高中生物必修1实验：检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质 doc
物质的鉴定与提取实验-高一上学期生物人教版必修1
物质的鉴定与提取实验（一）、生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定1、实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物发生特定的颜色反应。
（1）糖类中的还原糖（具有还原性的糖，分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都具有还原性，如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，生成砖红色沉淀。
（2）脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或苏丹Ⅳ染液染成红色）。
（3）蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应：在碱性溶液中，含有两个或两个以上肽键的多肽能与铜离子发生反应，形成紫色络合物。
2、实验步骤：（1）还原糖的鉴定：选材→制备组织样液→加斐林试剂→水浴加热→显色（砖红色沉淀）（2）脂肪的鉴定：选材→制片→加苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液染色→漂洗→镜检（橘黄色或红色）（3）蛋白质的鉴定：选材→制备组织样液→加双缩脲试剂A→摇匀→加双缩脲试剂B→观察颜色（紫色）3、注意事项：（1）还原糖的鉴定：①实验材料要求为浅色，不能用绿色叶片、西瓜、血液等材料，防止颜色干扰；②实验材料的还原糖含量要高，马铃薯中含有淀粉，甘蔗中含蔗糖，均不适合作为实验材料；③甲、乙液必须等量混合均匀后再加入样液中，现配现用；④必须水浴加热，50-65°C；⑤非还原糖与斐林试剂反应，溶液为浅蓝色，即Cu(OH)2的颜色，而不是无色。
（2）脂肪的鉴定：①切片要薄，如薄厚不均就会导致观察时有的地方清晰，有的地方模糊；②酒精的作用：实验中要使用体积分数为50%的酒精洗去浮色；③需使用显微镜观察，先用低倍镜观察，后用高倍镜观察；④使用不同的染色剂染色时间不同。
（3）蛋白质的鉴定：①先加A液1ml，摇匀；再加B液4滴，摇匀，B液不能过量；②鉴定前留出一部分的组织样液，以便对比；③无需加热（二）绿叶中色素的提取和分离1、实验原理：叶绿体中的色素能溶于有机溶剂（如丙酮、无水乙醇等）。
叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的色素随着层析液在滤纸上扩散的快，反之则慢。
高中生物实验还原性糖,脂肪,蛋白质
5．双缩脲试剂并不是双缩脲分子。所谓双缩脲是由两分子尿素经脱氨缩合而成的化合物。该化合物在碱性溶液中能与CuSO4反应产生紫色络合物，此反应称双缩脲反应。蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键，因此也能起双缩脲反应。特别要提醒学生的是实验桌上两瓶不同浓度的CuS04溶液，避免拿错。
过滤：将玻璃漏斗插入试管中，漏斗上垫一层纱布
注入组织样液2ml
加斐林试剂：2ml（由斐林试剂甲液和乙液充分混合而成，不能分别加入）
水浴加热：煮沸2min
观察溶液颜色变化：浅蓝色→棕色→砖红色。
结论：还原糖与斐林试剂在加热煮沸的过程中生成砖红色沉淀
2、实验成功的要点：
①还原糖的鉴定实验:选择含糖量较高、颜色为白色或近白色的植物组织，以苹果、梨为最好。
③还可设计一只加底物的试管，不加双缩脲试剂，进行空白对照，说明颜色反应的引起是蛋白质的存在与双缩脲试剂发生反应，而不是空气的氧化引起。
七.疑难精析
1．生物组织中的还原糖是指分子结构中含有还原性基团(如游离醛基或酮基)的糖，如葡萄糖、麦芽糖、果糖，淀粉、蔗糖不具有还原性，斐林试剂只能检验可溶性还原糖的存在，而不能鉴定可溶性非还原糖或不溶性糖。
2.试剂:①斐林试剂(0.1g/L的NaOH溶液+0.05g/mL的CuSO4溶液)；②苏丹Ⅲ染液；③双缩脲试剂；④ 体积分数为50%的酒精溶液；⑤蒸馏水。
六．（一）、还原糖的鉴定
1、还原糖的鉴定步骤:
制备生物组织样液 取样 注入试剂 加热和观察
选材： 苹果：洗净、去皮、切块，取5g放如研钵中
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
一、实验原理 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化 合物产生特定的颜色反应。如： 还原糖 + 斐林试剂→ 砖红色沉淀
蛋白质 + 双缩脲→紫色
脂肪 + 苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ ）→ 橘黄色(红色)
还原糖 + 斐林试剂→ 砖红色沉淀
1.向试管内注入2ml苹果汁。 2.另取一只试管加入甲液0.5ml（10滴）、乙液 0.5ml（10滴），等量混合均匀，配置斐林试剂。 3.向装有苹果汁的试管内注入1ml斐林试剂摇匀。 3.将试管放入盛有50～60℃温水的大烧杯中加热 约2min。匀浆、牛奶、花生种子匀浆。 2、用具：试管、试管架、试管夹、烧杯、胶头滴 管、量筒。 3、试剂：斐林试剂、双缩脲试剂、苏丹Ⅲ染液。
三、注意事项
1.用无名指和中指夹持在橡皮胶头和玻璃管的连接处，防 止胶头脱落。 2.胶头滴管不可交叉使用。 3.胶头滴管加液时，不能伸入容器，更不能接触容器。应 垂直悬空于容器上方0.5 cm处。 4.离开实验室前，要作必要的安全检查，关好水，断电， 关好窗户，锁门。
蛋白质 + 双缩脲→紫色
1.向试管内注入2ml牛奶。 2.向试管内注双缩脲试剂A液（0.1g/mL的NaOH溶 液）1ml（20滴），摇匀。 3.向试管内注双缩脲试剂B液（0.01g/mL的CuSO4 溶液）4滴，摇匀。 4.观察实验中出现的现象。
脂肪 + 苏丹Ⅲ→ 橘黄色
1.向试管内注入2ml花生种子匀浆。 2.向待测组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液。 3.观察样液被被染色情况。
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生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验答案doc
实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质学习目标：初步掌握鉴定生物组织中糖类、脂肪和蛋白质的基本方法，尝试用化学试剂检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质。
重点、难点：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质知识链接：了解同种生物组织中有机物含量的差异和不同生物组织间有机物含量的差异，为本章第一节及第四节的学习打下基础。
学习过程实验原理：1、某些化学试剂能使生物组织中的有机化合物产生特定的_____________________________________2、糖类中的还原糖，如：________________与_________________发生作用，生成________________3、脂肪可以被_____________________染成橘黄色，或被__________________ 染成红色4、蛋白质与__________________发生作用，产生_______________反应5、淀粉遇_____________蓝色实验过程：一、还原糖的检测和观察1、制备生物组织样液（1）_________________（洗净、去皮、切块）取5克放入研钵中。
（2）____________________________（加少许Si02和5ml水）（3）_____________（将漏斗插入试管，漏斗上垫一层纱布）（4）_____________（组织样液备用）2、还原糖的检测和观察（1）试管+2ml__________________________________(2)加_______________1ml振荡（溶液呈蓝色）（3）_______________（将试管放入盛有50—600C温水的大烧杯中加热约2min）(4)观察颜色变化二、脂肪的检测和观察1、制备生物组织实验材料：花生种子（浸泡3-4小时）、作徙手切片、取极薄的一片移至载玻片中央。
2、_____：滴2—3滴苏丹Ⅲ染液，染色3min(苏丹Ⅳ染色1min)3、______：吸取剩余染液，并滴1-2滴50%酒精溶液，洗取浮色4、______：吸取酒精，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖波片。
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
显 色 反 应 现象：
(创设碱性条件)
(提供Cu2+)
无色
紫色或紫红色
蛋白质的检测结果
4.淀粉的鉴定
取材：马铃薯匀浆
检测：
碘液2滴
现象：
摇匀后变成蓝色
[例] 做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋 白质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的 实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题：
各种可供实验的材料 梨 黄桃 胡萝卜 黄豆 花生种子 小麦种子
试剂
组成（用量）
用法
斐林 试剂
双缩 脲试 剂
0.1g/ml NaOH + 0.05g/ml CuSO4 甲液 (1mL) (1mL)
乙液
0.1g/ml NaOH + 0.01g/ml CuSO4
A液(1mL)
B液(4滴)
“甲乙等量 混匀”
“先A后B”
知识结构
第二章组成细胞的分子 网络构建
蛋白质的结构和功能
运送营养物质和代谢废物
水 85~90%
脂肪：CHO 生物体内的储能物质
脂质1~2%
磷脂：CHONP 细胞膜和细胞器膜的组成成分 胆固醇:细胞膜的重要成分，参与脂质的运输
固醇 性激素：促进生殖器官的发育和生殖细胞的形成
无机盐1~1.5%
维生素D：促进对钙、磷的吸收
核酸的组成成分
核糖
脱氧核糖
细胞内的主要能源物质 ：葡萄糖
实验的材料的选择和处理有什么要求？
材料的选择 材料的处理
含糖高，颜色为
还原性糖的鉴定 白色的植物组织，
/
如苹果和梨
脂肪的鉴定 富含脂肪的种子 浸泡3~4小时 ，如花生
蛋白质的鉴定
高中生物实验检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质
实验检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质P18
实验原理：
还原糖 ________________砖红色
脂肪________________红色
蛋白质________________紫色
1、还原糖的检测
什么是还原性糖：
还原性糖：有还原性基团——游离醛基或酮基的糖；如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖。
非还原性糖：淀粉、纤维素、蔗糖、糖元。
(1)材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。
(2)试剂：斐林试剂(甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液)，现配现用。
(3)步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂
1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min
左右→观察颜色变化(浅蓝色→棕色→砖红色)
2、脂肪的检测
(1)材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。
(2)步骤：制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央
↓
染色(滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
↓
制作装片(滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)
↓
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)
3、蛋白质的检测
(1)试剂：双缩脲试剂(A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液)
(2)步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色)。
高中生物必修一可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定-人教版
8、下面是一组探究生物体内主要有机物存在与否的鉴别实验，按表中数字顺序
（2）__用__滴__管__向__试__管__中__滴___加__2_—__3_滴__5_%__的__N_a_O__H_溶__液__，__振__荡__。___ （3）_用__滴__管__向__试__管__中__滴__加__2_—__3_滴__3_%__的__C__u_S_O_4_溶___液__，__振__荡__ （4）结果观察：_静__置__一__会__儿__后__，__观__察__到__红__紫__色__，__说__明__唾液中含有蛋白质
②A组发育正常，B组和C组不正常，但B组比C组发育状况指标好，差异显著。说明“人造蛋白”比缺乏 蛋白质对儿童正常发育更有害（注：其他的合理答案均可）
参考答案：
2． （2） ①选取年龄相当、体重相当、发育良好的大白鼠若干，平均分为三组，标记为A、 B、C。分别饲养 ②每天分别给A、B、C三组大白鼠饲喂等量的真正的纯牛奶、不含任何蛋白质的假 牛奶、含有“人造蛋白”的假牛奶
【实验一】 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
【实验一】生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
【实验原理】
1、可溶性还原糖的鉴定原理 ： （1）生物组织中普遍存在的可溶性还原糖种类较多，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖， 分子内都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原性糖； （2）用斐林试剂只能检验生物组织中可溶性的还原糖的存在与否。斐林试剂由质量浓 度为0．1g/mL的氢氧化钠溶液和质量浓度为0．05g／mL的硫酸铜溶液配制而成，二 者混合后，立即生成淡蓝色的Cu（OH）2沉淀。Cu（OH）2与加入的葡萄糖在加热的 条件下，能够生成砖红色的Cu2O沉淀 （3）用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色—棕色—砖红 色（沉淀）。
2.检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
则不需要加热。 (4)现象不同：斐林试剂检测还原糖，产生砖红色沉
淀，双缩脲试剂检测蛋白质，产生紫色物质。
[高考实验对接]
（ⅰ）
（ⅱ） （ⅲ）
【模板应用分析】
实验材料选择：与教材 试验不同，但都是富含 目的有机物且白色或无 色的生物材料，与教材 实验要求相同。
[多维思考]
（1）如果本实验要检测脂肪，应该怎么做？ 提示：可将腐乳制成腐乳组织液，加入苏丹Ⅲ或 Ⅳ染液，观察组织液颜色变化。
（2）如果本实验出现了腐乳腐败现象，可能是由 于什么原因？ 提示：可能的原因是在制作腐乳过程中，无菌操 作出现失误，造成杂菌污染所致。
实验试剂的选择： 蛋白质与双缩脲试 剂反应，与教材实 验要求相同。
实验变量分析：是 对教材实验的拓展。 ①②③组的单一变 量是处理时间，③ ④组的单一变量是 温度
使酶失活 浅
蛋白酶
不变
【模板应用分析】
浅
（ⅴ）
氨基 转换
实验结果： 生物材料中 的目的有机 物含量越多， 颜色越深， 否则越浅。
糖类和脂质
一、实验原理
某些化学试剂能够使生物组织中的相关有机化合物 产生特定的颜色反应。
(1)还原糖＋ 斐林试剂 50℃～65℃温水浴砖红色
沉淀。
苏丹Ⅲ染液 →橘Байду номын сангаас色
(2)脂肪＋
苏丹Ⅳ染液 →红色 (3)蛋白质＋ 双缩脲试剂 →紫色。 (4)淀粉＋ 碘液 →蓝色。
二、实验步骤
1.还原糖的检测： 选材：含糖量较高、白色或近于白色的植物组织
↓ 制备组织样液
↓ 显色反应：
制浆
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实验二检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质P18 实验原理：
还原糖 ________________砖红色
脂肪________________红色
蛋白质________________紫色
1、还原糖的检测
什么是还原性糖：
还原性糖：有还原性基团——游离醛基或酮基的糖；如葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖、半乳糖。
非还原性糖：淀粉、纤维素、蔗糖、糖元。
(1)材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。
(2)试剂：斐林试剂(甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液)，现配现用。
(3)步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴加热2min左右→观察颜色变化(浅蓝色→棕色→砖红色)
2、脂肪的检测
(1)材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。
(2)步骤：制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中央
↓
染色(滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)
↓
制作装片(滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片)
↓
镜检鉴定(显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒)
3、蛋白质的检测
(1)试剂：双缩脲试剂(A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液)
(2)步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色)。