第五章体内药物分析

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第05章-体内药物分析-幻灯片

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中长期保存
尿样宜立即测定,否则应加入防腐剂或低温冷藏。
第二节 体内样品分析的前处理
微量药物存在于大量生物介质中,若直 接进行测定,内源性物质可能干扰,药 物浓度太低将会达不到仪器灵敏度要求。 因此,生物样品中的药物必须经过分离、 纯化与浓集,必要时还需对待测组分进 行化学改性处理,从而为最后测定创造 良好的条件。
pH13 pH7 pH2
返回 液-液萃取(续)
其他方法
① 离子对提取法(ion-pair extraction) ②提取烷基化法(extractive alkylation)
——适用于离子化倾向较大,难以 用溶剂直接提取的极性药物
离子对提取法
一种有机溶剂提取离子性药物的方法
原理:在体液(水溶液)中呈离解状态的 酸性或碱性有机药物(Q),与呈相反电 荷离子(X)作用形成具有一定脂溶性的 离子对(QX),再用有机溶剂提取
酸水解:
尿中缀合物用盐酸水解时,使代谢物的七元 环断裂、形成相应的二苯甲酮衍生物
酶水解:
用 - 葡 萄 糖 醛 酸 苷 酶 水 解 酶 , 尿 液 1ml 、 pH4.8缓冲液50l、 -葡萄糖醛酸苷酶溶液 0.1ml、37℃水浴水解12h,水解后尿样调成 pH9乙醚萃取
返回 缀合物的水解 三唑仑GC测定
一般规则:碱性药物在碱性pH值、
液-液萃取法水相pH值:
生物样品宜在碱性或近中性提取,
生物基质中内源性物质多为酸性,在碱性 下不易萃取
空白血清在pH2、pH7和pH13缓冲液 中乙醚提取,提取液用RP-HPLC(UV)测 定,碱性药物在pH13下提取液杂质峰少
第三章 附图五
空白血清乙醚提取物的HPLC色谱图
常用沉淀剂—CuSO4-Na2WO4、ZnSO4-

药物分析05体内药物分析

药物分析05体内药物分析
第五章 体内药物分析
主讲: 秦大伟
药物分析
第五章 体内药物分析
体内药物分析 定义
体内药物分析是指体内样品(生物体液、器 官或组织)中药物及其代谢或内源性生物活 性物质的定量分析。

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第五章 体内药物分析
分析意义
与体内药代动力学研究和临床 治疗药物监测密切相关,直接 关系到药物的体内作用机制探 讨与质量评价和药物临床使用 的安全、有效与合理。
全血/血浆,组织
(1)蛋白沉淀 (2)调节pH 选择性溶剂提取 RIA
化学衍生化(提取烃基化)
碱回提
残渣
酸回提
HPLC UV、FLD、ECD

TLC
分光光度法 UV、FLD
GC
FID ECD N/P-FID GC-MS
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预处理的目的 使待测药物游离 满足测定方法要求
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组织样品
药物在组织中的分布提供重要 的体内动力学过程
组织采集:先取各种组织,应用匀浆器均匀化制 成水性基质匀浆液,再以适当方法萃取。 组织样品要经过蛋白沉淀:甲醇、乙腈、高氯酸、 三氯乙酸沉淀。 酸、碱水解:将组织水解掉 酶水解:应用酶将组织水解掉 其它:头发等
用水冲洗——活化 上样 用水或缓冲液冲洗,洗去 内源性物质 有机溶剂洗脱药物 收集洗脱液··· ···
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方法好 价格贵

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固相萃取 具体步骤
①固相选择 样品1ml 1ml规格固相 1~25ml 3ml规格固相 ②固相处理 反相C18 固定相的6~10倍体积甲醇洗柱,使溶剂化 6~10倍水缓冲服液冲洗达分离状态 ③上样

第五章体内药物分析

第五章体内药物分析

一)最佳选择题.体内药物分析中,最常用地体内样品是.血浆.尿液.唾液.胃.十二指肠.血浆占全血量地比例是. -- 文档来自于网络搜索.常用地去蛋白质地试剂是.醋酸.冰醋酸,甲醇.盐酸.硫酸.在体内药物分析方法地建立过程中,实际生物样品试验主要考察地项目是.方法地定量限.方法地检测限.方法地定量范围.代谢产物地干扰.内源性物质地干扰.使用唾液作为治疗药物监测样本,应满足地条件是.血浆中药物浓度足够大.唾液中药物浓度够大.足够大.下列研究目地中,体内分析使用毛发样品地是.生物利用度.药物剂量回收.药物清除率.体内微量元素测定.以上均不是.用加权最小二乘法计算回归方程时,权重因子(形)一般选用地是..1Ci..血浆样品地稳定性考察内容通常不包括地试验是.血浆样品地室温放置.血浆样品冰冻保存.血浆样品冻一融循环.经处理后溶液地冰冻保存.经处理后溶液地室温或特定温度放置.在体内药物分析方法地建立过程中,用空白生物基质试验进行验证地指标是.方法地定量范围.方法定量下限().方法地特异性.方法地精密度.方法地准确度.当采用液,液萃取法测定血浆中碱性药物()时,血浆最佳是(二)配伍选择题[].血清.尿液.头发.心脏.粪便下列试验目地宜选用地体内样品是.临床治疗药物监测.药物体内代谢类型研究[—].准确度.精密度.定量下限.样品.提取回收率.用于评价样品处理方法将体内样品中待测物从生物介质中提取出来地能力.用于分析过程中,对分析方法进行质量监控.是指在确定地分析条件下测得地体内样品浓度与真实浓度地接近程度(三)多项选择题.去除血浆中蛋白质,可采用地方法有.加入甲醇.加入异丙醇.加入硝酸.加入氢氧化钠.加热至90C.在体内药物分析方法地建立过程中,分离条件地筛选时应做地试验有.空白溶剂试验.空白生物介质试验.模拟生物样品试验.实际生物样品测试.检测灵敏度试验.在体肉药物分析方法地建立过程中,用样品进行验证地项目有.检测波长.方法地准确度.方法地专属性.方法地提取回收率.方法地精密度.生物样品预处理地目地有.使药物从结合物中释放.提高检测灵敏度.延长仪器使用寿命.使药物从缀合物中释放.改善方法特异性.血药浓度测定地种类有.游离型和结合型药物总浓度地测定.游离型药物浓度地测定.药物活性代谢物地测定.结合型药物地测定.内源性活性物质地测定.血样分析应用地目地有.生物利用度地评价.药物动力学地研究.临床药物监测.有关物质地检查.内源性活性物质地测定.生物样品制备时应考虑地问题有.被测组分地理化性质.被测组分地浓度范围.测定地目地.生物祥品种类.试验药品地辅料组成.在体内药物分析方法验证中,表示方法精密度地项目(内容)有.日内精密度.日间精密度.批内精密度.批间精密度.准确度.在体内药物地分析法中,确定方法特异性时要考惠地干扰物质包括.药物制剂地辅料.内源性物质.代谢产物.药物中地杂质.任用地其他药物(四)是非判断题.血浆样品经乙腈去蛋白后,上清液显酸性() .生物样品经前处理后能够降低分析时地背景噪声() .甲醇和乙腈是常用地与水相混溶地除蛋白溶剂(). 生物样品分析中,以标准曲线地最低点作为定量下限().在生物样品分析方法验证中,精密度用实际样品测定() .在用乙腈去蛋白时,血浆样品与沉淀溶剂地体积比应为:() .在分析方法验证中,实际生物样品用于考察代谢物是否干扰药物地测定() .在分析方法验证中,精密度用相对标准偏差表示().提取回收率地验证要考察高、中、低三个浓度地样品((五)简答题.简述体内药物分析中常用地去蛋白质法及其特点么?.与常规药物分析相比,生物样品有哪些特点?体内药物分析地特点是什.简述体内药物分析方法验证与体外药物分析方法验证地区别.。

《体内药物分析》PPT课件

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(四) 组织
常用的脏器组织:胃、肝、肾、心、脑等
1. 样品的制备
先制成匀浆液━━萃取药物
2.样品处理
①沉淀蛋白法
②酸水解或碱水解法
③酶水解法
(五) 毛发(头发)
适用:微量元素测定
方法:有机破坏法
湿法破坏
干法破坏
氧瓶燃烧法
测定方法为原子吸收分光光度法和电感耦 合等离子体发射光谱法。
第二节、体内样品分析的前处理技术
ห้องสมุดไป่ตู้一.体内样品种类
生物样本:生物体的任何脏器组织、体液均可 作为生物样本.
常用样本:血液(血浆、血清或全血)、尿液、 唾液、毛发
二、体内样品的采集和制备
(一)血样
适用-药物药动学研究、生物利用度、治疗药物检 测等研究与实际工作。
血药浓度通常指血浆、血清中的浓度。其中 的血药浓度能够反映药物在体内(靶器官)的 状况。是体内药物分析最常用的样本 1.血样采集 动物(采血不得超过总量的1/10) 人:静脉采血1-5ml
的强酸:10%三氯醋酸、6%高氯酸、5%偏磷酸 等。(高速离心机离心约2min )上清液近呈酸 性pH 0 ~ 4。不适宜在酸性中分解的药物。
④ 热凝固法 要求药物热稳定好,通常加热至90℃ ,使热 变性蛋白沉淀,高速离心或过滤法除去。
方法最简单,只能除去热变性蛋白。
(二)分离纯化与浓集
一般浓集方法: ①使被测组分提取体积小
贮藏
采血后及时分离。 短期保存:4℃ 长期保存: -20℃或-70~-80℃ 全血未经分离不宜冷冻
(二) 尿液 适用-药物剂量回收、肾清除率和生物利
用度测定、药代动力学研究等. 体内药物的清除主要通过尿液的排出。药 物可以原型或代谢产物及缀合物等形式排出。 尿液中药物浓度高,收集量大、方便。但 尿液浓度通常变化较大。 尿液中药物浓度与血药浓度相关性差;不 宜采样的人群:肾功能不良者、儿童 采样后应立即测定。否则应加入防腐剂或冷藏

5-体内药物分析

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三、体内样品的贮存与处理
1、血样的贮藏
采集后及时分离血浆和血清(≤ 2h ),分 离后置硬质玻璃试管中或EP管中完全密塞后再 贮存。
三、体内样品的贮存与处理
2、唾液样品的贮藏
——测定唾液pH时应在取样的当时测定。
——为阻止酶催化生成粘蛋白,应在4℃以
下保存
——冷冻保存唾液时,解冻后应用前摇匀。
三、体内样品的贮存与处理 3、尿样的贮藏
3 强酸沉淀法
常用的强酸——10%三氯醋酸、6%高氯酸、
5%偏磷酸等
试剂用量 ——血清与强酸的比例为1∶0.6时
——除去90%以上的蛋白质 离心分离 ——高速(>10000r/min)离心1~2min 上清液pH ——pH 0~4
4 热凝固法
当待测物热稳定性好时可采用。 通常可加热至90℃,只能除去热变性蛋白。
(一)血样——血浆、血清和全血
——体现药物浓度和治疗作用之间的关系。 ——最常用的生物样本。 1.血样的采集: 注射器 、毛细管眼眶采血、静脉插管手术、 滞 留针股静脉取血
动物实验时,采血量不宜超过动物总血量 的十分之一。
二、体内样品的采集和制备
2.血样的制备: 测定血中药物的浓度,通常是指测定血浆或 血清中的药物浓度,尤其是血浆,并非指全血。
(二)分离与浓集 目的: 1、消除内源性物质、代谢物及其他共存物质 的干扰; 2、提取浓缩待测物质,使其易于检测
(二)分离与浓集 方法: ——液-液萃取法(传统的方法)
——固相萃取法(液—固萃取法) ——自动化固相萃取
——固相微萃取
——超滤
——微透析技术
(二)分离与浓集 1 液—液萃取法 (liquid-liquid extraction, LLE) (1)溶剂的选择——试验成功的主要条件 考虑:提取效率和选择性; 操作是否方便

体内药物分析 体内样品分析 (药物分析课件)

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分光光度法 薄层扫描法 气相色谱法 高效液相色谱法
免疫法
五、样品的测定方法
方法
紫外-可见分光光度法 荧光分光光度法 原子吸收分光光度法 紫外扫描 荧光扫描 氢火焰监测器 氮磷检测器 电子捕获监测器 质量碎片选择离子监测器 紫外检测器 荧光检测器 电化学检测器 放射免疫法 酶免疫法 荧光免疫法 游离基免疫法
体内药物分析
一、样品的种类
体内药物分析采用的生物样品种类包括体内的各种体液和组织。其中 最常用的是血液(血浆、血清、全血)、尿液和唾液。
二、样品的采集
采集原则
根据不同的分析目的和要求进行选取; 所取样品应能正确反映药物浓度与效 应之间的关系; 样品应易于获取,便于处理、分析。
二、样品的采集
(一)血样 血样包括血浆、血清和全血,是体内药物 分析中最常用的样品。 血样采集方法:静脉取血或毛细血管取血。 血样采集的量:一般取血量为1~3ml。 动物:采血量不宜超过动物总血量的1/10。
四、样品的制备及测定
样品的制备 (一)样品制备方法选择的一般原则
生物样品的类型 药物的理化性质和浓度范围 药物测定的目的 样品制备与分析技术的关系
四、样品的制备及测定
(二)样品的制备方法 1.去蛋白法
(1)加入沉淀剂和变性试剂:加入中性盐、加入酸、加入金属离子。 (2)加入可与水混溶的有机溶剂:如甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、四 氢呋喃等。 (3)酶消化法:最常用的酶是蛋白水解酶中的枯草菌溶素。
二、样品的采集
(二)尿液
测定尿药浓度主要用于药物的 剂量回收、肾清除率和生物利 用度的研究以及药物代谢类型 的测定。体内兴奋剂检测的样 品主要是尿液。
二、样品的采集
(三)唾液
唾液的pH约在6.9±0.5,个体差异较 大,此外尚受到一些其他因素,如有 无刺激,剌激类型、强度与持续时间, 年龄,性别,疾病,药物等的影响。 一些药物的唾液浓度与血浆浓度相关, 样品易得,取样无损害。

《体内药物分析》课件

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个体化用药指导
个体化用药指导是体内药物分析的重要应用之一。随着精 准医学的发展,个体化用药已成为提高治疗效果和降低不 良反应的重要手段。通过体内药物分析,可以实现对个体 化用药的科学指导。
在个体化用药指导中,体内药物分析可以帮助医生了解患 者对药物的代谢和反应特点,为医生制定个体化的用药方 案提供依据。这有助于提高治疗效果,降低不良反应的发 生率,提高患者的用药安全性和满意度。
03
免疫分析法
04
利用抗体与抗原的特异性结合反 应进行药物测定的方法。该方法 具有高选择性、灵敏度和简便性 ,适用于生物样品中痕量药物的 测定。
其他方法
除上述常用方法外,体内药物分 析还包括光谱法、荧光法、化学 发光法等其他一些测定方法。这 些方法在特定情况下可能更具优 势,例如光谱法在某些特定药物 的测定中具有较高的灵敏度。
某些药物可能通过皮肤排泄,但这一过程相对较 慢且排泄量较小。
05
CHAPTER
体内药物分析的应用
药效学研究
药效学研究是体内药物分析的重要应用之一。通过分析药物 在体内的代谢和作用机制,可以深入了解药物的疗效和作用 特点,为新药研发和药物优化提供科学依据。
在药效学研究中,体内药物分析可以帮助研究人员了解药物 在体内的分布、活化、代谢等过程,以及这些过程对药效的 影响。这有助于发现潜在的药物作用靶点,预测新药在不同 个体内的效果和安全性。
目的
体内药物分析的主要目的是评估药物 的有效性和安全性,为药物的研发、 生产和使用提供科学依据,同时为临 床医学、药理学和毒理学等领域的研 究提供支持。
药物代谢过程
第一季度
第二季度
第三季度
第四季度
吸收
药物通过各种途径进入 生物体内,如口服、注 射、皮肤吸收等。在吸 收过程中,药物可能受 到生物膜的屏障作用、 药物的溶解度、渗透性 等因素的影响。

《体内药物分析》课件

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方法和技术。
3
局限性的原因
分析体内药物时的局限性,包括生物变 异、样本制备和测定方法等方面的影响。
如何解决局限性问题
1 优化样本制备
2 改进测定方法
3 标准化操作流程
改进样本制备方法,以减 少样本制备过程中的误差。
ห้องสมุดไป่ตู้
优化测定方法,提高测定 的准确性和灵敏度。
制定标准化操作流程,减 少人为因素对分析结果的 影响。
通过研究药物在体内的吸收速 率和程度,了解药物在体内的 吸收过程。
药物代谢动力学参数的测 定
研究药物在体内的代谢速率和 代谢途径,了解药物在体内的 代谢过程。
体内药物分析的精度和准确性
1
精度和准确性的概念
解释精度和准确性在体内药物分析中的
如何提高精度和准确性
2
重要性和定义。
介绍提高体内药物分析精度和准确性的
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# 体内药物分析
什么是体内药物分析?体内药物分析是研究药物在人体内分布、代谢和排泄 等过程的科学方法。
什么是体内药物分析
体内药物分析是研究药物在人体内分布、代谢和排泄等过程的科学方法。它 包括对药物浓度的测定以及药物动力学参数的研究。
体内药物分析的应用
临床药物治疗监测
通过分离和测定药物在样品中的浓度,可以定量分析药物。
2 质谱法
利用质谱仪对药物和其代谢产物进行分析和鉴定。
3 毒理学方法
通过观察药物在体内的毒副作用,评估药物的毒理学活性和安全性。
药物动力学参数的测定
测定方法介绍
介绍药物动力学参数的测定方 法,包括药物吸收、分布、代 谢和排泄等方面的参数。
药物吸收动力学参数的测 定
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(一)最佳选择题
.体内药物分析中,最常用地体内样品是
.血浆.尿液.唾液.胃.十二指肠
.血浆占全血量地比例是
.~~文档来自于网络搜索
.常用地去蛋白质地试剂是
.醋酸.冰醋酸,甲醇.盐酸.硫酸
.在体内药物分析方法地建立过程中,实际生物样品试验主要考察地项目是
.方法地定量限.方法地检测限.方法地定量范围
.代谢产物地干扰.内源性物质地干扰
.使用唾液作为治疗药物监测样本,应满足地条件是
.血浆中药物浓度足够大.唾液中药物浓度够大.足够大
.下列研究目地中,体内分析使用毛发样品地是
.生物利用度.药物剂量回收.药物清除率
.体内微量元素测定.以上均不是
.用加权最小二乘法计算回归方程时,权重因子(形)一般选用地是
..1C
i.
.血浆样品地稳定性考察内容通常不包括地试验是
.血浆样品地室温放置.血浆样品冰冻保存
.血浆样品冻一融循环.经处理后溶液地冰冻保存
.经处理后溶液地室温或特定温度放置
.在体内药物分析方法地建立过程中,用空白生物基质试验进行验证地指标是
.方法地定量范围.方法定量下限( ).方法地特异性
.方法地精密度.方法地准确度
.当采用液,液萃取法测定血浆中碱性药物()时,血浆最佳是
.
(二)配伍选择题
[]
.血清.尿液.头发.心脏.粪便
下列试验目地宜选用地体内样品是
.临床治疗药物监测
.药物体内代谢类型研究
[—]
.准确度.精密度.定量下限
.样品.提取回收率
.用于评价样品处理方法将体内样品中待测物从生物介质中提取出来地能力.用于分析过程中,对分析方法进行质量监控
.是指在确定地分析条件下测得地体内样品浓度与真实浓度地接近程度
(三)多项选择题
.去除血浆中蛋白质,可采用地方法有
.加入甲醇.加入异丙醇.加入硝酸
.加入氢氧化钠.加热至90℃
.在体内药物分析方法地建立过程中,分离条件地筛选时应做地试验有.空白溶剂试验.空白生物介质试验.模拟生物样品试验
.实际生物样品测试.检测灵敏度试验
.在体肉药物分析方法地建立过程中,用样品进行验证地项目有
.检测波长.方法地准确度.方法地专属性
.方法地提取回收率.方法地精密度
.生物样品预处理地目地有
.使药物从结合物中释放.提高检测灵敏度
.延长仪器使用寿命.使药物从缀合物中释放
.改善方法特异性
.血药浓度测定地种类有
.游离型和结合型药物总浓度地测定.游离型药物浓度地测定
.药物活性代谢物地测定.结合型药物地测定
.内源性活性物质地测定
.血样分析应用地目地有
.生物利用度地评价.药物动力学地研究
.临床药物监测.有关物质地检查
.内源性活性物质地测定
.生物样品制备时应考虑地问题有
.被测组分地理化性质.被测组分地浓度范围
.测定地目地.生物祥品种类
.试验药品地辅料组成
.在体内药物分析方法验证中,表示方法精密度地项目(内容)有
.日内精密度.日间精密度.批内精密度
.批间精密度.准确度
.在体内药物地分析法中,确定方法特异性时要考惠地干扰物质包括
.药物制剂地辅料.内源性物质.代谢产物
.药物中地杂质.任用地其他药物
(四)是非判断题
.血浆样品经乙腈去蛋白后,上清液显酸性()
.生物样品经前处理后能够降低分析时地背景噪声()
.甲醇和乙腈是常用地与水相混溶地除蛋白溶剂()
.生物样品分析中,以标准曲线地最低点作为定量下限()
.在生物样品分析方法验证中,精密度用实际样品测定()
.在用乙腈去蛋白时,血浆样品与沉淀溶剂地体积比应为:()
.在分析方法验证中,实际生物样品用于考察代谢物是否干扰药物地测定() .在分析方法验证中,精密度用相对标准偏差表示()
.提取回收率地验证要考察高、中、低三个浓度地样品(
(五)简答题
.简述体内药物分析中常用地去蛋白质法及其特点.
.与常规药物分析相比,生物样品有哪些特点?体内药物分析地特点是什么?
.简述体内药物分析方法验证与体外药物分析方法验证地区别.。

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