生化实验六酶的基本性质
生化基础实验报告
一、实验目的1. 了解生化实验的基本原理和操作方法。
2. 掌握常见生化试剂的制备和性质。
3. 学习并运用生化实验技术，进行物质的定性、定量分析。
二、实验原理生化实验是研究生物体内化学反应、生物分子结构与功能及其相互关系的实验方法。
本实验主要涉及以下内容：1. 蛋白质性质及鉴定：通过观察蛋白质在不同条件下的性质变化，如盐析、变性等，以及鉴定蛋白质的方法，如双缩脲试剂、酚试剂等。
2. 酶的性质及活性测定：通过观察酶催化反应的特点，如专一性、高效性等，以及酶活性测定方法，如比色法、电化学法等。
3. 糖类及脂肪的鉴定与测定：通过观察糖类、脂肪在特定条件下的性质变化，如糖的还原性、脂肪的皂化反应等，以及鉴定、测定方法，如费林试剂、苏丹Ⅲ染液等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：鸡蛋清、淀粉、葡萄糖、果糖、蔗糖、脂肪、盐酸、氢氧化钠、硫酸铜、硫酸锌、氯化钠、碘液、苏丹Ⅲ染液等。
2. 仪器：试管、烧杯、量筒、滴定管、pH计、电炉、恒温水浴锅、显微镜、离心机等。
四、实验步骤1. 蛋白质性质及鉴定实验（1）观察蛋白质盐析现象：取鸡蛋清溶液，逐滴加入饱和硫酸铵溶液，观察蛋白质沉淀现象。
（2）观察蛋白质变性现象：取鸡蛋清溶液，加入少量氢氧化钠溶液，观察蛋白质变性现象。
（3）鉴定蛋白质：取鸡蛋清溶液，加入双缩脲试剂，观察颜色变化。
2. 酶的性质及活性测定实验（1）观察酶的专一性：取淀粉溶液，分别加入淀粉酶、蛋白酶，观察酶催化反应现象。
（2）测定酶活性：取淀粉溶液，加入淀粉酶，用碘液检测淀粉分解情况，计算酶活性。
3. 糖类及脂肪的鉴定与测定实验（1）观察糖的还原性：取葡萄糖、果糖溶液，加入费林试剂，观察颜色变化。
（2）观察糖的鉴定：取蔗糖溶液，加入苏丹Ⅲ染液，观察颜色变化。
（3）测定脂肪含量：取脂肪样品，加入碱液，加热皂化，测定皂化物的质量，计算脂肪含量。
五、实验结果与分析1. 蛋白质性质及鉴定实验（1）盐析现象：观察到鸡蛋清溶液中加入饱和硫酸铵溶液后，出现白色沉淀。
《植物生理生化》实验指导
令狐采学《植物生理生化》实验指导（适用专业：农学类相关专业）黑龙江八一农垦大学植物科技学院生理生化教研室目录生物化学实验部分：实验一、氨基酸的纸层析 (1)实验二、蛋白质含量测定（设计性实验） (5)实验三、酶的基本性质 (7)实验四、维生素C含量的测定 (12)实验五、还原糖和总糖的测定 (14)实验六、淀粉酶活性的测定 (17)实验七、脂肪浸提——索氏脂肪浸提法 (20)实验八、一种简单实用的提取植物DNA的方法 (22)实验九、聚丙烯酰胺电泳法测定大麦、小麦种子纯度 (24)实验十、淀粉酶的诱导、提取和活性测定（综合性实验） (26)植物生理学实验部分:实验一、植物组织水势的测定（小液流法） (28)实验二、植物伤流量的测定 (30)实验三、根系活力的测定 (31)实验四、蒸腾强度的测定 (35)实验五、叶绿体色素的提取、分离、性质和定量测定（综合性实验） (37)实验六、光合强度的测定（改良半叶法） (39)实验七、呼吸强度的测定 (41)实验八、植物抗逆性的鉴定（电导仪法） (43)实验九、植物缺水程度的测定（脯氨酸法） (45)生物化学实验部分实验一氨基酸的纸层析一、目的：层析分析法已广泛用于氨基酸、核酸、激素、维生素、糖类的分离与分析。
其优点是能够分离与分析在组成、结构及性质上极为相似的物质；设备简单，操作容易，样品用量很少，结果也较明确。
本实验的目的在于要求学生掌握纸层析法的一般原理和操作技术。
二、原理：纸层析法是以滤纸作为支持物的分配层析法。
分配层析法是利用物质在两种不同混合溶剂中的分配系数不同，而达到分离的目的。
通常用α表示分配系数。
在一定条件下，一种物质在某溶剂系统中的分配系数是一个常数。
）溶质在流动相的浓度（）溶质在静止相的浓度（l s C C =α 层析溶剂是选用有机溶剂和水组成的。
由于滤纸纤维素对水有较强的亲和力（纸上有很多-OH 基与水以氢键相连），吸附很多水分子，一般达滤纸重的22%左右（其中约有6%的水与纤维素结合成复合物），因此使这一部分水扩散作用降低形成静止相；而有机溶剂与滤纸的亲和力很弱，可以在滤纸的毛细管中自由流动，便形成流动相。
普通生化实验总结
普通生化实验总结一、引言普通生化实验（General biochemistry experiments）是生物化学课程中的重要内容之一，通过实验操作和数据分析，帮助学生巩固理论知识，培养实验技能和科学思维能力。
本文将总结普通生化实验的主要内容，包括实验的目的、原理、实验操作步骤以及实验结果的分析和讨论。
二、实验目的普通生化实验的目的在于深入理解生物化学的基本原理和实验技术，培养学生的实验操作能力和数据分析能力。
三、实验一：蛋白质的定性实验1. 实验原理蛋白质是生物体内重要的有机物质，通过蛋白质的定性实验可以初步判断样品中是否含有蛋白质。
定性实验的原理是基于蛋白质的特性，在特定条件下，蛋白质与某些试剂发生反应产生显色或沉淀。
2. 实验操作步骤1.取一定量的样品溶液，分别加入Biuret试剂和Millon试剂，观察颜色变化。
2.根据颜色变化结果判断样品中是否含有蛋白质。
3. 实验结果分析根据实验结果，如果样品与Biuret试剂发生变色反应，由淡蓝变为紫色，可以初步判断样品中含有蛋白质；如果样品与Millon试剂发生变色反应，由白色变为红色，也可以确定样品中存在蛋白质。
四、实验二：酶的性质与活性测定1. 实验原理酶是生物体内的催化剂，能够加速生物化学反应的进行。
了解酶的性质和活性测定方法对于研究生物体内的代谢过程非常重要。
通过测定酶活性，可以确定酶对底物的催化效果和酶的活化或抑制情况。
2. 实验操作步骤1.准备一定浓度的酶底物和辅酶溶液。
2.将一定量的酶底物加入试管中，分别加入辅酶溶液。
分别设立对照组和实验组。
3.在一定时间内测量酶底物与辅酶溶液反应的光吸收度。
3. 实验结果分析通过测量实验组和对照组的光吸收度差异，可以计算出单位时间内的酶活性。
根据酶活性的测定结果，可以初步评估酶的催化效果和活性。
五、实验三：核酸的分离与纯化1. 实验原理核酸是生物体内的遗传物质，对于研究生物体的遗传信息和进化规律具有重要意义。
生化酶的实验报告
一、实验目的1. 理解生化酶的基本概念及其在生物体内的作用。
2. 掌握生化酶活性测定的基本原理和方法。
3. 通过实验，观察不同条件下酶活性的变化，加深对酶动力学性质的理解。
二、实验原理生化酶是生物体内一类具有催化功能的蛋白质，能够加速生物化学反应的速率，而不改变反应的平衡状态。
酶的活性受多种因素影响，如温度、pH值、抑制剂和激活剂等。
本实验主要采用紫外分光光度法测定酶活性。
在特定波长下，酶催化底物发生反应，生成产物，产物的生成会导致溶液吸光度发生变化。
通过测定吸光度变化，可以计算出酶的活性。
三、实验材料与仪器材料：1. 酶提取液2. 底物溶液3. 酶活性测定试剂盒4. pH缓冲液5. 温度控制装置仪器：1. 紫外分光光度计2. 恒温水浴锅3. 移液器4. 试管四、实验方法1. 酶活性测定：- 将酶提取液、底物溶液和pH缓冲液按比例混合，置于比色皿中。
- 在特定波长下，测定溶液的吸光度。
- 将吸光度变化与酶活性进行线性拟合，得到酶的活性。
2. 不同pH值对酶活性的影响：- 将酶提取液、底物溶液和不同pH值的缓冲液按比例混合，置于比色皿中。
- 在特定波长下，测定溶液的吸光度。
- 分析不同pH值对酶活性的影响。
3. 不同温度对酶活性的影响：- 将酶提取液、底物溶液和不同温度的水浴锅中按比例混合，置于比色皿中。
- 在特定波长下，测定溶液的吸光度。
- 分析不同温度对酶活性的影响。
五、实验结果与分析1. 酶活性测定：- 通过实验，得到酶的活性为X U/mg。
2. 不同pH值对酶活性的影响：- 在pH值为X时，酶活性最高，为Y U/mg。
- 随着pH值偏离最适值，酶活性逐渐降低。
3. 不同温度对酶活性的影响：- 在温度为X℃时，酶活性最高，为Y U/mg。
- 随着温度升高，酶活性逐渐增加，但超过一定温度后，酶活性反而降低。
六、结论1. 本实验成功测定了酶的活性，并分析了不同pH值和温度对酶活性的影响。
2. 酶的活性受多种因素影响，其中pH值和温度是影响酶活性的重要因素。
“酶”专题知识(知识+练习+问题详解)
“酶”专题知识一、酶的发现过程（略）二、酶的概念：活细胞产生的一类具有生物催化作用的特殊有机物。
1、来源：由活细胞产生。
（除某些没有细胞核的细胞外，如哺乳动物成熟的红细胞、血小板，植物筛管细胞）2、作用：催化生物化学反应（降低化学反应活化能）3、本质：绝大多数是蛋白质，少数是RNA（暂时还没有把DNA列入）。
三、酶的合成1、合成的原料：氨基酸或核糖核苷酸2、合成的场所：核糖体（与唾液淀粉酶等胞外酶合成和分泌有关的主要细胞结构有核糖体、内质网、高尔基体、线粒体和细胞膜。
）3、合成的过程：遵循中心法则，通过转录和翻译合成的4、合成的控制：酶的合成是在基因控制下进行的四、酶和激素的比较1、化学成分：前者主要是蛋白质，少数是RNA；后者有多肽及蛋白类、氨基酸衍生物、脂质等。
2、生理功能：前者对生化反应起催化作用；后者对生命活动起调节作用。
3、相互关系：能合成激素的细胞一定也能合成酶，但能合成酶的细胞不一定能合成激素。
要注意酶与激素、蛋白质、维生素、脂质的关系：维生素脂质激素蛋白质酶五、酶的类型1、按其发挥作用的场所不同分为：（1）胞外酶：消化酶、SOD（超氧化歧化酶）、基因工程中的工具酶（限制性核酸内切酶和DNA连接酶）等，在细胞外发挥作用。
注意限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用：DNA连接酶的作用是催化切割的DNA片段（黏性末端）形成化学键（磷酸二酯键）而拼接起来。
不是促使碱基配对形成氢键。
消化酶属于分泌蛋白如唾液淀粉酶（注意与生物膜和细胞器的联系）。
（2）胞内酶：在细胞内发挥作用。
如光合酶、呼吸酶、转氨酶、ATP酶、解旋酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、RNA聚合酶、逆转录酶、存在于微生物中的限制性核酸内切酶等。
2、具有酶活性的蛋白质分为简单蛋白质类和结合蛋白质类：（1）简单蛋白质类的酶只由氨基酸组成，不含任何其他物质，如胃蛋白酶。
（2）结合蛋白质类的酶（又称全酶）是由蛋白质与辅因子组成，其中蛋白质部分称为酶蛋白，辅因子部分称为辅酶或辅基。
认识酶的实验报告
认识酶的实验报告一、实验目的本实验旨在通过探究酶的性质和功能，加深对酶作用的认识，并进一步了解酶的作用机制。
二、实验原理1. 酶的定义：酶是一种能够加速生物体内生物化学反应速率的蛋白质。
2. 酶的特性：酶具有专一性、高效性和可逆性。
3. 酶促反应：酶与底物发生特异性结合，形成酶底物复合物，通过酶的催化作用，反应速率得到加快。
三、实验步骤1. 实验材料准备：酶溶液、底物溶液、试管、试管架、试管夹、显色剂等。
2. 实验步骤：- 步骤一：取两支试管，分别加入相同体积的酶溶液和底物溶液，并将其放入不同的试管架中。
- 步骤二：将试管架放入恒温槽中，保持温度恒定。
- 步骤三：同时开始计时器，并在不同的时间点分别取出试管，加入显色剂。
- 步骤四：观察试管中颜色的变化，并记录下时间和变化情况。
四、实验结果根据实验过程中记录的数据计算得出的结果如下表所示：时间（秒）试管一颜色变化试管二颜色变化0 无变化无变化10 逐渐变淡无变化20 变得非常浅逐渐变淡30 几乎透明变得非常浅40 透明透明50 透明透明60 透明透明五、实验讨论通过实验我们可以得出以下结论：1. 酶的作用是加速生物体内生物化学反应的速率，同时具有专一性、高效性和可逆性。
2. 本实验中，试管中的酶溶液通过与底物的特异性结合，催化反应，使底物的颜色变淡或透明。
3. 随着时间的增加，试管一和试管二中的底物都逐渐变淡或透明，说明酶的催化作用随时间的增加而增强。
六、实验总结通过本次实验，我们更加深入地理解了酶的性质和功能。
酶作为生物体内的催化剂，在代谢和生产过程中起着非常重要的作用。
同时，我们也学会了如何进行酶的活性检测实验，通过观察底物的变化情况来评估酶的催化效果。
然而，本次实验的结果可能受到实验条件的限制，如实验温度、酶浓度等因素。
因此，在今后的实验中，我们应该更加精确地控制实验条件，以获取更准确的实验结果。
总之，通过认识酶的实验，我们进一步了解了酶的作用机制，提高了对酶的认识和理解，并为今后的研究和应用提供了基础。
生物化学实验
透光度 T= I/I0 吸光度 A=-lgT=lgI0/I
根据Lambert-Beer定律：
A=KCL( K:吸光系数；C：溶液的浓度；L：
光透过液层的厚度)
A1=K1C1L1
溶质 溶剂
A2=K2C2L2
K1=K2；L1=L2
A1/A2=C1/C2
有色溶液
22
（二） 血糖测定(0-TB)原理
酸性/△
3、 取小试管3支
试剂（滴）
1
2
3
0.5%淀粉
10
10
10
PH6.8缓冲液
3
3
3
0.85%NaCl
3
3
3
混匀，分别将1、2、3号试管依次置于沸水浴、温水浴 和冰水浴中5min。然后向各管加入稀唾液3滴，继续放 置5min。
12
4. 每管取出2滴试液在白瓷板上，加碘液1滴，观察颜色 5. 将1、3两试管改置37度水浴中5min，加碘液1滴，
抑制
琥珀酸脱氢酶
2H
HOOC CH
HC COOH
延胡索酸
18
本实验用甲烯蓝作受氢体，接受琥珀酸 脱下的氢，自身变为甲烯白。
MB + 2H
MB：2H
甲烯蓝（蓝色） 甲烯白（白色）
注意：甲烯白容易被空气氧化，所以需 要隔绝空气。
19
三. 实验操作
四. 注意事项：
1. 肌肉提取液混匀 2. 加液体石蜡前将试管混匀，加后勿混
离心：3000rpm、5min
上清液倒入另一小试管
按P9表操作，测定血糖浓度: 27
3、 血糖浓度的测定
试 液（ml） 正常 胰－ 肾－ 标准
上清液
1.0 1.0
酶的性质及其在消化中的作用实验
酶的性质及其在消化中的作用实验实验目的：探究酶的性质及其在消化中的作用。
实验原理：酶是一类特殊的蛋白质，它可以在特定的条件下加速化学反应的速率，而不改变反应本身。
在消化中，人体内分泌的多种酶可以分解不同的食物成分，以便身体吸收。
本实验中，我们将使用淀粉酶和蛋白酶来模拟消化过程，观察它们的作用。
实验步骤：1.将一些淀粉加入到一个试管中，然后添加适量的淀粉酶溶液。
2.用试管夹将试管放入恒温水浴中，保持温度在37°C左右，开始计时。
3.每隔一定时间，从试管中取出一滴淀粉溶液，滴入到碘液中。
4.观察碘液颜色的变化，如果淀粉已经分解完全，则碘液的颜色会从深蓝色变为黄色，表示淀粉已经分解完全。
5.重复以上步骤，分别用不同浓度的淀粉酶溶液进行试验，观察分解淀粉的速度和效果。
6.将一些蛋白质溶液加入到一个试管中，然后添加适量的蛋白酶溶液。
7.用试管夹将试管放入恒温水浴中，保持温度在37°C左右，开始计时。
8.每隔一定时间，从试管中取出一滴蛋白质溶液，滴入到碱性铜液中。
9.观察碱性铜液颜色的变化，如果蛋白质已经分解完全，则碱性铜液的颜色会从蓝色变为紫红色，表示蛋白质已经分解完全。
10.重复以上步骤，分别用不同浓度的蛋白酶溶液进行试验，观察分解蛋白质的速度和效果。
实验结果：在淀粉酶的作用下，淀粉分解为糖类，碘液的颜色会逐渐从深蓝色变为紫色，直到变为黄色，表示淀粉已经完全分解。
不同浓度的淀粉酶溶液对分解速度和效果有影响，浓度越高分解越快。
在蛋白酶的作用下，蛋白质分解为氨基酸，碱性铜液的颜色会逐渐从蓝色变为紫红色，直到变为无色，表示蛋白质已经完全分解。
不同浓度的蛋白酶溶液对分解速度和效果有影响，浓度越高分解越快。
实验结论：本实验表明，淀粉酶和蛋白酶都是一类特殊的酶，它们可以加速特定的化学反应，将复杂的食物分解成更简单的成分以便身体吸收。
酶的分解作用在一定范围内受到浓度、温度、pH值等因素的影响，因此在实际应用中需要根据具体情况进行调整。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
专业：____生物工程姓名：课程名称：生物化学实验指导老师：史影成绩：实验名称：酶的基本性质实验——底物专一性、激活剂和抑制剂、最适温度同组学生姓名：陈莞尔，潘盛警Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性一、实验目的1.了解酶的专一性。
2.掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。
3.学会排除干扰因素，设计酶学实验。
二、基本原理酶是具有高度专一性的有催化功能的蛋白质。
酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性，酶促反应要比无机催化反应快数十倍。
酶催化的一个重要特点是具有高度的底物专一性，即一种酶只能对一种或一类底物其催化作用，对其他底物无催化反应。
根据各种酶对底物的选择程度不同，可分成下列几种：1.相对专一性。
一种酶能催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。
2.绝对专一性：有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物，而不作用于任何其他物质。
如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。
如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖，淀粉酶只作用于淀粉，而不作用于纤维素。
3.立体异构专一性：有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种，而对另一种则全无作用。
如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。
本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。
用Benedict试剂检测反应产物。
Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性的半缩醛羟基发生氧化还原反应，生成砖红色氧化铜沉淀。
Na2CO3+ 2H2O 2NaOH + H2CO3CuSO4+ 2NaOH Cu(OH)2+ Na2SO4还原糖(—CHO or —C=O)+ 2Cu(OH)2Cu2O + 2H2O + 糖的氧化产物（黄色或砖红色）淀粉和蔗糖无半缩醛基，无还原性，与Benedict试剂无显色反应。
淀粉被淀粉酶水解后产生葡萄糖，蔗糖被蔗糖酶水解后产生果糖和葡萄糖，产物都是还原糖，因此能被Benedict 试剂氧化生成砖红色的Cu2O沉淀。
三、实验材料与试剂1、实验材料⑴蔗糖酶(样品Ⅳ）；⑵新鲜唾液（含唾液淀粉酶）；2、实验试剂⑴蔗糖酶液蔗糖酶液(样品Ⅳ）加蒸馏水适当稀释，备用；⑵唾液淀粉酶液（学生自制）取0.5mL唾液至25ml量筒中，用蒸馏水（稀释）到25ml，用棉花过滤备用。
唾液稀倍数因人而异，可稀释50～400倍，甚至更高；⑶5%蔗糖（A.R.）溶液；⑷0.5%淀粉溶液（含0.3%NaCl）；⑸Benedict试剂；四、实验器材与仪器1.漏斗，2.脱脂棉花；3.恒温水浴（37℃，100℃）；4.量筒；5.试管；6.烧杯；7.吸量管。
五、实验内容酶的专一性实验，按下表操作。
六、结果分析和讨论结果：⑴①、②、③号试管均呈硫酸铜的蓝色，说明这3支试管内无还原糖，淀粉和蔗糖均未水解；⑵④号试管呈砖红色说明试管内淀粉被水解，⑤号试管呈蓝色说明试管内蔗糖未水解，⑥号试管呈蓝色说明无还原糖，从这三支试管看出唾液淀粉酶只对淀粉有催化活性，不能催化蔗糖水解，具有对淀粉的底物专一性；⑶⑧号试管呈黄绿色，说明试管中部分蔗糖被水解，但未水解完全，⑦号试管呈蓝色说明淀粉未水解，⑨号试管呈蓝色说明无还原糖，从这三支试管看出蔗糖酶只对蔗糖的水解有催化作用，对淀粉无催化作用，具有对蔗糖的底物专一性。
七、思考题1．观察酶专一性实验为什么要设计这3组实验？每组各有何意义？蒸馏水有何用？答：第一组作为整个实验的空白对照组，检测Benedict试剂对实验结果的颜色有何影响。
第二组作为检测淀粉酶的专一性实验组，第三组作为检测蔗糖酶的专一性的实验组。
蒸馏水作为每一个组中的空白对照，与组内其余两组进行对照。
2．将酶液煮沸10min后，重做二、三的操作，观察有何结果？答：二、三组的实验结果将和一组相同，即每组中3支试管都呈蓝色，因为酶在煮沸过程中已经变性，失去催化活性，故不能催化各自对应底物的水解反应。
3．在此实验中，为什么要用0.5%淀粉(0.3%NaCl)溶液？0.3%NaCl的作用是什么？答：0.3%NaCl中的Cl-是作为激活剂激活唾液淀粉酶的活性，使实验结果不至于因为唾液淀粉酶的活性不足而导致不同。
Ⅱ. 影响酶活性的因素——激活剂和抑制剂一、实验目的和要求1. 了解激活剂和抑制剂对酶促反应速度的影响。
2. 学习检定激活剂和抑制剂影响酶促反应速度的原理和方法。
二、实验基本原理在酶促反应过程中，酶的活性常收到某些物质的影响，有些物质能使酶的活性增加，称为激活剂；某些物质它们并不引起酶蛋白变性，但能使酶分子上的某些必需基团（主要是指酶活性中心上的一些基团）发生变化，因而引起酶活力下降，甚至丧失，致使酶反应速度降低，称为酶的抑制剂。
酶的激活剂种类：1、一些简单的无机离子，如Mg2+、Cl-等；2、一些中等大小的有机分子，如抗坏血酸等也是激活剂，它们对某些含巯基的酶具有激活作用；3、有些酶的催化作用易受某些抑制剂的影响，因而能除去抑制剂的物质也可称为激活剂，如EDTA 能除去重金属，因而能解除重金属对酶的抑制作用。
4、具有蛋白质性质的大分子物质，这些激活剂是指可对某些无活性的酶原起作用的酶。
酶的抑制剂有许多种：如重金属离子（Ag+、Hg2+、Pb2＋、Cu2＋等）、CO 、氯化物、H2S 、砷化物、氟化物、生物碱、有机磷农药等都是抑制剂。
少量的激活剂或抑制剂就能影响酶的活性，而且常具有特异性。
值得注意的是激活剂和抑制剂不是绝对的，各种激活剂对酶的作用是不同的。
本实验利用淀粉被水解的不同阶段产物与碘有不同颜色反应，定性观察唾液淀粉酶在酶促反应中激活或抑制现象。
淀粉经酶促水解为葡萄糖的不同阶段的产物与碘作用的颜色反应如下：淀粉 紫色糊精 红色糊精无色糊精 麦芽糖 葡萄糖 显蓝色 显紫色 显红色 不显色 不显色 不显色 （ 碘色） （碘色） （碘色）I 2仍为多糖 （无还原性） （有还原性）本实验中，Cl- 为唾液淀粉酶的激活剂；Cu2+为唾液淀粉酶的抑制剂。
利用淀粉酶别水解不同阶段产物与碘有不同的呈色反应，观察唾液淀粉酶的酶促反应中的激活和抑制现象。
水解程度通过水解混合物遇碘溶液所呈现的颜色变化判断。
三、实验材料与试剂1、实验材料新鲜唾液2、实验试剂⑴唾液淀粉酶（学生自制）取唾液1ml至25ml量筒中，用蒸馏水稀释至25ml，用棉花过滤备用。
唾液稀释倍数因人而异，可稀释50～400倍，甚至更高。
⑵0.1% 淀粉溶液⑶1.0% 氯化钠溶液⑷1.0% 硫酸铜溶液⑸1.0% 硫酸钠溶液⑹碘化钾-碘液四、实验器材和仪器1.试管及试管架2.量筒3.漏斗4.脱脂棉花5.点滴板6.吸量管7.恒温水浴（37℃）五、实验步骤注意：⑴找出准确的保温时间，是本实验是实验能否成功的关键步骤之一，唾液淀粉酶液浓度可根据个人情况而定，通过37℃水浴溶保温计时，反应时间最好在8～15min以内，只有确定准确的保温时间才能进行实验。
（2）加入酶液后，务必充分摇匀，保证酶与全部淀粉液接触的反应才能得到理想的颜色梯度变化结果。
（3）碘化钾–碘液不要过早地加到点滴板上，以免碘液挥发，影响显色效果。
六、结果讨论与分析结果：①反应时间在17min中时能明显区分各管颜色不同。
②试管1中颜色最深，说明CuSO4可以抑制淀粉酶的活性；试管2中颜色最浅，基本呈碘色，故淀粉酶活性最高，说明NaCl可以激活淀粉酶的活性；试管3、4中颜色基本一致，且深浅居于试管1、2之间，淀粉酶活性一般，说明Na+、SO42-对淀粉酶活性都没有影响。
故总体上看，可以得出Cl-是唾液淀粉酶的激活剂，Cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂。
③同时，因为各管的结果颜色都偏深，所以使用的唾液淀粉酶样品活性不高，这与区分各管颜色差别需要反应时间较长（17min）相符合。
七、思考题1. 激活剂可分哪几类？本实验中NaCl、硫酸铜是属于哪种类型？答：激活剂可分为：简单无机离子、中等大小有机分子、能出去抑制剂的物质、具有蛋白质性质的大分子物质等。
NaCl属于简单无机离子；CuSO4属于重金属抑制剂。
2. 本实验中，1，2，3，4管各有何用意？为什么要设计第3管和第4管？答：1管可观察抑制剂对反应影响的现象，2管可观察激活剂对反应影响的现象，第3管可以将1管中的Na+和2管中的SO42-对反应的影响去除，4管作为空白对照。
3. 抑制剂与变性剂有何不同？试举例说明。
答：抑制剂只改变酶的催化活性，并不使蛋白质变性，其影响是可逆的；变性剂破坏了蛋白质的高级结构，使蛋白质变性，并且多数变性剂的影响是不可逆的。
如：Cu2+是唾液淀粉酶的抑制剂，但如果将Cu2+去除淀粉酶的活性又可以变为正常水平。
Ⅲ. 影响酶活性的因素——温度，最适温度测定一、实验目的和要求1. 了解温度对酶活力的影响；2. 学习测定最适温度的原理和方法；二、实验基本原理酶的催化反应受温度影响很大，每一种酶所催化的反应，在一定条件下，仅在某一温度范围内表现出最大的活力，即反应速度最大时的温度，这个温度称为该酶促反应的最适温度，高于或低于最适温度时，反应速度逐渐下降。
因此，酶促反应与温度的关系，用酶活力对温度作图，通常具有钟罩形曲线特征。
温度与酶活力的关系测定是选择一定的条件，把底物浓度、酶浓度、反应时间、pH等固定在最适状态下，然后在一系列不同温度条件下，进行反应初速度测定，以酶反应初速度对温度作图，可以得一个钟罩形的曲线，即为温度—酶活性曲线，在某温度有一酶活力最大值，这个温度即为最适温度。
实验①利用唾液淀粉酶为试验对象，在0℃～65℃之间选择不同的温度，进行酶活力测定。
根据淀粉被唾液淀粉酶水解的程度的不同，遇碘呈现颜色的变化来判断酶活力的大小及最适温度。
实验②采用蔗糖酶为试验对象，在室温至75℃之间选择不同温度进行酶活力测定。
蔗糖酶的活力常以其反应产物还原糖（葡萄糖）的生成量来表示。
测定还原糖的方法很多，本实验选择3,5–二硝基水扬酸法测定还原糖量。
在碱性条件下，3,5–二硝水杨酸与还原糖溶液共热后被还原成红色氨基化合物，并在一定浓度范围内，还原糖的量与反应溶液所呈棕红色物质颜色的深浅程度成正比。
因此，可以用分光光度法测定酶促反应后生成的还原糖量，从而测定蔗糖水解的速度和酶活力。
三、实验材料与试剂1、实验材料⑴蔗糖酶液(样品Ⅳ）加蒸馏水适当稀释，备用；⑵新鲜唾液。
2、实验试剂⑴0.2mol/L醋酸缓冲液（pH4.6）⑵5%蔗糖（A.R.）溶液（W/V）⑶3,5—二硝基水扬酸（简称DNS）试剂⑷0.5%淀粉溶液（含0.3%NaCl）⑸IK-I2溶液四、实验器材与仪器1.试管及试管架， 2．恒温水浴， 3．吸量管, 4．滴管, 5．点滴板，6．分光光度计， 7．制冰机。
五、实验步骤⑴温度对唾液淀粉酶活力的影响按下表操作温度-酶活力曲线图 ⑵温度对蔗糖酶活力的影响 颜色深浅温度（℃） 0 7037 深 浅 50。