JNK 抑制剂对D2 氨基葡萄糖衍生物诱导人食管癌Eca2109 细胞周期阻滞和凋亡的影响
苦参素诱导人食管癌Eca-109凋亡作用及机制的研究
关 键词 ： 参 素 苦
亡 Ｂｃ一 Ｂａ ｌ２ ｘ
肿 瘤 ， 管／ 物 作 用 Ｅ ａ１９细 胞 凋 食 药 ｃ一０
Ｂ Ｎ Ｅ二 氧化 碳 培 养 箱 ； Ｌ Ｐ Ｓ倒 置 显 微 Ｏ Ｄ Ｏ ＹＭ Ｕ
号 ： ２ ５ Ｒ ８
２ｍ ／ 作 用 ２ ｇ ｍＬ ４ ｈ后 ， 置 显 微 镜 和 透 射 电 子 显微 镜 观 察 倒
Ｅ ａ１９细 胞 均 出现 典 型 的 凋 亡 形 态 变 化 ； 武 细 胞 仪 检 测 ｃ一 ０ 流 结 果 显 示 ， 胞 凋 亡 率 与 阴 性 对 照 组 相 比 ， 异 具 有 显 著 性 细 差
分析 骨不连 发生 的原 因 。针对 ｄ Ｊ 的具 体 情 况 ， ，Ｌ 从 脏腑 、 气血 、 正邪 等 方 而辨 证 施 治 ， 配 合适 当 的功 并 能锻炼 ， 发挥 祖 国医学 的优 势 ， 骨不 连转 化为 正常 使 的骨 折愈合 过程 。
参考文献 ：
［ ］ 亦璁． 与 关节损 伤 ［ ． １王 骨 Ｍ］ ３版 ． 京 ： 民 卫 生 出 版 北 人
药 物抗 肿瘤 的主 要机 制 ， 不外 乎 抑 制 细胞 的过 度 增
苦参 素 注 射 液 ， 津 生 物 工 程 公 司 生 产 ， 号 天 批
２ ０ ０ ， 格 ２ ｇ Ｌ ２ ｍ ／ ； Ｐ １４ ０４９ 规 ／ ， Ｌ 支 Ｒ ＭＩ６ ０培 养 基 为
白 Ｂ ｌ 和 Ｂ ｘ 的 表 达 水 平 。 结 果 ：苦 参 素 １ ／ 、 ｃ一 ２ ａ ｍｇｍＬ
文章编号 ：０ １ ６ １ （０ ７ １ ０ ０ ０ １０ — ９０ ２ ０ ）０— ０８— ４
・实 验 研 究
・
苦 参 素诱 导 人 食 管 癌 Ｅ ａ１９凋 亡 作 用 及 机 制 的研 究 冰 ｃ一０
姜黄素对人食管癌细胞株Eca-109增殖抑制和凋亡诱导的实验研究
Ｅｘ ｅ ｉ ｅ ｔ ｌＳ ｕ ｙ ｏ ｆｃ ｆ Ｃｕ ｃ ｍ ｉ ｎ Ｐ ｏｉ ｒ ｆ ｅ Ｉ ｈ ｂ ｔ ｎ ｏ ｍ ａ ｐ ｒｍ ｎ ａ ｔ ｄ ｎ Ｅｆｅ ｔ Ｏ ｒ ｕ ｎ ｏ ｒ ｌ ｅ ａ ｖ ｎ ｉ ｉ ｏ ｆ Ｈｕ ｎ ｆ ｉ ｉ
以流 式 细 胞 仪 检 测 细 胞 周 期 分 布 。 果 姜 黄 素 对 细胞 的 生 长 有 明 显 的 抑 制 作 用 ， 呈 浓度 依 赖 性 。 论 姜黄 素 可 抑 制 人 食 管癌 细胞 增 结 且 结
殖 。 导 失 巢 凋 亡是 其 机 制 之 一 。 诱
关键词 ： 姜黄素； 四甲基偶 氮唑蓝 ； 管癌细胞株 ； 食 实验研 究
ａ ｓｙ ｄ ｓｎ ＭＴｒ ｓ ａ ｅ ｕ ｉ ｇ ｍｅｈ ｄ ，ｔ ｅ ｌ ｒ ｔ ｎ ｆ ｈ ｃ ｌ ｙ ｌ ｗ ｓ ｅｅ ｔｄ ｓｎ ｆ ｗ ｙ ｏ ｔ ． ｓ ｌ Ｃ ｒｕ ｎ ａ ｔ ｅ ｒｍａ ｉ ｔ ｏ ｓ ｈ ａｔ ａｉ ｏ ｔ ｅ ｅｌ ｅ ｏ ｃ ｃｅ ａ ｄ ｔｃｅ ｕ ｉ ｇ ｌ ｃ ｔ ｍｅｒ Ｒｅ ｕ ｔ ｏ ｙ ｓ ｕ ｃ ｍｉ ｈ ｄ ｈ ｄ ａ ｔ ｃ ｉｈ ｂ ｔ ｎ ｏ ｈ ｅｌ ｇ ｏ ｔ ， ｎ ｈ ｎ ｉ ｉ ｏ ｌ ｓｕ ｄ ｔｅ ｄ ｎ ｉ ｅ ｅ ｄ ｎ ｅ Ｃｏ ｃｕ ｉ ｎ Ｃ ｒ ｕ ｎ ｃ ｎ ｉｈ ｂ ｔ ｔｅ ｐ ｏｉ ｒ ｔ ｎ ｏ ｎ ｉ ｉ ｏ ｎ ｔ ｅ ｃ ｌ ｒ ｗ ｈ ａ ｄ ｔ ｅ ｉｈ ｂ ｔ ｎ ａｓ ａ ｓ ｍｅ ｈ ｅ ｓ ｙ ｄ ｐ ｎ ｅ ｃ ． ｎ ｌ ｓｏ ｕ ｃ ｍｉ ａ ｎ ｉｉ ｈ ｒ ｌ ｅ ａｉ ｆ ｉ ｉ ｏ ｔ ｆ ｏ ｔ ｅ ｈ ｍａ ｓｐ ａ ｅ ｌ ｃ ｎ ｅ ｅ ｌ Ｏｎ ｆ ｔ ｅ ｍｅ ｈ ｎ ｓ ｙ ｂ ｅａｅ ｏ ａ ｏｋ ｓ ｈ ｕ ｎ ｅ ｏ ｈ ｇ ａ ａ ｃ ｒ ｃ ｌ ． ｅ ｏ ｈ ｃ ａ ｉ ｓ ｍｓ ｍａ ｅ ｒｌ ｔｄ ｔ ｎ ｉｉ． Ｋｅ ｒ ｓ ｃ ｒ ｕ ｎ Ｍ１ｒ ｅ ｏ ｈ ｇ ａ ｃ ｎ ｅ ｅｌ ｌ ｅ ｅ ｐ ｒ ｎａ ｔ ｄ ｙ ｗｏ ｄ ： ｕ ｃ ｍｉ ； Ｔ ； ｓ ｐ ａ ｅ ｌ ａ ｃ ｒ ｃ ｌ ｉ ； ｘ ｅ ｍｅ ｔｌ ｓｕ ｙ ｎ ｉ
苦参素注射液对人食管癌Eca-109细胞周期的影响及机制研究
苦参素注射液对人食管癌Eca-109细胞周期的影响及机制研
究
朱艳琴;王凯娟
【期刊名称】《山东医药》
【年(卷),期】2008(48)32
【摘要】目的探讨苦参素对人食管癌Eca-109细胞增殖周期的影响及其机制.方法运用流式细胞术检测细胞周期变化和调控细胞增殖周期相关蛋白CyclinD1和CDK4的表达.结果与阴性对照组和阳性对照组比较,苦参素对Eca-109细胞持续作用48 h后,G0/G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少(P均<0.05);CyclinD1和CDK4的表达量均随苦参素剂量增加而减少.结论苦参素可以明显将人食管癌Eca-109细胞阻滞于G0/G1期,其主要机制可能与CyclinD1及CDK4的低表达有关.【总页数】3页(P10-12)
【作者】朱艳琴;王凯娟
【作者单位】河南中医学院基础医学院,河南,郑州,450008;郑州大学公共卫生学院【正文语种】中文
【中图分类】R730.2
【相关文献】
1.姜黄素对人食管癌细胞Eca-109增殖及细胞周期的影响 [J], 陈剑华;刘晓霞;姚艳冰;王雪玲;霍忠超
2.JNK抑制剂对D-氨基葡萄糖衍生物诱导人食管癌Eca-109细胞周期阻滞和凋亡
的影响 [J], 强占荣;吴静;杨国栋;李娟;周永宁;王爱勤;薛群基
3.博安霉素诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其对细胞周期的影响 [J], 汤昊;杨小平
4.吉西他滨对人食管癌Eca-109细胞的增殖、细胞周期、细胞凋亡及STAT3蛋白的影响 [J], 吕红博;曾凡业;王洪江;孙伟;阿迪力·萨来
5.人参皂苷Rh_2对食管癌细胞Eca-109细胞周期的影响 [J], 李丽;齐凤英;刘俊茹;左连富
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姜黄素抗食管癌Eca-109细胞增殖及诱导凋亡机制的研究
抑制作 用； 琼脂糖凝胶技术检测 有无 Ｌ ａ ｄ ｄ ｅ ｒ 状条带形成、 电镜技 术观 察细胞 超微 结构及全 自动荧光酶标仪观 察姜黄素对 Ｅ ｔ ａ一１ ０ ９细胞 的杀伤作 用。结果 随浓度增加 时间延长各组生长抑 制率有 明显增 高， 且 呈剂量 浓度 依赖 性 ， 组 间差异有
文 献标识 码 ： Ｂ
文章 编号 ： １ ０ ０ ８ － ０ ８ ０ ５ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ８ — １ ８ ８ ７ － ０ ３
在我 国食管癌是高发恶 性肿瘤 之一 ， 其发 病率居第 四位… 。 在全 自动荧光酶标仪上检测各 孑 Ｌ 的吸光 度 （ Ｄ Ｄ） 值， 计算不 同药
显著性 （ Ｐ＜０ ． Ｏ １ ） 。Ｃ ａ ｓ ｐ ａ ｓ ｅ 一 ３活性检测发现 ： 姜黄素 ２ ０ Ｉ ｘ ｍｏ ］ ・ Ｌ。 。 、 ４ ０／ ｘ ｍ ｏ ｌ ・ Ｌ 作用 ２ ４ ｈ后 ０ １ ７ 值与对照组 比较 ， 差 异具有 统计 学意义（ Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ） 。电镜观察显示姜黄素 可破 坏细胞 的超微 结构 。结论 姜黄 素可破坏 细胞超微 结构 ， 抑制 食 管癌 Ｅ ｅ ａ 一１ ０ ９细胞 增殖并诱 导其凋亡 。
食管癌Eca109细胞中Nucleostemin基因表达的实验研究
食管癌Eca109细胞中Nucleostemin基因表达的实验研究郑学芝;金秀东;张绪东;刘桂莲;孙卫;念红;李丽;徐秋玲;蔡子微【期刊名称】《牡丹江医学院学报》【年(卷),期】2011(032)001【摘要】目的:研究Nucleostemin(NS)基因在食管癌Eca109细胞中的表达及凋亡作用.方法:提取各组食管癌细胞总RNA,用半定量RT-PCR方法检测NS基因的表达情况;用CCK-8法检测3组细胞增殖抑制率;TUNEL试剂盒法检测细胞凋亡情况.结果:与对照组比较,实验组细胞NS基因表达量下降,细胞增殖抑制率>65%,细胞凋亡增加( 凋亡指数为39.47%)差别具有统计学意义.结论:NS基因特异性RNA干扰使食管癌Eca109细胞中NS基因表达量下降,出现细胞增殖抑制,细胞凋亡增加.【总页数】3页(P3-5)【作者】郑学芝;金秀东;张绪东;刘桂莲;孙卫;念红;李丽;徐秋玲;蔡子微【作者单位】牡丹江医学院生理教研室,黑龙江,牡丹江,157011;黑龙江省高校肿瘤疾病防治重点实验室,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江医学院生理教研室,黑龙江,牡丹江,157011;黑龙江省高校肿瘤疾病防治重点实验室,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江医学院生理教研室,黑龙江,牡丹江,157011;黑龙江省高校肿瘤疾病防治重点实验室,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江医学院生理教研室,黑龙江,牡丹江,157011;黑龙江省高校肿瘤疾病防治重点实验室,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江医学院生理教研室,黑龙江,牡丹江,157011;黑龙江省高校肿瘤疾病防治重点实验室,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江医学院生理教研室,黑龙江,牡丹江,157011;黑龙江省高校肿瘤疾病防治重点实验室,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江医学院生理教研室,黑龙江,牡丹江,157011;黑龙江省高校肿瘤疾病防治重点实验室,黑龙江,牡丹江,157011;牡丹江医学院生理教研室,黑龙江,牡丹江,157011;黑龙江省高校肿瘤疾病防治重点实验室,黑龙江,牡丹江,157011;黑龙江省高校肿瘤疾病防治重点实验室,黑龙江,牡丹江,157011【正文语种】中文【中图分类】R737.9【相关文献】1.Bufalin对食管癌ECA109细胞中FAK活化和上皮-间质转化的影响 [J], 刘雪姣;岳萌;张玲玲;贾迎;刘月平2.DEC1基因表达对人食管癌 ECA109细胞增殖及侵袭能力的影响 [J], 邱娟;张世坤3.胃癌组织和SGC-7901细胞中nucleostemin基因表达的实验研究 [J], 郑学芝;张承玉;孙卫;徐秋玲;蔡子微4.食管鳞癌ECA109细胞中Survivin通过ERK信号通路调控c-myc基因表达的机制 [J], 闫冬;吴怡娴;董娟娟;李秀梅;封敏5.斑蝥酸钠对体外培养的人食管癌Eca109细胞中Bcl-2、p53基因表达的影响[J], 梁枫;王明艳;许冬青因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
D-氨基葡萄糖衍生物对人食管癌Eca-109 细胞Bcl-2 及WTp53 蛋白表达的影响
7q31,in human head and neck cancers[J].Oncogene,2002,21:4462-4470.[5] Garkavtsev I,Kozin S V,Chernova O,et al.The canditae tumoursupp ress or p r otein I N G4regulates brain tumour gr owth and angi o2 genesis[J].Nature,2004,428(6980):328-332.[6] UnokiM,Shen JC,Zheng Z M,et al.Novel s p lice variants of I N G4and their possible r oles in the regulati on of cell gr owth and motility [J].J B i o Chem,2006,281(45):34677-34686.[7] He GH,Helbing CC,W agnerMJ,et al.Phyl ogenetic analysis of theI N G fam ily of PHD finger p r oteins[J].Mol B i ol Evol,2005,22(1):104-116.[8] Zhang X,W ang KS,W ang Z Q,et al.Nuclear l ocalizati on signal ofI N G4p lays a key r ole in its binding t o p53[J].B i oche m B i ophysRes Commun,2005,331(4):1032-1038.[9] Parkin DM,B ray F,Ferlay J,et al.Gl obal cancer statistics,2002[J].CA Cancer J Clin,2005,55(2):74-108.[10] Zhang X,Xu LS,W ang Z Q,et al.I N G4induces G2/M cell cyclearrest and enhances the che mosensitivity t o DNA-da mage agentsin HepG2cells[J].FEBS Lett,2004,570(1-3):7-12. [11] Ki m S,Chin K,Gray J W,et al.A screen f or genes that supp ressl oss of contact inhibiti on:identificati on of I N G4as a candidatetumor supp ress or gene in human cancer[J].Pr oc Natl Acad SciUS A,2004,101(46):16251-16256.[12] Ozer A,W u LC,B ruick RK.The candidate tumor supp ress or I N G4rep resses activati on of the hypoxia inducible fact or(H I F)[J].Pr oc Natl Acad Sci US A,2005,102(21):7481-7486.[13] Shen JC,UnokiM,YthierD,et al.I nhibit or of gr owth4supp ressescell s p reading and cell m igrati on by interacting with a novel bind2ing partner,li p rin al pha1[J].Cancer Res,2007,67(6):2552-2558.[14] Colla S,Tagliaferri S,Morandi F,et al.The ne w tumor-supp res2s or gene inhibit or of gr owth fa m ily me mber4(I N G4)regulatesthe p r oducti on of p r oangi ogenic molecules by myel oma cells andsupp resses hypoxia-inducible fact or-1al pha(H I F-1al pha)activity:involvement in myel oma-induced angi ogenesis[J].B l ood,2007,110(13):4464-4475.[15] L iu E,W u J,Cao W,et al.Curcum in induces G2/M cell cycle ar2rest in a p53-dependent manner and up regulates I N G4exp res2si on in human gli oma[J].Neur ooncol,2007,85(3):263-270. [16] W u Q,Xia D,Carlsen S,et al.Adenovirus-mediated transgene-engineered dendritic cell vaccine of cancer[J].Curr Gene Ther,2005,5(2):237-247.(编校:张志明)D-氨基葡萄糖衍生物对人食管癌Eca-109细胞Bcl-2及WT p53蛋白表达的影响强占荣1,4,吴 静1,2,李 娟1,杨国栋1,周永宁1,王爱勤3,薛群基3Effect of D-glucosam i n e on expression of Bcl-2andW Tp53prote i n s of cell li n e Eca-109Q I A NG Zhan-r ong1,4,WU J ing1,2,L I Juan1,Y ANG Guo-dong1,Z HOU Yong-ning1,WANG A i-qin3,XUE Qun -ji31D ept.of Gastroenerology,First Hospital of L anzhou U niversity,L anzhou730000,China;2D ept.of Gastroenterology,the N inth C linic Col2 lege of B eijing U niversity,B eijing Shijitan Hospital,B eijing100038,China;3L anzhou Institute of Che m ical and Physics,Chinese Scientific A cade m y,L anzhou730000,China;4D ept.of Gastroenterology,A ffiliated Hospital of Guilin M edical College,Guilin541001,China.【Abstract】 O bjecti ve:To observe the effect of D-glucosa m ine[2-(3-carboxy-1-oxop r opyl)a m ino-2-de2oxy-D-Glucose,C OP ADG]on cell p r oliferati on and apop t osis and exp ressi on of Bcl-2p r otein and W Tp53p r oteinin hu man es ophageal cancer Eca-109cells and discuss the possible mechanis m s.M ethods:Eca-109cells werecultured in vitr o by using RP M I-1640and calf seru m,then were exposured t o COP ADG at0.03mmol/L concentra2ti ons for different ti m e.Cell gr owth inhibit ory rate was detected by M TT col ori m etric assay;The cell mor phol ogicalchanges were observed by inverted phase contrast m icr oscopy.Exp ressi on of Bcl-2p r otein and W Tp53p r otein wasdetected by using fl ow cyt ometry and apop t osis rate was analyzed by using Annexin V/P I fluorescence staining t ogeth【收稿日期】 2008-05-15 【修回日期】 2008-09-04【基金项目】 中科院西部之光资助项目(200524号)【作者单位】 1兰州大学第一医院消化科,甘肃 兰州 7300002北京世纪坛医院北京大学第九临床医学院消化科,北京 1000383中国科学院兰州化学物理研究所,甘肃 兰州 7300004桂林医学院附属医院消化科,广西 桂林 541001【作者简介】 强占荣(1972-),男,山西吉县人,硕士,主治医师,主要从事消化系肿瘤研究。
D-氨基葡萄糖衍生物抑制HepG_2细胞生长及诱导凋亡的初步研究
D-氨基葡萄糖衍生物抑制HepG_2细胞生长及诱导凋亡的初步研究吴静;寇炜;高明太;周永宁;姬瑞;王爱勤;薛群基【期刊名称】《肿瘤防治杂志》【年(卷),期】2005(12)16【摘要】目的:研究D-葡萄糖衍生物对人肝癌HepG2细胞生长增殖的影响,进而探讨D-葡萄糖衍生物诱导HepG2细胞凋亡的作用。
方法:用不同浓度的D-葡萄糖衍生物处理HepG2,采用MTT法测定其对HepG2细胞生长增殖的抑制作用,通过荧光显微镜、透射电镜、流式细胞术和DNA琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞的形态结构及其对HepG2细胞诱导凋亡的效应。
结果:D-氨基葡萄糖衍生物能抑制HepG2细胞的生长增殖,并呈一定的浓度、时间依赖性;D-氨基葡萄糖衍生物能诱导肝癌细胞凋亡;荧光显微镜、透射电镜可见肝癌细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变;DNA琼脂糖凝胶电泳呈现典型的DNA梯形条带图谱;流式细胞仪检测出现典型的亚二倍体凋亡峰。
结论:D-氨基葡萄糖衍生物在体外可显著抑制人肝癌细胞株生长,其作用机制主要是诱导肿瘤细胞凋亡。
【总页数】5页(P1223-1227)【关键词】癌;肝细胞/病理学;葡萄糖/类似物和衍生物;细胞凋亡【作者】吴静;寇炜;高明太;周永宁;姬瑞;王爱勤;薛群基【作者单位】兰州大学第一医院消化科;西北民族大学医学院内科;中国科学院兰州化学物理研究所【正文语种】中文【中图分类】R735.7【相关文献】1.JNK抑制剂对D-氨基葡萄糖衍生物诱导人食管癌Eca-109细胞周期阻滞和凋亡的影响 [J], 强占荣;吴静;杨国栋;李娟;周永宁;王爱勤;薛群基2.D-氨基葡萄糖衍生物诱导肝癌细胞凋亡的研究 [J], 吴静;寇炜;李娟;陈轩;姬瑞;王爱勤;薛群基3.D-氨基葡萄糖衍生物诱导Eca-109细胞凋亡的机制 [J], 吴静;杨国栋;路红;强占荣;周永宁;王爱勤;薛群基4.D-氨基葡萄糖衍生物通过JNK信号通路诱导Eca-109细胞凋亡 [J], 强占荣;吴静;周永宁;李娟;杨国栋;王爱勤;薛群基5.D-氨基葡萄糖衍生物诱导人结肠癌SW1116细胞凋亡的形态学变化 [J], 寇炜;吴静;赵晋;兰咏梅;窦春江;王爱勤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
JAK2抑制剂对食管癌细胞增殖、凋亡及COX-2表达的影响
JAK2抑制剂对食管癌细胞增殖、凋亡及COX-2表达的影响刘俊茹;左连富;杨建柱;王莹;刘淑霞;王冬【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2008(028)012【摘要】目的研究食管癌细胞Eca-109增殖、凋亡及COX-2表达与信号转导子和激活子3(STAT3)信号传导通路的关系,明确以JAK2/STAT3为靶向的信号转导在Eca-109细胞中的分子调控机制.方法将JAK2抑制剂AG490作用于Eca-109细胞,用MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪、DNA琼脂糖电泳法及透射电子显微镜检测细胞凋亡;Westernblot法检测细胞中JAK2、p-JAK2、P-Stat3及COX-2的蛋白表达变化;RT-PCR检测COX-2 mRNA的变化.结果 AG490呈时间、剂量依赖性的抑制Eca-109细胞增殖并诱导凋亡,抑制JAK2/STAT3通路蛋白的表达,呈浓度依赖性地下调p-JAK2及p-Stat3蛋白的表达(P<0.05),并下调COX-2 mRNA 及蛋白的表达(P<0.05).结论 JAK2/STAT3信号传导通路调控AG490对Eca-109细胞作用的细胞内信号传导机制,最终通过下调COX-2表达影响Eca-109细胞的增殖并诱导凋亡.【总页数】6页(P1260-1265)【作者】刘俊茹;左连富;杨建柱;王莹;刘淑霞;王冬【作者单位】河北医科大学第三医院,病理科,河北,石家庄,050051;河北医科大学第四医院,肿瘤研究所,河北,石家庄,050011;河北医科大学第三医院,病理科,河北,石家庄,050051;河北医科大学第三医院,病理科,河北,石家庄,050051;河北医科大学病理教研室,河北,石家庄,050017;河北医科大学第三医院,病理科,河北,石家庄,050051【正文语种】中文【中图分类】R735.1【相关文献】1.选择性COX-2抑制剂对Raji细胞增殖、凋亡及Survivin表达的影响 [J], 江莲;李雪青;赵孝先;刘翠萍;李梅;曲凡;金江2.COX-2抑制剂Mavacoxib对骨肉瘤干细胞增殖、凋亡及相关信号通路的影响[J], 吕惠成;贾海生;马敏;王明波;吴一民3.抑制食管癌STC-1基因表达对食管癌细胞凋亡、IL-1β和TNF-α表达及JAK2/STAT3信号的影响研究 [J], 卜秀梅;王文刚;李辉;郑瑾4.二甲双胍联合COX-2选择性抑制剂塞来昔布对胃癌SGC-7901细胞增殖凋亡的影响 [J], 张永恒; 常廷民5.COX-2抑制剂联合顺铂通过Wnt/β-catenin信号通路对肺癌细胞增殖与凋亡的影响 [J], 赵一波;邢述因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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D 2氨基葡萄糖衍生物具有较强的抑制肿瘤作 用 ,而对人体正常细胞毒性很小 ,因而有极大的潜在 临床应用价值 [ 1 ] 。 22( 32羧基 212丙酰氨基 ) 222脱氧 2 D 2葡萄糖 [ 22( 32carboxy212oxop ropyl) am ino222deoxy2 D 2Glucose, COPADG ]是一种含羧基侧链的 D 2氨基葡 萄糖衍生物 ,能够显著诱导人食管癌 Eca2109细胞 、 人肝细胞癌 HepG2 细胞和人结肠癌细胞 SW 1116细 胞凋亡 [ 2 - 4 ] ,但诱导细胞凋亡的内在机制仍不甚明 了 。C2JUN 氨基末端激酶 ( C2JUN NH22term inal ki2 nase, JNK) 是有丝分裂原活化蛋白激酶 (m itogen activated p rotein kinase, MAPK)家族成员之一 。研 究表明 , JNK通路的激活与细胞凋亡有密切关系 [ 5 ] 。 本研究从体外细胞学实验的角度来研究 COPADG 抗人食管癌的作用并探讨其作用机制 。
Q IANG Zhan2rong2 , WU J ing1, 23 , YANG Guo2dong2 , L I Juan2 , ZHOU Yong2ning2 , WAN G A i2qing3 , XU E Q un2ji3
( 11Dep t of Gastroenterology, the N inth Clinic Medcine College of Beijing University, Beijing Shijitan Hosp ital, Beijing 100038; 21Dep t. of Gastroenterology, the First Hosp ital of Lanzhou University, Lanzhou 730000; 3. Lanzhou Institute of Chem ical and Physics,
2009年 3月 第 29卷 第 3期
基础医学与临床 Basic & C linical M e1 26 3 2 5 ( 2 0 0 9 ) 0 3 20 2 5 9 20 5
M arch 2009 Vol. 29 No. 3
研究论文
JNK抑制剂对 D2氨基葡萄糖衍生物诱导人食管癌 Eca2109 细胞周期阻滞和凋亡的影响
关键词 : 22(32羧基 212丙酰氨基 ) 222脱氧 2D 2葡萄糖 ; 食管癌 ; 凋亡 ; C2JUN氨基末端激酶 ; 细胞周期阻滞
中图分类号 : R 73511 文献标志码 : A
Effect of JNK inhibitor on apop tosis and cell cycle arrest of human esophageal cancer cell line Eca2109 induced by the derivative of D 2am ine2glucose
摘要 :目的 观察特异性 C2JUN氨基末端激酶 (JNK)抑制剂 SP600125对 D 2氨基葡萄糖衍生物 22(32羧基 212丙酰氨
基 ) 222脱氧 2D 2葡萄糖 (COPADG)诱导的 Eca2109细胞凋亡和细胞周期阻滞的影响 ,并探讨 COPADG诱导 Eca2109 细胞凋亡的潜在分子机制 。方法 体外培养 Eca2109 细胞 ,以 COPADG及 SP600125 与细胞作用 ; W estern blot法检 测 P2JNK蛋白表达 , M TT法检测细胞增殖 ,流式细胞 术检测细胞周期 。结果 COPADG显著增加 Eca2109 细胞 P2JNK蛋白的表达和细胞凋亡率 ,且诱导 Eca2109细胞发生 G0 / G1 期细胞阻滞 , SP600125明显减少 Eca2109细胞凋 亡 ,并使 G0 / G1 期细胞阻滞向 G2 /M 期细胞阻滞发展 。结论 COPADG可能通过激活 JNK信号通路诱导 Eca2109细 胞凋亡 。
112 方法 11211 细胞培养 : 人食管癌 Eca2109 细胞稀释成 1 ×108L - 1分别接种于新的培养瓶中 ,用含小牛血清 的 RPM I1640全培养液 (青霉素 1 ×105U /L ,链霉素 100 mg /L )在饱和湿度 , 37 ℃, 5% CO2 孵箱中培 养传代 。 11212 实验分组 : 实验随机分为 4组 , 未加药对照 组 (D组 ) ; SP600125组 (A 组 )每孔加入 20μmol/L的 SP600125; COPADG 组 ( B 组 ) 加 入 30μmol/L 的 COPADG; COPADG + 抑 制 剂 组 ( C 组 ) 先 加 入 20μmol/L 的 SP600125 孵 育 30 m in 后 再 加 入 30μmol/L的 COPADG。W estern blot实验还另设终 浓度分别为 10、20 和 40μmol/L的 COPADG作用组 。 11213 W estern blot检测细胞内 P2JNK蛋白 (活化 的 JNK)表达变化 : 收集各药物处理组及对照组细 胞 ,细胞裂解液裂解细胞 ,抽提蛋白 ,确定总蛋白浓 度 ,每个加样孔上样 50μg蛋白 , 40 V 恒定电压使溴 粉蓝染料从 50 g /L浓缩胶进入 150 g /L分离胶后 ,以 100 V恒定电压电泳至分离胶底端 , 50 V电压 4 ℃转 移 115 h, 丽春红 S染色确定是否转印成功 ,小牛血 清封闭 30 m in, 加 入 一 抗 ( 1∶400 ) 过 夜 , PB S2T 洗 膜 ,加二抗 (1∶600) 37 ℃摇床孵育 2 h, DAB 显色 ,照 相 ,显色条带采用 Bandscan分析软件测定成像条带 平均吸 光 度 值 , 以 目 的 基 因 /内 参 照 (即 P2JNK / β2actin)平均吸光度比值半定量分析 P2JNK蛋白表 达。 11214 M TT法检测细胞增殖活力 : 取对数生长期 的 Eca2109 细胞 ,经胰酶消化后 ,吹打成单细胞悬 液 ,调整细胞数为 1 ×109L - 1 ,以每孔 20μL单细胞悬 液及等量小牛血清 ,接种于 96 孔板 ,分别加入不同 药物 ,每组设 4 ～8 个复孔 ,用 RPM I1640 调整每孔 的总体积为 200μL ,另设不加药的阴性对照组 ,待药
1 实验
111 材料 人食管癌细胞株 Eca2109由兰州大学第一医院
中心实验室保存 ; COPADG由中国科学院兰州化学 物理研究所合成并惠赠 ,分子式为 : C10 H17 NO8 , 用 RPM I1640培养液配成所需浓度的工作液 ,过滤除 菌 , 4 ℃保存 ;特异性 JNK抑制剂 SP600125 (用少许 二甲基亚砜溶解配制成 40 mmol/L的储液 , 4 ℃下保 存 ,临用时稀释 )和 M TT、P I (均 Sigma 公司 ) ,一抗 小鼠抗人 P2JNK mAb, 内参照 β2actin mAb及二抗 辣根过氧化物酶标记的羊抗小鼠 IgG ( Santa cruz公 司 ) , R IPA 细胞裂解液 (上海申能博彩生物公司 ) , 硝酸 纤 维 素 膜 (NC 膜 ) (瑞 典 Amersham 公 司 ) , EP ICS XL 型流式细胞仪 (美国 Beckman coulter公 司 ) ,WALLAC 1420型多功能时间分辨仪 (芬兰 V ic2 tor公司 ) 。
强占荣 2 , 吴 静 1, 23 , 杨国栋 2 , 李 娟 2 , 周永宁 2 , 王爱勤 3 , 薛群基 3
(11北京世纪坛医院 北京大学 第九临床医学院 消化科 , 北京 100038; 21兰州大学 第一医院 消化科 , 甘肃 兰州 730000; 31中国科学院 兰州化学物理研究所 , 甘肃 兰州 730000)
2009129 (3)
ation of Eca2109 cells and induced them into apop to sis and cell2cycle arrest in G0 / G1 phase. W estern blo t showed that the p rotein exp ression of P2JNK was increased in a dose2dependent manner in Eca2109 cells after stimulation by COPADG. SP600125 rem arkablely inhibited the p rotein exp ression of P2JNK as well as the apop tosis rate and cell grow th inhibitory rate in Eca2109 cells induced by COPADG as compared w ith those treated w ith only COPADG, m eanwhile, cell2cycle arrest in G0 / G1 phase p rogressed to cell2cycle arrest in G2 /M phase. Conclusion JNK sig2 naling pathway m ay p lay an important role in apop tosis of Eca2109 induced by the COPADG. Key words: 22(32carboxy212oxop ropyl) am ino222deoxy2D 2Glucose; esophageal cancer; apop tosis; C2JUN NH2 term inal p rotein ki2
Chinese Scientific Academy, Lanzhou 730000, China)
Abstract: O bjective To exp lore the effect of SP600125, a specific C2JUN NH2 term inal p rotein kinase ( JNK) inhibitor, on apop tosis and cell2cycle arrest of the human esophageal cancer cell line Eca2109 induced by 22( 32 carboxy212oxop ropyl) am ino222deoxy2D 2Glucose ( COPADG) and potential molecular m echanism in COPADG2in2 duced cell apop tosis was discussed. M ethods Eca2109 cells were cultured and then p re2incubated w ith SP600125 for 30 m in p rior to exposure to COPADG of different concentrations and for different tim es. Changes of exp ression of P2JNK p rotein were exam ined by W estern blot; Cell grow th inhibitory rate was detected by M TT colorim etric assay; Apop tosis and cell2cycle arrest were analyzed by flow cytometry. Results COPADG significantly inhibited p ro lifer2