血培养的最佳实践
血培养操作规范指南
血培养操作规范指南《血培养操作规范指南》嗨，小伙伴们！今天咱们来好好聊聊血培养这个事儿。
你知道吗？血培养可重要啦，就像在身体里寻找那些隐藏的小坏蛋一样。
血培养呢，就是要从咱们的血液里找出那些可能让我们生病的细菌或者真菌。
这就好比在一片大森林里找那些偷偷搞破坏的小怪兽。
医生叔叔阿姨们做血培养呀，是为了能准确地知道是什么东西让我们不舒服，然后就可以用合适的药把这些小坏蛋打败。
首先，在做血培养之前呀，我们要准备好一些东西呢。
就像我们要出去探险得带上工具一样。
得有专门用来装血的瓶子，这个瓶子可神奇啦，它就像一个小房子，专门给那些可能存在的细菌或者真菌住的。
而且呀，这个瓶子是经过特殊处理的，不是随随便便的瓶子哦。
还有呢，得有一根很细很细的针，这根针就像一个小探针，要去血液的世界里取样本呢。
护士姐姐或者医生叔叔在拿这些东西的时候呀，那可得特别小心，就像我们捧着自己最心爱的玩具一样，不能让它们受到一点污染。
那什么时候我们要做血培养呢？比如说，有人发烧啦，而且这个烧老是退不下去，就像小火苗一直在身体里烧着。
或者是身体某个地方老是发炎，吃了药也不见好。
这时候呀，医生就可能会考虑做血培养啦。
就像侦探在没有头绪的时候，要寻找新的线索一样。
做血培养的时候呢，医生叔叔或者护士姐姐会先找到我们胳膊上的血管。
这血管呀，就像一条条小河流在我们身体里流淌。
他们会先用酒精棉球在要扎针的地方擦一擦，哇，那时候感觉凉凉的呢，就像有小冰块在皮肤上滑过。
然后就把那根细细的针扎进去。
哎呀，这时候可能会有点疼，就像小蚂蚁咬了一口似的。
不过别怕，就一下下就好啦。
血液就会顺着针流到那个小瓶子里啦。
可是，这里面也有很多要注意的地方呢。
比如说，采血量一定要合适。
要是采得太少了，就像钓鱼的时候诱饵太少了，那些细菌或者真菌可能就不愿意“上钩”，检测不出来啦。
要是采得太多呢，瓶子可能装不下，就像往小杯子里倒太多水会溢出来一样。
而且呀，在采完血之后，要尽快把血送到实验室去。
血培养采集的方法及注意事项2017
血培养采集的方法及注意事项2017
2017-05-22
血培养的概念
血培养是一项实验室检查，是采集患者血液标本并接种到培 养瓶，用以发现、识别导致患者感染的病原微生物
是诊断菌血症和真菌血症的基本而重要的方法 对感染性疾病的诊断、治疗和预后都有极为重要的临床意义
血培养采集的方法及注意事项2017
采血套数
指南中强调：血培养至少送2套 除外新生儿外，成人：任何时候，不能只送一瓶！
血培养采集的方法及注意事项2017
阳性套数
1 1 2 1 2 3
采集套数
1 2 2 3 3 3
临床意义 ％
0 2 60 0 75 100
污染可能 无法确认
％
％
97
3
95
3
3 37
100
0
0 25
0
0
采集1套无法判 断是病原菌还 是污染菌
血培养的病原体 鉴定病原体，做药敏试验 指导抗菌药物的使用
能够更好的帮助医生合理用药，减少患者的死亡率
血培养采集的方法及注意事项2017
目前血培养存在的主要问题---医生
血培养重视程度不够，送检率低
血培养用处不大，治疗费用增加，有指征不送检 血培养时间长，不能适应临床需求
血培养采集的方法及注意事项2017
为何要送厌氧血培养瓶？？
❖ In this study, use of paired aerobic/anaerobic blood culture bottles yielded more staphylococci, members of the family Enterobacteriaceae, and anaerobes when compared to paired aerobic blood culture bottles.50
血培养操作方法
进行血液培养是一种常见的微生物学实验操作，用于检测血液中是否存在细菌或真菌等病原微生物。
以下是一般的血液培养操作方法：
1.准备培养基和试剂：选择适用于血液培养的富营养培养基，如琼脂平板或液体培养
基。
确保培养基未受污染并符合要求。
另外，准备好其他必要的试剂和器具。
2.采集样本：从患者的静脉血液中采集样本。
严格遵守无菌操作规范，避免外界细菌
的污染。
3.接种：将采集的血液样本分别接种在含有富营养物质的琼脂平板上，或直接加入到
含有培养基的试管中。
4.培养：将接种后的琼脂平板或试管放入培养箱中，控制适当的温度和湿度，通常在
37°C 下培养24-48 小时。
5.观察：观察培养基上是否有细菌或真菌形成的典型菌落。
根据菌落的形态、颜色等
特征初步判断细菌或真菌的种类。
6.进一步鉴定：对初步检测出的菌落进行进一步的鉴定，可以进行革兰氏染色、生化
测试或分子生物学技术等。
7.结果分析：根据鉴定结果判断样本中是否存在病原微生物，并进行相应的治疗或进
一步检查。
注意：血液培养操作需要严格遵守无菌操作规范，避免交叉污染和误判结果。
在实验过程中，确保实验室环境的清洁和消毒，以减少外部细菌的干扰。
简述留取血培养标本的方法及注意事项
1. 方法1.1 选取适当的采血管：在留取血培养标本时，首先要选择适当的采血管，通常使用含有抗凝剂的血管，如EDTA管或肝素管。
1.2 消毒皮肤：接下来要对患者的采血部位进行消毒处理，以减少外部细菌的污染。
常用的消毒剂有酒精、碘酒或氯己定等。
1.3 抽取血样：消毒后，使用一次性采血器具，将血样采集到抗凝管内，通常要留取足够的血样做血培养检验。
1.4 标注标本信息：在留取血培养标本后，务必要在标本管上标注患者的相关信息，如尊称、性莂、芳龄、病区、科室等。
2. 注意事项2.1 避免空气污染：在留取血培养标本时，要尽量避免空气污染，避免将外部空气中的细菌带入血样中，尤其在离心和接种血培养时更要注意。
2.2 注意采血技巧：采血人员要有一定的采血技巧，避免在采血过程中对患者造成过多疼痛，也要避免对血样造成不必要的污染。
2.3 避免过度摇晃：在留取血培养标本后，要避免过度摇晃标本管，以免破坏细菌的生长和培养。
轻轻摇匀即可。
2.4 选择合适的培养基：在进行血培养前，要根据临床情况和病原体的猜测，选择合适的培养基，如青霉素富养基或厌氧培养基等。
3. 丰富的续写和扩展内容3.1 血培养标本处理血培养标本的处理是非常关键的环节。
在采集完血样后，需要将标本尽快送到临床微生物实验室进行处理。
在送检前，要确保标本的密封性，避免血样泄漏或被外部污染。
要根据医学实验室的规范和操作流程进行标本的处理和运送，以确保标本的完整性和可靠性。
3.2 血培养标本的保存对于血培养标本的保存，要避免高温、阳光直射、冷冻等不利因素。
通常建议在室温下保存，但也要避免放置在过于潮湿或通风不良的环境中。
保持标本的原有状态，确保在送检前细菌的数量和种类不发生改变。
3.3 血培养标本的接种在进行血培养时，需要根据医学实验室的规范和要求进行标本的接种。
通常情况下，要使用专门的接种环境和设备，如无菌培养皿、接种环、无菌移液器等。
接种时要正确添加培养基，避免过度或不足的添加，同时要确保标本的均匀分布。
血培养采集顺序及注意事项
血培养采集顺序及注意事项血液培养采集顺序及注意事项一、血液培养采集顺序血液培养是一种常用的临床检验方法，用于检测血液中是否存在细菌或真菌感染。
在进行血液培养时，采集样本的顺序非常重要，以确保准确可靠的结果。
1.准备工作：清洁双手，穿戴好无菌手套，并准备好采血所需的器械和培养瓶。
2.先采集静脉血液：首先应采集静脉血液，因为在细菌或真菌感染时，这些病原体往往会进入血液循环。
3.采集不同部位的血液：在采集静脉血液后，可以根据需要采集其他不同部位的血液，如动脉血液或毛细血管血液。
4.分批次采集：如果需要采集多个培养瓶，应将血液分批次采集，以避免交叉感染的可能。
5.标记标本：在采集完血液后，应及时标记标本，注明患者的姓名、病历号等信息，以免混淆。
二、血液培养注意事项在进行血液培养时，还需要注意以下几点，以确保结果的准确性和可靠性。
1.无菌操作：血液培养是一项无菌操作，采集前要做好手部消毒，并穿戴好无菌手套，避免细菌的污染。
2.适当的培养瓶：根据需要选择适当的培养瓶，如常规培养瓶、革兰氏阳性菌培养瓶或革兰氏阴性菌培养瓶等。
不同类型的培养瓶可以检测不同类型的细菌。
3.采集血量：采集血液时要确保足够的血量，以保证培养的有效性。
一般来说，成人采集的血量应在10-20ml之间，儿童和新生儿的血量相应减少。
4.避免污染：在采集血液时，要避免污染，如避免血液与皮肤或其他物体接触，避免血液喷溅等。
5.及时送检：采集完血液后，应尽快将标本送至检验科，以避免血液中细菌或真菌的繁殖。
6.记录采样时间：记录采样时间非常重要，因为这有助于确定感染的来源和感染的进展情况。
通过正确的血液培养采集顺序和注意事项，可以提高血液培养结果的准确性和可靠性，为临床诊断和治疗提供有力的支持。
希望本文对大家有所帮助。
血培养操作流程及评分标准
-5
5、去除培养瓶上的封盖瓶帽，用75%酒精棉球用机械力摩擦消毒培养瓶橡皮盖，待干。
5
-5
6、抽血量成人：8一10ml血液／成人瓶;儿童或婴幼儿：1一3ml血液／儿童瓶。
5
-5
7、成人在不同部位采集两套血，每套两瓶（需氧、厌氧各一瓶），至少应采集一套血培养（需氧、厌氧应从不同部位分别采集）；儿童应采集两瓶儿童需氧瓶（从两个部位分别采集）。
3、在标本量少的情况下，应首先满足需氧瓶用量；己采集的血培养标本必须立即送检，如不能立即送检，可放置室温，勿放冰箱保存；从外周静脉导管和中心静脉导管采取的血标本很可能存在非感染菌的污染，检验单上须注明采血部位。
总分
100分
5
-5
2、向患者/家属解释血培养的目的
5
-5
3、将病人放置合适体位，充分暴露操作区域（注意保暖及病人隐私权的保护）。
5
-5
4、洗手（用手消剂），消毒肘静脉穿刺部位皮肤及周围，选择静脉和穿刺点，用75%乙醇从中心点向外消毒皮肤，再用碘酊按同样的方法消毒，待干后（0.5-lmin）用乙醇棉球擦去碘迹，再用双针采血系统直接穿刺肘静脉。
10
-5
-5
8、用75％乙醇去除血培养瓶上的血液并进行消毒。
10
-5-5
9、中心静脉留置导管血标本的采集：用75％乙醇消毒导管及其周围皮肤，再用碘酊按同样的方法消毒，待干（0.5﹣lmin )，拔去导管盖，消毒针心，先插入无菌注射器抽取至少0.5﹣1.0ml血液弃去（以消除干扰因素和导管末端的污染），另取一无菌注射器抽取0.5﹣1.0ml血液注入儿童培养瓶内送检，然后在导管内注入肝素或无菌生理盐水。
10
-5
-5
10、导管暂停输液，抗生素封管。
如何采集血培养标本
如何采集血培养标本
通过血培养，我们可以鉴定血中是否存在细菌和其他微生物（酵母菌和丝状真菌）。
血中出现这些微生物分别称为菌血症或真菌血症，健康机体血循环中应是无菌的。
细菌入侵导致菌血症的患者出现了严重的临床表现，如寒战、发热、全身倦怠、中毒症状和低血压，甚至休克或死亡。
采集血液标本要求如下：1、血液标本采集的时机：血液标本应尽可能的在用抗生素前采集。
最好的时机是预计寒战或体温骤升之前。
血液标本应尽可能的在经验性用抗生素前采集，这一点很重要。
如有必要，可在药敏结果回报后适当调整；
2、采集血量：血液中每毫升中细菌数往往很少的，所以必须采集足够量的血液：每次穿刺一般成人取血10 毫升；儿童往往细菌量较多。
2-5 毫升即可；
3、皮肤消毒：静脉穿刺部位的皮肤必须用杀菌消毒剂仔细备皮：用碘伏消毒2 次。
选自《北京康益德中西医结合肺科医院209期院报》。
血培养标本采-V1
血培养标本采-V1血培养标本采血液培养是一种检查血液中是否存在病原菌的常用方法，常用于寻找感染病原体的迹象以及识别其类型，从而帮助医生确定合适的治疗方案。
然而，对于一份血液样本来说，采集过程中的优质实践对检查结果有重要影响。
以下是关于采集血液样本用于培养的几种务必遵守的实践：1.采样时间在进行血液培养之前，需要在采样前消毒采样部位，之后要采集血液样本，确保采集的时间不超过1个小时。
采样尽可能在症状发生后12-18小时内完成，这样可以最大限度地提高成功检测病原体的机会。
2.消毒在采血之前消毒采血部位是非常重要的，防止细菌和其他微生物在皮肤上繁殖并污染血液样本。
通常情况下，使用70％的酒精用于消毒。
消毒过程中，需要彻底地擦洗采样部位，并允许酒精蒸发以避免酒精残留。
3.采集标本量采集的血量是确保培养结果准确的重要因素之一。
对于每个血液容器，需要收集指定的血液量，从而确保细菌或真菌在标本内的分布均匀。
错误的血液量会使培养过程中得到不特异或低容量的结果。
4.采集样本的正确方式在确定采集的部位和量之后，需要选择正确的技术来采集血液。
常用的技术包括需要采集静脉血液的导管、采集静脉血液的模式和采集动脉血液的模式。
在采集血液之前，需要使用适当的注射器，即使对于最细微的血管，在复杂的放置情况下都禁止停滞不前。
血培养可以在短时间内提供大量的有效信息，但是在进行血液样本采集时，要遵循正确的规程是至关重要的。
正确的操作流程可以最大程度地提高血培养结果的准确性，从而将正确的治疗方案指导给患者。
因此，进行血液样本采集时，必须要严格遵循相关的制度和规定，从而确保采集的样本的准确性和有效性。
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1.3 阳性血培养的临床意义
经验治疗
A I A A I
A
I I
培养后
A A I A I I A I
药敏后 T
A
A
A I A I I I
相关死亡率 (%)
10.5 13.3 20.0 20.0 25.8 28.6 0.0 (2) 33.3
相关风险
1.0 1.27 1.91 1.91 2.46 2.73 0.05 3.18
集。 （儿童采血量少，更应注意颠倒混匀）
医院常用血培养瓶
树
含
脂
溶
需
血
氧
素
瓶
厌
氧
瓶
树
分
脂
枝
儿
杆
童
菌
瓶
瓶
及
真
菌
瓶
采集标本前：于室温保存，切勿冷冻。如冷藏需恢复至室温使 用。
采集标本后：尽快送微生物室，如无法及时送检，应置于室温，
不能置于冰箱或温箱，以免影响检出。
结论：
只要怀疑血流感染，应做血培养(发热要做血培养)
血培养临床实践指南
CLSI Principles and Procedures
for Blood Culture; Approved Guideline (M47-P,2006)
美国【临床实验室标准化协会】
血培养的关键要点
采血指征 采血时机 采血套数 接种血量 消毒灭菌
问题： 血培养的指征是什么?
中华医学会检验医学分会建议一般患者 出现以下一种体征时可作为采血的重要指征
⑴发热( ≥38 ℃) 或低温( ≤36 ℃)
⑵寒战
⑶白细胞增多(计数大于10.0 ×109/ L ,特别有“核左
移”时)
⑷皮肤黏膜出血
⑸昏迷 ⑹多器官衰竭
发热要做血培养！
⑺血压降低
⑻C 反应蛋白,PCT，SAA升高
⑼血液病患者出现粒细胞减少，血小板减少等
2－3套血培养，有助于污染的判断。
Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333
问题： 为什么要做厌氧培养？
厌氧培养的研究分析
根据文献，厌氧瓶除了检出厌氧菌，另外对葡萄 球菌，肠杆菌科细菌以及苛养菌的检测有优势
资料显示：16%的链球菌和17%的肠杆菌科细菌血 培养时仅厌氧瓶报告阳性1
怀疑血流感染时应常规行血培养
摘自：《血培养检测规范化操作》，主编：徐英春、倪语星、王金良，上海科学技术出版社
怀疑血流感染，何时采血最佳？
体温
寒战 血培养
菌血症的水平
0
30
60
0
时间 (3分0 钟)
60
体温与细菌浓度并不完全同步
怀疑血流感染，何时采血最佳？ 答 案：
• 寒战时，体温高峰前采集最好。但是错过了没关 系
90%阳性标本可在12小时内被检测，36小时内可检测出 99%的阳性标本。
与孵育7天相比，只有0.3%有临床意义的阳性血培养在5 天内不能被检出。设定5天为孵育周期是最具有性价比 的。
Huang, et al., European Journal of Clinical Microbiology 17: 637. 1998 (Cockerill, et al. CID 2004)
65％
1套
Cockerill, CID 2004
80％ 2套
96％ 3套
99％ 4套
血培养套数
表皮葡萄球菌的临床意义
阳性套数 采集套数
1
1
1
2
2
2
1
3
2
3
3
3
临床意义 ％
0 2 60 0 75 100
污染可能 无法确认
％
％
97
3
95
3
3 37
100
0
0 25
0
0
采集1套无法判 断是病原菌还 是污染菌。
问题： 应该采集多少血液?
采血量与检出率的关系
100 90 80 70 60
检出率％ 50
40 30 20 10
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
ml
每增加1毫升，成年人真性菌血症阳性检出率增加3％
要采集少血液? 答 案：
采血量是影响灵敏度最关键因素 成人一份标本2个培养瓶（需氧＋厌氧），每瓶8－10ml，共
75%乙醇擦拭静脉穿刺部位，等待30秒
1-2% 碘酊30秒或10%碘伏消毒60秒 ，从穿刺点向外画圈消毒,直径1.52cm.
用75%乙醇消毒 60秒（脱碘），待 酒精挥发干燥后采血.
注意：对于碘过敏的患者，只能使用 75％乙醇消毒60秒，待酒精挥发干 燥后采血.
细菌是干死的，不是淹死的
• 其他皮肤消毒方法
厌氧瓶平均报阳时间快于需氧瓶
62套血培养大肠埃希菌培养瓶分析
厌氧瓶先报警
53
需氧瓶先报警
9
0
20
40
60
厌氧瓶平均报阳时间 需氧瓶平均报阳时间
35
30
小时
25
20
15
10
5
0
大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌 肠球菌
葡萄球菌
厌氧培养的意义
提高厌氧菌感染患者的诊断率 提高临床常见兼性厌氧菌的检出率 早期报告时间 保证了足够的采血量
标本（Ⅱ级）。 • 但对怀疑血管内的感染，则应该间隔一段时间取不同部位的静脉穿刺
抽血，有助于诊断持续性菌血症（Ⅱ级）。 • 成人：任何时候，绝对不能只送一瓶！
Crit Care Med 2008 Vol. 36, No. 42；0 CLSI指南；英国指南
血培养套数与阳性检出率（％）
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
20ml；要求至少采两份标本，即40ml。 儿童一般只需采集儿童需氧瓶，在保证采集血量＜1％总血量
下，一般为1－3ml 采血量不足时应优先保证需氧瓶，因临床90％以上的感染为需
氧菌或兼性需氧菌感染
利用瓶身 刻度准确 采血
BD BACTEC 每个瓶 都清晰显示最佳采血量
血培养孵育时间
CLSI推荐全自动系统只需孵育5天
重视血流感染 规范送检血培养标本
BD临床诊断部门
宋伟
2018.3.14
2015年标本培养状况
江苏省人民医院 香港玛丽医院
培养标本25746份 12% 培养标本276215份 14.5%
血培养重要吗？
血培养是血流感染检测中最有价值的诊断工具 阳性血培养能确定血流感染中的病原体 抗菌药物敏感试验，指导抗菌药物治疗
洗必泰使用方法： 葡萄糖酸洗必泰作用30 秒，但不适用于2个月以内的 新生儿。
安尔碘使用方法：
原液均匀涂擦二遍，或用原液直接喷于消毒部位二 次。作用1-2分钟。（参照厂家说明书）
细菌是干死的，不是淹死的
培养瓶的消毒程序：
1. 去掉培养瓶口的塑料瓶盖。 2. 75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60秒。 3. 自然待干。 4. 将标本注入培养瓶内。 5. 颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝
19
指南中强调：血培养至少送2套4瓶
• 在发热开始的24 h内进行血培养。 • 尽力保证在抗感染治疗前获得首份血培养标本。 • 同时经2个独立部位抽取血标本，此结果比单一部位的血培养更有临床
意义。除外新生儿外，不建议只进行单套血培养（Ⅱ级）。 • 48-96 h后评估治疗效果，再次血培养不能单取1套，必须同时抽取2套
• 体温峰值采血，并不显著增加阳性率
J Clin Microbiol. 2008;46(4):1381-5. Ann Oncol. 2007， 18(11):1870-4.Pediatr Rep. 2011，3(1):e4.
17
问题： 应该采几套血液标本?
血培养：“一套”或“一份”的定义
“一次静脉穿刺 + 2个血培养瓶”= “一套或一份血培养”
判断感染性疾病的类型
评价疗效及预后
正确采取感染控制措施 • 是否隔离 • 减少院内感染
血培养是诊断血 流感染的金标准
国内血培养现状
—阳性检出率低10%（国外约为15％）
原因何在？
血流中含菌量低 血液中抗菌物质 抗生素的应用
血培养的临床实践 欠规范！！
培养条件限制
二、血培养的规范实践
问题： 如何进行消毒与标本采集？
护理老师们，您知道您有多重要！
血培养的采集：无菌操作
血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、 凝血等其它标本要高。
所以要最先采集血培养标本。 污染率的指标是 < 3%
（100份标本里只能有不到3个标本出现污染）
细菌是干死的，不是淹死的
皮肤消毒程序（三步法）：
床科室！
一、血培养概念与意义
1.1 血培养概念
采集患者的血液或无菌体液标本,送至微生物实验室 培养检测.
检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存在. 如有细菌,则极有可能为致病的细菌. 进一步进行鉴定/药敏试验.
1.2 血培养检测的意义
根据培养结果：
选择正确的抗感染治疗方案 或调整经验治疗方案
阳性血培养能显著改善治疗而降低死亡率
• A = Appropriate Therapy（正确治疗） • I = Inappropriate Therapy（不正确治疗） • Clin Infec Dis 24:584-602, 1997
共同优化血培养的流程
医生
护士
检验科
沟通--有效的连接检验科微生物室与临
Khanna等2对7072份同时做需氧瓶和厌氧瓶的血培 养结果分析显示: