姜厚朴水提物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌机理研究
厚朴抗菌的实验报告
一、实验背景厚朴（Magnolia officinalis Rehd. et Wils.）为木兰科植物，是我国传统的名贵中药材之一，具有理气、燥湿、消痰、平喘、解毒等功效。
近年来，随着现代药理学研究的深入，厚朴的抗菌活性逐渐引起人们的关注。
本实验旨在探讨厚朴的抗菌活性，为厚朴的进一步开发利用提供科学依据。
二、实验材料1. 实验药物：厚朴粗提物（由实验室提供）2. 实验菌株：金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coli）、肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）3. 实验试剂：无菌生理盐水、三氯化铁、硫酸铜、硫酸锌、氯化钠、琼脂、pH试纸等4. 实验仪器：恒温培养箱、细菌培养皿、移液器、显微镜、天平等三、实验方法1. 厚朴粗提物的制备取厚朴干燥根皮，粉碎后用70%乙醇回流提取，浓缩至适量体积，低温干燥，得到厚朴粗提物。
2. 菌株的培养将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基，37℃恒温培养箱中培养24小时，得到活化菌株。
3. 抗菌实验（1）纸片扩散法：将厚朴粗提物溶解于无菌生理盐水，配制成不同浓度的溶液。
取一定量溶液滴加于无菌滤纸上，制成纸片。
将活化菌株均匀涂布于琼脂平板上，将纸片置于平板上，37℃恒温培养箱中培养24小时，测量抑菌圈直径。
（2）最低抑菌浓度（MIC）测定：采用微量稀释法，将厚朴粗提物溶解于无菌生理盐水，配制成不同浓度的溶液。
将活化菌株接种于微量稀释板，加入不同浓度的厚朴粗提物溶液，37℃恒温培养箱中培养24小时，观察细菌生长情况，确定MIC。
4. 数据分析采用SPSS 22.0软件对实验数据进行统计分析，比较不同浓度厚朴粗提物对菌株的抑制作用。
四、实验结果1. 纸片扩散法实验结果显示，厚朴粗提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌均有明显的抑制作用，随着厚朴粗提物浓度的增加，抑菌圈直径逐渐增大。
生姜拮抗性内生细菌的筛选
生姜拮抗性内生细菌的挑选生姜（Zingiber officinale Roscoe ）在中药中是一种很重要的药用植物，因为其性辛辣的特色，有发汗、驱寒、止呕、解毒等多种功能，生姜中的一些代谢产物还拥有优秀的降胆固醇、抑菌、抗衰老、抗癌、防血凝、抗氧化及防腐等作用，如姜黄、姜精油。
生姜内生细菌是指存在于生姜组织和器官内部的细菌，依据相像相溶原理，生姜内生细菌可能拥有生姜同样的抑菌成效，可作为重要的天然抑菌资料根源进行研究。
因为生姜的病变极少，本研究鉴于生姜内生细菌可能拥有抑菌功能的思想，从生姜组织中分别纯化内生细菌，并挑选对金黄色葡萄球菌（ Staphyloccocus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coli ）、枯草芽孢杆菌（ Bacillus subtilis）、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ Methicillin-resistant staphylococcus aureus ，MRSA）有抑菌作用的菌株，为利用植物内生细菌资源开发抑菌新药物供给理论依照。
1资料与方法1.1 资料从乐山各市场购置市售食用生姜。
1.2 靶标菌S.aureus、E.coli、B.subtilis、MRSA，由本校病理实验室供给。
1 / 51.3 培育基马铃薯葡萄糖培育基（分别纯化培育基）：马铃薯 200 g ，葡萄糖 5 g ，琼脂粉 16 g ，纯净水 1000 ml ，pH 自然。
马铃薯琼脂培育基（PDA）（拮抗挑选培育基）：马铃薯200 g，削皮煮汁，葡萄糖 5 g ，琼脂粉 20 g ，水 1000 ml ， pH7.0 。
1.4 生姜内生菌的分别纯化生姜的表面消毒：取无病无霉变的完好生姜块根（约30 g），用自来水冲刷 5 min ，冲刷表面的泥土等污物，放于已灭菌的培育皿中，无菌水频频冲刷 3～5 次， 5%次氯酸钠清洗 3 次，无菌水冲刷3～ 5 次，采集最后一次冲刷液做无菌查验。
鲜姜汁对大肠杆菌及巨大芽孢杆菌的抑制作用研究
鲜姜汁对大肠杆菌及巨大芽孢杆菌的抑制作用研究摘要：将新鲜生姜研磨过滤获得100%鲜姜汁，稀释成75%、50%、25% 3个梯度浓度，以无菌水作为对照，以大肠杆菌（Escherichia coli）、巨大芽孢杆菌（Bacillus magaterium）为试验菌，采用滤纸贴片法测定抑菌作用，比较不同浓度姜汁的抑菌活性。
结果表明，随着姜汁浓度的增大，抑菌作用增强。
关键词：姜汁；抑制作用；大肠杆菌；巨大芽孢杆菌生姜是姜属植物姜（Zinggiber ofcinale Rosc）的根茎。
姜是热带、亚热带地区的一种重要栽培植物，在中国的中部、东南部、西南部广为栽培。
生姜作为药食两用的植物在中国具有悠久的种植和食用的历史。
在中医药用性能上，生姜味辛、性温，有开胃止呕、化痰止咳、发热解汗等作用，适用于外感风寒、咳嗽、胃寒呕吐或吐清水，也可用于增进血行、驱散寒气、益胃气、助发汗。
生姜中含有挥发性油，主要成分有姜醇、姜烯、甲基庚烯酮、姜辣素等[1]。
医学研究表明生姜对细菌有抑制作用，对阴道滴虫有杀灭作用；有明显的抗溃疡、抗菌、治疗心脏血管疾病等药用保健功能[2，3]。
其所含成分被证明有降血脂等功能[8，9]。
生姜是一种天然的抗氧化剂，具有较好的保鲜作用，对食品工业和人体健康具有重要意义[4]。
生姜在食品工业中作为抗氧化剂及防腐剂添加[5-7]。
现代科学研究证实，生姜有消炎抗菌的作用。
生姜的水浸剂对伤寒杆菌、链球菌、沙门氏菌、肺炎球菌有明显的抑制作用，可用于治疗痢疾和腹泻。
鲜姜汁对大肠杆菌、啤酒酵母、青霉菌有较明显的抑菌作用。
付爱华等[10]报道，生姜提取物用液态沙堡琼脂培养基稀释为0.062 5%～0.250 0%对培养基中的皮肤癣菌、红色毛癣菌、犬小孢子菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌有极为显著的抑菌、杀菌作用。
陈碰玉等[11]研究发现，新鲜生姜对幽门螺杆菌具有较好的抑菌作用。
试验以人体肠道常见微生物大肠杆菌（Escherichia coli）和巨大芽孢杆菌（Bacillus magaterium）为材料，利用滤纸片法测定抑菌圈，明确姜汁的抑菌作用，为生姜的开发利用奠定基础。
32种中药水提取物的体外抗菌活性研究
32种中药水提取物的体外抗菌活性研究曾富强;王斌;李旭廷;李金良;詹素琼;袁定胜;梁歌【期刊名称】《四川畜牧兽医》【年(卷),期】2012(039)011【摘要】本试验提取32味中草药水煎液，采用微量肉汤稀释法测定对标准大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌活性．筛选出对金黄色葡萄球菌具有较好体外抑菌活性的中草药11味，并对3株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）进行了最低抑菌浓度（MIC）的测定。
结果显示：有24味中草药水煎液具有体外抑菌活性．且对金黄色葡萄球菌的抑菌效力大于大肠杆菌．以黄连和黄柏对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最好：3株MRSA对筛选的11味中草药中的10味均产生了不同程度的耐药，MIC增加2—4倍，仅香薷对MRSA的MIC减少2—4倍。
%The antibacterial activities to E.coli ( CVCC2801 ) and Staphlococcus aureus (CVCC1882) for the water extracts from 32 Chinese herbs were detected by using micro-broth dilution method.ll of 32 extracts were showed to have good antibacterial activities for Staphlococcus aureus, and the minimal inhibitory concentration (MIC) for 3 strains of MRSA was detected. The result showed that 24 of 32 extracts had antibacterial activities, and it better for Staphlococcus aureus than that of E.coli, extracts from Coptis chinensis Franch and Phellodendron amurense Rupr had the best antibacterial activities in 24 extracts. 3 strains of MRSA were showed to have different level of resistance for the 10 extracts, except Mosla chinensis Maxim. The MIC of the 10 extracts for MRSA increased 2-4 timescompare to Staphlococcus aureus (CVCC1882), and the MIC of Elshohzia for MRSA reduced 2-4 times.【总页数】3页(P25-27)【作者】曾富强;王斌;李旭廷;李金良;詹素琼;袁定胜;梁歌【作者单位】四川省百牧科学研冤院,四川成都610066;四川省百牧科学研冤院,四川成都610066;四川省百牧科学研冤院,四川成都610066;四川省百牧科学研冤院,四川成都610066;四川省百牧科学研冤院,四川成都610066;四川省百牧科学研冤院,四川成都610066;四川省百牧科学研冤院,四川成都610066【正文语种】中文【中图分类】S853.74【相关文献】1.乌梅等20种中药对胸膜肺炎放线杆菌的体外抗菌活性研究 [J], 康帅;殷中琼;贾仁勇;代如意;李莉;彭练慈;曲径;梁陈2.30种中药水提取物的体外抗菌活性试验 [J], 陈莉;朱凤静;张春枝3.绵茵陈、穿心莲不同配伍比例水提取物的体外抗菌活性研究 [J], 陈倩倩;李清;毕开顺4.四川宜宾七种中药提取物体外抗菌活性研究 [J], 李莉;殷中琼;贾仁勇;代如意;李曼;蔡红5.鱼腥草等12种中药对铜绿假单胞菌的体外抗菌活性研究 [J], 高贵阳;黄志昂;黄晓辉;黄党生;郑志方;林婉徇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
生姜提取物的抑菌效果研究
生姜提取物的抑菌效果研究生姜是一种常见的中药材，具有广泛的药用价值。
近年来，研究表明生姜提取物具有很好的抑菌效果，对多种病原微生物具有一定的杀菌作用。
本文旨在探究生姜提取物的抑菌效果，并分析其可能的机制。
一、生姜提取物的制备生姜提取物的制备方法有多种，常用的方法是水提法、醇提法、超声波提取法等。
本文中采用水提法制备生姜提取物，具体步骤如下：1. 将新鲜生姜洗净，去皮切成小块。
2. 将生姜块放入研磨器中，加入适量的水。
3. 开始研磨，直至生姜块变成泥状。
4. 将生姜泥倒入一个干净的容器中，加入适量的水，搅拌均匀。
5. 用滤纸过滤掉固体颗粒，得到生姜提取液。
二、生姜提取物的抑菌实验本实验选用了常见的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌等细菌进行抑菌实验。
实验分为两组，一组为对照组，另一组为实验组。
对照组中，细菌培养基中不加入生姜提取物；实验组中，在细菌培养基中加入适量的生姜提取物。
实验结果表明，生姜提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌等细菌均有不同程度的抑制作用。
其中，对金黄色葡萄球菌的抑制率最高，达到了80%以上。
三、生姜提取物抑菌机制的探究经过对实验结果的分析，我们认为生姜提取物的抑菌机制可能与以下因素有关：1. 生姜中含有丰富的挥发油和姜黄素等成分，这些成分具有很好的抗氧化和抗炎作用，可以有效地杀灭细菌。
2. 生姜中含有丰富的蛋白质和多糖等营养成分，这些成分可以增强人体免疫力，从而增强对细菌的抵抗力。
3. 生姜具有温热辛散的特性，可以促进血液循环，增强身体代谢功能，从而加速细胞更新和修复。
四、结论本文通过实验探究了生姜提取物的抑菌效果，并分析了其可能的机制。
结果表明，生姜提取物具有很好的抑菌作用，并且可能与其所含有的多种成分有关。
因此，在日常生活中，我们可以适当地食用一些生姜或者使用生姜提取物来预防和治疗一些细菌感染性疾病。
生姜抗菌实验报告
一、实验目的本研究旨在探究生姜的抗菌作用，特别是针对常见细菌如沙门氏菌的效果。
通过实验验证生姜是否具有抗菌活性，为生姜在食品防腐、医药保健等领域的应用提供科学依据。
二、实验材料1. 生姜：新鲜生姜，洗净，去皮，切成薄片。
2. 细菌：沙门氏菌、大肠杆菌等常见细菌。
3. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤等。
4. 实验仪器：高压蒸汽灭菌器、恒温培养箱、显微镜、移液器、试管等。
三、实验方法1. 生姜提取液的制备：将生姜薄片放入100ml蒸馏水中，浸泡过夜，然后煮沸10分钟，冷却后过滤，得到生姜提取液。
2. 细菌培养：将沙门氏菌和大肠杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤中，置于37℃恒温培养箱中培养18小时。
3. 生姜提取液对细菌的抑菌实验：a. 将生姜提取液按照一定比例稀释。
b. 将稀释后的生姜提取液分别加入含有沙门氏菌和大肠杆菌的培养基中。
c. 对照组不加生姜提取液。
d. 将所有培养基置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
4. 结果观察与记录：a. 观察并记录各组培养基中的细菌生长情况。
b. 对比实验组与对照组的细菌生长情况，分析生姜提取液的抗菌效果。
四、实验结果与分析1. 生姜提取液对沙门氏菌的抑菌效果：a. 实验结果显示，生姜提取液对沙门氏菌具有明显的抑制作用。
在生姜提取液浓度为1:100时，沙门氏菌的生长受到明显抑制，与对照组相比，抑菌率达到了80%以上。
b. 随着生姜提取液浓度的增加，抑菌效果逐渐增强。
当生姜提取液浓度为1:50时，抑菌率达到了90%以上。
2. 生姜提取液对大肠杆菌的抑菌效果：a. 实验结果显示，生姜提取液对大肠杆菌也具有较好的抑制作用。
在生姜提取液浓度为1:100时，大肠杆菌的生长受到一定程度的抑制，与对照组相比，抑菌率达到了60%以上。
b. 随着生姜提取液浓度的增加，抑菌效果逐渐增强。
当生姜提取液浓度为1:50时，抑菌率达到了80%以上。
五、实验结论本研究通过实验验证了生姜具有抗菌作用，尤其对沙门氏菌和大肠杆菌等常见细菌具有较好的抑制作用。
生姜提取物对常见病原微生物的抑制作用
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病 原 菌类 别
金 黄 色菊 萄球 菌 劝 五 白色 萄球 菌
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,
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大 肠 杆 菌 ( 」月1 4 9 ) 白色 念 珠 菌 ( 由 湖
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白 色葡萄球 菌 ( 由 长 春生物 制
乙 肝表 面 抗原 阳 性 血 清
1
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对 常 见 病 原菌 的 抑 制 作 用 见 表
不 同 浓 度 的 生 姜 提 取 物 对 常 见 病 原菌的 抑 制作 用
生姜提取物对常见食品污染菌的抑菌作用研究
生姜提取物对常见食品污染菌的抑菌作用研究
申晓慧
【期刊名称】《黑龙江农业科学》
【年(卷),期】2014(000)006
【摘要】为研究生姜提取物对常见食品污染菌的抑菌作用,采用滤纸片法测定了生姜提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及枯草芽孢杆菌的抑菌活性,探讨了不同温度和不同pH生姜提取物对3种细菌抑菌活性的影响.结果表明:生姜提取物对3种供试细菌有明显抑制作用.对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最小抑制浓度为0.125％、对大肠杆菌的最小抑制浓度为0.250％.且生姜提取物的热稳定性较好,对供试细菌最佳抑菌pH范围为6.0～9.0.
【总页数】3页(P103-105)
【作者】申晓慧
【作者单位】黑龙江省农业科学院佳木斯分院,黑龙江佳木斯154007
【正文语种】中文
【中图分类】TS202.3
【相关文献】
1.苍耳叶提取物与生物抑菌剂对几种常见食品污染菌的体外协同抑菌作用及其作用机理 [J], 刘洪霞;韩址楠;姜咏栋;曲艺;李大鹏
2.黄皮叶提取物对食品中常见致病菌抑菌作用研究 [J], 赵丰丽;杨建秀;梁燕美;刘艳秋
3.芦荟提取物对常见食品污染菌的抑制作用研究 [J], 申晓慧;
4.芦荟提取物对常见食品污染菌的抑制作用研究 [J], 申晓慧
5.生姜、食盐、乳酸对常见食品污染菌的协同抗菌防腐作用研究 [J], 关洪全;关鑫;陈兴
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姜厚朴水提物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌机理研究李婷，杨舒然，陈敏，宋丽雅，何聪芬（北京工商大学,北京市植物资源研究开发重点实验室，中国化妆品协同创新中心，北京 100048） 摘要：为了探讨姜厚朴水提物（GMB）对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌机理，试验对GMB作用下菌体形态结构、膜系统上离子通道的酶活力和能量代谢等方面进行了研究。
结果表明，GMB对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC分别为6.25、12.5 mg/mL。
大肠杆菌胞外AKP酶和β-半乳糖苷酶吸光度值分别增加1.78和4.24倍，GMB作用4 h后电导率显著上升，膜上Na+K+-A TP酶活性从0.42增加到1.74 mg prot/mL，且为阴性对照的1.7倍；金黄色葡萄球菌体表出现囊泡状、不规则的突起结构，SDH酶活性、总A TP 酶活性和胞内蛋白质含量分别降低40%、23.4%和17.9%，且AKP酶活和电导率均有所增加。
由此推测出GMB主要是通过破坏大肠杆菌细胞壁、膜结构，增加其渗透性和通透性，造成胞内物质外流和蛋白质合成量下降等现象，进而抑制菌体生长。
而GMB抑制金黄色葡萄球菌的作用机制是增加细胞壁的通透性、降低能量代谢相关酶的活性，干扰其正常的代谢活动。
关键词：姜厚朴；大肠杆菌；金黄色葡萄球菌；抑菌机理文章篇号：1673-9078(2016)2-84-92 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.2.014 Antibacterial Mechanism of Ginger Mix-fried Magnolia Bark Extract against Escherichia coli and Staphylococcus aureusLI Ting, Y ANG Shu-ran, CHEN Min, SONG Li-ya, HE Cong-feng(Science College of Beijing Technology and Business University, Beijing Key Laboratory of Plant Resources Research and Development, Chinese Cosmetics Collaborative Innovation Center, Beijing 100048, China) Abstract: To determine the antibacterial mechanism of ginger mix-fried magnolia bark (GMB) against Escherichia coli and Staphylococcus aureus, the morphological structure of the bacterial cells, enzyme activity in the ion channels of cell membrane, and energy mechanism after treatment with GMB were studied. The results showed that the minimum inhibitory concentrations (MICs) of GMB against E. coli and S. aureus were 6.25 and 12.5 mg/mL, respectively. The absorbance values for extracellular alkaline phosphatase (AKP) and β-galactosidase in E. coli increased 1.78-fold and 4.24-fold, respectively. Four hours after GMB treatment, the conductivity of the culture medium changed significantly, and membrane Na+K+-A TPase activity increased from 0.42 to 1.74 mg prot/mL, which was 1.7 times higher than that of the negative control. There were vesicular or irregular projections on the cell surface of S. aureus, and the sorbitol dehydrogenase (SDH) activity, total adenosine triphosphate (A TP) activity, and soluble protein content decreased by 40%, 23.4%, and 17.9%, respectively, whereas AKP enzymatic activity and conductivity increased. These results suggested that GMB increased E. coli cell permeability by disrupting the cell wall and damaging membrane structure, which resulted in an outflow of intracellular material and a decreased amount of synthesized proteins, thereby inhibiting bacterial growth. GMB appeared to inhibit S. aureus by enhancing the cell wall permeability, reducing the activity of enzymes related to energy metabolism, and interfering with the normal metabolic activities.Key words: ginger mix-fried magnolia bark; Escherichia coli; Staphylococcus aureus; antibacterial mechanism当前，细菌污染所引起的食源性疾病是影响人类公共健康和食品安全的最大因素之一，其中引起食源收稿日期：2015-05-11基金项目：北京市优秀人才培养资助D项目（2012D005003000006）作者简介：李婷（1991-），女，在读研究生，研究方向为天然植物抑菌剂 通讯作者：宋丽雅（1974-），女，博士，副教授，研究方向为微生物与酶工程 性疾病的主要病原菌有沙门菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌[1]。
细菌污染食品后分解食物中的蛋白质、糖、脂肪、维生素等营养物质，从而进行自身繁殖，最终导致食品的营养价值和品质下降，严重时造成食品腐败变质，呈现出一定的令人难以接受的感官性状，如刺激性气味、组织腐烂等。
此外，有些细菌污染食品后会产生毒素，如肉毒毒素、金黄色葡萄球菌肠毒素84等，若不慎食用会造成人体中毒。
因此，在延长食品保存期、保证食品品质的过程中，食品防腐剂具有非常重要的作用。
然而，传统的食品防腐剂主要是化学合成品，由于合成防腐剂可能存在潜在危险，所以在许多国家已被逐渐禁止或限制使用。
国际上食品添加剂已形成了无毒、安全、天然的发展趋势。
因此，评价和筛选具有抑菌活性的植物抑菌剂已成为食品行业研究的新领域。
中草药中含有许多杀菌成分，而且本身又是很好的抗氧化剂，可防止油脂和食品氧化，起到保鲜作用。
中草药作为食品防腐剂，不仅可以避免化学防腐剂的毒性危害，而且还可以赋予食品独特的风味。
厚朴始载于《神农本草经》，来源为木兰科植物厚朴或凹叶厚朴的干皮、根皮或枝皮。
有研究报道称其提取物对多种微生物均有较强的抑制效果，药理学研究也证明厚朴具有抗炎、抗菌、抗病毒和抗过敏等作用。
厚朴在临床应用上一般为姜制厚朴（Ginger Magnolia Bark，以下简称GMB），有研究表明姜制厚朴对金黄色葡萄球菌的抑制效果比厚朴生品更明显，且已证明净厚朴和GMB在主成分的含量上确实存在差异，原因可能是由于其主成分含量在炮制前后发生了变化，或是源于辅料生姜的协同作用[2]。
但是，目前有关GMB对微生物作用机制的研究鲜有报道。
本文选取革兰氏阴性菌大肠杆菌和革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌作为试验对象，研究GMB抑制细菌生长的作用机制，旨在为姜厚朴在食品、药品等领域的应用提供理论依据。
1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 菌株与中药提取液大肠杆菌（Escherichia coli），金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），以上菌株均由本实验室提供；中药姜厚朴购于北京同仁堂有限责任公司（航天桥店）；净厚朴购于祁瑞中药饮片有限公司。
菌株的活化：菌种经营养肉汤培养基培养过夜，取菌液在营养琼脂平板划线培养24 h，挑取生长状况较好的单菌落进行液体培养基扩增。
GMB：将姜厚朴干燥后粉碎过筛（30目），用去离子水浸泡30 min后沸水浴提取25 min，其中料液比为1:10，然后过滤、浓缩至30%，存放在4 ℃冰箱备用（净厚朴提取液制作方法同姜厚朴）。
1.1.2 主要试剂和仪器磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、氯化钠、无水乙醇、戊二醛、醋酸异戊酯、邻硝基苯β-D-半乳吡喃糖苷（ONPG）等试剂均为分析纯，均购于北京半夏科技发展有限公司。
营养肉汤培养基和营养琼脂培养基均购于北京奥博星生物技术有限责任公司。
超声细胞破碎仪（宁波新芝JY92-ⅡN）；扫描电子显微镜（中科院微生物所HITACHI SU8010）；高速冷冻离心机（Sigma）；酶标仪（Thermo Multiskan Go）；电导率仪（雷磁DDS-307a）；摇床震荡培养箱（上海福玛）；-80 ℃冰箱（Thermo）；高压蒸汽灭菌锅（上海博讯实业有限公司）；超净工作台（TELSTAR A V-100）。
1.2 实验方法1.2.1 最小抑菌浓度（MIC）的测定液体倍半稀释法[3]：取对数生长期的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌接种到营养肉汤培养基中（菌悬液浓度为1×107 CFU/mL），分别加入等量的不同质量浓度的GMB，使其最终质量浓度分别为50、25、12.5、6.5、3.2、1.6 mg/mL，同时设置无菌水空白对照组，于37 ℃、120 r/min震荡培养24 h后涂布平板，观察大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长情况，以微生物不生长的最小稀释浓度的GMB质量浓度即为MIC值。