酶法提取枸杞多糖工艺研究
酶法提取枸杞多糖的工艺研究
酶法提取枸杞多糖的工艺研究李阳;赵春玲;王晓晓;张成军;万端极【摘要】研究了酶法提取枸杞多糖的工艺，探讨了酶的种类、 pH值、料液比、酶解温度、酶解时间等对多糖提取率的影响。
结果表明：果胶酶的提取效果最好；果胶酶最佳工艺条件为pH值为3.5，料液比为1：45，温度为55℃，时间为2 h，此条件下枸杞多糖的提取率达7.40％。
%The enzymatic hydrolysis method was used for extraction of polysaccharide from lycium barbarum was investigated.The effects of the kinds of enzymes , pH, solid -liquid ratio, temperature and time on the extraction of polysaccharide werestudied.The experimental results showed that using pectinase to extract polysaccharide could achieve the optimal effect.The optimized process parameter was pH 3.5, solid-liquid ratio 1:45, temperature 55℃, and time 2 h.Under optimal conditions , the extraction rate was 7.40%.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2014(000)020【总页数】3页(P59-60,65)【关键词】果胶酶;枸杞多糖;提取【作者】李阳;赵春玲;王晓晓;张成军;万端极【作者单位】湖北工业大学轻工学部，湖北武汉430068;湖北工业大学轻工学部，湖北武汉 430068;湖北工业大学轻工学部，湖北武汉 430068;湖北工业大学轻工学部，湖北武汉 430068;湖北工业大学轻工学部，湖北武汉 430068【正文语种】中文【中图分类】TS255.1现代科学研究表明，枸杞的药理作用与其生物活性成分枸杞多糖(LBP)密切相关。
枸杞多糖的提取和人体免疫调控研究
枸杞多糖的提取和人体免疫调控研究枸杞是一种传统的中药材，而枸杞多糖则是其主要成分之一，被广泛应用于中药制剂中。
近年来，随着免疫疗法的逐渐普及，枸杞多糖被认为是一种重要的免疫调节剂。
在此背景下，如何有效地提取枸杞多糖，并探索枸杞多糖对人体免疫调节的作用，成为了当前枸杞多糖研究的重要课题之一。
一、枸杞多糖的提取方法枸杞多糖是枸杞中的一种天然高分子化合物，其提取方法主要分为水提法、超声波提取法、微波提取法、酶解提取法、真空提取法等。
不同的提取方法对枸杞多糖的提取效率、产量、糖类组分等有着不同的影响。
因此，在提取枸杞多糖时，需要根据实验的具体目的和要求选择合适的提取方法。
水提法是常见的提取方法之一，其主要过程为将枸杞粉末与水混合，并进行适当的加热和搅拌，使枸杞多糖在水中溶解，并最终得到多糖粗提物。
这种提取方法简单易行，操作方便，但是相对于其他方法，其提取效率较低。
超声波提取法是利用超声波的物理效应进行提取的一种方法，其主要原理为利用超声波的震荡作用和旋转流体效应，使枸杞多糖从植物材料中脱离并汇集在液体中。
这种方法能够提高多糖的提取效率和产量，但是操作较为复杂。
微波提取法是一种利用微波的物理效应进行提取的方法，其主要原理为利用微波的电磁波能量对物质的温度进行提高，使多糖迅速溶解在液体中。
这种方法具有操作简单、提取效率高等优点，但是其技术要求较高，需要仔细控制微波功率、时间等参数。
酶解提取法是利用酶对纤维素等难以降解的物质进行分解，并将枸杞多糖提取出来的一种方法。
这种方法提取的多糖成分较为纯净，但是操作成本较高。
真空提取法是将枸杞粉末置于真空下，利用低压下的温度和压力变化，将多糖迅速从材料中挥发出来的一种方式。
这种方法能够提取多糖的同时保持原料的营养成分，但是提取效率较低。
二、枸杞多糖对人体免疫调节的作用枸杞多糖在免疫调节方面具有重要的作用。
研究表明，枸杞多糖能够诱导巨噬细胞、T淋巴细胞、自然杀伤细胞等免疫细胞的活化，增强机体的免疫功能，提高机体抗病能力。
枸杞多糖提取工艺的研究
枸杞多糖提取工艺的研究
枸杞多糖是一种天然的多糖物质，具有多种生物活性，如抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等。
因此，枸杞多糖的提取工艺研究备受关注。
首先，枸杞多糖的提取方法有很多种，如水提法、酸提法、碱提法、超声波提法等。
其中，水提法是最常用的方法之一。
其具体流程为：将枸杞浸泡在水中，然后将其加热至一定温度，过滤后得到浸提液，再用醇沉、离子交换层析等方法纯化得到枸杞多糖。
其次，影响枸杞多糖提取的因素有很多，如浸提温度、浸提时间、浸提液比、pH值等。
其中，浸提温度是影响提取率的关键因素之一。
一般来说，温度越高，提取率越高。
但是，过高的温度会导致多糖分解，从而影响其生物活性。
因此，在选择浸提温度时需要权衡提取率和生物活性。
最后，枸杞多糖的应用前景非常广阔。
它可以用于保健品、医药、食品等领域。
例如，在保健品中，枸杞多糖可以作为一种天然的抗氧化剂，对人体具有很好的保健作用。
在医药领域，枸杞多糖可以用于治疗肿瘤、心血管疾病等。
在食品领域，枸杞多糖可以作为一种天然的添加剂，增强食品的营养价值。
综上所述，枸杞多糖的提取工艺研究对于发掘其生物活性、拓展其应用领域具有重要意义。
未来，我们还需要进一步深入研究其提取工艺和生物活性，并探索其在更广泛领域的应用前景。
枸杞中枸杞多糖的药理作用及提取方法的研究进展
枸杞中枸杞多糖的药理作用及提取方法的研究进展摘要：研究表明，枸杞具有调节机体免疫、抗肿瘤、抗氧化、延缓衰老、降血脂、降血糖、保护遗传系统等药理作用。
枸杞多糖为其主要有效成分。
近几十年对枸杞多糖的研究多集中于其药理作用以及提取、分离、纯化及检测方面[1]。
本文对枸杞的主要有效成分枸杞多糖的药理作用及其提取纯化工艺的研究进展做一综述。
目的：为枸杞多糖的进一步临床应用和研发提供参考。
关键词：枸杞；枸杞多糖；药理作用；提取Summary: The research indicate that the Lycium barbarum has the effect such as immunomodulation, anti-tumor,antioxidation, delaying senescence, lowering blood sugar, blood fat ,protect genetic system and so on. Its main effective component is LBP. In recent several decades, the research on LBP is most concentrate on its pharmacological effects, extraction, isolation and purification,assaying[1]. This article makes a review of the pharmacological activities and extraction industrial art on the main effective component of Lycium barbarum —polysaccharide. It provides the reference for LBP’s further clinical application and further research.Keywords: Lycium barbarum ; Lycium barbarum polysaccharide(LBP) ; pharmacological effects ;extraction枸杞为茄科植物宁夏枸杞Lycium barbarum L的成熟果实；性味甘平，归肝肾经。
微波法提取枸杞多糖工艺研究
参考文献 ［１］林华．话说枸杞多糖．中国食品，２００１，１５：７． ［２］王航宇，刘金荣，但建明，等．新疆枸杞多糖的超声波提
取及含量的测定．中药材，２００２，２５（１）：４２－４３． ［３］倪慧，何爱华．新疆枸杞多糖的提取及含量测定．中成药，
１９９３，１５（１）：３９－４０． ［４］付志红，谢明勇，聂少平．微波技术用于车前子多糖的提
（２ ）微波法提取枸杞多糖精密称取干枸杞５ｇ，剪 碎，置于烧杯中，加入一定量的蒸馏水和一定量的碱液， 置于微波炉中调整ｐＨ值、微波功率、微波处理时间、水 料比进行提取。提取后用滤布过滤入２００ｍｌ容量瓶。用蒸 馏水洗涤滤渣，合并滤液，定容。待冷却至室温后，吸取 ５ｍｌ提取液，加入５倍体积９５％食用酒精，静置１６ｈ沉淀， 将醇沉液离心分离（３０００ｒ／ｍｉｎ，１０ｍｉｎ）。所得沉淀用 无水乙醇、丙酮、乙醚多次洗涤，得粗枸杞多糖。
由表１和表２极差及方差分析可知，影响枸杞多糖提 取率的各因素主次关系为：提取液ｐ Ｈ 值＞ 微波处理时
间＞微波功率＞料液比。由方差分析表可知，对于提取时 ｐＨ值和提取时间，Ｐ＜０．０１，说明提取时ｐＨ值和提取时 间在ａ＝０．０１的水平上存在极显著的差异。对于微波功率 与料液比，Ｐ＜０．０５，说明微波功率与料液比在ａ＝０．０５水 平上存在显著差异。最优条件为ｐＨ８，提取时间２ｍｉｎ， 微波功率４５０ｗ，料液比１∶１０，即Ｂ３Ｃ１Ｄ２Ａ２。取３份枸杞 样品以最优条件提取枸杞多糖，测得枸杞多糖提取率平 均值为１０．４９％。
由图２可知，随着微波处理时间的延长，多糖提取 率先上升，达到一定值后，出现了下降，可能是由于处
９
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微波处理时间（ｍｉｎ）
图 ２ 提取时间对提取率的影响
枸杞多糖酶法提取及其对油脂的抗氧化性能研究
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微波辅助复合酶法提取枸杞多糖及其抗氧化活性研究
微波辅助复合酶法提取枸杞多糖及其抗氧化活性研究
陈建双;苗惠;杨雪;杨洋
【期刊名称】《粮食与油脂》
【年(卷),期】2024(37)2
【摘要】采用微波辅助复合酶法提取枸杞多糖。
以多糖得率为指标,在单因素试验的基础上通过响应面法优化提取工艺,并评价其抗氧化活性。
结果表明:最佳提取工艺为纤维素酶∶果胶酶∶蛋白酶质量比3∶1∶2、加酶量7%(以枸杞质量计)、酶解时间2.50 h、微波时间4 min、酶解温度52℃、酶解pH 5.2,在此条件下,枸杞多糖得率为24.37%±1.65%,制得的枸杞多糖对DPPH·和ABTS^(+)·的清除率分别为62.07%、47.82%,表明其具有较好的抗氧化活性。
【总页数】6页(P132-136)
【作者】陈建双;苗惠;杨雪;杨洋
【作者单位】承德医学院基础医学院;河北省神经损伤与修复重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.1
【相关文献】
1.竹笋多糖复合酶法辅助提取及抗氧化活性研究
2.遗传算法优化超高压辅助复合酶提取枸杞多糖工艺及其抗炎活性研究
3.超滤辅助复合酶法制备枸杞多糖工艺优化及抗氧化活性研究
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纤维素酶提取枸杞多糖及工艺优化
Ｎｏ．３．２００７食品科技枸杞为茄科（Ｓ．ｌａｎｃｅａｅ）茄族（Ｓ．ｌａｎｃｅａｅＲｅｉｈｂ）、枸杞亚族（Ｌｙｃｉｉｎａｅｗｅｔｔｓｔ）枸杞属（ＬｙｃｉｕｍｉｕｍＬ．）植物。
枸杞子（ＦｒｕｃｔｕｓＬｙｃｉｉ）始载于《神农本草经》，为枸杞的干燥成熟果实，历版《中国药典》均有收载［１－５］。
临床医学研究表明，枸杞具有调节免疫、抑制肿瘤、延缓衰老、抗脂肪肝、降血脂、降血糖和抗疲劳等作用，而其药理作用与其生物活性成分枸杞多糖密切相关［９］。
近年来，纤维素酶逐渐应用于中草药有效成分提取，如马田田等［６］将纤维素酶用于黄柏小檗碱提取的预处理，小檗碱的收率可从０．８７％提高到１．１７％。
本研究将纤维素酶应用于枸杞多糖的提取，并采用正交实验优化了其提取条件，为酶法提取中药材提供了参考。
１材料和方法１．１实验材料宁夏枸杞王：宁夏枸杞的干燥成熟果实，烘干制成粉末备用；纤维素酶：上海国药集团化学试剂公司，酶活性≥１０Ｕ／ｍｇ；氯仿、苯酚、硫酸、甲醇（Ｍｅｔｈａｎｏｌ）：收稿日期：２００６－０９－０７＊通讯作者作者简介：王岩岩（１９８０－），女，硕士，讲师，主要从事食品生物技术教学及研究工作。
纤维素酶提取枸杞多糖及工艺优化王岩岩，陈东海，车烈权，吴光旭＊（长江大学生命科学院，荆州４３４１００）摘要：通过单因素和正交实验对纤维素酶提取枸杞粗多糖的工艺条件进行优化，结果表明：最佳酶解工艺条件为纤维素酶用量０．４５％、ｐＨ为４．５、酶解温度５０℃、酶解时间１６０ｍｉｎ，在此优化条件下，提取枸杞粗多糖的得率为２３．６８％，与热水法浸提的粗多糖８．６５％相比有明显提高。
其中采用酶法提取的粗多糖中的枸杞多糖含量也提高到了３１．３％，为热水浸提法所得枸杞多糖含量的１．８倍。
关键词：纤维素酶；枸杞；多糖中图分类号：ＴＳ２０１．１文献标识码：Ａ文章编号：１００５－９９８９（２００７）０３－０１０４－０３ＰｒｏｃｅｓｓｉｎｇｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎａｎｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＬｙｃｉｕｍｂａｒｂａｒｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｂｙｃｅｌｌｕｌａｓｅＷＡＮＧＹａｎ－ｙａｎ，ＣＨＥＮＤｏｎｇ－ｈａｉ，ＣＨＥＬｉｅ－ｑｕａｎ，ＷＵＧｕａｎｇ－ｘｕ＊（ＬｉｆｅａｎｄＳｃｉｅｎｃｅＣｏｌｌｅｇｅｏｆＹａｎｇｔｚｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｎｇｚｈｏｕ４３４１００）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｎｂａｓｉｓｏｆｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒａｎｄｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＬｙｃｉｕｍｂａｒｂａｒｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｂｙｃｅｌｌｕｌａｓｅｗａｓｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅａｓｆｏｌｌｏｗｓ：ｔｈｅａｍｏｕｎｔｓｏｆｃｅｌｌｕｌｏｓｅｗａｓ０．４５％，ｔｈｅｐＨｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｍｅｄｉａｗａｓ４．５，ｔｈｅｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ５０℃ａｎｄｔｈｅｅｎｚｙｍｏｌｙｓｉｓｔｉｍｅｗａｓ１６０ｍｉｎ．Ｉｎｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｔｈｅｙｉｅｌｄｏｆｃｒｕｄｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｏｆＬｙｃｉｕｍｂａｒ－ｂａｒｕｍｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙｃｅｌｌｕｌｏｓｅｗａｓ２３．６８％，ｗｈｉｃｈｈａｄａｎｏｂｖｉｏｕｓｉｎｃｒｅａｓｅｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈ８．６５％ｏｆｃｒｕｄｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｗｉｔｈｈｏｔｗａｔｅｒ．ＡｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＬｙｃｉｕｍｂａｒｂａｒｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｂｙｅｎｚｙｍｏｌｙ－ｓｉｓｗａｓ３１．３％，ｗｈｉｃｈｗａｓ１．８ｔｉｍｅｓｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＬｙｃｉｕｍｂａｒｂａｒｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｗｉｔｈｈｏｔｗａｔｅｒ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ；Ｌｙｃｉｕｍｂａｒｂａｒｕｍ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｓ工艺技术１０４Ｎｏ．３．２００７食品科技分析纯；葡萄糖：上海化学试剂厂。
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技术·食品工程＞＞＞C酶法提取枸杞多糖工艺研究梁敏1邹东恢1，2郭建华1，2（1．齐齐哈尔大学2．黑龙江省普通高校齐齐哈尔大学农产品加工重点实验室）【摘要】本文研究了酶法提取枸杞多糖的最佳工艺条件以及枸杞中多糖的分离方法。
采用木瓜蛋白酶处理，对作用温度、加酶量、最适pH值、作用时间进行正交试验。
确定了酶法提取枸杞多糖的最佳工艺：加酶量0．3％，酶解反应的pH值为7．0，温度为45℃，反应时间为2h，提取率可达14．9％。
【关键词】枸杞多糖；酶法提取；正交试验；工艺中图分类号：TS255．7文献标识码：A文章编号：1673-7199(2010)03-0104-03枸杞子为茄科植物枸杞的成熟果实，是我国传统的滋补中药材。
《本草纲目》中记载枸杞子具有坚筋骨、补精气诸不足、明目安神、令人长寿等功效。
目前人们对枸杞子多糖进行了较广泛的研究，发现枸杞多糖具有增强机体免疫力、抗肿瘤、抗衰老、降血脂、降血糖、抗疲劳、护肝、防辐射、抗缺氧等功效，且无任何毒副作用，因此枸杞多糖的分离纯化及其药理作用研究已成为一个热点课题。
近年来生物酶广泛应用于各个领域，在国内也开始将其应用于药物提取中，枸杞多糖通常被包裹在植物细胞壁内，并且多糖往往和蛋白质结合在一起，以蛋白多糖的形式存在。
研究表明中性蛋白酶能有效酶解与多糖结合在一起的蛋白质，从而将多糖释放出来而提高多糖的得率，提高了多糖的纯度，对枸杞多糖的研究开发具有现实意义。
1试验方法与工艺过程1．1试验原料从市场中购得新鲜枸杞，清洗干净，去除杂质，之后适当切块放入真空干燥箱干燥，待枸杞恒重，放入粉碎机中粉碎，将粉碎后的枸杞粉依次通过40、60、80、100目的筛，过筛之后把各级枸杞粉分别装到清洁干燥的烧杯中，置于真空干燥箱中待用。
1．2试验试剂与仪器木瓜蛋白酶，北京世纪时尚科贸有限公司；Sephadex G－75，Pharmacia；苯酚，天津市科密欧化学试剂开发中心；葡萄糖、活性炭，天津市凯通化学试剂有限公司；使用试剂均为分析纯。
真空干燥箱，上海益恒试验仪器有限公司；电热恒温水浴锅、离心机、透析袋、THZ－82A台式恒温振荡器，上海跃进医疗器械厂；HL－2S恒流泵，上海青浦沪仪器厂；九阳料理机，山东九阳小家电有限公司；SHZ－D（III）循环水式真空泵、722紫外分光光度计、PB－10pH计，北京赛多利斯仪器系统有限公司；BSZ－100自动部分收集器，上海沪西仪器厂；Lambda－35紫外可见分光光度计，美国PE公司。
1．3试验方法与步骤称取80目的枸杞粉3g，放入到250mL的三角瓶中，然后加蒸馏水35mL混合均匀后置于40℃水浴锅中，水浴30min，调节pH值，加入一定比例木瓜蛋白酶混合，加入5mL蒸馏水溶解，枸杞溶液放在水浴中预热至酶解温度，将酶液加入到枸杞溶液中，在恒温振荡器上提取，反应结束，将三角瓶放到沸水锅中，10min沸水浴灭酶，灭酶结束，冷却至室温，将酶提取液放入到离心管中，调至5000r／min离心，取上清液，即得到酶提取多糖清液。
1．4葡萄糖标准曲线的制定以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作图，绘制标准曲线，获得线性回归方程。
直线方程为：Y＝104C ＜＜＜食品工程·技术表1酶法提取枸杞多糖正交试验结果试验号加酶量A （％）温度B （℃）pH 值C时间D （h ）多糖提取率（％）11（0．3）1（35）1（5．0）1（1）12．6212（45）2（6．0）2（2）14．6313（55）3（7．0）3（3）13．742（0．2）12312．35223113．06231213．373（0．1）13213．18321311．09332110．7K 140．938．036．936．3K 238．638．637．641．0K 334．837．739．837．0k 113．612．712．312．1k 212．912．912．513．7k 311．612．613．312．3R2．00．31．01．6图1粒度对枸杞多糖提取率的影响图2料液比对枸杞多糖提取率的影响0．5528X ＋0．0114，回归系数为0．9961，在5～50μg ／mL 范围内呈良好的线性关系。
1．5多糖总量的测定采用苯酚－硫酸比色法，在490nm 波长处测定吸光度，再通过已经测定的葡萄糖标准曲线计算求得枸杞中的多糖含量。
1．6蛋白质去除方法采用Sevag 法去除粗多糖中的蛋白质。
1．7多糖的分离提取枸杞多糖在NaOH 水溶液中溶解度大，所以先用0．5％氢氧化钠初步提取，之后取清液，用透析袋透析去除杂离子，透析后去除杂蛋白，2％浓度活性炭脱色1h ，加入无水乙醇，使溶液中乙醇的浓度达到75％进行醇沉，醇沉过程中要将其保存在4℃冰箱中，保持24h ，4500r ／min 离心15min ，取沉淀，置于真空干燥箱中干燥，即可得到枸杞粗多糖。
1．8多糖的纯化枸杞多糖粗品水溶解后用SephadexG－75色谱分离，干燥获得纯枸杞多糖。
2结果与讨论2．1物料粒度对枸杞多糖提取率的影响物料粒度对提取率将有较大影响，将粉碎后的枸杞粉依次通过40、60、80、100目的筛，得到40以下、40～60、60～80、80～100、100目粒度以上的样品，取一定量样品，选择料液比1∶15，温度45℃水浴中浸提1h ，结果如图1所示，80～100目粒度物料多糖提取率最高。
2．2料液比对枸杞多糖提取率的影响选择料液比1∶l0、1∶15、1∶20、1∶25、1∶30，分别于45℃水浴中浸提1h ，枸杞多糖提取率（％）分别为2．4、3．2、3．5、3．6、3．6，结果如图2所示，当料液比在1∶15～l∶25之间多糖提取率增长较快，继续提高料液比多糖提取率仍有升高，但提高速率减小。
对料液比的选择，若加水太少提取不彻底；加水太多，降低了提取液的固形物含量，不利于以后的分离，而且加重了生产中负担，因此试验确定料液比为1∶25。
2．3正交试验结果影响枸杞多糖的提取因素很多，通过预试验选择其中的4个因素作为研究的对象：加酶量（对底物）、酶解温度、pH 值、反应时间。
每一个因素又包括3个水平，选择四因素三水平正交试验，试验结果见表1。
由表1可知：按极差的大小顺序是A＞D＞C＞B ，以A 为主要因素，D 次之，C 再次之，B 是次要因素。
经比较4个因素的不同水平下的各自的平均值，发现A 1D 2C 3B 2在每个因素的4个水平下对枸杞多糖的提取率105技术·食品工程＞＞＞C 图3SephadexG－75色谱分离图图4枸杞多糖紫外吸收图谱的提高最大，由此确定枸杞多糖的提取率的最优条件为A 1D 2C 3B 2。
通过正交试验得到酶法提取枸杞多糖的最佳工艺条件为：加木瓜蛋白酶0．3％，酶解温度45℃，pH 值7．0，反应时间2h ，采用酶法工艺优化得到多糖的提取率为14．9％。
2．4色谱分离样品制备（1）待纯化样液的制备：称取干燥后的粗多糖50mg ，在100mL 容量瓶中定容。
（2）色谱柱：柱长80cm ，直径2．0cm 。
装柱60cm ，填充物为SephadexG－75。
洗脱液为0．05moL ／L 的NaCl ，在流速5mL ／h 下平衡72h 。
取粗多糖10mL ，上柱。
用恒流泵控制流速（15mL ／h ），自动部分收集器收集，每管收集2．0mL ，用苯酚－硫酸法测定各洗脱液490nm 处吸光度，由吸收曲线得到一个吸收峰，收集其流出液，冷冻干燥得到纯化样品。
2．5枸杞多糖紫外吸收分析紫外吸收光谱应用很广，可用于有机化合物的结构表征和有机化合物定量分析。
由于此法灵敏度高，能检查出10－4～10－5moL ／L 甚至10－6～10－7moL ／L 浓度的化合物，因此在本试验中采用此法测定其中的微量杂质蛋白质，结果如图3所示。
采用美国PE 公司的Lambda－35紫外可见分光光度计，在190．0～1000．0nm 范围内对提取的枸杞多糖进行紫外光谱扫描，从多糖紫外吸收图谱（图4）上可见扫描吸收曲线较为光滑，在280nm 处的曲线未出现峰值，所以蛋白质的含量非常微小。
3结论（1）本试验采用木瓜蛋白酶处理枸杞，得到优化试验条件为：加木瓜蛋白酶量为0．3％，酶解反应的温度为45℃，pH 值为7．0，反应时间为2h ，提取率为14．9％，采用酶法提取枸杞多糖相比于传统工艺提取率提高65．6％。
（2）多糖样品的紫外扫描得到的紫外吸收图谱可以看出在280nm 处的曲线未出现剧烈波动或峰值，所以采用此法提取的枸杞多糖产品中蛋白质的含量微小，为进一步提取制备枸杞多糖的研究提供一定的参考。
参考文献［1］李军林，王爱成．枸杞［M ］．北京：北京科学技术出版社，2002．［2］李丽，王乃平．植物多糖的药理作用研究［J ］．中医药学刊，2004，22（10）：19．［3］吴梧桐，高美凤，吴文俊．多糖的抗肿瘤作用研究进展［J ］．中国天然药物，2003，1（3）：182．［4］卢艳花，魏东芝，蒋晓萌．中药有效成分提取分离技术［M ］．北京：化学工业出版社，2008．［5］邬卫东，张晓文．硫酸－苯酚法测定枸杞多糖含量［J ］．中草药，2003（3）：38．［6］念保义，王铮敏，黄河宁．超声提取、超滤分离香菇多糖工艺的研究［J ］．化学与生物工程，2004，21（4）：16～17．［7］张民，张声华．枸杞多糖的制备及其结构研究［J ］．食品研究与开发，2007，28（7）：68．收稿日期：2009－09－24作者简介：梁敏（1967—），女，齐齐哈尔人，副教授，主要从事化学分离工程及食品分析方面教学与科研工作。
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