TSK-GELSW色谱柱使用中的注意事项常见问题及故障排除
YSK-GEL SW Type说明书
TSK是日本产品,但是目前该产品在很多国内的标准上占有一席之地,我希望在科技市场上有我们自己的国有品牌。
科学技术是第一生产力,科学技术产业如果国有化那么才是真正的强大。
本人不得不使用该产品,对其附带使用手册进行翻译，也很无奈，并跟同样无奈的人分享。
安全预防:警告:离火远点在使用可燃的溶剂时要采取适当的预防措施。
火、爆炸和有毒的试剂有潜在的危险。
注意：1．在通风良好的环境使用2．不要使溶剂溢出泄露会引起火灾、电子冲击、有毒、损害和腐蚀3．带眼镜保护装置并带保护性手套4．小心处理包装不适当的持有方式会导致破裂和飞溅5．只能按照设计的好的方式使用本产品仅用于分离和纯化6．确定组分是安全的，检查获得的组分和溶液是否安全7．适当使用，要适用于当地的法律注意：急救：略，放置和储存：避免储存本品于低于0度的地方。
如果存放的地方太糟糕，外壳会破裂。
在使用本产品时要使用适当的眼镜保护装置废料处理：使用大量水稀释，在适用的规定下可以进行焚烧处理。
TSK-GELSW Type的额外说明：Semi-micro column SuperSW3000(2.0mm和1mm，30cm长)的使用手册介绍：这个柱子是被设计用于高敏感分析，比传统的（4.6mm或7.8mm）更适合。
长期储存：在替换存储溶剂时，流速应少于推荐流速的一半除去污染的颗粒：柱子的效率很容易降低，是由于柱子进入了污染物。
强烈推荐使用0.2-0.5微孔滤膜。
推荐流速：填充柱TXK-GEL SW是用于水溶性的高表达的物质分析像蛋白质、酶和核酸。
我们有钢制的和玻璃的2种。
尤其是玻璃填充柱是生物适合的类型，它是由高精密的由塑胶封口的玻璃管组成。
长期反方向使用本柱会使柱效降低。
在安装和拆卸时，注意不要使任何气泡进入柱子。
在安装柱子前一定要冲洗管道并排气。
安装：如果在把帽从柱子的进口方向拿走时有溶液流出，那么就可以仔细地连接柱子，这样就不会有气泡进入柱子。
如果没有溶液流出，那么从反方向连接柱子的出口端并进行泵液，排出气泡。
水相分子尺寸排阻色谱柱
水相分子尺寸排阻色谱柱TSKgel SW系列补充说明书东曹株式会社出厂溶剂操作注意事项色谱柱的出厂溶剂：0.1 mol/L 磷酸盐缓冲液＋0.1 mol/L Na2SO4＋0.05 % NaN3（pH 6.7）填料操作注意事项阻燃填料（改性硅胶）TSKgel G2000SW XL，G3000SW XL，G4000SW XL，G2000SW，G3000SW，G4000SW，G2000SW Glass，G3000SW Glass，G4000SW Glass，SuperSW2000，SuperSW3000，SuperSWmAb HR，SuperSW mAb HTP，UltraSW Aggregate，UP-SW3000TSKgel guardcolumn SW XL，SW，SW Glass，SuperSW，SuperSW mAb，UltraSW，UP-SW，UP-SW DCTSKgel SW系列产品补充信息半微型色谱柱：TSKgel SuperSW3000（2.0 mmI.D.×30 cm/1.0 mmI.D.×30 cm），TSKgel SuperSW mAb HR，TSKgel SuperSW mAb HTP ，TSKgel UltraSW Aggregate，TSKgel UP-SW 3000，TSKgel guardcolumn UP-SW 和TSKgel guardcolumn UP-SW DC的使用说明书为防止财产损失、确保个人安全，请在使用本产品之前，仔细通读本补充说明书。
本补充信息中所用的章节编号与“TSKgel SW系列”的使用说明书一致。
有关TSKgel SuperSW3000，TSKgel SuperSW mAb HR，TSKgel SuperSW mAb HTP，TSKgel UltraSW Aggregate和TSKgel UP-SW3000 色谱柱的相关内容，请参阅本补充信息的“注意事项”，第1节，第3节，第4节（表1），第6节，第7节（表3），第11节（表4）和第13节（表6和表7），忽略“TSKgel SW系列”的使用说明书中的相应章节。
东曹株式会社TSKgel SuperIC系列离子色谱柱使用说明书
离子色谱柱TSKgel SuperIC系列使用说明书东曹株式会社安全注意事项［注意标签］■远离火源使用易燃溶剂时，请务必小心。
否则可能会导致火灾、爆炸或中毒。
■使用环境必须通风良好如果通风不良，易燃或有毒溶剂可能会导致火灾、爆炸或中毒。
■请勿喷洒溶剂溶剂发生喷洒或泄漏可能会导致火灾、触电、中毒、受伤以及腐蚀。
清除漏出的溶剂时，请佩戴合适的护具。
■请佩戴护目镜和防护手套有机溶剂和酸属于有害物质，切勿直接接触皮肤。
■请小心处理包装处理不当可能会导致产品破裂或溶剂飞溅。
■请勿将本产品用于其他目的本产品仅可用于分离和提纯，请勿用于其他用途。
■请确认化合物的安全性请确认分离和提纯后的化合物和溶剂安全可靠。
■正确废弃请根据当地法律法规正确废弃。
注■请妥善保管本说明书，以便日后参阅。
注意事项：出厂溶剂出厂溶剂：请参阅本说明书中《3. 色谱柱信息》中的内容。
注意事项：填料易燃性填料（乙烯基共聚物）目录1. 简介 (1)2. 使用前 (1)3. 色谱柱信息 (1)4. 色谱柱部件 (5)5. 操作 (6)6. 安装 (8)7. 保存和废弃 (10)8. 清洗色谱柱 (11)9. 理论塔板数和不对称因子的计算方法 (12)10. 质量标准和质量保证 (13)1. 简介本说明书详细记载了有关如何正确保存和使用该类色谱柱的重要信息，以便充分发挥产品的性能。
使用色谱柱之前，请务必仔细阅读本使用说明书。
2. 使用前使用前，请检查色谱柱的包装和外观，确认是否有损坏。
如果发现损坏，请联系当地东曹销售代表。
然后确认色谱柱配有以下文件：使用说明书1份检测报告（Inspection Data）1份3. 色谱柱信息如表1和2所示，TSKgel SuperIC系列产品共包含15种不同的分析柱和保护柱。
表1 分析柱信息（1）1 PEEK：聚醚醚酮（Poly Ether Ether Ketone）2检测用溶剂·TSKgel SuperIC-Anion，TSKgel guardcolumn SuperIC-A6.0 mmol/L四硼酸钠+15 mmol/L硼酸+0.2 mmol/L碳酸氢钠·TSKgel SuperIC-AP，TSKgel guardcolumn SuperIC-AP1.7 mmol/L碳酸氢钠+1.8 mmol/L碳酸钠·TSKgel SuperIC-AZ，TSKgel guardcolumn SuperIC-AZ6.3 mmol/L碳酸氢钠+1.7 mmol/L碳酸钠·TSKgel SuperIC-CR，TSKgel guardcolumn SuperIC-CR2.2 mmol/L甲基磺酸+1.0 mmol/L 18-冠醚-6·TSKgel SuperIC-Cation HS3.0 mmol/L甲基磺酸+0.4 mmol/L 18-冠醚-6+0.2 mmol/L L-组氨酸·TSKgel guardcolumn SuperIC-C HS1.2 mmol/L甲基磺酸+0.4 mmol/L 18-冠醚-6+0.2 mmol/L L-组氨酸如果东曹离子色谱仪IC-2001或IC-2010使用的是抑制模式，请使用以下抑制胶。
凝胶过滤色谱柱说明
rat liver microsome
Elution : (0.2mol/l sodium chloride +20%glycerol +
octaethyleneglycol dodecylether) in 50mmol/l
phosphate buffer,ph 7.0. Note : concentration
2008 -12 volume 15
Applications of TSK-GEL SW-type Gel Filtration columns
Higher resolution with 5um TSK-GEL SWXL compared with 10um TSK-GEL SW columns
Separation of membrane protein by SEC with different surfactant concentration in the eluent
Column : TSKgel G3000SW ,7.5mm ID*60cm
Sample : Membrane protein from a crude extract from
Separation of crude protein samples on TSKgel G3000SWxl.
Column : Sample:
Elution : Flow Rate ; Detection : Recovery :
TSK gel G3000SWXL,5um,7.8mm ID *30cm A. crude peroxidase from Japanese radish, 0.15mg in 0.1ml B. crude glutathione S-transferase from guinea pig liver extract ,0.7mg in 0.1ml 0.3mol/l NaCL in 0.05mol/l phosphate buffer ,ph 7 1.0ml/min
色谱柱在使用过程中易出现的问题和解决办法
色谱柱在使用过程中易显现的问题和解决方法色谱柱日常维护每天用充足的时间来维护色谱柱，您将节省更多有利于处置色谱柱故障的时间，调试您的色谱柱的寿命也会变得更长，色谱柱的使用寿命，除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关，zui重要的是与日常维护紧密相关。
色谱柱的使用寿命重要依据柱效和柱压两个指标来衡量，假如一支色谱柱的柱效太低或者太高，通常被认为该色谱柱的使用寿命已尽结束。
因此，延长色谱柱的使用寿命关键是，清除引起柱效下降和柱压上升的因素，通过以下几点帮战您完成色谱柱的日常维护工作。
一、流动相的pH应在使用范围内以硅胶为基质的反相色谱柱的pH范围为2～9，流动相超出其pH范围将会导致硅胶基质流失和键合相碳链断裂，使柱效下降，寿命变短。
二、去除样品和流动相汇总的固体颗粒样品和流动相中含有固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板，不但会引起柱压的上升，而且也会引起柱效下降。
因此，建议使用超纯水和色谱纯试剂，在分析前对样品进行针筒过滤，流动相过0.45um滤膜。
三、使用保护柱或在线过滤器保护柱和在线过滤器上都有筛板，其孔径与色谱柱筛板孔径相同，因此可以阻拦固体颗粒物质到达色谱柱，有效防止色谱柱筛板的堵塞。
由于柱压上升在分析故障中占很大比例，因此除对样品和流动相进行过滤外，建议您在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器。
四、正确使用缓冲盐缓冲盐使用欠妥会使其在流动相（含有机溶剂）中析出，堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙，使填料板结，柱压上升；同时拦阻了基质上的键合的碳链自由伸展，使用色谱柱的保管本领下降，柱效降低。
建议使用前要过滤，使用后要冲洗。
实在方法如下：1、等度条件：使用缓冲盐前和使用后需要过滤流动相1.0ml/min流速冲洗60min.2、梯度条件：用含有缓冲盐的流动相跑梯度之前，用与初始流动相构成相同的过滤流动相像1.0ml/min流速冲洗60min；分析完成后，再用该过滤流动以1.0ml/min冲洗色谱柱120min。
TSK-GEL色谱柱使用中的常见故障及故障排除(中文)100921
21.5 x 150 54 － － 972 864 900
1,800 1,944 720
22 x 200 76 － － － －
Column size ( mm I.D. x mm Height)
4.6 x 35
5 x 50
7.8 x 50
8 x 75
0.6
1
2
4
1
－
－
－
－
30
-
－
－
18
-
68
－
16
-
61
－
17
40
63
－
33
80
127
－
36
86
137
－
13
32
51
10 x 100 8 －
237 － － 132 263 284 105
10
Retention time (min)
90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 15
Commercial Q type 6mL Styrene type
900 800 700 600 500 400 300 200 100
0 -100
0
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
5
10
原因和解决方法 1 样品溶液中的离子强度太高
(a) 通过透析或用缓冲液（非盐缓冲液）来对样品溶液脱盐处理 特别是在下一步中将会使用疏水模式的样品应该按照以上方法处理
2 样品溶液的pH值与缓冲液的不同 (a) 通过透析来对样品溶液脱盐处理
1 样品中的疏水性杂质吸附在填料上干扰了正常的结合 (a)使用酸性溶液或碱性溶液进行清洗 (b)使用有机溶剂清洗
凝胶色谱仪使用时常见故障的断定及解决方法
凝胶色谱仪使用时常见故障的断定及解决方法诊状可能的原因及解决方法(一)保留时间变化1.柱温变化柱恒温，必要时需配置恒温箱2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱3.缓冲液容量不够用》25mmol/L的缓冲液4.柱污染每天冲洗柱5.柱内条件变化稳定进样条件,调节流动相6.柱快达到寿命采用保护柱(二)保留时间缩短1.流速增加检查泵,重新设定流速2.样品超载降低样品量3.键合相流失流动相PH值保持在3"7.5检查柱的方向4.流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀5.温度增加柱恒温(三)保留时间延长1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱3.键合相流失同前(二)34.流动相组成变化同前(二)45.温度降低同前(二)5(四) 出现肩峰或分*1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%2.样品溶剂过强采用较弱的样品溶剂3.柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件4.柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品5.进样器损坏更换进样器转子(五)鬼峰1.进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗2.样品中未知物处理样品3.柱未平衡重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱) 每天新配,用抗氧化剂5.水污染(反相) 通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水(六) 基线噪声1.气泡(尖锐峰) 流动相脱气,加柱后背压2.污染(随机噪声) 清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂3.检测器灯连续噪声更换氘灯4.电干扰(偶然噪声) 采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)5.检测器中有气泡流动相脱气,加柱后背压(七)峰拖尾1.柱超载降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相2.峰干扰清洁样品,调整流动相3.硅羟基作用加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相PH值,钝化样品4.同前(四)4 同前(四)45.同前(四)3 5.同前(四)36.死体积或柱外体积过大连接点降至最低,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管7.柱效下降用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱(八)峰展宽1.进样体积过大同(四)12.在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散3.数据系统采样速率太慢设定速率应是每峰大于10点4.检测器时间常数过大设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%5.流动相粘度过高增加柱温,采用低粘度流动相6.检测池体积过大用小体积池,卸下热交换器7.保留时间过长等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱8.柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至最小9.样品过载进小浓度小体积样品。
色谱柱的使用和维护注意事项
色谱柱的使用和保护注意事项色谱柱的正确使用和保护十分重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至破坏。
在色谱操作过程中，需要注意以下问题，以保护色谱柱。
1、防止压力和温度的急巨变化及任何机械震动。
温度的忽然变化或许使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填补状况；柱压的忽然高升或降低也会激动柱内填料，所以在调节流速时应当迟缓进行，在阀进样时阀的转动不可以过缓( 如前所述 )。
2、应渐渐改变溶剂的构成，特别是反相色谱中，不该直接从有机溶剂改变成所有是水，反之亦然。
3、一般说来色谱柱不可以反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才能够反冲除掉留在柱头的杂质。
不然反冲会迅速降低柱效。
4、选择使用适合的流动相( 特别是pH)，以防止固定相被破坏。
有时能够在进样器前方连结一预柱，剖析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入剖析柱以前早先被硅胶 " 饱和 " ，防止剖析柱中的硅胶基质被溶解。
5、常常用强溶剂冲刷色谱柱，消除保存在柱内的杂质。
在进行冲洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂渐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20 倍左右。
6、保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防备溶剂挥发干燥。
绝对严禁将缓冲溶液留在柱内静置或更长时间。
7、色谱柱使用过程中，假如压力高升，一种可能是烧结滤片被拥塞，这时应改换滤片或将其拿出进行冲洗；另一种可能是大分子进入柱内，使柱头被污染；假如柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。
在后两种状况发生时，当心拧开柱接头，用干净小钢将柱头填料拿出1-2mm 高度 ( 注意把被污染填料取净) 再把柱内填料整平。
然后用适合溶剂润湿的固定相 ( 与柱内同样 ) 填满色谱柱，压平，再拧紧柱接头。
这样办理后柱效能获得改良，可是很难恢复到新柱的水平。
柱子无效往常是柱端部分，在剖析柱前装一根与剖析柱同样固定相的短柱 (5-30mm) ，能够起到保护、延伸柱寿命的作用。
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建议流速 （mL/min)
极性有机 溶剂比例%
Super SW2000
4.6mm内径
Super SW3000 30
12
4.6mm内径
Super SW3000 2.0mm内径
0.4
0.1-0.35
100
0.075
0.065
Super SW3000 30 12 1.0mm内径
0.020
0.016
100
TOSOH硅胶基质尺寸排阻色谱柱的关键 参数
TOSOH硅胶基质尺寸排阻色谱分类
SW系列色谱柱： 粒径10um（2000/3000) 粒径 13um（4000）
SWXL系列色谱柱： 粒径5um （2000/3000) 粒径 8um（4000）
SuperSW系列色谱柱: 粒径4um（2000/3000) 用于mAb分离的SW色谱柱：粒径4um（HR/HTP)
用于mAb 分离的SW系列
名称
柱长 最大耐压 最大流速 建议流速 （cm) （MPa） （mL/min) （mL/min)
极性有 机溶剂 比例%
SuperSW mAb HR
30
12
1
(7.8mm内径）
0.5-1.0
SuperSW mAb HTP (4.6mm内径）
15 8
0.5
0.1-0.35
20
Ultra SW Aggregate
硅胶基质尺寸排阻色谱柱使用前注意事项
• 请先确认整个色谱系统是否正常，（可以通过1ml/min的流速下 ，系 统压力值进行判定）
• 系统确认良好的状态下，先将系统中的有机相置换成纯水相后再进行 SW系列色谱柱的柱效评估
• 流动相现配现用，配好后使用0.45um的水相滤膜过滤后再超声脱气。 • 参考OCS数据中的压力范围设置限压保护，
硅胶基质尺寸排阻色谱柱柱效测定模板
柱效测定模板-1.p df
样品溶液的配置
• 请先确认样品是溶液的状态（澄清，透明） • 如果是液态样品，0.45um 或者0.22um的滤膜过滤后才能进样
滤膜的选择根据样品溶解性 • 如果样品的溶剂与流动相不同，要先用流动相稀释样品，检查
样品在流动相状态下是否会沉淀或者变性 • 如果样品是固体状态，尽量考虑使用流动相溶解样品，样品过
建议流速
极性有机溶 剂比例%
（MPa） （mL/min) （mL/min)
2 4 2.5
1.2 5 1.5
3
0.5-1.0
100
TOSOH硅胶基质尺寸排阻色谱柱的关键 参数
SW系列 ( 21.5mm 内径）
名称 G2000SW G3000SW G4000SW
柱长 （cm)
30 60 30 60 30 60
粒径3um（Ultra SW Aggregate)
UP-SW3000 ： 粒径2 um （HPLC &UHPLC）
TOSOH硅胶基质尺寸排阻色谱柱的关键 参数
SW系列 ( 7.5mm 内径）
名称 G2000SW G3000SW G4000SW
柱长 （cm)
30 60 30 60 30 60
最大耐压 最大流速
TSK-GEL SW色谱柱使用中的注意事项 常见问题及故障排除
内容概要
TOSOH硅胶基质尺寸排阻色谱分类 TOSOH硅胶基质尺寸排阻色谱柱的关键参数 硅胶基质尺寸排阻色谱柱使用前注意事项 硅胶基质尺寸排阻色谱柱柱效测定模板 样品溶液的配置 保护柱的作用 硅胶基质尺寸排阻色谱柱的清洗 硅胶基质尺寸排阻色谱柱的保存 硅胶基质尺寸排阻色谱柱的故障排除
名称
G2000SWXL G3000SWXL G4000SWXL
柱长（ cm)
最大耐 压（ MPa）
极性有机溶 最大流速（ 建议流速（ 剂比例% mL/min) mL/min)
30
7
30
7
1.2
30
3.5
0.5-1.0
100
TOSOH硅胶基质尺寸排阻色谱柱的关键
参数
Super SW 系列
名称
柱长 最大耐压 最大流速 （cm) （MPa） （mL/min)
滤后再进样分析。 • 如果样品是非溶液状态， 就必须通过适当的前处理技术(溶剂
萃取，柱预处理等等），使目标组分充分溶解在溶剂中。
保护柱的作用
• 防止分析柱被一些微粒物质堵塞。ห้องสมุดไป่ตู้• 在色谱柱上强吸附组分在色谱柱上吸附。 • 防止突然高流速下分析柱柱床塌陷。
硅胶基质尺寸排阻色谱柱的清洗（7.8mmX30cm)
最大耐压 最大流速
建议流速
极性有机溶 剂比例%
（MPa） （mL/min) （mL/min)
1 2 1.5
8 3 1
2
3.0-6.0
100
TOSOH硅胶基质尺寸排阻色谱柱的关键 参数
SW系列 ( 玻璃柱）
名称
G2000SW
8mm 内径
G3000SW
8mm 内径
G3000SW
20mm 内径
G4000SW
8mm 内径
柱长（ cm) 30 30
30
30
最大耐
极性有机溶
压（ MPa）
最大流速（ 建议流速（ 剂比例% mL/min) mL/min)
2 0.8
2
0.8
0.8
8.0
0.4-0.8
0.4-0.8 100
4.0-6.0
2
0.8
0.4-0.8
TOSOH硅胶基质尺寸排阻色谱柱的关键 参数
SWXL系列 ( 7.5mm 内径）
30 12
1
(7.8mm内径）
0.5-1.0
TOSOH硅胶基质尺寸排阻色谱柱的关键 参数
UP-SW系列
名称
柱长（ cm)
最大耐压 最大流速
建议流速
极性有机溶 剂比例%
（MPa） （mL/min) （mL/min)
25
0.5
0.1-0.35
UP-SW3000
15
30
（4.6mm)
30
34
0.35
0.1-0.35
G2000SWXL/G3000SWXL/G4000SWXL的耐受压力是7MPa，所以要在仪器上 设定限压保护7MPa+系统压力值 ， • 初次拿到柱子后，参照柱盒中的Inspection data的方法评估柱效后再 使用 • 当天使用完成后，如果流动相PH在2.5-7.5之间，可以挂在系统上明 日再用 • 当天使用完成后如果隔几日再用最好使用加入NaN3到流动相中，浓度 为0.05%
• 100%纯水以0.2mL/min的流速冲洗1.5小时. • 如果是疏水性吸附，以20%或更多比例乙腈的（或其他极性有机溶剂
）水溶液为流动相（用0.45um的有机相滤膜过滤），采用0.2mL/min 的流速冲洗1.5小时. • 100%纯水以0.2mL/min的流速冲洗1.5小时. • 如果是离子性物质的吸附，以0.1mol/LPB（ 0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4）缓冲液+0.1mol/LNa2SO4或 更高盐浓度溶液为流动相（用0.45um的水相滤膜过滤），采用0.2 mL/min的流速冲洗1.5小时后，再以0.01g/LPABA(对氨基苯甲酸)为 标准品，进样量为20uL,在UV280nm下，以0.1mol/LPB（ 0.05mol/LNaH2PO4+0.05mol/LNa2HPO4）+0.1mol/LNa2SO4缓冲液为 流动相检测柱效,。 • 如果是碱性物质的吸附，以0.05mol/L的磷酸二氢钠溶液（用磷酸调 整pH2.5）为流动相（用0.45um的水相滤膜过滤），采用0.2mL/min 的流速冲洗1.5小时。