植物组织中总糖和还原糖含量的测定
总糖和还原糖的测定
三、实验器材
1、材料：山芋粉 2、仪器：电子分析天平、水浴锅、V-1100 可见分光光度计、移液器 3、其他：试管、容量瓶、三角烧瓶、量筒、 吸管（移液管）、洗耳球、玻棒、洗瓶、 漏斗、离心管、六凹反应盘、pH试纸（1 ～14）
四、实验试剂
1、标准葡萄糖溶液（1.0mg/ml） 2、DNS试剂 3、6mol/L HCl 4、6mol/L NaOH 5、I2-KI溶液
六、计算
C1V1 ω(还原糖)=——×100% m1
C2V2
ω(总糖)=——×0.9×100% m2
附：相关仪器使用 1、移液管的使用
2、移液器的使用
3、离心机的使用 注意配平，对称放 4、V-1100可见分光光度计的使用 比色皿
V-1100可见分光光度计
开机预热30min 测吸光度 选择波长（540nm） MODE键切换到T，将黑体放入光路中
2、样品中总糖的水解、提取
准确称取0.2g山芋粉置于100ml三角烧瓶中
加3ml蒸馏水，调成糊状
取1～2滴于六凹 反应盘中，加1滴 I2-KI溶液，如果 完全不显蓝色， 即可进行下面的 操作。
再加12ml蒸馏水，5ml 6mol/L HCl
沸水浴，30min (不时搅拌) 冷却至室温 用6mol/L NaOH调pH7.0（ pH试纸） 蒸馏水定容至100ml,混匀
合上盖，0键校零MODE键切换到A，参比 Nhomakorabea放入到光路中
合上盖，100键调零
将待测液依次放入到光路中，即可得出 待测液的吸光度。
比色皿的使用
管号
试剂
标准葡萄糖溶液 /ml
0
1
2
3
4
5
6
7
植物中还原糖含量测定
植物中还原糖含量测定
植物中的还原糖是指一类可以还原铜离子的碳水化合物，主要包括葡萄糖、果糖和蔗糖等。
在植物中，还原糖是一种重要的营养物质，也是植物代谢的重要产物。
测定植物中的还原糖含量对于了解植物的生长发育和代谢状态具有重要意义。
测定植物中的还原糖含量通常采用硫酸酚法或硫酸亚铁法。
硫酸酚法是将植物样品加入酚和硫酸，经过加热后，还原糖与酚反应生成有色产物，然后用比色法测定产物的吸光度，从而计算出还原糖的含量。
硫酸亚铁法是将植物样品加入硫酸亚铁溶液，还原糖与亚铁离子反应生成蓝色络合物，然后用比色法测定产物的吸光度，计算出还原糖的含量。
通过测定植物中的还原糖含量，可以了解植物的生长发育和代谢状态。
在植物生长过程中，还原糖的含量会受到光照、温度、水分等环境因素的影响，因此还原糖含量的变化可以反映植物对环境的适应能力。
此外，还原糖也是植物的能量来源之一，其含量的变化还可以反映植物的养分代谢和能量代谢状态。
总之，测定植物中的还原糖含量对于研究植物生长发育和代谢
具有重要意义，可以为植物生理生态学研究提供重要的数据支持。
同时，还原糖的含量变化也可以为农业生产提供参考，帮助农民更好地管理和调控作物的生长。
因此，加强对植物中还原糖含量的测定研究具有重要的理论和应用价值。
植物组织中还原糖含量的测定(精)
植物组织中还原糖含量的测定(3，5–二硝基水杨酸法一、实验目的通过本实验，掌握还原糖定量测定的基本原理，学习比色定糖法的基本操作。
二、实验原理3，5–二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色物质（即3–氨基–5–硝基水杨酸，该物质在540nm波长处有最大吸收。
在一定浓度范围内，还原糖的量与棕红色物质的光吸收值成正比例关系，利用比色法可定量测定样品中的含糖量。
三、实验仪器、试剂和材料1.仪器：25ml刻度试管、离心管或漏斗、三角瓶、容量瓶、刻度吸管、离心机、分光光度计等。
2.试剂：1mg/ml葡萄糖标准液、3，5–二硝基水杨酸3.材料：食用面粉四、实验操作步骤1、葡萄糖标准曲线的制作取7支干燥洁净的25ml刻度试管或大试管，编号，按下表准确加样：0 1 2 3 4 5 6管号葡萄糖标0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2准液/ml蒸馏水/ml 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.83，5–二硝基水杨1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5酸/mlA540 nm将各管摇匀，在沸水浴中加热5min，取出后立即放入盛有冷水的烧杯中冷却至室温，再以蒸馏水定容至25ml，加塞后颠倒混匀。
在540nm波长下，用0号管为参比管调零，分别读取各管的吸光度(A540nm。
以吸光度为纵坐标，葡萄糖毫克数为横坐标绘制标准曲线。
2、样品中还原糖的提取准确称取1.5g食用面粉，放在小锥形瓶中，先以少量蒸馏水调成糊状，然后加25ml蒸馏水，搅匀，置于50℃恒温水浴中保温20min，然后将锥形瓶中内容物转入一个50mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。
充分混合，过滤，滤液即为还原糖待测液。
3、样品含糖量的测定分别取2ml还原糖待测液于两支刻度试管或大试管中，然后各加3，5–二硝基水杨酸1.5ml。
其余操作与制作葡萄糖标准曲线时相同。
测定各管吸光度。
五、实验结果处理以上述还原糖待测液的吸光度平均值，在标准曲线上查出相应的还原糖毫克数。
植物还原糖和总糖的测定实验报告
植物还原糖和总糖的测定实验报告实验目的：本实验旨在通过测定植物中还原糖和总糖的含量，了解植物中糖的组成和含量，并掌握测定糖的方法。
实验原理：还原糖是指具有还原性的糖类物质，例如葡萄糖、果糖等。
总糖是指所有糖类物质的总和，包括还原糖和非还原糖。
本实验测定还原糖和总糖的方法是利用硫酸铜和碱性硫脲试剂的反应。
还原糖能够将硫酸铜（CuSO4）还原成氧化亚铜（Cu2O），从而产生红色沉淀。
而非还原糖则不能起到还原作用，因此不会产生红色沉淀。
实验材料和仪器：材料：植物样品、蒸馏水、硫酸铜溶液、碱性硫脲试剂溶液、氯仿、无水乙醇。
仪器：试管、移液管、离心机、恒温水浴。
实验步骤：1. 将植物样品研磨成细粉。
2. 取适量植物样品加入试管中，并加入适量蒸馏水，使样品完全浸没。
3. 将试管放入恒温水浴中加热，使水浴温度保持在70℃左右，加热30分钟，使植物中的糖充分溶解。
4. 将试管取出，冷却至室温。
5. 取1 mL植物提取液加入新的试管中，加入1 mL硫酸铜溶液，混匀。
6. 加入2 mL碱性硫脲试剂溶液，混匀。
7. 加入10 mL氯仿，并用离心机离心5分钟，分离出氯仿层。
8. 将氯仿层转移至干净的试管中，加入2 mL无水乙醇，混匀。
9. 加热试管，使氯仿和乙醇挥发，得到含有还原糖的溶液。
10. 将溶液转移到比色皿中，使用分光光度计测定溶液的吸光度，记录吸光度值A1。
计算结果：1. 计算还原糖的含量：根据实验原理可知，还原糖的含量与吸光度呈线性关系。
根据已知浓度的标准溶液制作一系列不同浓度的还原糖标准曲线，通过测定待测溶液的吸光度，可以根据标准曲线确定还原糖的含量。
2. 计算总糖的含量：首先将植物提取液进行酶解，将非还原糖转化为还原糖，然后按照上述方法测定还原糖的含量。
最后，将还原糖的含量乘以一个修正系数，即可得到总糖的含量。
实验结果：根据实验步骤测定，得到待测溶液的吸光度值A1为X。
通过标准曲线，可以确定还原糖的含量为Y。
还原糖和总糖的测定汇总
实验一还原糖和总糖的测定姓名：李凯学号：5603115053一、实验目的1、掌握还原糖和总糖测定的基本原理2、学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用二、实验原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。
还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。
利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(还原糖以葡萄糖含量计)。
还原糖在碱性条件下加热可被氧化成糖酸及其它产物，而氧化剂3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计在540nm波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。
由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以系数0.9。
三、实验材料和试剂1、实验材料面粉2、实验试剂①1mg/ml葡萄糖标准液②3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂③碘-碘化钾溶液：④酚酞指示剂：⑤6M HCl和6M NaOH四、实验器材具塞玻璃刻度试管，50ml离心管，100ml烧杯，100ml 三角瓶，100ml容量瓶，移液管：1ml；2ml；10ml，恒温水浴锅，离心机，天平，分光光度计。
五、操作步骤1、制作葡萄糖标准曲线取7支具塞刻度试管编号，按表1分别加入浓度为1mg/ml的葡萄糖标准液、蒸馏水和DNS试剂，配成不同浓度的葡萄糖反应液。
将各管摇匀，在沸水浴中准确加热5min取出，冷却至室温，用蒸馏水补足至10ml，加塞后颠倒混匀，在分光光度计上进行比色。
调波长540nm，用0号管调零点，分别测出1~6号管的光密度值。
以光密度值为纵坐标，葡萄糖含量(mg)为横坐标，在坐标纸上绘出标准曲线。
还原糖和总糖的含量测定
还原糖和总糖的含量测定材料：小麦面粉；精密pH 试纸四、操作步骤1. 制作葡萄糖标准曲线取7支20mL 具塞刻度试管编号，按表1分别加入浓度为1mg/mL 的葡萄糖标准液、蒸馏水和3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂，配成不同葡萄糖含量的反应液。
表1 葡萄糖标准曲线制作2. 样品中还原糖和总糖的测定（1）还原糖的提取准确称取3.00g 食用面粉，放入100mL 烧杯中，先用少量蒸馏水调成糊状，然后加入50mL 蒸馏水，搅匀，置于50℃恒温水浴中保温20min，使还原糖浸出。
将浸出液（含沉淀）转移到50mL 离心管中，于4000r/min下离心5min,沉淀可用20mL 蒸馏水洗一次，再离心，将二次离心的上清液收集在100mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，混匀，作为还原糖待测液。
（2）总糖的水解和提取准确称取1.00g食用面粉，放入100mL三角瓶中，加15mL 蒸馏水及10mL 6M HCl，置沸水浴中加热水解30min（水解是否完全可用碘-碘化钾溶液检查）。
待三角瓶中的水解液冷却后，加入1 滴酚酞指示剂，用6mol/LNaOH 中和至微红色，用蒸馏水定容在100mL容量瓶中，混匀。
将定容后的水解液过滤，取滤液10mL，移入另一100mL容量瓶中定容，混匀，作为总糖待测液。
（3）显色和比色取4支20mL 具塞刻度试管，编号，按表2 所示分别加入待测液和显色剂，空白调零可使用制作标准曲线的0号管。
加热、定容和比色等其余操作与制作标准曲线相同。
五、结果与计算：计算出7、8号管光密度值的平均值和9、10管光密度值的平均值，在标准曲线上分别查出相应的还原糖毫克数，按下式计算出样品中还原糖和总糖的百分含量。
总糖和还原糖的测定
总糖和还原糖的测定──3,5－二硝基水杨酸法目的要求：掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用比色法测定还原糖的方法。
实验原理:在NaOH和丙三醇存在下，3,5－二硝基水杨酸（DNS）与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。
在过量的NaOH碱性溶液中此化合物呈桔红色，在540nm波长处有最大吸收，在一定的浓度范围内，还原糖的量与光吸收值呈线性关系，利用比色法可测定样品中的含糖量。
黄色桔红色试剂和器材一、试剂3,5－二硝基水杨酸（DNS）试剂：称取6.5g DNS溶于少量热蒸馏水中，溶解后移入1000ml容量瓶中，加入2mol/L氢氧化钠溶液325ml，再加入45g丙三醇，摇匀，冷却后定容至1000ml。
葡萄糖标准溶液：准确称取干燥恒重的葡萄糖200mg，加少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至100ml，即含葡萄糖为2.0mg/ml。
6mol/L HCl：取250ml浓HCl（35%～38%）用蒸馏水稀释到500ml。
碘－碘化钾溶液：称取5g碘，10g碘化钾溶于100ml蒸馏水中。
6N NaOH：称取120g NaOH溶于500ml蒸馏水中。
0.1% 酚酞指示剂。
二、材料藕粉，小麦淀粉或玉米淀粉。
三、器材723PC、S22型分光光度计，天平，水浴锅，电炉，试管若干等。
一、葡萄糖标准曲线制作取5支15mm×180mm试管，按下表加入2.0mg/ml葡萄糖标准液和蒸馏水。
管号葡萄糖标准液蒸馏水葡萄糖含量OD540 /ml /ml /mg0 1 00.210.80.42 0.4 0.6 0.83 0.6 0.4 1.24 0.8 0.2 1.65 1 0 2操作方法在上述试管中分别加入DNS试剂2.0ml，于沸水浴中加热2min进行显色，取出后用流动水迅速冷却，各加入蒸馏水9.0ml，摇匀，在540nm波长处测定光吸收值。
以1.0ml蒸馏水代替葡萄糖标准液按同样显色操作为空白调零点。
以葡萄糖含量（mg）为横坐标，光吸收值为纵坐标，绘制标准曲线。
总糖的测定蒽酮比色法
植物组织中总糖和还原糖含量的测定（蒽酮比色法）2010-5-24一、实验目的掌握蒽酮比色法测定总糖和还原糖含量的原理和方法，学会正确使用分光光度计。
二、实验原理游离的己糖或多糖中的己糖基、戊糠醛及己糖醛酸在浓硫酸的作用下脱水生成糠醛衍生物，糠醛衍生物与蒽酮缩合成蓝色的化合物，在620nm处有最大吸收，在一定糖浓度范围内（200ug/ml），溶液吸光度值与糖溶液的浓度成线性关系。
用酸将植物组织中没有还原性的多糖和寡糖彻底水解成具有还原性的单糖，或直接提取植物组织中的还原糖，即可对植物组织中的总糖和还原糖进行定量测定。
三、实验材料1．可见分光光度计、电子天平(1/100)、粉碎机、水浴锅、电炉。
2．研钵、量筒、三角烧瓶、烧杯、容量瓶、玻璃漏斗、试管1.5cm×15cm、刻度吸管、胶头滴管、pH试纸、坐标纸。
3．植物原料，如银耳、木耳、菜叶等。
四、实验试剂1．蒽酮试剂：取2g蒽酮溶于l000ml体积分数为80％的硫酸中，当日配制使用。
2．标准葡萄糖溶液(0.1mg／m1)：称取100mg葡萄糖，溶于蒸馏水并稀释至1 000ml（可滴加几滴甲苯作防腐剂）。
3．6mol／L HCl溶液：50ml盐酸，加水至100ml。
4．10％NaOH溶液：称取10g NaOH固体，溶于蒸馏水并稀释至100ml。
五、操作步骤1．葡萄糖标准曲线的绘制取干净试管6支，按下表进行操作。
以吸光度为纵坐标，各标准液浓度(mg／m1)为横坐标做图。
2．样品中还原糖的提取和测定称取植物原料干粉0.1～0.5g，加水约3ml，在研钵中磨成匀浆，转入三角烧瓶中，并用约30ml的蒸馏水冲洗研钵2～3次，洗出液也转入三角烧瓶中。
于50℃水浴中保温半小时（使还原糖浸出），取出，冷却后定容至100ml。
过滤，取lml滤液进行还原糖的测定：吸取lml总糖类溶液置试管中，浸于冰浴中冷却，再加入4ml蒽酮试剂，沸水浴中准确加热10min，取出用自来水冷却后比色，其他条件与做标准曲线相同，测得的吸光度值由标准曲线查算出样品液的糖含量。
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3.3、糖含量测定方法
相对密度法 折光法 旋光法
物理法
直接滴定法 还原糖法
(改良的兰—爱农法）
高锰酸钾法
萨氏法
化学法
碘量法
3，5—二硝基水杨酸
酚—硫酸法 比色法蒽酮法半胱 Nhomakorabea酸—咔唑法
纸色谱 薄层色谱 色谱法 GC HPLC β—半乳糖脱氢酶测半乳糖、乳糖 酶法 葡萄糖氧化酶测葡萄糖 发酵法 ——测不可发酵糖 重量法——测果胶、纤维素、膳食纤维素
乘以0.9。
碘量法
(1) 原理 样品经处理后，取一定量样液于碘量瓶中，加入一定量过量的碘液和 过量的氢氧化钠溶液，样液中的醛糖在碱性条件下被碘氧化为醛糖酸钠， 由于反应液中碘和氢氧化钠都是过量的，两者作用生成次碘酸钠残留在 反应液中，当加入盐酸使反应液呈酸性时，析出碘，用硫代硫酸钠标准 溶液滴定析出的碘，则可计算出氧化醛糖消耗的碘量，从而计算出样液 中醛糖的含量。 醛糖 + I2 +3 NaOH = 醛糖酸钠 + 2 NaI +2H2O I2 + 2 NaOH = NaIO + NaI + H2O NaIO + NaI + 2 HCl = I2 + 2 NaCl + H2O (2)适用范围 本法用于醛糖和酮糖共存时单独测定醛糖。适用于各类食品，如硬糖、 异构糖、果汁等样品中葡萄糖的测定。
摇匀，沸水浴10mins，取出，用自来水（或冰浴）冷却，直到透明，目的是中止反应，室温放 10mins在620nm处测吸光值
4.2、植物组织中总糖与还原糖溶液 的获取
(1)还原糖：
1g土豆 取滤液5mL, 定容到100mL 混匀,过滤
3mL水
研成匀浆 冷却定到 100mL
30mL水冲研 钵2-3次
3.2、蒽酮比色法
• 总糖的提取及双、多糖的酸水解。利用糖的溶解 度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分 别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用 酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定， 再分别求出样品中还原糖和总糖的含量。 • 单糖类遇浓硫酸时，脱水生成糠醛衍生物，后者 可与蒽酮缩合成蓝绿色的化合物，在可见光620nm 处有最大吸收，当糖的量在20一200mg范围内 时．其呈色强度与溶液中糖的含量成正比，故可 比色定量。
4、操作步骤
• 4.1、制定标准曲线
管号 标准葡萄糖溶液/mL 水 葡萄糖浓度/ug/mL 0 0 1.0 0 1 0.1 0.9 10 2 0.2 0.8 20 3 0.3 0.7 30 4 0.4 0.6 40 5 0.5 0.5 50
冰浴5mins
冰浴条件下加蒽酮试剂 /mL 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0
• 该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不
但可以测定戊糖与己糖含量，而且可以测所有寡糖
类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因为反应 液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应），
所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶
液中全部可溶性碳水化合物总量。
• 在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用
液反应，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜，经过
滤，得到氧化亚铜沉淀，加入过量的酸性硫酸铁
溶液将其氧化溶解，而三价铁盐被定量地还原为
亚铁盐，用高锰酸钾标准溶液滴定所生成的亚铁
盐，根据高锰酸钾溶液消耗量可计算出氧化亚铜
的量，再从检索表中查出与氧化亚铜量相当的还 原糖量，即可计算出样品中还原糖含量
萨氏(Somogyi)法
实验六、植物组织中总糖和 还原性糖含量的测定
1、实验目的
• 掌握总糖和还原糖含量的测定方法
2、实验重点和难点
• 利用蒽酮比色法测定还原糖含量的实验原 理 • 多糖在浓硫酸加热条件下会降解为还原糖
3、实验原理
• 3.1、还原糖的概念
• 指含有游离的半缩醛（酮）基糖。单糖 都是还原糖；某些二糖是还原糖（如麦 芽糖、乳糖等）；多糖多为非还原糖。 • 葡萄糖分子中含有游离醛基，果糖分子 中含有游离酮基，乳糖和麦芽糖分子中 含有游离的醛基，故它们都是还原糖。
三角瓶中 50℃水浴0.5h
(2)总糖：
1g土豆 取滤液 5mL,定容 到100mL 混匀,过滤
3mL水
研成匀浆
12mL水冲研 钵2-3次
三角瓶中
10mL6MHCl
冷却,用 NaOH中和, 加水定容 到100mL
沸水浴0.5h
4.3、用蒽酮比色法测还原糖含量
管号 样液/mL 水 0 0 1.0 还原糖 样液管 1.0 0 总糖样液管 1.0 0
将一定量的样液与过量的碱性铜盐溶液共热，样液中的还原 糖定量地将二价铜还原为氧化亚铜，生成的氧化亚铜在酸 性条件下溶解为一价铜离子，并能定量地消耗游离碘，碘 被还原为碘化物，而一价铜被氧化为二价铜。剩余的碘用 硫代硫酸钠标准溶液滴定，同时做空白试验，根据硫代硫 酸钠标准溶液消耗量可求出与一价铜反应的碘量，从而计 算出样品中还原糖含量。各步反应式如下： 2Cu+ + I2 = 2Cu2+ = +2 II2 + 2 Na2S2O3 Na2S4O6 + 2 NaI
特点是试剂用量少，操作和计算都比较简便、快速，滴定终
点明显。
适用于各类食品中还原糖的测定。但测定酱油、深色果汁等
样品时，因色素干扰，滴定终点常常模糊不清，影响准确
性。 • 本法是国家标准分析方法。
蓝—爱农（Lane—Eynon)法 比直接法的试剂中少亚铁氰化钾，终点为红色。
高锰酸钾滴定法
• 将一定量的样液与一定量过量的碱性酒石酸铜溶
3,5-二硝基水杨酸比色法
• 还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产
物，3,5-二硝基水杨酸(黄色）则被还原为棕红色 的3-氨基-5-硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖
的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关系，利用
分光光度计，在540nm波长下测定光密度值，查对 标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖 的含量。由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖 苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应
直接滴定法（是GB法） 原理：将一定量的碱性酒石酸铜甲、乙液等量混合，立即生 成天蓝色的氢氧化铜沉淀； 这种沉淀很快与酒石酸钾反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸
钾钠铜络合物。
在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用样液滴定，样液 中的还原糖与酒石酸钾钠铜反应，生成红色的氧化亚铜沉
淀；
这种沉淀与亚铁氰化钾络合成可溶的无色络合物；二价铜全 部被还原后，稍过量的还原糖把次甲基蓝还原，溶液由兰 色变为无色，即为滴定终点；根据样液消耗量可计算出还 原糖含量。
冰浴5mins 冰浴条件下加蒽酮试剂/mL 4.0 4.0 4.0
摇匀，沸水浴10mins，取出，用自来水（或冰浴）冷却，直到透明，目的是中止反 应，室温放10mins在620nm处测吸光值
5、原始数据
管号
0
还原糖样液管
总糖样液管
A620nm
6、数据处理与问题
• 6.1、计算浓度
还原糖浓度 2000106 还原糖含量 100% 1 总糖浓度 2000106 0.9 总糖含量 100% 1
蒽酮法可以一次测出总量，省去许多麻烦，因此， 有特殊的应用价值。
• 但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿 将样品的未溶解残渣加入反应液中，不然会因 为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂 发生反应而增加了测定误差。
• 此外，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同， 果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖 较浅，五碳糖显色更浅，故测定糖的混合物时， 常因不同糖类的比例不同造成误差，但测定单 一糖类时，则可避免此种误差。 • 糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的 吸收峰为 620 nm ，故在此波长下进行比色。
• 6.2、本实验的注意事项？
蒽酮硫酸法标准曲线
葡萄糖标准曲线（蒽酮硫酸法）
0.8 0.7 0.6 0.5
y = 0.0068x + 0.0359 R 2 = 0.9959
A620
0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 20 40 60 浓度（ug/ml） 80 100 120