挥发性脂肪酸和乳酸的测定方法研究_林秋萍
内标法同时测定挥发性脂肪酸和乳酸的方法探究_姜芳
行测定。取制备好的样品上清液及加入标品后溶液 上机分析，分别重复测定 10 次，其精密度及回收率 见表 4。结果显示，此方法中青贮料样品的回收率也
时，乳酸浓度在 12~60 mmol/L 时，线性关系良好。同 达到 93%以上，但比待测标液要低一点，而相 对 标
73
饲 料 检 测 ·Fe e d Te s ting
2009 年 第 45 卷 第 21期
1.3.4 待测标液 分别取乙、丙、丁酸的色谱纯标 准品和乳酸分析纯各适量，加入定量的内标溶液，用 高纯水稀释至 1 mL 后，摇匀，配出表 2 中不同浓度
组分的待测溶液。
表 2 待测溶液中各组分浓度 10-3mol·L-1
组分 乙酸 丙酸 丁酸 乳酸 巴豆酸
待测液 A 100 20 15 10 6
待测液 B 40 10 8 6 6
1.4 待测样品的制备 取剪碎的青贮玉米 70 g（W） 于具塞三角瓶中，加入 150 mL 的蒸馏水后，放入 4℃冰箱内浸取 24 h，期间每隔 6 h 均匀摇晃三角瓶 5 min，以保证浸取完全。浸取完毕后进行过滤，将提取 物用 80 目涤纶筛网过滤液挤尽，通过定量滤纸过滤于 500 mL（V）的容量瓶中定容、摇匀。取提取液 5 mL（V1） 于 10 mL 离心管中并分别加入 1 mL 25%的偏磷酸 和 1 mL 42 mmol/L 的 巴 豆 酸 （保 证 内 标 物 浓 度 一 致），振荡、静置 30 min 后离心 10 min，取上 清液用 于上机分析。 青贮饲料鲜样中各种有机酸的总量可按下式计算：
程 ：Y 乙 = 2.3042X +0.0318，R =0.9986；Y 丙 = 1.4397X - 本方法的实际应用性，试验也选取青贮玉米鲜样进
挥发性脂肪酸VFA测定步骤与方法
挥发性脂肪酸的测定一、GC（Gas chromatograph）工作条件仪器：GC-14B型气相色谱仪（日本岛津公司）毛细柱：NUKOLTM Capillary Column ( Supelco )；Column No.34292-07B30m×0.32mm×0.25μm film thickness气相色谱仪参数：色谱柱采用毛细吸管柱，柱温130℃，汽化温度180℃，采用氢离子火焰检测器，检测温度180℃，载气为氮气，压力为60 KPa，氢气压力为50 KPa，氧气压力50 KPa，灵敏度（档）为101，衰减 3.0二、样品制备1．试剂制备（1）配制25%w/v 的偏磷酸溶液，将25g偏磷酸溶在100mL双蒸水中（2）巴豆酸的配制，在100ml的偏磷酸溶液中加入0.6464g的巴豆酸，定容到100mL。
（可先用80 ml双蒸水，加热溶解偏磷酸，然后定容至100 ml）（3）标准样品，准确称取色谱标准级乙酸0.9100 g、丙酸0.3700 g、丁酸0.1765 g、异丁酸0.1765g、戊酸和异戊酸分别为0.1985g，分别溶于双蒸水中，再各自定容至100 mL。
2．样品制备(1) 发酵液取（或过滤瘤胃液）VFA测定1ml样品到离心管中，再加入0.2 ml的偏磷酸巴豆酸混合溶液，－20℃冰箱保存过夜，解冻后12000rpm离心5min，取上清液保存，测定前再12000rpm离心5min(或少许通过0.22μm针式滤器，滤液直接进样用 1.0微升微量进样器瞬时注入色谱仪，进样量为0.2－1.0μL。
(2) 食糜及粪样VFA测定取1g置于离心管中，加入5－10倍的双蒸水，混合均匀。
取1mL上清夜，加偏磷酸巴豆酸0.2mL/mL。
其它步骤同上。
3．保留时间的确定与样品处理相同，在 1 ml标准样品中加入0.2mL偏磷酸与巴豆酸的混合样，上样测出乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸的保留时间。
VFA(厌氧挥发酸)的测验方法及步骤
VFA（挥发酸）的做法试剂：0.1N NaOH溶液、10%磷酸溶液、0.5%酚酞指示剂。
做法：(1) 取500mL原液；(2) 取50mL样品加入500mL烧瓶中，加入6mL磷酸（10%），加入300mL蒸馏水；(3) 连接好设备加热，直到蒸出300mL蒸馏液；(4) 蒸馏液加入3滴酚酞，用NaOH滴定，记录数：挥发酸(mg/L)=(V-C)*V1*60*1000/50备注：V---滴定数；V1—NaOH浓度；C----空白数配制0.1N NaOH溶液带着小烧杯、NaOH、500ml容量瓶一张滤纸去直接用小烧杯测2.08gNaOH，用蒸馏水稀释一下倒进容量瓶，继续稀释倒进容量瓶，直到刻度即可。
0.5%酚酞指示剂的配制方法：①0.5g 酚酞溶于75mL体积分数为95%的乙醇中，并加人20mL水，然后再加入约0. lmol/L的氢氧化钠溶液，直到加入一滴立即变成粉红色，再加入水定容至l00ml （GB604 酸碱指示剂pH变色域测定通用方法时使用的配制方法，用来测定酚酞的显色范围的）②1g酚酞, 溶解于100mL95％的乙醇（GB603用来做酸碱滴定用）网上其他的VFA 的测定方法常见的VFA 测定方法有滴定法和气相色谱法。
由于条件限制，本实验采用滴定法。
滴定法的原理是将废水以磷酸酸化后，从中蒸发出挥发性脂肪酸，再以酚酞为指示剂用NaOH 溶液滴定馏出液。
废水中的氨态氮可能对测定形成干扰，因此应当首先在碱性条件下蒸发出氨态氮。
药品:a.10%NaOH 溶液;b.NaOH 标准溶液，O.1000mo1/L;c.10%磷酸溶液，取70m1密度1.7g/cm ，的磷酸用水稀释至1L;d.酚酞指示剂。
测定步骤:于蒸馏瓶中放入50～200m1的待测废水，其VFA 含量不超过30mmo1。
如水体积不足100m1，可以蒸馏水稀释至100m1。
放入几滴酚酞指示剂。
（我一般用100ml ） 加入10%NaOH 溶液，使溶液成碱性，并使NaOH 略过量。
挥发性脂肪酸的测定
挥发性脂肪酸的测定挥发性脂肪酸〔VFA〕的测定一般来说,碳原子数在10以下的脂肪酸大局部具有挥发性,并且易溶于水.在它们中间,随着碳原子数的增加,挥发性逐渐下降.典型的挥发酸见下表：低级脂肪酸的分子式及沸点挥发性脂肪酸易被微生物利用.在有机物的厌氧分解中,挥发性脂肪酸是作为生物代谢的中间或最终产物而存在.在厌氧发酵的液化产酸阶段,这一类低级脂肪酸是这一阶段的主要产物,其中以乙酸为主.在某种条件下,乙酸可以到达该类酸总量的80%.在CH4形成过程中,甲酸和乙酸是形成甲烷的重要前体物.据研究,自然界有机物产生的CH4中大约有70%上由乙酸中的甲基原子团形成的.丙酸、丁酸可以转化成甲酸.有机酸过多往往反映出发酵池的病态.因此可以认为,在微生物厌氧发酵过程中,挥发性脂肪酸不仅是一种不可缺少的营养成分,更重要的意义在于这类有机酸已是沼气发酵研究有机物降解工艺条件优劣的重要参数,在甲烷形成的研究和生产中,它们的含量也是重要的参数.挥发性脂肪酸的测定在挥发性脂肪酸的总量测定中,是以乙酸作为基数进行计算,除了要求测定总量外,对甲酸、乙酸等各种低级脂肪酸的分别定量分析也是十分重要的.中文名磷酸爆由22七英文名Phospharicacid沸£261+C一、滴定法测VFA1、原理将废水酸化后,从中蒸储出挥发性脂肪酸,再以酚醐为指示剂用氢氧化钠滴定储出液.废水中的氨态氮先在碱性条件下蒸储出.2、仪器：50ml碱式滴定管、锥形瓶、带磨口的具支蒸储烧瓶(500ml)、与烧瓶配套的蛇形冷凝管、橡胶导管、电炉试齐I」：(1)10%氢氧化钠：10g氢氧化钠溶于水,稀至100ml.(2)10%磷酸溶液：取70ml浓磷酸稀释至1L.(3)酚醐指示剂：称取0.5g酚醐溶于50ml95%的乙醇中,用水稀释至100ml.(4)氢氧化钠标准溶液(0.1000mol/L):称取60g氢氧化钠溶于50ml水中,转入聚乙烯瓶中静置24h以上,吸取上层清夜约7.5ml置于1000ml容量瓶中,稀释至标线,摇匀.称取在105-110C枯燥过的基准试剂(邻)苯二甲酸氢钾约0.5g(称准至0.0001g),置于250ml锥形瓶中,加无二氧化碳水100ml挥发性脂肪酸的测定使之溶解,参加4滴酚醐指示剂,用待标定的氢氧化钠标液滴定至浅红色为终点,同时,用无二氧化碳水做空白滴定.氢氧化钠标准溶液浓度〔mol/L〕=MX1000/[〔V1-V0〕x204.23]式中：m-称取苯二甲酸氢钾的质量〔g〕;V0-滴定空白时所耗氧氧化钠标准溶液体积〔ml〕;V1一滴定苯二甲酸氢钾时所耗氢氧化钠标准溶液的体积〔ml〕;204.23一苯二甲酸氢钾的摩尔质量〔g/mol〕.3、测定步骤：〔1〕于蒸储烧瓶中参加100ml待测水样,几粒玻璃珠,参加几滴酚醐指示剂,然后参加10%€氧化钠溶液使使水样呈碱性〔溶液出现红色〕,并使氢氧化钠略过量.〔2〕翻开冷凝水,开始蒸储,蒸储至瓶中液体为50〜60ml,〔如果测定氨氮,那么可用50ml硼酸吸收储出液.如果不,可倒掉.〕〔3〕参加约40〜50ml蒸储水,参加10ml10%^酸酸化,在接受瓶中参加10ml蒸储水,将冷凝管插入液面下,蒸储至瓶中液体为15~20ml.待冷却后,参加50ml蒸储水继续蒸储,至瓶中剩余液体10〜20ml止.〔4〕向储出液中参加10滴酚醐指示剂,用氢氧化钠标液滴定至氮淡粉红色不消失止,记录用量.计算：挥发酸〔VFA〔mg/l〕=〔V3-V4〕xNX60x1000/V5挥发性脂肪酸的测定式中:VT滴定样品日t所消耗的NaOK升数;V4一滴定空白时所耗的NaOK升数；V5-取样量(ml);N-NaO聆液的浓度(mol/L);60一乙酸的分子量.考前须知：(1)蒸储前翻开冷凝水；(2)冷却时,把接受瓶移开,以免倒吸；。
气相色谱法测定厌氧发酵液中挥发性脂肪酸的研究
Ａｂｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ：Ｉ ｎ ｏ ｒ ｄ ｅ ｒ ｔ ｏ ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｔ ｈ ｅ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｓ ｏ ｆ ＶＦＡｓ ｉ ｎ ｔ ｈｅ ａ ｎ ａ ｅ ｒ ｏ ｂ ｉ ｃ ｆ ｅ ｒ ｍｅ ｎ ｔ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｌ ｉ ｑ ｕｉ ｄ
ｕ ｐ． Ｔｈ ｅ ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｓ ｈ ｏ ｗｎ ｔ ｈ ａ ｔ ｔ ｈ ｅ ｐｅ ａ ｋ ｔ ｉ ｍｅ ｏ ｆ ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ＶＦ Ａｓ ｉ ｓ ２ ０． ３ ９ ５， ２ ２． ２１ ７ ａ ｎｄ ３． ９ ２１ ｍｉ ｎ ｒ ｅ ｓ ｐ ｅ ｃ — ｔ ｉ ｖ ｅ ｌ ｙ， ｗｈ ｉ ｃ ｈ ｃ ａ ｎ ｂｅ ｄ ｉ ｖ ｉ ｄ ｅ ｄ ｂ ｙ ＧＣ ｗｅ ｌ １ ．Ｔ ｈｅ ｃ ｏ ｒ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｃ ｏ ｅ ｆｉ ｃ ｉ ｅ ｎ ｔ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｇ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｃ ｕ ｒ ｖ ｅ ｏ ｆ ｔ ｈ ｅ ｓ ｔ ａ ｎ ｄ ａ ｒ ｄ ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ｓ ａ ｒ ｅ ａ ｌ ｌ ｌ ａ ｒ ｇ ｅ ｒ ｔ ｈ ａ ｎ ０．９ ９ ９． ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｃ ｏ ｖ ｅ ｒ ｙ ｏ ｆ ｅ ｏ ｎ ｉｒ ｆ ｍａ ｔ ｏ ｒ ｖ ｅ ｘ ｐ ｅ ｒ ｉ ｍｅ ｎ ｔ ｓ ｏ ｆ ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ＶＦ Ａｓ ａ ｒ ｅ ９ ６． ７２％ ， ９ ７． ２ ０％ ， ９ ７． １ ３％ ｒ ｅ ｓ ｐ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ｌ ｙ，ｗｈｉ ｃ ｈ ｓ ｈ ｏ ｗｓ ｔ ｈａ ｔ ｔ ｈ ｅ ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ＶＦ Ａｓ ｉ ｎ ｔ ｈ ｅ ａ ｎ ａ ｅ ｒ ｏ ｂｉ ｃ
．
ｄ ｉ ｆ ｆ ｅ ｒ ｅ ｎ ｔ ｃ ｏ ｎ ．
油和脂肪中的〔挥发性〕酸化学分析方法
油和脂肪中的〔挥发性〕酸化学分析方法挥发性酸（volatile fatty acids, VFAs）是一类在油和脂肪中常见的有机酸，由于其具有较强的气味和对产品品质的影响，因此在食品和化妆品行业中，对挥发性酸的含量进行分析具有重要的意义。
下面将介绍两种常用的化学分析方法：蒸馏法和气相色谱法。
一、蒸馏法蒸馏法是一种常用的分析挥发性酸的方法，它主要包括以下步骤：1.将待测样品加入适量的蒸馏水，并用酸或碱调整样品的pH值，以确保挥发性酸被完全释放。
2.将样品放入蒸馏器中，并通过加热使样品蒸发。
3.蒸发的挥发性酸进入冷凝管，在凝结器中冷却成液体。
4.收集液体样品，并用适当的溶剂稀释和调整pH值。
5.采用酸碱滴定或色谱等方法对挥发性酸进行定量分析。
蒸馏法的优点是简单、容易操作，但存在一定的局限性，如需要大量的试剂和设备，无法同时分析多种酸，对挥发性酸的分析结果具有一定的误差。
二、气相色谱法气相色谱法是目前应用较广泛的分析挥发性酸的方法，它主要包括以下步骤：1.将待测样品溶解在适当的溶剂中。
2.通过冷冻离心分离样品中的固体和杂质。
3.将清澈的样品溶液注入气相色谱仪中。
4.在气相色谱仪中，样品被注入进入进样口，进入色谱柱进行分离。
5.经过分离的挥发性酸进入检测器进行检测，并根据检测结果进行定量分析。
气相色谱法具有高灵敏度、高分辨率和高精确度的特点，能够同时分析多种酸，且分析结果可靠。
但气相色谱法的设备和试剂成本较高，对操作人员的技术要求也较高。
总之，通过蒸馏法和气相色谱法可以对油和脂肪中的挥发性酸进行分析。
选择何种方法需要考虑实际需求、分析目的和实验条件等。
食品中挥发性脂肪酸的检测与分析研究
食品中挥发性脂肪酸的检测与分析研究食品安全一直是人们关注的焦点，而挥发性脂肪酸作为食品中的一种常见成分，对食品的品质和安全具有重要影响。
因此，食品中挥发性脂肪酸的检测与分析研究成为了食品科学领域的热门话题。
挥发性脂肪酸是一类易于蒸发和呈挥发性的脂肪酸，常见于植物和动物的食物中。
它们不仅对食物的气味和口感产生影响，还与食品的储存寿命和品质相关。
因此，准确检测和分析食品中的挥发性脂肪酸成为了重要而复杂的研究课题。
当前，食品中挥发性脂肪酸的检测与分析主要采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）。
该技术以高灵敏度和高分辨率的优势，可以对食品中的挥发性脂肪酸进行准确的定性和定量分析。
一般来说，检测食品中的挥发性脂肪酸需要将食品样品提取出脂肪酸，然后通过衍生化反应将其转化为能够通过GC-MS分析的适当形态，并使用该技术进行定性和定量分析。
这种方法在食品行业中得到了广泛应用，并为食品质量控制和安全监测提供了可靠的技术支持。
食品中挥发性脂肪酸的检测与分析不仅有助于评估食品质量，还能为食品加工和存储提供科学依据。
通过检测和分析食品中的挥发性脂肪酸，可以判断食品是否存在质量问题，比如过氧化脂质、酸败、腐败等。
此外，挥发性脂肪酸的检测还有助于研究食品的保存条件和贮存期，并找到延长食品寿命的方法。
因此，挥发性脂肪酸的检测与分析研究具有重要的实际意义和应用价值。
然而，食品中挥发性脂肪酸的检测与分析也面临着一些挑战。
首先，不同食品中的挥发性脂肪酸种类和含量各不相同，需要针对不同的食品样品进行专门的提取和分析方法优化。
其次，挥发性脂肪酸的提取和衍生化反应过程中，存在着化学反应速率、催化剂选择等技术难题，需要克服。
此外，食品中的复杂基质和其他成分也会对挥发性脂肪酸的检测和分析产生干扰，需要进一步优化样品处理方法。
因此，针对食品中挥发性脂肪酸的检测与分析研究仍面临着一系列的挑战与难题。
为解决这些挑战，科学家们正在不断研究和改进挥发性脂肪酸的检测与分析技术。
挥发性脂肪酸(VFA)的测定
挥发性脂肪酸（VFA）的测定一般来说，碳原子数在10以下的脂肪酸大部分具有挥发性，并且易溶于水。
在它们中间，随着碳原子数的增加，挥发性逐渐下降。
典型的挥发酸见下表：低级脂肪酸的分子式及沸点挥发性脂肪酸易被微生物利用。
在有机物的厌氧分解中，挥发性脂肪酸是作为生物代谢的中间或最终产物而存在。
在厌氧发酵的液化产酸阶段，这一类低级脂肪酸是这一阶段的主要产物，其中以乙酸为主。
在某种条件下，乙酸可以达到该类酸总量的80%在CH4形成过程中，甲酸和乙酸是形成甲烷的重要前体物。
据研究，自然界有机物产生的CH4中大约有70%上由乙酸中的甲基原子团形成的。
丙酸、丁酸可以转化成甲酸。
有机酸过多往往反映出发酵池的病态。
因此可以认为，在微生物厌氧发酵过程中，挥发性脂肪酸不仅是一种不可缺少的营养成分，更重要的意义在于这类有机酸已是沼气发酵研究有机物降解工艺条件优劣的重要参数，在甲烷形成的研究和生产中，它们的含量也是重要的参数。
在挥发性脂肪酸的总量测定中，是以乙酸作为基数进行计算，除了要求测定总量外，对甲酸、乙酸等各种低级脂肪酸的分别定量分析也是十分重要的。
中文名磷酸榕点22英文名Phospharicacid 狒点261+C一、滴定法测VFA1、原理将废水酸化后，从中蒸馏出挥发性脂肪酸，再以酚酞为指示剂用氢氧化钠滴定馏出液。
废水中的氨态氮先在碱性条件下蒸馏出。
2、仪器：50ml碱式滴定管、锥形瓶、带磨口的具支蒸馏烧瓶 (500ml)、与烧瓶配套的蛇形冷凝管、橡胶导管、电炉试剂：(1) 10%氢氧化钠：10g氢氧化钠溶于水，稀至100ml。
(2) 10%磷酸溶液：取70ml浓磷酸稀释至1L。
(3) 酚酞指示剂：称取0.5g酚酞溶于50ml 95%的乙醇中，用水稀释至100ml。
(4) 氢氧化钠标准溶液(0.1000mol/L):称取60g氢氧化钠溶于50ml水中，转入聚乙烯瓶中静置24h以上，吸取上层清夜约7.5ml 置于1000ml 容量瓶中，稀释至标线，摇匀。
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０．４
丁酸
０．２６９
０．２８３
０．２７７
０．２７２
０．２９０
０．２６１
０．２７５
１．１
３ 小结 本实验采用低温的水做溶剂， 目的是尽量避免
样 品 提 取 过 程 中 ＶＦＡ 的 挥 发 ， 水 做 溶 剂 使 样 品 提 取 比 较 完 全 。程 序 升 温 测 定 ， 各 组 分 分 离 效 果 较 好 ， 分 析 时 间 短 ， 精 密 度 、精 确 度 较 高 ， 适 用 大 批 量 样 品 的测定。
色谱 柱 ： ２ｍ×３ｍｍ 内 装 ５％聚 二 乙 二 醇 丁 二 酸 酯
林秋萍， 河南省农业科学院科学实验中心， 副研究员， ４５０００２， 河南省郑州市农业路 １ 号。
李瑾、冯书惠、王会锋、王铁良， 单位及通讯地址同第一作者。 收稿日期： ２００６－ ０５－ ０８
（ ＤＥＧＳ） ＋１％磷酸的不锈钢柱。 仪器条件： 柱温 １１０℃ ２℃／ｍｉｎ １２０℃， 进样器、检测
１ 对号入座。要正确按不同畜禽种类和不同生长、发育阶段选用不同比例的预混料品种 ， 能量饲料添加要准确， 搅拌 要均匀。
２ 更换预混料要循序渐进。突然更换预混料畜禽不适应， 影响采食和生长。使用中应逐渐增加新料用量， 减少旧料用 量， 大约一周时间过渡到完全使用新预混料。
３ 要按推荐配方配合饲料。有很多养殖户使用预混料常常凭自己的经验， 随便改变推荐配方， 造成各项营养指标不能 满足畜禽各期的生长需要。
电压（ ｍｖ） 乳酸
异戊酸 乙酸
丙酸 丁酸 戊酸
１１ １０ ９ ８ ７ ６ ５ ４ ３ ２ １
０
１２３ ４５６７８９
时间（ ｍｉｎ）
图 １ ＶＦＡ 和乳酸（ 乙醛） 标样色谱
乙酸
电压（ ｍｖ） 乳酸
丙酸 丁酸 戊酸
１１ １０ ９ ８ ７ ６ ５ ４ ３ ２ １
０ １ ２ ３ ４ ５ ６ ７ ８９ 时间（ ｍｉｎ）
①２５％ 偏磷酸： 称取 ２５．０ｇ 偏磷酸加水至 １００ｍｌ。 ②１５％ 高碘酸： 称取 １．５ｇ 高碘酸加水至 １０ｍｌ。③标 样： 乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、异戊酸、乳酸均为色谱纯。 根据需要配置成不同浓度的混合溶液。 １．２ 仪器
植物组织捣碎机； 气相色谱仪： 日本岛津 ＧＣ－ ９Ａ， 具有氢火焰离子化检测器（ ＦＩＤ） 。 １．３ 样品制备
检测技术
《饲料工业》·２００６ 年第 ２７ 卷第 １５ 期
挥发性脂肪酸和乳酸的测定方法研究
林秋萍 李 瑾 冯书惠 王会锋 王铁良
乙酸 、丙酸 、丁 酸、戊 酸 、异 戊 酸 等 广 泛 地 存 在 于 自然界中， 它们的共同特点是具有较强的挥发性， 生 物 学 上 一 般 称 之 为 挥 发 性 脂 肪 酸 （ Ｖｏｌａｔｉｌｅ Ｆａｔｔｙ Ａｃｉｄｓ， ＶＦＡ） 。ＶＦＡ 在动物科学和食品科学上具有十分 重要的意义， 其代谢和含量是这些研究领域中常遇到 的问题。因此， 一个好的测定方法是研究中十分必要 的。
３
４
５
６
平均值（ ｍｇ／ｍｌ） ＲＳＤ（ ％）
乳酸
１．７１
１．６６
１．７５
１．７９
１．８３
１．６２
１．７３
７．９
乙酸
０．３２８
０．３１６
０．３３１
０．３２８
０．３３２
０．３２１
０．３２６
０．７
丙酸
０．０６３ ４ ０．０７２ １ ０．０６７ ８ ０．０６４ ９ ０．０６５ １ ０．０６８ ２
０．０６６ ９
４ 预混料不宜直接使用， 不宜用开水冲或蒸煮， 以免破坏营养物质。 ５ 不要将预混料与其它品种的预混料混合使用， 以免影响效果。 ６ 贮放时间不宜过长， 时间一长， 预混料就会分解变质， 色味全变。一般有效期为夏季最多 ３ 个月， 其它季节不超过 ６ 个月。须贮放在通风、干燥、避光、阴凉处， 以免受潮变质， 造成损失。
参考文献
１ Ｅｒｏｗｉｎ Ｚ Ｓ． Ｖｏｌａｔｉｌｅ Ｆａｔｔｙ Ａｃｉｄｓ Ａｎａｌｙｓｅｓ ｏｆ Ｂｌｏｏｄ ａｎｄ Ｒｕｍｅｎ Ｆｌｕｉｄ
ｂｙ Ｇａｓ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ．［Ｊ］．Ｄａｉｒｙ Ｓｃｉ．，１９６１， ４４：１ ７６８
２ 陈庆今， 刘焕彬， 胡勇有．气相色谱测厌氧消化液挥发性脂肪酸的
挥 发 性 脂 肪 酸 的 测 定 方 法 有 比 色 法 、 滴 定 法 、色 谱法等。相比之下， 气相色谱法以快速、准确、简便， 能 分别测定各个组分而适用于多种样品（ 如： 青贮饲料、 瘤胃液、血液、饮料等） 。但是， 气相色谱法也受多种条 件的影响， 如色谱条件、样品的处理方法等。利用挥发 性脂肪酸和乳酸易溶于水的特点， 用水提取饲料中挥 发性脂肪酸， 用偏磷酸除去可溶性蛋白质， 用高碘酸 氧化乳酸为乙醛， 直接进样， 用外标法定量测定乳酸 和其它挥发性脂肪酸的含量。 １ 试验材料与方法 １．１ 酸 异戊酸
表 １ 本方法的检出限及线性关系
浓 度 范 围（ｍｇ／ｍｌ） ０．０８１￣２．１ ０．０８２￣２．１ ０．０８９ ～２．４ ０．０８２～２．１ ０．０８０￣２．０ ０．０８３￣２．１
相关系数（ ％） ０．９９５ ３ ０．９９９ ２ ０．９９９ ５ ０．９９９ ５ ０．９９９ ６ ０．９９８ ９
快速法研究［Ｊ］．中国沼气， ２００３， ２１（ ４） ： ３～５
３ ＧＢ／Ｔ ５００９．１２０－ ２００３［Ｓ］．食品中丙酸钠、丙酸钙的测定．北京： 中国标
准出版社， ２００４
（ 编辑： 崔成德， ｃｕｉｃｅｎｇｄｅ＠ｔｏｍ．ｃｏｍ）
·信 息 采 撷·
使用预混料须知
预混料逐渐被广大农户所接受。但如何正确使用预混料， 已成为广大农户迫切需要了解的问题。下面提出使用预混料 六点须知， 供广大用户参考。
检出限（ ｎｇ） ４０ ４２ ５２ ４２ ４０ ４７
２．４ 回收率实验
取已知含量的同一青贮饲料样品提取液 ６ 份， 分 别加入一定量的混合标准溶液， 按 １．５ 的方法处理， 测 得的回收率在 ７８．２％～１０２％之间， 结果见表 ２。
项目
乳酸 乙酸 丙酸 丁酸 戊酸 异戊酸
表 ２ 回收率实验
本底值
器 ２００℃。 载 气 流 速 ２０ｍｌ／ｍｉｎ； 氢 气 流 速 ３０ｍｌ／ｍｉｎ； 空 气 流
速 ３００ｍｌ／ｍｉｎ。 １．５ 测定方法
用 微 量 注 射 器 依 次 吸 取 １５％高 碘 酸 １μｌ、 空 气 １μｌ 及上清液 ２μｌ， 直接注入 色 谱仪 ， 按 １．４ 的色 谱条 件进行 ＶＦＡ 和乳酸的分析， 以外标法计算。 ２ 结果与讨论 ２．１ 色谱柱的选择
称取剪碎的青贮饲料（ 或其它） 样品（ １０±０．００２） ｇ， 置于植物组织捣碎机中加入 ２℃的去离子水 ８０ｍｌ， 间 歇捣碎 ３ｍｉｎ， 过滤于 １００ｍｌ 容量瓶中定容至刻度， 摇 匀。取 ５ｍｌ 置于 １０ｍｌ 具塞离心管中， 分别加入 ２５％的 偏磷酸 １ｍｌ， 摇匀， 静止 ３０ｍｉｎ 后，离心 １０ｍｉｎ， 上清 液 供色谱测定用。 １．４ 色谱条件
图 ２ 样品色谱
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林秋萍等： 挥发性脂肪酸和乳酸的测定方法研究
检测技术
２．２ 温度的选择 温度条件决定着样品分离的好坏， 我们曾采用恒
温、各种不同的程序升温， 通过多方调试， 确认以上色 谱条件在使用中是较好的。 ２．３ 方法的检出限及线性关系
本方法的线性范围较宽， 从 ４０μｇ￣２．５ｍｇ 均呈直 线关系， 最小检出限 ４０ｎｇ 左右， 其结果见表 １。
（ ％） ７８．２￣９５．６ ９２．３￣９９．８ ９１．２￣９９．０ ８７．６￣９８．９ ７９．８￣９６．９ ９５．５￣１０２
２．５ 方法的重复性 取 ６ 份同一青贮饲料样品提取液， 按 １．５ 的方法
测得的变异系数在 ０．４％～７．９％之间， 具体结果见表 ３。
表 ３ 方法的重复性
项目
１
２
重复性次数
３３
（ ｍｇ／ｍｌ） １．７０９ ８ ０．３２７ ６ ０．０６３ ４ ０．２６９ ３
－ －
添加量
（ ｍｇ／ｍｌ） ０．４１１ ２ ０．４２２ ４ ０．４８７ ６ ０．４２１ ６ ０．４００ ０ ０．４０６ ０
平均测定值
（ ｍｇ／ｍｌ） ８６．９ ９６．０ ９５．１ ９３．２ ８８．４ ９８．８
回收率范围