takara反转录试剂盒说明书
TAKARA植物DNA提取试剂盒说明书
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1 2 M
1.0 kbp 0.5 kbp
2.0 kbp
PCR 反应液 4 μl，1％ Agarose 电泳，M：Wide-Range DNA Ladder（50～10,000 bp） 图 3 以提取的基因组 DNA 为模板进行 PCR 扩增的电泳图
图 1 从植物组织中提取的基因组 DNA 电泳图 -2-
表 1 从植物组织中提取的基因组 DNA 纯度*
样品名称
样品量
Sample No.
A260/A280
A260/A230
20 mg
1
拟南芥幼芽
2
3
50 mg
4
2.2
1.4
2.2
1.4
2.1
1.7
2.1
1.7
20 mg
5
6
西红柿幼芽
7
50 mg
8
图 5 以提取的基因组 DNA 为模板进行 PCR 扩增的电泳图
注：长时间存放可能会有夹杂物沉淀，尽量迅速进入 下一步操作。
12. 12,000 rpm 4℃离心 10 分钟。 13. 弃上清，注意不要吸取沉淀。
注：沉淀有时肉眼看不见。
14. 加入 1 ml 70％乙醇，清洗沉淀。 15. 12,000 rpm 4℃离心 3 分钟。 16. 弃上清，注意不要吸取沉淀。 17. 沉淀干燥，加入适量 TE Buffer（约 20 μl）溶解沉
2. 取出冻结的植物组织于室温放置 5 分钟左右，使其融解。 3. 轻微离心，将植物组织收集在 Microtube 底部。 4. 使用 Pipet Tip 尖端将植物组织按压 Microtube 底部 10 次左右，进行物理破碎。 5. 加入 400 μl 的 Extraction Solution 1，剧烈振荡 5 秒钟。如果植物组织仍滞留于 Microtube 底部，
反转录试剂盒介绍及使用说明
反转录试剂盒介绍及使用说明反转录（Reverse Transcription，RT）是指将RNA作为模板，逆向合成DNA的一种过程。
反转录酶（Reverse Transcriptase，RTase）是一种能够将RNA转录为相应的DNA序列的酶，它是自然界中一些逆转录病毒的主要组成部分。
反转录试剂盒是一种用于反转录反应的工具，通常包含有RTase、RNA模板、dNTPs、引物、缓冲液等试剂。
它可以在实验室中为实验者提供一个便利的条件，用于将RNA转录成DNA，以便进行后续的分析，比如PCR扩增、DNA测序等。
1.获取所需的RNA样品并确保其质量和浓度。
RNA可以从细胞、组织或体液中提取得到，常见的提取方法包括酚/氯仿提取法、硅胶柱法等。
2. 准备反转录反应混合液。
根据试剂盒的使用说明，将所需的试剂按照一定比例混合，包括RTase、RNA模板、dNTPs、引物和缓冲液等。
3.将反转录反应混合液加入至RNA样品中。
将反转录反应混合液和RNA样品按照一定比例混合，通常是将混合液加入至RNA样品中，然后通过轻轻的混匀操作进行反应。
4.进行反转录反应。
将反应混合物在适当的温度下进行反应，通常是在42-55摄氏度下反应30-60分钟。
5.停止反转录反应。
通过加入适当的反应终止缓冲液，可以停止反转录反应，以便进行后续的处理。
6.存储和使用反转录产物。
反转录产物可以直接用于下游分析，也可以暂时存储在低温下，比如-20摄氏度或-80摄氏度。
1. 反转录试剂盒中的试剂应避免受到污染和外界的RNase酶。
试剂的制备和操作过程中，应使用无RNase的操作台、无RNase的显微注射器、无RNase的离心管和其他试剂。
2.反转录试剂盒应在恒温条件下进行储存。
通常试剂盒的储存温度为-20摄氏度或-80摄氏度，应避免反复冻融。
3.操作过程中应注意试剂的保存，避免长时间暴露在室温下，以免影响试剂的质量和活性。
4.在进行反转录反应前，需要对RNA样品进行处理，如去除污染、进行退变性处理等。
takara反转录试剂盒说明书
takara反转录试剂盒说明书Takara反转录试剂盒是一种用于研究RNA分子的试剂盒。
该试剂盒可以用于DNA的反转录，将RNA转录成DNA，并进行后续的PCR扩增。
反转录试剂盒在生命科学领域中起着非常重要的作用，因此在使用过程中需仔细阅读说明书并按照说明书进行操作。
一、试剂盒组成Takara反转录试剂盒主要包含以下拉玛：1.反转录酶：外源的M-MLV反转录酶，具有高度的反转录活性和优异的扩增效率等优良特性。
2.反转录缓冲液：针对反转录酶的酶切优化反转录缓冲液。
3.引物：随机9mers引物，适用于多种RNA逆转录的应用。
4.对照RNA：In Vitro转录的任意序列的RNA，用于反转录和后续PCR扩增反应的质控。
二、试剂盒使用方法1. RNA提取：在使用Takara反转录试剂盒之前，需要从样品中提取RNA。
2. 反转录反应：将RNA测序专用随机引物、针对反转录酶的反转录缓冲液、反转录酶和RNA样品混合，进行逆转录反应。
3. PCR扩增：反转录完成后，可以利用PCR扩增技术对转录所得DNA进行扩增，完成DNA序列的检测和分析。
三、试剂盒注意事项1. 避免多次冻融。
为保证试剂的稳定性，反转录试剂盒必须储存于-20℃及以下的冰箱中，避免多次冻融。
2. 操作时需佩戴手套。
操作时需佩戴手套，尽量避免手汗或皮脂的污染，影响试剂盒的效率和准确性。
3. 注意反转录缓冲液的稀释量。
反转录缓冲液的稀释量会影响反转录效果，因此需要按照说明书进行操作，精准稀释。
4. 注意反转录酶的用量。
不同反转录酶的最优用量不同，需要根据实验需要按照说明书或文献进行调整。
5. 确认对照RNA引物的扩增效果。
在进行PCR扩增前，需要先进行对照RNA引物的扩增，以确认反转录反应的正确性，避免因为反应偏差而引起的实验结果的偏差。
4. 根据实验需要进行调整。
反转录试剂盒虽然具有大量的优良特性，但是实验环境和实验条件的不同，会对反转录试剂盒的效果产生较大的影响，因此需要根据实验需要进行调整。
Takara基因组抽提试剂盒说明书
照说明书的要求进行。 ② DNA 中含有乙醇。在 Rinse B 洗净时，离心速度和时间应严格遵循说明书要求进行。
Q5. 能否使用本试剂盒提取酵母菌中的基因组 DNA？ A5. 不能。因为酵母菌属于真核微生物，其细胞壁的化学组成和结构与细菌不同，因此 Lysozyme 不
TaKaRa Code：DV810A
MiniBEST Bacterial Genomic DNA Extraction Kit Ver.2.0 （50 次量）
说明书
宝生物工程(大连)有限公司
内容
●制品说明 ●制品内容 ●运输温度 ●保存温度 ●实验前的准备 ●操作方法 ●使用例 ●注意事项 ●Q&A
22 ml
Solution C
35 ml
DB Buffer
25 ml
Rinse A
28 ml
Rinse B*3
24 ml
Elution Buffer
4 ml
*1 RNase A1 为混浊溶液。 *2 若出现沉淀，请于 65℃加热溶解，待恢复至室温后使用。 *3 首次使用前，请添加 56 ml 的 100%乙醇。
11. 弃 Filter Cup，在滤液中加入 450 μl 的 DB Buffer， 混合均匀。
12. 将试剂盒中的 Spin Column 安置于 Collection Tube 上。
-2-
图 1. 操作流程简图
13. 将上述操作 11 的混合液转移至 Spin Column 中，12,000 rpm 离心 1 分钟，弃滤液。 14. 将 500 μl 的 Rinse A 加入至 Spin Column 中，12,000 rpm 离心 1 分钟，弃滤液。
TAKARA公司的5' full RACE说明书
400 μl 100 μl 100 μl
For Control Reactions（5 次量）：
Control HL60 Total RNA（1 μg /μl）*2 5′RACE Control Outer Primer（10 μM）*2 5′RACE Control Inner Primer（10 μM）*2
引物序列（5’→ 3’） CATGGCTACATGCTGACAGCCTA CGCGGATCCACAGCCTACTGATGATCAGTCGATG AGGTAGGTGATGTTCCGAGAGCGT TTGGAGTCGCCCTCAGCAGAGAT
长度 23 mers 34 mers 24 mers 23 mers
团。 3. 使用 T4 RNA Ligase 将 5′RACE Adaptor 连接到去帽后的 mRNA 上。 4. 以上述 3 的mRNA作为模板，使用Reverse Transcriptase M-MLV（RNase H-），Random 9 mers
进行反转录反应合成cDNA。 5. 使用下游外侧特异性引物 GSP1 和 5′RACE Outer Primer 进行 Outer PCR 反应，再使用下游内侧
行 5′RACE 实验。 3． 高特异性的 5′RACE 扩增。套式 PCR 法的使用，大大提高了 5′RACE DNA 片段扩增的特异性。
4． 长片段 5′RACE扩增。试剂盒中使用了本公司特殊改良的M-MLV（RNase H-）反转录酶，反转录性
能良好，使长片段的RT-PCR扩增成为了可能。
●制品内容（10 次量）
以下为使用本试剂盒时的注意事项，使用前请一定认真阅读！
1． 进行 5′RACE 实验时，为提高 RACE 结果的可信度，应同时进行 TAP（-）和 M-MLV（-）的负对 照实验。TAP（-）即：RNA 经去磷酸化反应后不进行 TAP 处理，直接进行 5′RACE Adaptor 的 连接及后续实验，以验证 RNA 去磷酸化是否充分。如果充分，RT-PCR 将不能扩增。但是，真正进 行 TAP（-）负对照实验时，由于不能保证 100%的去磷酸化，往往会有 RT-PCR 扩增结果，但其扩 增片段长度一般不同于目的片段。M-MLV（-）即：5′RACE Adaptor 连接反应后进行 RT 反应时 不添加 M-MLV，以排除基因组 DNA 污染造成的假阳性结果。如果 M-MLV（-）的负对照实验没有 特异性扩增，说明 5′RACE 结果来源于 mRNA。
takara反转录试剂盒说明书
takara反转录试剂盒说明书说明书一、产品简介takara反转录试剂盒是一种高效、可靠的反转录试剂盒，适用于转录RNA为cDNA的实验操作。
本试剂盒由takara公司制造，经过严格的质量控制，确保产品的稳定性和可靠性。
二、试剂盒组成本试剂盒包含以下组分：1. 反转录酶：高效反转录酶，能在广泛的实验条件下进行反转录反应。
2. 基质：提供反应所需的核酸和其他辅助物质。
3. 标记物：用于标记反转录产物的荧光染料或放射性同位素。
4. 缓冲液：维持试剂盒中酶的活性，调节反应条件的缓冲体系。
5. 控制样品：用于检验试剂盒的反应效果和稳定性。
三、实验操作1. 准备工作在进行实验前，请准备所需的实验仪器和试剂，确保实验环境的清洁和无菌，避免污染对实验结果的影响。
2. RNA提取使用适当的方法提取目标RNA样本，并在提取过程中避免RNA的降解。
3. 反转录反应将提取的RNA样本与反转录试剂盒中的反转录酶、基质和缓冲液按推荐比例混合，并在适当的温度下进行反应。
反应时间根据样本的RNA含量和实验要求确定。
4. 停止反应通过停止反应来终止反转录反应，一般使用热敏感性酶来达到这个目的。
5. 产物处理反转录产物可以直接用于下游实验，如实时定量PCR、聚合酶链式反应等，也可以进行储存和后续处理。
四、实验结果解读根据试剂盒的使用目的和实验设计，对反转录产物进行相应的分析和解读。
常见的分析方法有凝胶电泳、实时定量PCR和测序等。
根据实验结果，可以得到RNA的表达情况、差异表达基因等相关信息。
五、注意事项1. 试剂保存：请按照试剂盒上的说明保存试剂，避免暴露在高温、冻融循环和光照等不利条件下。
2. 操作规范：请按照本说明书中提供的实验操作步骤进行操作，避免实验误差对结果的影响。
3. 质量控制：在每次实验中，请使用合适的阳性和阴性对照样品，以确保实验结果的准确性和可靠性。
4. 废弃物处理：请将使用过的试剂和实验废弃物按照相关规定进行处理，避免对环境造成污染。
PCR说明书
TaKaRa Code：DRR063ASYBR® PrimeScript™ RT-PCR Kit(Perfect Real Time)(200次量)目录内 容 页 码●制品说明 1●制品内容 1 ●适用的Real Time PCR扩增仪 2●保 存 2 ●试剂盒原理 2 ●特 长 3●RNA样品制备 3 ●操作注意 5 ●操作方法 5 1．反转录反应 5 2．Real Time PCR反应6◆应用Thermal Cycler Dice TM Real Time System扩增仪的操作方法 6 ◆应用ABI PRISM 7000/7700/7900 HT，77300/7500/7500 Fast Real-Time PCR的操作方法◆应用LightCycler Real Time PCR扩增仪的操作方法8◆应用Smart Cycler II System Real Time PCR扩增仪的操作方法9◆应用Mx3000P Real Time PCR扩增仪的操作方法 10●PCR反应条件说明 11 ●实验例 11 ●引物设计说明 13 ●特别提示：本公司提供用于基因表达定量分析的引物设计及合成服务 14 ●问 答14●制品说明本制品是采用SYBR® Green I嵌合荧光法进行Real Time RT-PCR的专用试剂。
Real Time RT-PCR方法以其卓越的快速性及定量性被广泛应用于科研领域，使用本制品可以准确简便地进行mRNA的表达分析。
本制品由「A. 反转录反应试剂」（TaKaRa Code：DRR037A）和「B. PCR反应试剂」（TaKaRa Code：DRR041A）两部分构成。
其「B. PCR反应试剂」部分是一种2×浓度的Premix Type试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单。
「B. PCR反应试剂」制品中的PCR用DNA聚合酶使用了改良后的Hot Start法用 DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq TM HS，并与TaKaRa精心研制的Real Time PCR用Buffer组合使用，可以有效抑制非特异性的PCR扩增，大大提高PCR的扩增效率，进行高灵敏度的Real Time PCR扩增反应。
RACE说明
TaKaRa Code：D3155’-Full RACE Kit(10次量)目录内容页码●制品说明 1 ●制品内容 1 ●保存 2 ●试剂盒原理 2 ●特异性引物的设计要求 3 ●试剂盒特点 3 ●RNA样品制备 3 ●试剂盒使用注意 4 ●使用Control HL60 Total RNA时的5′RACE实验例 4 ●实验样品的5′RACE操作方法 8 ●实验例 11 ●Q&A 11●制品说明本试剂盒是高灵敏度、高特异性扩增cDNA 5′末端全长的试剂盒。
使用RT-PCR方法扩增目的DNA时，一般很难得到全长的cDNA片段，在基因工程研究中，分析遗传基因的全长cDNA序列十分重要。
RACE （Rapid Amplification of cDNA Ends）法能有效解决这一问题。
TaKaRa 5′-Full RACE Kit能够通过已知的cDNA序列，高灵敏度、高特异性地扩增cDNA的5′末端的全长序列。
本试剂盒应用了“去帽法”原理，Tobacco Acid Pyrophosphatase（TAP）可以去掉mRNA的5′帽子结构，使用T4 RNA Ligase将5′RACE Adaptor连接到mRNA的5′端后，可以使用5′RACE Adaptor 上的引物与已知序列部分的引物进行RT-PCR反应，高特异性地扩增cDNA 5′末端的全长序列。
本试剂盒中含有完成5′RACE操作的主要试剂。
试剂盒中使用的Reverse Transcriptase M-MLV（RNase H-）经过了本公司的特殊改良，反转录性能良好，无RNase H活性，大大增加了反转录性能。
结合使用TaKaRa LA Taq®（TaKaRa Code：DRR02AM）进行PCR扩增时，其5′RACE的扩增性能大大优于其他同类产品。
本试剂盒应用了套式PCR原理，增加了PCR扩增的特异性与灵敏度，可以对少量样品或低丰度的基因进行5′RACE实验，并且对长片段的5′RACE扩增具有明显优势。
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Code No. RR047A 研究用PrimeScript™RT reagent Kitwith gDNA Eraser(Perfect Real Time)说明书目录内容页码●制品说明1●制品内容 1 ●试剂盒外必备材料 1 ●保存 1 ●特长 2 ●使用注意 2 ●操作方法 2 ● Real Time PCR 4 ●实验例 6 ●附录7 ●关联产品8●制品说明为了准确地进行基因表达量分析，必须满足只有cDNA作为模板检出的先决条件，但Total RNA中常常混有基因组DNA，并可以直接作为PCR反应的模板进行扩增，因此会造成解析结果不准确。
为了避免这种情况发生，通常将检测用引物设计在内含子前后的外显子上，使基因组DNA得不到扩增。
但是，此方法不适合具有单个外显子的基因或两个外显子之间所跨的内含子过小的基因，同时当基因组上有伪基因存在时、或设计引物对基因组有非特异性扩增时、以及基因信息没被完全解析的生物种等也同样不适合于本方法。
在这种情况下，我们常常需要对Total RNA样品进行DNase I处理，以除去残存的基因组DNA。
而DNase I处理通常要进行复杂的纯化操作，同时会造成RNA的降解和损失。
PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因组DNA进行Real Time RT-PCR反应的专用反转录试剂。
Kit中使用了具有较强DNA分解活性的gDNA Eraser，通过42℃，2 min即可除去基因组DNA。
同时由于反转录试剂中含有抑制DNA分解酶活性的组分，经过gDNA Eraser处理后的样品可以直接进行15 min的反转录反应合成cDNA，因此，20 min内即可迅速完成从基因组DNA去除到cDNA合成的全过程。
使用本制品合成的cDNA适用于SYBR® Green分析法和TaqMan®探针分析法，可以根据实验目的，选择与SYBR Premix Ex Taq™ II（Tli RNaseH Plus）（Code No. RR820Q/A/B）、Probe qPCR Mix（Code No. RR391S/A/B）组合使用。
注意：Takara Bio使用SYBR® Green I作为研究试剂已得到Molecular Probes Inc.的许可。
SYBR®为Molecular Probes Inc.的注册商标。
●制品内容（20 μl反应×100次）1. gDNA Eraser 100 μl2. 5×gDNA Eraser Buffer*1200 μl3. PrimeScript RT Enzyme Mix I*2100 μl4. 5×PrimeScript Buffer 2（for Real Time）*3400 μl5. RT Primer Mix*4400 μl6. RNase Free dH2O 1 ml×27. EASY Dilution（for Real Time PCR）*5 1 ml*1：5×gDNA Eraser Buffer在反转录反应前使用，请务必进行基因组DNA的除去反应。
*2：含有RNase Inhibitor。
*3：含有dNTP Mixture。
*4：含有Oligo dT Primer和Random 6 mers。
*5：制作标准曲线时梯度稀释cDNA或RNA标准品的稀释液。
模板DNA或RNA如果用水或TE Buffer稀释时，由于受Microtube吸附作用等的影响，往往不能准确地进行稀释，导致实验结果精度降低。
使用本制品时，即使稀释至低浓度也能够进行准确地稀释，容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
本制品不影响反转录和PCR反应，用其稀释后的样品可直接使用。
EASY Dilution（for Real Time PCR）（Code No. 9160）也可以单独购买。
注意：EASY Dilution（for Real Time PCR）请与本公司Real Time PCR试剂组合使用，对于其他公司的同类制品的适用性本公司尚未进行确认。
●试剂盒外必备材料热循环仪（或37℃水浴，42℃水浴和85℃加热块）反转录反应所用0.2 ml和1.5 ml的微量反应管微量移液器和枪头（高压灭菌）●保存： -20℃。
●特长1．含有去除基因组DNA的gDNA Eraser，只需2 min即可除去基因组DNA。
2．只需15 min即可高效合成Real Time PCR反应用模板cDNA，是进行2 Step Real Time RT-PCR 反应的最佳试剂。
3．反转录引物使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer混合的RT Primer Mix，可以均匀合成样品中的各种cDNA。
4．本制品提供了SYBR Green分析法和TaqMan探针分析法各自最适反应体系，可以根据分析方法选择体系。
SYBR Green分析法和TaqMan探针分析法区别如下：∙反转录反应中RT Primer Mix的用量。
∙反转录反应中总RNA的用量。
5．Real Time RT PCR定量需要建立标准曲线，建立标准曲线的条件就是需要将总RNA和反转录cDNA 稀释到较低的浓度。
如果用水或TE Buffer稀释时，由于模板浓度低不稳定，因而会缩小曲线范围，结果精度降低。
本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution（for Real Time PCR），将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释，容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
●使用注意以下为使用本试剂盒时的注意事项，使用前一定认真阅读。
1．使用本制品合成的cDNA与SYBR Green I关联制品组合使用时，建议使用：SYBR Premix Ex Taq II（Tli RNaseH Plus）(Code No. RR820Q/A/B)SYBR Premix Ex Taq（Tli RNaseH Plus）(Code No. RR420Q/A/B)以上制品与本制品组合使用，可以得到可信度高的结果。
本制品与SYBR Fast qPCR Mix（Code No. RR430S/A/B）组合使用时，有时反应性能不好，不推荐使用。
2．当同时需要进行数次反应时，应先配制各种试剂的混合液（Master Mix；其中包括RNase Free dH2O、Buffer、酶等），然后再分装到每个反应管中。
这样可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。
同时也可以减少实验操作或实验之间产生的误差。
3．gDNA Eraser和PrimeScript RT Enzyme Mix I在使用前要小心地离心收集到反应管底部。
由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。
同时，要使用精确、量程适合的移液枪，并且不要使Tip插入液面过深，否则会因Tip壁粘着造成损失，而使酶量不足。
4．5×gDNA Eraser Buffer和5×PrimeScript Buffer 2（for Real Time）在使用前需Vortex振荡混匀，轻轻离心后使用。
5．分装试剂时务必使用新的枪头（Tip），以防止样品间污染。
●操作方法1.去除基因组DNA反应按如下成分于冰上配制反应混合液，为了保证反应液配制的准确性，进行各项反应时，应先按反应数+2的量配制Master Mix，然后再分装到每个反应管中，最后加入RNA样品。
42℃ 2 min （或者室温5 min *2）4℃*1： 20 μl 反转录反应体系中，SYBR Green qPCR 法最多可使用1 μg 的Total RNA ，TaqMan Probe qPCR 法最多可使用2 μg 的Total RNA 。
*2：室温反应时，可以延长至30分钟。
2. 反转录反应反应液配制请在冰上进行。
为了保证反应液配制的准确性，进行各项反应时，应先按反应数+2的量配制Master Mix ，然后再分装10 μl 到每个反应管中*3。
轻柔混匀后立即进行反转录反应。
37℃ 15 min *6 85℃ 5 sec4℃*7< TaqMan Probe qPCR 法>37℃ 15 min *6 85℃ 5 sec4℃*7*3：若不配制Master Mix ，向步骤1的反应液中添加试剂时，要先加入RNase Free dH 2O 和5×PrimeScript Buffer 2 (for Real Time)混合均匀，以使gDNA Eraser 的活性充分受到抑制， 再添加RT Primer Mix 、PrimeScript RT Enzyme Mix I ，轻轻混匀进行反转录反应。
*4：使用RT Primer Mix 可以高效合成cDNA 。
因为实验目的不同，也可以不使用RT Primer Mix ，而选择Oligo dT Primer 或Gene Specific Primer 进行反转录反应，引物使用量如下：Oligo dT Primer 50 pmol ／20 μl 反应体系 Gene Specific Primer 5 pmol ／20 μl 反应体系 *5：反转录体系可以根据需要相应扩大。
*6：使用Gene Specific Primer 时，建议反转录反应条件设置为42℃ 15 min 。
PCR 反应有非Master Mix 10 μlMaster Mix 10 μl特异性扩增时，将温度升到50℃会有所改善。
*7：合成的cDNA需要长期保存时，请于-20℃或更低温度保存。
注意：1) 在反转录反应中，SYBR Green qPCR法的RT Primer Mix 用量为1 μl，TaqManProbe qPCR法的用量为4 μl。
2) 得到的RT反应液加入到下一步的Real Time PCR反应体系中，其加入量不要超过Real Time PCR反应体积的1/10（V/V）量。
● Real Time PCR以下是使用本制品进行反转录反应后，选择SYBR Premix Ex Taq II（Tli RNaseH Plus）（Code No.RR820A/B）进行Real Time PCR反应的操作方法。
◆应用Thermal Cycler Dice™ Real Time System扩增仪的操作方法1. 按下列组份配制PCR反应液（反应液配制请在冰上进行）。
*1 通常引物终浓度为0.4 μM可以得到较好结果。
反应性能较差时，可以在0.2～1.0μM范围内调整引物浓度。