2020南方凤凰台生物二轮(江苏专版)重难大题集训六

重难大题集训六微生物的培养与应用

1. (2019·盐城三模)利用紫外线诱变选育高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌,未突变菌不能在含有一定浓度的β- 紫罗酮的培养基上生长,菌体随β-胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色。下图甲为选育及提取获得β- 胡萝卜素的流程,请回答下列问题:

(1)为选出高产突变菌种,还应在培养基中添加,从用途上分析,该培养基类型

是。在接入菌种前,应对培养基进行,以避免杂菌污染。

(2)某同学进行正确的②接种操作后,培养的平板菌落分布如图乙所示。该同学所用接种工具是;由于,所以培养基上只有少数菌能生长形成菌落。

(3)进行③过程时,应选取色的菌落接种至液体培养基,进行该过程的目的是。经过程⑥浓缩后,可用法对色素分离并鉴定提取的胡萝卜素粗品。

2. (2019·徐州考前模拟)锈去津是一种含氮的有机化合物,是一种广泛使用的除草剂,且在土壤中不易降解。为修复被其污染的土壤,某研究小组按下图选育能降解锈去津的细菌(目的菌)。已知锈去津在水中溶解度低,含过量锈去津的固体培养基不透明。请回答:

(1)为获取目的菌,图中A~C均为的选择培养基,A~C培养的目是。

(2)若右图为所测得的A~C瓶中三类细菌的最大密度,则甲类细

菌密度迅速降低的主要原因

是。图中从C瓶将细菌接

种到固体培养基常用的接种工具是,涂布前必须对

其进行,涂布后需将培养皿倒置于

中培养一段时间。

(3)固体培养基接种前是不透明的,原因是,其中菌落即为目的菌落。

3. (2019·南京三模)刚果红能够与纤维素形成红色复合物,可用其鉴定纤维素分解菌。某研究小组将滤纸埋在土壤中,30天后从滤纸上取6g土壤样品加入30mL生理盐水中溶解,得到了富有纤维素分解菌的菌原液,并进行如下实验,请回答下列问题:

(1)稀释菌原液:为确定合适的稀释倍数,小组成员取1mL菌原液进行如下图所示的操作,在统计菌落时,发现平板上的平均菌落数为40个,则每毫升菌原液中的细菌数大约为个。

(2)培养基的准备:在对培养基进行高压蒸汽灭菌的过程中,完成加水、装锅、加热排气、保温保压适当时间后,切断热源,让灭菌锅内温度自然下降, ,打开排气阀,旋开固定螺栓,开盖,才可以取出灭菌的培养基等物品。待培养基冷却至50℃左右时倒平板,在培养基凝固之前加入灭菌的刚果红,从功能上来看,该培养基属于培养基,培养基中碳源主要是。

(3)接种与观察:在无菌条件下,用取0.1mL稀释后的菌悬液进行下图1中所示的操作,室温放置23min后倒置于恒温箱中培养,室温放置23min的目的是。培养过程中定期观察菌落特征和透明圈的大小,图2中D/d的值越,表示该菌对纤维素分解能力越强。

甲乙

图1

图2

4. (2019·扬州一模)“手机上的细菌比马桶上的还多?”央视和北京卫视的记者都做实验对手机和马桶上的细菌数量进行了调查,调查结果如下。请回答下列问题:

(1)该实验需制备培养基,制备培养基的操作顺序是。(用下列字母和箭头排序)

a. 倒平板

b. 计算

c. 溶化

d. 称量

e. 灭菌

(2)根据图中结果可知,两电视台展示的实验均采用法进行接种,该方法使用的接种工具是。

(3)通过观察菌落的(至少写两项)等特征,可知手机和马桶上都存在多种微生物。

(4)两电视台实验操作无误且完全一致,但报道结果截然不同,你认为原因可能是。

(5)实验员按图中方法取样,测定某手机屏幕的细菌数量,从10 mL菌悬液中取出1 mL,稀释100倍,在3个平板上分别接入0.1 mL稀释液,经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为35、36和37,则该手机屏幕的细菌数为个·cm-2。该方法计数的结果往往比实际结果偏(选填“高”或“低”)。

5. (2019·苏锡常镇二模)泡菜的制作离不开乳酸菌,但酵母菌对泡菜的风味和品质也有着重要影响,为研究泡菜发酵过程中酵母菌种群数量的动态变化和pH变化,科研人员选用3份泡菜“老盐水”Y1、Y2、Y3和新鲜萝卜进行了以下实验。请完善下列实验过程并分析回答:

(1)制作泡菜:

40%“老盐水”和60%饮用水

↓

原料→清洗→晒干→切分→称量→装坛→→发酵→成品

↑

配料(食盐、花椒、辣椒、生姜、冰糖、白酒)

(2)酵母菌的分离、纯化及鉴定:

无菌操作下每天取泡菜盐水25 mL,加入mL无菌水中,将样品稀释十倍,再依次稀释成102、103、104、105倍稀释液,分别接种涂布,置于28 ℃恒温培养箱中培养24 h,观察菌落特征,并选取培养基上的

用于DNA分子鉴定。

(3)菌落计数和盐水中的pH测定:

选取便于计数的培养基对不同种酵母菌的菌落分别计数,用此方法计数和直接在显微镜下计数菌体相比,得到的数值往往偏小,原因

有、。同时,每天用精密pH计测定盐水中的pH。

(4)结果分析:

实验持续15天,部分实验结果如下:

原样老盐水样品

发酵时间:天012345679111315

泡萝卜Y1 5.975.985.755.585.765.685.615.625.013.813.583.30 Y2 3.253.513.523.493.273.193.063.072.942.892.862.85 Y3 3.683.823.673.413.173.163.083.112.982.922.912.88

①发酵后期,膜璞毕赤酵母数量减少,甚至消失,从种间竞争的角度分析原因可能

是。

②采用Y1老盐水泡制萝卜10 天后,泡菜表面出现白膜(俗称“生花”),这可能与Y1发酵液中后期

较多有关,其存在时间较长的原因可能是。

6. (2019·南通二模)反硝化细菌能将硝态氮(如N O3-)转化为氮气(2N O3-+10e-+12H+→N2+6H2O),广泛用于污水处理。科研人员开展好氧反硝化细菌的筛选和固定化研究,主要过程及结果如下。请回答:

步骤1菌株初筛、纯化和鉴定:将1 g活性污泥稀释成不同浓度的溶液,各取50 μL稀释液均匀涂布到含有溴麝香草酚蓝(BTB)的初筛培养基上(BTB是一种酸碱指示剂,在弱酸性溶液中呈黄色,弱碱性溶液中呈蓝色,

中性溶液中呈绿色,初筛培养基呈绿色),在适宜条件下培养获得单菌落,再进行纯化和遗传鉴定。

步骤2制备固定化细菌:配制海藻酸钠等溶液并灭菌。在无菌条件下制备固定化小球,用无菌水冲洗并保存。步骤3不同C/N(碳氮比)对反硝化效率的影响研究:配制不同C/N的培养液,每种培养液分两组,分别加100粒固定化小球和0.8 mL的菌液,在30℃下振荡培养48 h后,测定培养液中N O3-的去除率,结果如下图所示。