乙二胺四乙酸二钠检验标准操作规程
乙二胺四乙酸二钠标定方法
乙二胺四乙酸二钠标定方法
乙二胺四乙酸二钠的标定方法可以采用以下步骤：
1. 取基准氧化锌，用少量水湿润，加入2mL20%盐酸溶液，溶解样品，再加入100mL水。
2. 用10%氨水溶液中和至pH值为7~8，然后加入10mL氨-氯化铵缓冲溶液甲（pH≈10）及5滴5g/L铬黑T指示液。
3. 用配制好的乙二胺四乙酸二钠溶液[c(EDTA)=/L]滴定至溶液由紫色变为纯蓝色。
同时做空白试验。
请注意，这只是其中一种标定方法，具体的操作步骤可能会根据不同的实验条件和要求有所不同。
建议根据实际实验情况选择适合的标定方法。
乙二胺四醋酸二钠滴液配制与标定操作规程
乙二胺四醋酸二钠滴液（0.05mol/L）配制与标定操作规程一、范围：本标准规定了乙二胺四醋酸二钠滴定液（0.05mol/L）配制与标定的方法和操作要求;适有于本化验公司乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05MOL/L)的配制、标定与复标。
二、引用标准：中华人民共和国药典（2000年版）二部附录。
三、误差要求：四、指示剂：铬黑T指示剂五、基准试剂：基准氧化钭六、仪器与用具1、三角烧瓶（200ml）2、滴定管（50ml）七、操作步骤1、C10H14N2Na2O8·2H2O=372.24 18.61g→1000ml2、配制取乙二胺四醋酸二钠（E、D、T、A—2Na）19g，加适量的水使溶解成1000ml，摇匀。
3、标定取于约800℃灼至恒重的基氧化锌0.12g,精密称定,加稀盐酸3ml使溶解,加水25ml,加0.025%甲基红的乙醇溶液1滴,滴加氨试液至溶液显微黄色,加水25ml与氨-氯化铵缓冲液(PH10.0)10ml,再加铬黑T 指示剂少量,用本液滴定至溶液由紫色变为纯蓝色,并将滴定的结果用空白试验校正.每1ml 乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于4.069mg 的氧化锌.根据本液的消耗量与氧化锌的取用量,算出本液的浓度.即得。
4、计算公式MsF=----------------------（V i -V o ）×0.004069式中: Ms:氧化锌的质量(g)V i :滴定所耗E 、D 、T 、A-2N a 滴定液的体积（ml ）V o ：空白试验所耗E 、D 、T 、A-2N a 滴定液的体积（ml ）5、反应原理HCl ZnO 2+ O H ZnCl 22+ -++22n HI Zn +-+H ZnI n+-+222n Z Y H +-+H ZnY 22--+n ZnI Y H 22 +--++H HIn ZnY 22（红色） （蓝色）6、注意事项6．1 不透明橡皮中，含有氧化锌填料，能与本液作用，改变液作用，改变其浓度，透明橡胶管（乳胶橡皮管）则无影响，故存装本液时与橡皮制品接触，应注意此点。
0.02%乙二胺四乙酸二钠(EDTA)溶液配制标准操作规程
0.02%乙二胺四乙酸二钠（EDTA）溶液配制标准操作规程1 范围本标准适用于车间配液组0.02%乙二胺四乙酸二钠（EDTA）溶液的配制分装。
2 职责操作人员：严格按照该标准操作规程进行生产。
QA：对该标准操作规程的执行情况进行监督检查。
3 内容3.1 操作前检查3.1.1 计量器具是否完好，性能与称量要求相符，并在检定有效期内。
3.1.2 检查水、电、气供应是否良好，纯化水及注射用水是否检验合格。
3.1.3 人员检查洁净室温度、湿度、压差是否符合要求。
3.1.4 生产操作人员检查质量部门出示的尘埃粒子、沉降菌的检测报告是否符合相关规定，并在有效期内。
3.1.5 应对上一个班次的生产清场进行检查，有QA下发的清场合格证，方可进行操作。
3.1.6 检查高压灭菌柜、电子天平等设备状态标志，设备是否“完好”、“已清洁”。
3.1.7 检查所需文件记录齐备，无与本批无关的指令及记录，无与本批无关的物料。
3.1.8 QA确认符合生产条件后，在批记录中签名准许生产。
3.1.9 及时填写并悬挂生产状态卡。
3.2 操作前的准备：3.2.1 设备与材料的准备:电子天平印度瓶硅胶塞绢布丝光绳漏斗量筒3.2.2 化学试剂的准备氯化钠氯化钾磷酸氢二钠磷酸二氢钾EDTA注射用水3.3 配制过程：配方：（按10L配制量计算）3.3.1 配制10L 0.02%乙二胺四乙酸二钠（EDTA）溶液需用氯化钠 80g、氯化钾 2g、磷酸氢二钠11.5g、磷酸二氢钾 2g、EDTA 2g。
如结晶水有变化应按其配方相应换算。
3.3.2 用电子天平分别称取3.3.1中药品倒入同一印度瓶中，加注射用水至8000ml 摇动印度瓶使其充分溶解，补加注射用水至10L混匀。
3.3.3 按生产实际需要进行分装,分装后盖上硅胶塞并用绢布、丝光绳包扎好瓶口，贴上标签注明名称、批号、浓度、灭菌日期，经121℃，0.105MPa、60分钟或121℃、0.105Mpa、40分钟（脉动真空灭菌柜）高压蒸汽灭菌。
2020版《中国药典》乙二胺四醋酸二钠滴定液配制与标定操作规程
一、目的：建立乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)的配制与标定标准操作规程，规定了乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)的配制、标定方法与要求 。
二、范围：适用于乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)的配制、标定操作。
三、职责：化验室对实施本规程负责四、内容：1、仪器与用具：马弗炉、电子天平（万分之一）、坩锅、锥形瓶(250m1)、滴定管(50m1、A 级)、取样勺、量筒(50ml)、刻度管（5ml 、10ml ）、量筒(100ml 、250m1) 。
2、试药与试液：2.1乙二胺四醋酸二钠(AR)2.2氧化锌(基准试剂)2.3稀盐酸（见EK/SOP-QC8001试液配制操作规程）2.4 0.025%甲基红的乙醇溶液（见EK/SOP-QC8003指示剂与指示液配制操作规程）2.5氨试液（见EK/SOP-QC8001试液配制操作规程）2.6氨－氯化铵缓冲液（pH10.0）（见EK/SOP-QC8002缓冲液配制操作规程）2.7铬黑T 指示剂（见EK/SOP-QC8003指示剂与指示液配制操作规程）3、配制：3.1分子式：C 10H 14N 2Na 2O 8·2H 2O 分子量：372.243.2欲配浓度：18.61g →1000ml3.3取乙二胺四醋酸二钠19g ，加适量的冷水使溶解成1000ml ，摇匀。
4、标定与复标：4.1操作方法：取于约800℃灼烧至恒重的基准氧化锌0.12g ，精密称定,加稀盐酸3ml 使溶解,加水25ml ，加0.025%甲基红的乙醇溶液1滴，滴加氨试液至溶液显微黄色,加水25ml 与氨-氯化铵缓冲液(pH10.0)10ml,再加铬黑T 指示剂少量,用本液滴定至溶液由紫色变为纯蓝色,并将滴定的结果用空白试验校正。
每1ml 乙二胺四醋酸二钠滴定液（0.05mol/L ）相当于4.069mg 的氧化锌。
根据本液的消耗量与氧化锌的取用量，算出本液的浓度，即得。
乙二胺四乙酸二钠(EDTA)标准溶液配制标定
乙二胺四乙酸二钠(EDTA)标准溶液配制标定各浓度EDTA标准滴定溶液配制按表1所表示，称取乙二胺四乙酸二钠二水物(C10H14N2O8Na2· 2H2O)溶于足够量水中，稀释至1L，贮存在聚乙烯容器内。
表 1 称取EDTA质量氧化锌基准溶液按表2所表示，称取已于800℃灼烧1h基准氧化锌置于100mL烧杯中，用少许水湿润，滴加盐酸溶液(1+1)至氧化锌溶解，移入250mL量瓶中，稀释至刻度，混匀。
表 2标定所需氧化锌质量标定氨-氯化铵缓冲溶液(pH≈10)1、称取54g氯化铵溶于水，加350mL氨水，稀释至1L。
2、称取26.7g 氯化铵溶于水，加36mL 氨水，稀释至1L铬黑T 指示液(5g/L)称取0.50g 铬黑T 和4.5g 氯化羟胺，溶于乙醇中，用乙醇稀释至100mL ，贮存于棕色瓶中。
可保持数月不变质。
标定时，用单标线吸管吸收25mL 氧化锌基准溶液于250mL 锥形瓶中，加75mL 水，用氨水(1+1)中和至溶液pH7～8(溶液出现微混浊)，加10mL 氨-氯化铵缓冲溶液，5滴铬黑T 指示液，用EDTA 溶液滴定至溶液由紫红色变成纯蓝色为终点。
计算乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液浓度按式(1)计算：c (EDTA)＝m/0.08138×V (1)式中：c(EDTA)──乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液之物质量浓度，mol/L ；m──25.0mL 氧化锌基准溶液中所含氧化锌质量，g ； V──滴定用去乙二胺四乙酸二钠溶液实际体积，mL ； 0.08138──和1.00mL 乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液〔 c( EDTA) = 1.000mol/L 〕相当以克表示氧化锌质量。
精密度做五次平行测定，取平行测定算术平均值为测定结果。
五次平行测定极差，应小于表3要求许可差r。
表3EDTA 标准滴定溶液标定许可差稳定性乙二胺四乙酸二钠标准滴定溶液每个月重新标定一次。
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饲料公司乙二胺四乙酸二钠EDTA络合滴定法
饲料公司乙二胺四乙酸二钠（EDTA）络合滴定法1 原理将试样中有机物破坏，钙变成溶于水的离子，用三乙醇胺、乙二胺、盐酸羟胺和淀粉溶液消除干扰离子的影响，在碱性溶液中以钙黄绿素为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠标准溶液络合滴定钙，可快速测定钙的含量。
2 试剂和溶液2.1 盐酸羟胺，分析纯；2.2 三乙醇胺，1+1；2.3 乙二胺，1+1；2.4 盐酸水溶液：1+3；2.5 硝酸溶液：1+1；2.6 高氯酸，70%～72%；2.7 氢氧化钾溶液（200 g/L）：称取20 g氢氧化钾溶于100 mL 水中；2.8 淀粉溶液（10 g/L）：称取1 g可溶性淀粉入200 mL烧杯中，加5 mL水润湿，加95 mL沸水搅拌，煮沸，冷却备用（现用现配）；2.9 钙黄绿素—甲基百里香草酚蓝指示剂：0.10 g钙黄绿素、0.10 g甲基麝香草酚蓝、0.03 g百里香酚酞与5 g氯化钾研细混匀，贮存于磨口瓶中备用；2.10 钙标准溶液（0.001 g/mL）：称取2.4974 g于105℃～110℃干燥为3 h的基准物碳酸钙，溶于40 mL盐酸（2.4）中，加热赶除二氧化碳，冷却，用水移至1000 mL容量瓶中，稀释至刻度；2.11 乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准滴定溶液。
3 仪器和设备3.1 实验室用样品粉碎机或研钵；3.2 分样筛：孔径0.42 mm（40目）；3.3 分析天平：感量0.0001g；3.4 高温炉：电加热，可控温度在（550±20）℃；3.5 坩埚：瓷质；3.6 容量瓶：100 mL；3.7 滴定管：酸式，25 mL或50 mL；3.8 玻璃漏斗：6 cm直径；3.9 定量滤纸：中速，7 cm～9 cm；3.10移液管：10，20 mL；3.11烧杯：200 mL；3.12凯氏烧瓶：250 mL或500 mL；4 测定步骤4.1 试样分解4.1.1干法（推荐法）称取试样2～5 g（精确至0.0002 g）于坩埚中，在电炉上小心炭化，再放入高温炉于550℃下灼烧3 h(或测定粗灰分后连续进行)，在坩埚中加入盐酸溶液10 mL和浓硝酸3滴，小心煮沸，将此溶液转入100ml容量瓶，冷却至室温，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。
乙二胺四乙酸二钠滴定液配制与标定操作规程
变更历史目的：建立乙二胺四醋酸二钠滴定液的配制与标定标准操作规程，确保制备的滴定液质量能满足检验的要求。
范围：本规程适用于乙二胺四醋酸二钠滴定液的配制与标定操作。
职责：质量控制部QC检验员执行。
内容：1 编制依据：《中国药典》2015年版四部通则（8006）。
2 滴定液名称：乙二胺四醋酸二钠滴定液2.1 滴定液浓度：0.05mol/L3 分子式与分子量：C10H14N2Na2O8`2H2O=372.24 18.61g→1000ml4 配制方法4.1 使用设备仪器：电子天平、容量瓶4.2 使用试剂、试药：乙二胺四醋酸二钠4.3 操作方法：取乙二胺四醋酸二钠18.61g，加适量的水使溶解成1000ml，摇匀。
5 标定方法5.1 使用设备仪器：干燥箱、电子天平、量筒、称量瓶、干燥器、滴定管、具塞三角瓶5.2 使用试剂、试药：基准氧化锌、稀盐酸、0.025%甲基红的乙醇溶液、氨试液、氨-氯化铵缓冲液（pH10.0）、铬黑T指示剂、乙二胺四醋酸二钠5.3 标定原理反应式： ZnO+2HCl==ZnCl2+H2OZn2++HI2-n ==ZnI-n+H+H2Y2-+Zn2+==ZnY2- +2H+H2Y2-+ZnI-n==ZnY2-+HIn2-+H5.4 操作方法：取于约800℃灼烧至恒重的基准氧化锌0.12g，精密称定，加稀盐酸3ml使溶解，加水25ml，加0.025%甲基红的乙醇溶液1滴，滴加氨试液至溶液显微黄色，加水25ml与氨-氯化铰缓冲液（pH10.0)10ml，再加铬黑T指示剂少量，用本液滴定至溶液由紫色变为纯蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。
每1ml乙二胺四醋酸二钠滴定液（0.05mol/L)相当于4.069mg的氧化锌。
根据本液的消耗量与氧化锌的取用量，算出本液的浓度，即得。
5.5 计算公式F=式中：m氧化锌的质量（mg）；Vi 滴定所消耗本滴定液的体积（ml）；V2空白试验所耗本滴定液的体积（ml）。
乙二胺四乙酸二钠(EDTA)标准溶液的配制与标定
乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准溶液的配制与标定1 试剂乙二胺四乙酸二钠（EDTA）氧化锌（基准试剂）。
盐酸溶液（1＋1）。
10%氨水。
氨-氯化铵缓冲溶液：配制方法见“SS-14-1-84”。
%铬黑T指示剂（乙醇溶液）：配制方法见“SS-14-1-84”。
2 操作步骤0.05M、0.02M EDTA标准溶液的配制与标定：2.1.1 EDTA标准溶液的配制：1） 0.05M EDTA溶液：称取20g乙二胺四乙酸二钠溶于1 L蒸馏水中，摇匀。
2) 0.02M标准溶液：称取8g乙二胺四乙酸二钠溶于1 L高纯水中，摇匀。
2.1.2 EDTA标准溶液的标定：1）标准溶液的标定：称取于800℃灼烧至恒重的基准氧化锌1g（称准至），用少许蒸馏水湿润，加盐酸溶液（1＋1）至样品溶解，移入250ml容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。
取上述溶液，加80ml水，用10%氨水中和至PH为7～8，加5ml氨-氯化铵缓冲溶液（PH=10），加5滴%铬黑T指示剂，用0.05M EDTA溶液滴定至溶液由紫色变为纯兰色。
2）0.02M EDTA标准溶液的标定：称取0.4g（称准至）于800℃灼烧至恒重的基准氧化锌用少许蒸馏水湿润，加盐酸溶液（1＋1）至样品溶解，移入250ml 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。
取上述溶液，加80ml水，用10%氨水中和至PH为7～8，加5ml氨-氯化铵缓冲溶液（PH=10），加5滴%铬黑T指示剂，用0.02M EDTA溶液滴定至溶液由紫色变为纯兰色。
EDTA标准溶液的摩尔浓度（M）按下式计算：G 20 0.08G⊿V = —————×———— = —————V× 250 V×式中 G——氧化锌之重，g；V——滴定时消耗EDTA溶液的体积，ml；——250ml中取20ml滴定，相当于G的倍；——每毫摩尔氧化锌（ZnO）的重量，g。
0.001M EDTA 标准溶液饿配制和标定：2.2.1 配制：取0.05M EDTA 标准溶液，准确地稀释至50倍制得。
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编码：SOP-QC-212-A
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颁发部门：质控部
分发部门：检验室
变更记载修改号
批准日期执行日期
变更原因及目的
标准依据：《中国生物制品主要原辅材料质控标准》2000年版。
目的：建立乙二胺四乙酸二钠检验操作规程。
范围：本规程适用于乙二胺四乙酸二钠的检验。
2.3.2溶液的澄清度
取本品5.0g，加热水100ml溶解，溶液应澄清，如显浑浊，与3号澄清度标准（见附录澄清度检查法第一法）比较，不得更深为符合规定。
2.3.3铁
取“溶液Ⅰ”[取本品5g，置于铂皿中，缓缓加热炭化，于600℃±50℃灼烧至近白，加水5ml，蒸干，再于600℃±50℃灼烧，反复处理至残渣完全变白。加水20ml，滴加25%硝酸溶液10ml，在水浴上蒸干，残渣加热水40ml溶解（必要时过滤），稀释至50ml]10ml，稀释至15ml，用10%氨水溶液将溶液的PH值调至2后，按附录铁盐检查法第二法进行，所呈红色与标准铁溶液用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.001%）为符合规定。
浊度标准液的制备：取浊度标准原液与水，按下表配置，即得。本液应临用时制备，使用前充分摇匀。
级号
0.5
1
2
3
4
浊度标准原液/ml
2.5
5.0
10.0
30.0
50.0
水/ml
97.50
95.0
90.0
70.0
50.0
铁盐检查法（第二法）
按药品标准的规定取样并制备试液，稀释至约15ml，用15%盐酸溶液或10%氨水溶液将溶液的PH值调至2，加20g/L抗坏血酸溶液1ml、醋酸-醋酸钠缓冲液（PH4.5）5ml、1，10-菲啰啉溶液（0.2%）1ml，稀释至25ml，摇匀，放置15分钟。所呈红色与标准比较。
2.3.4重金属
取“溶液Ⅰ”10ml，加醋酸盐缓冲液（PH3.5）2ml，加水适量使成25ml，按《中国药典》2005版二部附录ⅧH进行，含重金属不高于0.001%为符合规定。
2.4微生物限度
取本品10g，加入45℃PH7.0的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，作为1：10的供试液。取适量供试液，照微生物限度检查平皿法（《中国药典》2005版二部附录Ⅺ J）检查，细菌数、霉菌和酵母菌数分别不得过100个/g，金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌不得检出为符合规定。
浊度标准贮备液的制备：称取硫酸肼1.00g，置100ml量瓶中，加水适量使溶解，必要时可在40℃的水浴中温热溶解，并用水稀释至刻度，摇匀，放置4-6小时；取此溶液与等量的10%乌托品溶液混合，摇匀，于25℃避光静置24小时，即得。本液置冷处避光保存可在两个月内使用。
浊度标准原液的制备：取浊度标准贮备液15.0ml，置1000ml量瓶中，加水稀释至刻度发，摇匀，即得。本液应在24小时内使用，用前摇匀。
3．[贮藏]密闭保存
附录：
澄清度检查法（第一法）
本法系将一定浓度的供试品溶液与浊度标准液分别置于配对的比浊用的玻璃管（内径15-16mm平底，具塞，以无色透明中性硬质玻璃制成）中，液面的高度围0mm，在浊度标准液制备后5分钟，同置黑色背景上，在漫射光下，从比浊管上方向下观察比较或垂直置于于伞棚灯下，照度为1000lx，从水平方向观察、比较，用以检查溶液的澄清度或者其浑浊程度。
标准是取规定量的铁（Fe）杂质标准溶液，稀释至15ml，与同体积试液同时同样处理。
职责：检验员、质控部经理对本规程实施负责。
规程：
1．[性状]
取本品适量，置表面皿中，在自然光下观察，为白色结晶粉末，溶于水，几乎不溶于乙醇。
2．[检查5%硝酸10%氨水溶液醋酸盐缓冲液（PH3.5）
2.3操作方法
2.3.1酸碱度
取本品5.0g，加不含CO2的热水100ml溶解后，测PH值（《中国药典》2005版二部附录ⅥH），PH值为4.0~5.0为符合规定。