的体位，避免运动和剧烈呼吸。
采血前，应消毒采血点，通常选择患者指尖或耳垂作为采血部位。
采集时，要注意采血针的角度和深度，采集到适量的血样。
采血后，及时停血，用无菌生理盐水清洗采血点，避免出现血涂片上的干血痂。
然后，制备血涂片要细心。
将采集的血样倒入无菌盘中，用移液管吸取一定量的血样，滴到载片上。
收集血样时，要避免空气和凝血因子的影响，避免血压过高或太低，以免影响血细胞形态。
滴液时应保持手稳，使血液均匀地分布在载玻片上。
滴液后，要使液体在玻片上自然流开，避免抖动或倾斜。
血涂片制备完毕后，需要进行染色。
目前常用的染色方法有古尔氏染色和偏碱性染料染色。
染色时，要先将血涂片在烘箱或通风处晾干，保证干燥后的血涂片在染色过程中不会破裂。
然后，将血涂片依次通过染色剂溶液，注意控制染色时间和染色液浓度。
染色后，用蒸馏水洗去多余的染色剂，将玻片晾干，即可开始镜检观察。
最后，需要注意处理和储存血涂片。
在观察完血涂片后，应及时收集已观察的玻片，进行妥善处理。
未观察的血涂片应存放在干燥、无菌的容器中，避免受潮、受灰尘和细菌的污染。
储存时，要注意避光和防潮，尽量保持温度稳定。
总之，制备血涂片是一项复杂而细致的工作，很大程度上影响着血涂片检查结果的准确性。
操作人员需要严格按照规范的操作步骤进行操作，保持良好的技巧和耐心。
只有在制备过程中注意各项细节，才能得到准确、可靠的血涂片结果，为临床诊断和治疗提供有益的参考依据。
血涂片制备与染色
.
5
涂片技术是制备血液样品最常用的技术。将 血液样品制成单层细胞的涂片标本，染色后可对 血液中各种细胞形态进行形态观察、细胞计数、 细胞大小测量等工作。
.
6
血涂片制备
推片 血液
载玻片
一张满意的血涂片应厚薄均匀
头
体
尾鲜明
.
涂片干燥后用铅笔在血涂片的头 部写上姓名和编号
B 123
李 四
7
方法与步骤1：采血，挤出第二滴血置于载玻片的右侧
血涂片制备与染色
.
1
【目的】 掌握血涂片的制备和染色方法。
【原理】 将一小滴血液均匀涂在玻片上，呈单层 紧密分布，制成薄血片。用含天青B和伊红的 Romannowsky类染料进行染色。细胞中的碱性物质 如RBC中的血红蛋白及嗜酸性粒细胞胞质中的嗜酸 性颗粒等与酸性染料伊红结合染成红色；细胞中 的酸性物质如淋巴细胞胞质及嗜碱性粒细胞质中 的嗜碱性颗粒等与碱性染料亚甲蓝结合染成蓝色； 中性粒细胞的中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝 均可结合，染成淡紫红色。
.
8
2.再取另一张边缘光滑的双凹片，斜置于血滴的前缘，先 向后稍移动轻轻触及血滴，使血液沿玻片端展开成线状。
.
9
.
10
两玻片的角度以30-45°为宜，轻轻将双凹片向 前匀速推进，即涂成血液薄膜。
30~45°
.
11
3.成片，干燥
一张满意的血涂片应厚薄均匀
头
体
尾鲜明
李 四
.
12
[血涂片质量评价]
.
23
6.血涂片的观察
低倍镜观察 1.染色情况(满意、偏酸、偏碱） 2.细胞分布情况 油镜下分类计数：体尾交界处。 油镜分类时应按一定走向，不要重复计数。（共计
技能操作流程和评分标准-骨髓及血涂片制作
未按摩手指扣3分，未消毒扣5分，采血部位不正确扣5分，采血深度不够扣3分，未擦去第一滴血扣3分，未止血扣5分
将血液（5-8μl）滴加于载波片一端1cm处；②左手平执载玻片，右手持推片从前方接近血液，使血液沿推片边缘展开成适当宽度，将推片与载玻片呈30-45°角，推动推片，制成厚薄适宜的血涂片③将推好的血涂片在空气中晃动，使其迅速干燥；④在载玻片的一端做好标记（病人姓名，住院号等）；⑤用相同的方法再制作1-2张血涂片
质量评定
沟通有效，关爱病人
5
酌情给分
操作熟练程度
5
根据熟练程度给分
总分
100
技能操作流程和评分标准（骨髓及血涂片制作）
项目
内容要求
分值
评分标准
得分
操
作
前
准
备
仪表端庄，着装整洁，戴手套
5
衣帽、口罩不整洁各扣2分，不戴手套扣5分
操作前准备：核对病人信息，病人行骨髓穿刺术，抽取骨髓液，不超过0.2ml为宜
2
未提骨髓液的量扣2分
载玻片（清洁、干燥）、推片、75％酒精、棉签、一次性微量吸管、一次性采血针
20
未拔去针头扣3分，滴加位置不正确扣3分，未晃动干燥扣3分，未做标记扣4分；骨髓涂片应厚薄适宜、头体尾分明，长短3-4cm，两端1-2cm空隙，有骨髓小粒（酌情扣分）
①按摩患者左手中指或无名指（需选择皮肤完整处采血）；②棉签沾取75%酒精擦拭采血部位皮肤，待干；③用左手拇指和示指固定采血部位使其皮肤和皮下组织绷紧，右手持一次性采血针自指尖腹内侧迅速刺入，深度2-3mm,立即出针；④用无菌棉签擦去第一滴血；⑤用微量吸管吸取血液；⑥无菌棉签压住伤口止血
20
滴加位置不正确扣3分，未晃动干燥扣3分，未做标记扣4分；血涂片应厚薄适宜、呈舌状，头、体、尾分明、边缘整齐，长短3-4cm，两端1-2cm空隙（酌情扣分）
实验6-人血永久涂片
实验6-人血永久涂片实验目的：能够运用显微镜观看人血永久涂片，识别红细胞、白细胞和血小板。
操作步骤：三、操作注意事项安放显微镜中的“7cm ”是指距身前的边缘，而非实验台左侧边缘，那个距离与手掌的宽度相仿；手绝对不能接触目镜和物镜镜头的玻璃部分，镜头只能用擦镜纸擦拭；取用器材 1、一手握镜臂，一手托镜座，镜筒向前，镜臂向后，将显微镜从显微镜箱中取出；将显微镜安放在实验台距身前边缘7cm 左右处，略偏左。
安装镜头2、安装好物镜和目镜。
对光3、转动粗准焦螺旋，使镜筒上升。
4、转动转换器，使低倍物镜正对通光孔。
5、转动遮光器，选择较大光圈对准通光孔。
6、左眼凝视目镜内，右眼睁开，用手转动反光镜（要能依照光线强弱选择镜面），看到明亮视野。
用低倍镜 观看人血永久涂片7、用洁净的纱布将人血永久涂片擦洁净后放在载物台上，使涂片尽量正对通光孔的中心，用压片夹固定。
8、两眼从一侧凝视物镜；双手顺时针方向转动粗准焦螺旋；使镜筒慢慢下降，直到物镜头接近涂片为止。
9、两眼睁开，左眼凝视目镜；双手逆时针方向转动粗准焦螺旋，使镜筒慢慢上升，直至看到物像；若物像不在视野中央，移动装片使物像移到视野中央。
识别红细胞、白细胞和血小板10、能够清晰的看到物像，并能辨论出红细胞、白细胞和血小板，必要时可转动细准焦螺旋。
整理器材11、实验终止后，先提升镜筒，取下人血永久涂片、目镜，盖上镜头盖，转动转换器，把两物镜偏到通光孔两旁，使镜筒降到最低位置，反光镜竖立存放，显微镜外表用纱布擦拭，镜头用擦镜纸擦拭，将显微镜放回显微镜箱。
12、整理好仪器，清理好桌面，将人血永久涂片放回原处并合理存放废品（整理不到位要扣分）。
不能用手扳物镜转换镜头，要转动转换器（安装镜头的部位，大金属圆盘）；对光后会看到视野专门明亮，打开实验台上的灯对光后甚至会专门耀眼；对光后，不能移动显微镜；不能单手转动准焦螺旋，尽量不在高倍镜下转粗准焦螺旋；安放涂片时，需要用两个压片夹压住涂片；由于血液中白细胞的数量最少，需要学生认确实全方位的观看人血永久涂片；区分开杂质和红细胞、白细胞、血小板。
实验四静脉采血血涂片的制备与染色
取血
待酒精干后，刺破皮肤，使血自然流出， 勿挤。取干净载片，让血滴在离载片一端 中4～5毫米处，注意手指 持握载片的边缘 ，勿触及其表面。不能使载片接触取血部 位的皮肤。
推片 取一块边缘光滑的载片做推片。将其一
端置于血滴前方，向后移动到接触血滴， 使血液均匀分散在推片与载片的接触处。 然后使推片与载片呈30°～40°角，向另 一端平稳地推出。涂片推好后，迅速在空 气中挥干，使之自然干燥。
标记试管
在试管上贴上标签，著名患者姓名、项目名 称、采集日期、门诊或住院号。
消毒双手
采血前，操作人员应用肥皂或消毒液和水洗手。
选择静脉
采血前，要求受检者坐在实验台前。将前臂放在 实验台上，掌心向上，并在肘下放一枕垫。卧床 受检者要求前臂申展，暴露穿刺部位。常用采血 位置是肘前静脉，因其粗大、容易辨认。
检查注射器
静脉采血前要仔细检查针头是否安装牢固， 针筒内是否有空气和水分。所用针头应锐利、光 滑、通气，针筒不漏气。抽血时针栓只能向外抽 ，不能向静脉内推，以免形成空气栓塞，造成严 重后果。
扎压脉带
采静脉血时止血带压迫时间不能过长 、绑扎不能过紧，以避免淤血和血液浓缩 ，最好不超过1min，否则会影响某些试验 结果，如造成血红蛋白和血细胞比容增高 。
醇所固定;
3、 加等量PH6.4的磷酸盐缓冲液(或等量 超纯水)轻轻晃动玻片,均匀静置5-10分钟;
4、 水洗、吸干、镜检。
血涂片染色
涂片干燥后加瑞氏染色Ⅰ液5-8滴 覆盖整个血膜1分钟
勿冲洗再加瑞氏染色Ⅱ液5-8滴后将Ⅰ液和 Ⅱ液充分混匀静置10分钟
直接流水冲洗3-5分钟 （切勿先倒掉染液）
血涂片染色操作流程
血涂片染色操作流程
血涂片染色操作流程主要包括以下步骤：
1. 制片：将新鲜抗凝血滴于载玻片上，利用推片机或角度适中的推片手法，将血液均匀分散，制成薄而透明的血膜。
2. 干燥：待血膜自然晾干或在空气中风干，不可加热，以防细胞形态改变。
3. 固定：使用甲醇或甲醇-乙醚混合液固定血膜，使细胞成分稳定，防止染色时细胞形态受损。
4. 染色：先用瑞氏染液（或瑞-吉染液）进行染色，浸泡一定时间后水洗去除多余染料。
5. 复染：如需区分白细胞种类，可进行姬姆萨复染，进一步区分颗粒细胞和淋巴细胞。
6. 擦干、封片：染色结束后吸去水分，晾干后加盖片，可用树脂封固。
7. 显微镜观察：在显微镜下观察血细胞形态和数量，进行细胞
学诊断。
血涂片的制备及染色
血涂片的制备及染色血涂片的制备及染色摘要血涂片是世界上使用最广泛的实验室检测方法之一，应用于疾病的筛查，发现，诊断以及监控。
本文提供了在临床检验中制备及染色出优质血涂片的一种参考。
虽然在如何人工制备血涂片上仍存在某些“工艺”，但是已尽可能采用了客观标准使得临床实验室能准备和染色出优质血片。
本参考中包含固定和染色手工工艺中的问题解决方法。
关键词：血涂片制备，染色前言血涂片是世界上使用最广泛和最频繁的检测方法之一，但似乎没有关于血涂片制备要求，程序及潜在问题等的综合性文献。
虽然血涂片的制备是个简单的过程，但作为一种检测方法，有很多因素可导致检测失败或比其预期低效。
本文应国际血液学标准化委员会的请求所写，并作为实验室血细胞计数板的指导方针。
本文旨在提供临床检验中用于形态评价的血涂片制备及其染色的指导和标准化。
显微镜分析过程和解释不在本文的范围内。
列举的方法中包括最先进的技术以及发展中国家实验室的适用方法。
发展中国家不具备最高水平的指标，但应在所有条件下可达到其规定的指标，以确保诊断测试的质量，以免降低病人护理。
这点尤其重要，因为无论对于病例发现，诊断或疾病监测，血涂片显微镜分析所得数据通常在临床情况中起最终和决定性的作用。
为了方便参考使用，本文采用一种特殊的格式来描述涉及血涂片制备和染色的各个步骤。
血涂片制备载玻片载玻片应由最高纯度的耐腐蚀玻璃制成；通常不可接受其他材料如塑料。
典型玻片为75×25mm，约有1mm 厚度，必须平整，无扭曲和波痕，而且必须澄清无色（“水白，无色透明”）。
荧光显微镜检测必须使用无自发荧光的玻片。
最好使用预洗过的载玻片，但至少实验室必须确保载玻片无划痕，干净无尘、绒线，油脂（指纹），而且必须干燥。
这就意味着在潮湿环境中，载玻片必须能抗水。
在所处密闭容器开启后，载玻片必须保存于干燥器或装有无水（甲基）乙醇或乙醇与丙酮混合液（3:1）的容器内直至被使用。
载玻片需一直保存于密闭容器中，只能在立即使用前开启。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
血涂片的操作方法
血涂片是一种常见的实验技术，用于观察血液中的细胞形态和数量。
下面是血涂片的操作方法：
1. 准备材料：显微镜玻璃片、无菌注射器、血液样本（静脉血或毛细血管血）。
2. 取一只无菌注射器，将其抽空。
然后将血液样本放入注射器中，释放一到两滴血液样本到玻片中。
3. 将另一只玻片压平在已经滴有血液的玻片上，使血液样本均匀涂开。
4. 沿着玻片的一侧，将已经涂有血液的玻片平行于另一只干净的玻片上，使其逐渐移动。
5. 保持持续的均匀速度，将带有血液样本的玻片从一侧滑动到另一侧，形成一层均匀的涂片。
6. 确保血液干燥后，用染色剂（如Wright染色液）对涂片进行染色。
按照染色剂的说明操作。
7. 将涂片放在显微镜下，使用适当的放大倍率（如100倍或1000倍）观察涂
片。
注意细胞数量、形态和其他特征。
血涂片操作是一个相对简单的过程，但需要仔细操作以确保获取准确的结果。
在进行操作时，请注意实验室的安全规范，并遵守任何实验室指南。