第二十七章人类白细胞抗原分型

第二十七章人类白细胞抗原分型

Chapter 27 Human Leukocyte Antigen Typing

第一部分教学内容和要求

一、目的要求

·掌握：HLA血清学分型和细胞学分型的方法类型、原理和用途；熟悉：基因分型技术的方法类型、原理和用途；了解：HLA血清学分型的技术要点。

二、教学内容

1．血清学分型法：原理，实验流程与结果判断，技术要点，方法评价。

2．细胞分型法：阴性分型法，阳性分型法。

3．基因分型技术：PCR-序列特异性引物分型法，PCR-序列特异性寡核苷酸探针杂交法，PCR-序列测定法，PCR-限制性片段长度多态性分析法。

第二部分测试题

一、选择题

（一）单项选择题（A型题）

1.微量补体依赖的细胞毒试验中所用的补体为

A．豚鼠血清 B．兔血清 C．羊血清 D．马血清 E．人血清

2．HLA-Ⅰ类抗原血清学分型主要应用的试验

A．微量补体依赖的细胞毒试验 B．T淋巴细胞增殖试验 C．T细胞介导的细胞毒试验

D．溶血空斑试验 E．混合淋巴细胞培养

3．不表达HLAⅠ类抗原的细胞是

A．淋巴细胞B．成熟红细胞C．血小板D．脾细胞E．粒细胞

4．编码HLA -I类分子的基因位点有

A．HLA—A、B位点B．HLA—A、B、C位点C．HLA—DR位点

D．HLA—DR、DP、DQ位点E．C4、C2、TNF位点

5. 最容易发现HLA新基因的方法是

A．CDC试验B．MLR C．PCR-SSP D．PCR-SSO E．PCR-测序

6. CDC试验观察结果用

A．分光光度计B．酶标仪C．光学显微镜D．相差显微镜E．倒置相差显微镜

（二）多项选择题（X型题）

1.HLA-I类抗原分布于如下细胞

A.T细胞

B.B细胞

C.巨噬细胞

D. 血小板

E.红细胞

2．HLA-Ⅱ类抗原包括的抗原有

A．HLA-A B．HLA-D C．HLA-DP D．HLA-DQ E．HLA-DR

3. HLA-Ⅱ类抗原主要表达于如下细胞

A.B淋巴细胞

B. 巨噬细胞

C. 抗原提呈细胞

D.红细胞

E.T淋巴细胞

4．HLA抗体可来自

A．健康人血清 B．产妇血清 C．接受移植者血清 D．单克隆抗体 E．兔抗HLA血清

5．HLA血清学分型技术可用于检测

A．HLA-A抗原 B．HLA-DP抗原 C．HLA-DR抗原 D．HLA-B抗原 E．HLA-C抗原

6．可用混合淋巴细胞培养分型方法进行检测的位点有

A．HLA-A B．HLA-B C．HLA-DP D．HLA-DR E．HLA-D

7．下述哪些分子生物学方法可用作HLA定型

A．PCR B．PCR-SSP C．PCR-RFLP D． PCR-SSO E．PCR-测序

8．下述哪些是MLC阴性定型法的特征

A．用已知的HTC作应答者B．用已知HTC作刺激者D．需培养6天

D．仅需培养2天E．具有相同抗原时cpm不增高.

9．血清学分型法(微量补体依赖的细胞毒试验，CDC test)临上可应用于

A．HLA分型（供移植前配型、疾病相关研究、人类亲缘研究等）B．抗体筛选

C．鉴定和交叉配合试验D．测定T细胞免疫功能E．B细胞免疫功能

10．PCR-SSP(序列特异性引物)用于HLA分型具有的特点

A．分辨度高B．特异性强C．扩增后处理过程简单

D．只需借助琼脂糖凝胶电泳E．依据是否出现特异性条带判断结果

二、填空题

1．检测HLA抗原的基本方法有___________分型法、___________ 分型法和___________分型法。2．CDC试验的分型血清可来自__________或____________。

3．CDC试验阳性时，抗原细胞应___________。

4．检测HLA-Ι类抗原时可用___________细胞或___________细胞，检测HLAⅡ类抗原时需用___________细胞。

5．检测HLAⅡ类抗原时，抗血清需用___________吸收除去HLA___类抗体。

6．PCR-SSP分型法是目前最常用于___________类基因分型

三．名词解释

1．PCR-序列特异引物分型技术（PCR-polymerase chain reaction with sequence specific primer，PCR-SSP ）2

．

同

种

免

疫

血

清

(

i

s

o

t

y

p

e

-

i

m

m

u

n

o

s

e

r

u

m

)

3

．混合淋巴细胞培养（mixed lymphocyte culture，M

L

C

）

四．问答题

1．检测HLA血清学分型法(微量补体依赖的细胞毒试验，CDC test)的原理

2．用血清学分型法检测HLA-Ⅱ类抗原时，和检测Ⅰ类抗原比较有哪些主要的不同点？

3．CDC试验中兔补体为何需用多只兔的混合血清？

4．如何获取B淋巴细胞?

5．PCR-SSP用于HLA分型的原理

第三部分参考答案与题解

一、选择题

（一）单项选择题（A型题）