EGFR基因突变检测
egfr基因检测价钱贵吗
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对于患上癌症，尤其是患有肺癌的人群，医生都会建议做egfr基因检测。
只有做过这个测试，才能确定患者是否可以做靶向药物治疗。
但是很多人在进行这项测试的时候都会关心“egfr基因检测价钱贵吗”的问题。
提醒大家，在我们了解这个问题的时候，也最好是了解下为什么要做egfr基因检测。
★为什么要做egfr基因突变检测?
因为靶向治疗不是所有的肿瘤患者都适合，只有当体内存在基因突变才适合。
那么怎么才能确定患者体内有基因突变呢?方法之一就是egfr基因突变检测。
有研究表明，EGFR与肿瘤细胞的增殖、血管生成、肿瘤侵袭、转移及细胞凋亡的抑制有关，在许多实体肿瘤中，就存在EGFR的高表达或异常表达。
目前，EGFR基因突变是研究最充分、证据最充足、了解最透彻的肿瘤标志物，全球的三大肿瘤突变会的指南都重点强调过
EGFR突变检测的重要性。
所以，当患者做egfr基因突变检测出存在基因突变时，一定要及时咨询主治大夫，看看是否适合使用靶向药物。
★egfr基因检测价钱贵吗?
可能很多人会发现，上网一搜就有很多公司说都可以做这个检测，费用也是不一样的，少则几百元，多则上千元。
在这里要提醒各位一句，几百元的检测基本上是不靠谱，准确率高不到哪去，或者是另外还有一些收费，报价几百，只是为了用低报价吸引患者进去检查，转而收取各种名目的其他费用。
所以，建议患者还是去公立医院检测，一般来说，正规的公立医院egfr基因突变检测费用基本上是几千，高端一点的医院可能会是上万。
当然，egfr基因突变检测费用会根据患者检测的基因个数才决定，另外还要受到当地城市消费水平和医院的级别、检测设备等因素的影响。
EGFR基因突变(ARMS法)检测标准操作规范
EGFR基因突变(ARMS法)检测标准操作规范EGFR基因突变（ARMS法）检测标准操作规范1、目的：明确EGFR基因突变（ARMS法）检测操作、结果判断、报告内容及质控管理规程，保证检测结果的可靠性。
2、执行人：李文辉、郭志云3、试剂来源：苏州为真生物医药科技有限公司4、质控物：阴性、阳性对照均为试剂配套。
5、实验操作步骤：5.1 DNA提取FFEP样本DNA的提取(QIAGEN)（1）切片、烤片：切3~5张厚度为8~10μm的组织片，捞至普通玻片上（若为小组织，则切10张，同一玻片可捞多张），60℃考片30分钟；大组织另外切一张3μm组织片进行常规HE染色，作病理评估之用。
（2）脱蜡：将组织切片置于二甲苯中室温脱蜡2次，每次10min；随后浸入100%乙醇3min。
将组织切片依次室温置于100%、80%、70%梯度乙醇中各2min，复水后，室温浸入去离子水3min。
（3）评估、刮片：组织片经病理评估后，用洁净盖玻片刮取癌组织密集区域，并转移至洁净的1.5ml EP管中；小组织全部刮取至1.5ml EP管中。
（4）消化：加入180μl ATL和20μl蛋白酶K，震荡混匀，根据组织大小可增加消化液的用量，56℃，1h，根据组织大小可延长消化时间甚至过夜消化（期间可以适当摇晃颠倒样品，使之混匀裂解充分；可裂解至组织消化完）。
（5）升温：将温度调至90℃，作用1h（注意管盖，90℃高温可能会导致爆盖以致液体被蒸发；时间不要太长1小时足够；一个水浴锅时，56℃到90℃之间过渡时应将样本置于室温中，待温度完全升到90℃后再将样本放进去）。
（6）短暂离心使液体聚于管底，加入200μl AL，震荡混匀，然后加入200μl无水乙醇，震荡混匀。
（7）短暂离心使液体聚于管底，将整个液体全部移入收集柱中，然后8000rpm 离心1min，丢弃收集管后将收集柱至于新的收集管中。
（8）加入500μl AW1漂洗液，离心8000rpm，1min，丢弃收集管后将收集柱至于新的收集管中。
egfr检测内容
egfr检测内容
EGFR 检测是一种用于诊断和评估肺癌的重要方法，可以检测出肺癌细胞中 EGFR 基因的表达水平。
EGFR 是一种受体酪氨酸激酶，其在肺癌细胞中的表达水平与肺癌的恶性程度、预后和治疗反应等方面密切相关。
EGFR 检测的方法主要包括以下几种:
1. 免疫组化法 (IHC):IHC 是一种常用的 EGFR 检测方法，可以通过检测肺癌组织中 EGFR 的表达来诊断和评估肺癌。
IHC 可以使用单克隆抗体或多克隆抗体来检测 EGFR 的表达，通常需要使用染色强度和染色面积两个指标进行评估。
2. 基因测序：基因测序是一种用于检测 EGFR 基因变异的方法，可以用于评估肺癌患者的预后和治疗反应。
EGFR 基因变异与肺癌的恶性程度和治疗反应等方面密切相关，因此可以通过基因测序来检测EGFR 基因变异。
3. 荧光原位杂交 (FISH):FISH 是一种用于检测 EGFR 扩增和
突变的方法，可以通过检测肺癌细胞中 EGFR 基因的扩增和突变来诊断和评估肺癌。
EGFR 检测在肺癌的诊断、治疗和预后等方面具有重要作用，需要根据具体病情选择合适的检测方法。
egfr检验流程
egfr检验流程EGFR（Epidermal Growth Factor Receptor）是一种位于细胞膜上的蛋白质受体，对细胞增殖、分化和存活起重要作用。
EGFR检验可用于评估疾病的诊断和治疗方案。
本文将详细介绍EGFR检验的流程。
一、样本采集EGFR检验的样本通常采集自患者的血液或组织。
血液样本可以通过静脉采集或指尖采血得到。
组织样本则需要通过手术或穿刺等方式获取。
二、标本处理采集到的血液样本需要进行离心分离，将血浆或血清与细胞分离开来。
组织样本则需要进行组织切片，以便后续的染色和分析。
三、EGFR检测方法目前常用的EGFR检测方法主要有免疫组化法和分子生物学法。
1. 免疫组化法免疫组化法是通过特异性抗体与EGFR结合，再经过染色反应可观察到阳性细胞的染色情况。
这种方法可以直观地查看组织中EGFR 的表达情况，但结果受组织处理和抗体质量的影响。
2. 分子生物学法分子生物学法主要包括PCR、FISH和NGS等技术。
PCR可以检测EGFR基因的突变情况，FISH可以观察EGFR基因的扩增，NGS则可以同时检测EGFR以及其他相关基因的突变情况。
这些方法可以提供更为准确的分子水平的信息，对于EGFR的变异情况有更高的敏感性和特异性。
四、结果解读根据EGFR检测结果，可以对疾病进行进一步的诊断和治疗方案的制定。
EGFR阳性表达可能与某些肿瘤的发生和发展相关，而EGFR 基因突变则可能影响某些抗癌药物的疗效。
五、临床应用EGFR检验在临床上具有重要的应用价值。
例如，在肺癌的诊断和治疗中，EGFR突变的检测可以帮助筛选出适合使用EGFR抑制剂的患者，从而提高治疗的效果。
此外，EGFR检测还可以应用于其他肿瘤的早期筛查和治疗监测。
六、质控措施为了确保EGFR检验的准确性和可靠性，实验室需要制定严格的质控措施。
这包括使用标准品进行校准、进行内部质控和参加外部质控等。
七、研究进展随着科学技术的不断发展，EGFR检验也在不断改进和完善。
人类EGFR基因突变荧光PCR检测试剂盒说明书
人类EGFR基因突变荧光PCR检测试剂盒说明书【产品名称】通用名称：人类EGFR基因突变荧光PCR检测试剂盒英文名称：Shuwen® Human EGFR Gene Mutation Detection Kit for Real-Time PCR【包装规格】7测试/盒【预期用途】EGFR是一种细胞膜外表的糖蛋白受体，具有酪氨酸激酶〔Tyrosine Kinase，TK〕活性，是原癌基因c-erbB-1〔HER-1〕的表达产物。
EGFR 的主要信号转导途径有：PI3K-PDK 通路，RAS-RAF-MEK-ERK-MAPK 通路，PLC-γ 通路，JAK-STAT 通路。
通过这些途径，将胞外信号转化为胞内信号，从而有效应对外界的信号刺激，调节细胞的生长、增殖、分化，抑制细胞的凋亡。
EGFR异常调节通过多种机制促进细胞恶性转化，包括受体的过度表达、突变、生长因子-受体自分泌环的活化以及特定的磷酸酶失活，其中涉及肿瘤发生和进展的机制中最常见的是EGFR的基因突变和过度表达。
EGFR基因位于7号染色体短臂7pl2-14区，由28个外显子组成。
其突变主要发生在EGFR酪氨酸激酶的ATP结合位点的编码区〔第18-20外显子〕，研究说明，EGFR酪氨酸激酶抑制剂〔例如吉非替尼、厄洛替尼和埃可替尼等〕疗效与EGFR基因的突变有密切的相关性。
目前已经报道大约有30种突变与吉非替尼的药物反响相关，主要是19外显子上的缺失突变和21外显子上的L858R的点突变。
外显子19上747-750位氨基酸的大约20种缺失约占所有突变的45%，其中以两种delE746-A750(2235_2249del15和2236_2250del15)最为常见，占到外显子19缺失总数的75%；外显子21上L858R的点突变占所有突变的45%左右；外显子18的3种点突变〔G719X〕约占5%；外显子20的突变占1%左右。
另外研究发现外显子20上的T790M突变与酪氨酸激酶抑制剂药物的耐药性相关。
EGFR突变检测方法简介
遗传异质性 （Heterogeneity） 对检测方法敏感度有较高要求
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标本因素对肿瘤组织中基因突变检测的影响
--组织标本种类--
冰冻组织
--外科手术标本 --穿刺活检测标本
固定包埋组织
--外科手术标本 --穿刺活检测标本
正常细胞混杂 （Contamination with normal cells）
EGFR突变检测方法简介
朱冠山 (Mike) 阿斯利康中国创新研究中心 20010年4月9日
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内 容
非小细胞肺癌中EGFR活性增强突变 标本因素对肿瘤组织中基因突变检测的影响 EGFR突变检测方法概述 ARMS试剂盒检测EGFR突变 工作流程与质量控制
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非小细胞肺癌中EGFR酪氨酸激酶区突变
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EGFR突变检测主要方法及敏感度
方法
直接测序法 PCR-RFLP/AS-PCR dHPLC/HRMA 实时荧光定量PCR --TaqMan --PNA-LNA clamp --ARMS >10％ 1％ 1％
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敏感度
10-20％ N/A 3-12％
测序法与ARMS法比较
测序法 敏感度 FFPE标本成功率 商用试剂盒 流程与速度 数据分析要求 试剂成本 仪器成本 10-20% 低 无 复杂/慢 高 低 高 ARMS 1% 高 有 简单/快 低 略高 低
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Q&A
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ADx ARMS
中国厦门艾德 双环引物与探针 29种 FAM信号, Ct值 <10ng/Rnx Stratagene Mx系列, ABI系列, Lightcycler480
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1、EGFR基因的突变位点
1、EGFR基因的突变位点1、EGFR基因的突变位点肺癌是全世界范围内发病率和死亡率最⾼的恶性肿瘤，其中⾮⼩细胞肺癌（NSCLC）占全部肺癌的80%左右。
⽬前，晚期NSCLC的标准治疗为含铂的双药联合化疗。
但化疗药物对改善晚期NSCLC患者的⽣存期⽅⾯作⽤有限。
在⾮⼩细胞肺腺癌⾥，EGFR基因的突变频率⾮常⾼，尤其是亚裔⾮吸烟的⼥性患者。
针对EGFR基因的突变位点和相对应的靶向药物也研究的⽐较清楚。
EGFR基因的常见突变位点发⽣在18、19、20和21号外显⼦上，其中19号外显⼦的⾮移码缺失突变约占45%，21号外显⼦的L858R点突变占40-45%，这两种突变被称为常见突变。
其他的突变被称为罕见突变。
需要注意的EGFR基因有药物敏感突变，也就是突变后可以使⽤某种靶向药物，也有耐药位点，即突变后对某种靶向药物耐药（如T790M突变就是⼀个耐药位点，⽽且占了50%左右的突变频率）。
2、EGFR的第⼀代靶向药物如果发现EGFR存在常见突变位点，也就是19号外显⼦的⾮移码缺失，或21号外显⼦的L858R错义突变，可以考虑使⽤第⼀代EGFR靶向药物，也就是吉⾮替尼（易瑞沙）、厄洛替尼（特罗凯）和埃克替尼（凯美钠）。
⼀项在台湾开展的⼊组1122个患者研究表明，厄洛替尼⽣存获益优于吉⾮替尼，厄洛替尼有更⾼的⾎脑屏障透过率，半衰期和⽣物利⽤度，但副作⽤较其他第⼀代靶向药物更⼤。
存在这些基因突变位点并⾮⼀定有效，因为也有可能存在其他耐药位点，如下游的KRAS、BRAF等激活突变，以及HER2、c-MET等基因的突变造成旁路激活。
因此患者在选择做EGFR基因检测的时候，⼀定最好系统地把常见的突变基因都做了，⼀个是避免不是EGFR 突变⽽存在漏检，第⼆是把那些耐药基因突变也给筛查⼀下，如果存在耐药基因突变，使⽤靶向药物是获益不⼤的，反⽽花费很多药物费⽤。
3、EGFR第⼀代靶向药物的耐药原因⼀般⽽⾔，EGFR基因的第⼀代靶向药物吉⾮替尼、厄洛替尼和埃克替尼都有耐药时间。
人类EGFR基因突变荧光PCR检测试剂盒说明书
人类EGFR基因突变荧光PCR检测试剂盒说明书【产品名称】通用名称：人类EGFR基因突变荧光PCR检测试剂盒英文名称：Shuwen® Human EGFR Gene Mutation Detection Kit for Real-Time PCR【包装规格】7测试/盒【预期用途】EGFR是一种细胞膜表面的糖蛋白受体，具有酪氨酸激酶（Tyrosine Kinase，TK）活性，是原癌基因c-erbB-1（HER-1）的表达产物。
EGFR 的主要信号转导途径有：PI3K-PDK 通路，RAS-RAF-MEK-ERK-MAPK 通路，PLC-γ 通路，JAK-STAT 通路。
通过这些途径，将胞外信号转化为胞内信号，从而有效应对外界的信号刺激，调节细胞的生长、增殖、分化，抑制细胞的凋亡。
EGFR异常调节通过多种机制促进细胞恶性转化，包括受体的过度表达、突变、生长因子-受体自分泌环的活化以及特定的磷酸酶失活，其中涉及肿瘤发生和进展的机制中最常见的是EGFR的基因突变和过度表达。
EGFR基因位于7号染色体短臂7pl2-14区，由28个外显子组成。
其突变主要发生在EGFR酪氨酸激酶的ATP结合位点的编码区（第18-20外显子），研究表明，EGFR酪氨酸激酶抑制剂（例如吉非替尼、厄洛替尼和埃可替尼等）疗效与EGFR基因的突变有密切的相关性。
目前已经报道大约有30种突变与吉非替尼的药物反应相关，主要是19外显子上的缺失突变和21外显子上的L858R的点突变。
外显子19上747-750位氨基酸的大约20种缺失约占所有突变的45%，其中以两种delE746-A750(2235_2249del15和2236_2250del15)最为常见，占到外显子19缺失总数的75%；外显子21上L858R的点突变占所有突变的45%左右；外显子18的3种点突变（G719X）约占5%；外显子20的突变占1%左右。
另外研究发现外显子20上的T790M突变与酪氨酸激酶抑制剂药物的耐药性相关。
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