凝血因子VIII活性(FVIII：C)测定
FVIII自身抗体的自身免疫性疾病
0.8
0.4
103
122
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80
一. FVIII抑制物定义
• 体内产生的具有灭活凝血因子VIII促凝活性（FVIII:C）的抗体 （即中和抗体）引起FVIII水平降低，包括两大类：
–同种免疫抗体（allo- antibodies）:
• 血友病（HA）患者输注FVIII制品后产生的抗FVIII抗体
• 空腹血糖、肾功能、电解质均正常；肝功能：ALT 106U/L，AST 56U/L，ALB、TBIL、DB正常；甲功七项、肿瘤三项、贫血三项 均正常；CRP 19.9mg/L，ASO、RF正常，IgA 1.2g/L，IgG 4.0g/L↓，IgM 0.24g/L↓，C3、C4正常；乙肝两对半：HBsAb、 HBeAb、HBcAb阳性；HBV-DNA荧光定量 <500IU/ml；术前免疫 三项正常；ENA抗体全套、ANCA、ACA均正常；地贫一套、 G6PD活性、Coombs test及Hams test均正常；
• 结合病史及上述检查结果，基本排除血管性血友病、结 缔组织疾病、血小板减少性紫癜、肿瘤、药物、家族遗 传等原因致凝血功能异常，考虑患者第二次妊娠产生Ⅷ 抑制物致使Ⅷ因子缺乏，
• 诊断：获得性血友病A。
治疗观察表 1
血浆 (ml/d) 凝血因Ⅷ
(U)
地塞米松(mg/d)
20/9 400 1800 10
–自身免疫抗体（Auto-antibodies ，获得性FVIII抑制物)
• 非血友病患者自发产生的抗FVIII抗体-获得性血友病
二、获得性血友病A (AH）
• 非血友病A患者体内自发性产生针对FVIII的特异性自身免疫性抗体, 中和或灭活FⅧ活性，引起FⅧ水平降低，导致临床严重，甚至威胁 生命的出血。
凝血因子抗体检测(王学锋)
• 免疫法检测不适合于抗体测定，因为其不能区分 所检测的抗体是否具有生物学活性
抗体类型
• 时间依赖型抗体：FVIII
• 时间非依赖性抗体：其他相关凝血因子抗 体
抗体检测临床意义
• 抗体阳性：获得性 因子替代治疗后产生抗体
• 指导免疫抑制剂的使用 • 指导所需因子的使用量 • 监测出血倾向
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mean
Factor VIII activity 110 120 110 120 113 110 110 112
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在使用时，需将Nijmegen血浆进行稀释，使其终浓 度为100%
3.检测：
准备患者血浆、标准品和质控品，若怀疑 FVIII抗体滴度较高，需将患者血浆进行一定 比例的稀释，常用稀释度为：1/2，1/4，1/8， 1/16，加入等量Nijmegen血浆后置于37℃水 浴2小时（加盖）
Brand: Pacific Haemostasis Lot No:800-601x Expiry Date:01/2009 Blank
Brand: Dade Lot No:536550 Expiry Date:22/11/2008 Blank Brand: Technoclone Lot No:486900D Expiry Date:31/12/2008 Blank
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4种凝血因子活性测定的可靠性分析
4种凝血因子活性测定的可靠性分析摘要] 目的探讨三种因素对凝血因子活性测定的可靠性分析。
方法采用不同稀释剂、不同盐离子浓度制品和校准品不同复溶时间对凝血因子V、VII、VIII、IX活性测定的分析。
结果生理盐水、纯水及配套稀释液对因子V、VII、VIII活性有显著性差异（P<0.01）；含1mol/L氯化钠的样品中因子V、VIII活性显著低于含0.25mol/L氯化钠的样品（P<0.05），VII、IX无显著性差异（P>0.05）；4小时、24小时测定校准品时V、VII、VIII、IX活性有显著性差异（P<0.01）。
结论三种因素对凝血因子活性测定有影响，应正确严格按照凝血因子活性测定的条件，保证检测结果具有最佳的准确性和可靠性。
[关键词] 凝血因子V、VII、VIII、IX；凝血因子活性（FV:C、FVII:C、FVIII:C、FIX:C）；盐离子浓度；稀释剂；校准品凝血因子活性检测操作要求严格、结果会受到许多因素的影响，常见有稀释剂、盐离子浓度和不断复溶校准品等，凝血因子活性的准确测定对校准品质量控制及临床疗效研究具有重要意义，现就可靠性分析如下。
1 材料和方法1.1 试剂法国STA-R型凝血分析仪配套试剂，STA-Deficient V 、STA-Deficient VII、STA-Deficient VIII、STA-Deficient IX；STA-Caphascreen， STA-Owren-Koller，STA-CaCl20.025M，NaCl 1M，STA-System Control 。
1.2 仪器法国STA-R Compact血凝分析仪。
1.4 方法1.4.1 凝固法，用％为单位报告，严格按项目操作要求进行检测。
1.4.2 分别采用稀释剂纯水、生理盐水、配套稀释液稀释标准品进行检测。
1.4.3 分别采用氯化钠浓度为1mol/L、0.5mol/L 、0.25mol/L对校准品进行检测。
血浆凝血因子Ⅱ活性测定
血浆凝血因子Ⅱ活性测定血浆凝血因子Ⅱ活性测定介绍：血浆凝血因子Ⅱ活性测定是对血浆内的凝血因子Ⅱ，即凝血酶原进行测定，对急性肝炎和慢性肝炎有诊断指导。
血浆凝血因子Ⅱ活性测定正常值：正常值 2～4mg/mL血浆凝血因子Ⅱ活性测定临床意义：异常结果：凝血因子Ⅱ活性正常或轻度下降;慢性肝炎中度、重度和肝硬化患者，凝血因子Ⅱ活性水平明显下降，说明它的降低程度与肝细胞损害程度密切相关。
有研究认为异常凝血酶原(protein-Ⅱinducedbyvitam inKabsence，PIVKA-Ⅱ)可用于原发性肝癌的诊断，部分AFP阴性的原发性肝癌患者PIVKA-Ⅱ阳性，在临床上应联合检测AFP与PIVKA-Ⅱ。
需要检查的人群：有慢性肝炎症状的人群。
血浆凝血因子Ⅱ活性测定注意事项：不合宜人群：无检查前禁忌：检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。
血液中的酒精成分会直接影响检验结果。
体检前一天的晚八时以后，应禁食。
检查时要求：抽血时应放松心情，避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。
血浆凝血因子Ⅱ活性测定检查过程：采用静脉采血进行检测。
静脉采血前要仔细检查针头是否安装牢固，针筒内是否有空气和水分。
所用针头应锐利、光滑、通气，针筒不漏气。
先用30g/L碘酊棉签自所选静脉穿刺处从内向外、顺时针方向消毒皮肤，待碘酊挥发后，再用75%乙醇棉签以同样方法拭去碘迹。
以左手拇指固定静脉穿刺部位下端，右手拇指和中指持注射器针筒，食指固定针头下座，使针头斜面和针筒刻度向上，沿静脉走向使针头与皮肤成30°角斜行快速刺入皮肤，然后以5°角向前穿破静脉壁进入静脉腔。
见回血后，将针头顺势探入少许，以免采血时针头滑出;但不可用力深刺，以免造成血肿，同时立即去掉压脉带。
针栓只能外抽，不能内推，以免静脉内注入空气形成气栓，造成严重后果。
取下注射器针头，将血液沿试管壁缓缓注入抗凝管中，防止溶血和泡沫产生。
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临床意义：
Ⅻ缺乏、弥散性血管内凝血、肝脏疾病等; 5.因子Ⅱ：C 、因子Ⅴ：C 、因子Ⅶ：C 、 因子Ⅹ：C降低，见于先天性凝血因子缺 乏或获得性凝血因子降低，如肝脏疾病、 维生素K缺乏、弥散性血管内凝血、口服 抗凝药及血液中存在抗凝物质等。 升高： 见于血液高凝状态和血栓性疾病，如深部 静脉血栓形
相关疾病：
弥漫性血管内凝血、肝素诱导性血小板减 少症、δ-贮存池病、遗传性凝血酶原缺 乏、遗传性凝血因子Ⅴ缺乏症、遗传性凝 血因子Ⅶ缺乏、遗传性凝血因子Ⅹ缺乏、 遗传性凝血因子Ⅺ缺乏、遗传性凝血因子 ⅩⅢ缺乏、获得性维生素K依赖性凝血因 子异常、获得性循环抗凝物质增多症、严 重肝病引起获得性凝血因子异常
医学检验·各论 凝血因子活性测定
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别名： 凝血因子活性测定。
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简介：
凝血因子在血液凝固过程中，起着非 常重要的作用。测定各个凝血因子的活性， 有助于判断血友病的类型、血友病的轻重 程度以及某些病理情况下的凝血状况。
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相关疾病：
原发性纤维蛋白溶解症、出血性疾病、老 年静脉血栓症、产科播散性血管内凝血、 白血病、维生素K缺乏病、血友病、小儿 播散性血管内凝血。
谢谢！
பைடு நூலகம்
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临床意义：
降低： 1. Ⅷ：C降低见于血友病A、 血管性血友病、弥散性血管内凝血等; 2. 因子Ⅸ：C降低见于血友病C、肝脏疾病、 维生素K缺乏、弥散性血管内凝血、口服 抗凝药等; 3.因子Ⅺ：C降低可见于先天 性因子Ⅺ缺乏、维生素K缺乏、弥散性血 管内凝血等; 4.因子Ⅻ：C降低可见于先 天性因子
医疗机构医院医学实验室凝血因子活性测定技术要求
医疗机构医院医学实验室凝血因子活性测定技术要求1 范围本标准规定了凝血因子（Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ）活性测定的技术要求，包括了一期法、二期法和发色底物法。
由于方法学不一致，本标准不涉及纤维蛋白原检测和凝血因子XIII的检测。
本标准适用于开展凝血因子活性检测的医学实验室，用于规范相应的检测过程和质量控制。
2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。
凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
WS/T 359-2011 血浆凝固实验血液标本的采集及处理指南WS/T 406-2012 临床血液学检验常规项目分析质量要求WS/T 407-2012 医疗机构内定量检验结果可比性验证指南3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件3.1凝血酶原时间prothrombin time, PT血浆与凝血活酶试剂（例如，组织因子）和氯化钙反应后发生凝固所需要的时间。
[WS/T 359-2011，定义2.1]3.2活化部分凝血活酶时间activated partial thromboplastin time, APTT血浆与适量的氯化钙（CaCl2）、部分凝血活酶试剂盒接触因子激活剂（如白陶土）反应后发生凝固所需要的时间。
[WS/T 359-2011，定义2.2]3.3定标曲线calibration curve校准曲线参考曲线定量反映凝血因子活性与纤维蛋白形成所需时间之间的相互关系的曲线。
3.4参考血浆reference plasma校准血浆定标血浆已知凝血因子活性的枸橼酸钠抗凝的正常混合血浆。
该血浆可以自备，亦可从制造商处购买，用于制备参考曲线。
3.5乏因子血浆factor-deficient plasma缺乏待测凝血因子的血浆。
3.6质控血浆control plasma源于人或动物血，或者人工制成的新鲜、冰冻或冻干的血浆，用于质量控制。
血浆凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ促凝血活性测定
血浆凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ促凝血活性测定摘要】目的讨论血浆凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ促凝血活性测定。
方法对样本进行临床检验。
结论参考范围(一期法)FⅧ：C 54.29%～168.51%，FⅨ：C 50.09%～222.05%，FⅪ：C 81%～118%， FⅫ：C 61 %～148%。
因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ的促凝活性检测与Ⅱ：C、V：C、Ⅶ：C、X： C等一样，都是以相当正常人的百分活性来表示的，故工作参考值很重要，志愿者以100例为好，且年龄段分布要有代表性，制成的混合血浆在一30℃下也只能保持3个月。
每次检测都必须制作标准曲线。
【关键词】血浆凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ促凝血活性测定参考范围(一期法)FⅧ：C54.29%～168.51%，FⅨ：C50.09%～222.05%，FⅪ：C81%～118%，FⅫ：C61 %～148%。
结果评价1.生理情况血浆凝血因子Ⅷ曾称为抗血友病因子(antihemophilic factor，AHF)或抗血友病球蛋白(antihemophilic globulin，AHG)，正常人血浆浓度很不稳定，一般为0.1mg/L，分子质量为3330000，肝脏可能是主要的合成场所，其基因定位于X性染色体(Xq28)，长度为186kb。
凝血因子Ⅸ也称为凝血活酶成分(plasma thromboplastin com-ponent，或叫christmas因子，分子质量为56000，正常血浆浓度为3～4mg/L，为肝脏合成的维生素K依赖性凝血因子，其基因定位于X染色体(Xq27.1)，长度为34kb。
凝血因子Ⅺ，又称血浆凝血活酶前质(plasma thromboplastin antecedent，PTA)，是一种较为稳定的凝血蛋白，血浆正常浓度为4～6mg/L，分子质量为160 000，由肝脏合成，基因定位于4号染色体(4q35)，长度为23kb。
因子Ⅻ，也称Hageman因子，正常血浆浓度为29mg/L，分子质量为80 000，主要由肝脏合成，基因定位于第5号染色体(5q33-ter)，长度为11.9kb。
血栓与止血的检测及临床意义
APTT(A)
PT(N) 内源途径缺陷
APTT(A)
PT(A) 无出血症状
共同途径缺陷
凝血因子I、II、V、X缺陷症
（遗传性、获得性）
凝血因子XII、PK、HMWK缺陷症
（遗传性、获得性）
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血友病筛选及诊断试验
筛选试验
确诊试验
PT APTT TT Fg
混合试验
纠正
凝血因子活性检测 病理性抗凝物质检测
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血管性血友病分型
❖ 1型, VWF 量部分缺乏 (75%)
❖ 2型, VWF 质异常 (25%)
90%以上漏诊
◆ 2A型,血浆中缺乏大中分子量VWF多聚物 ◆ 2B型,血浆中缺乏大分子量VWF多聚物，与血小板GPIb的 结合能力增强 ◆ 2M型,血浆中VWF多聚物分布正常，血小板黏附能力下降 ◆ 2N型,血浆中VWF多聚物分布正常，与因子VIII结合能力 明显下降
❖ 3型, VWF 完全缺乏 (《5%)
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血管性血友病实验室诊断
出血筛查
PLT ; PTT; PT; Fibrinogen or TT
VWD初步诊断
VWF:Ag; VWF:Rco; FVIII； BT
确诊和分型
➢ VWF:Rco /VWF:Ag比值 ➢ 多聚物检测 ➢ 胶原结合试验
费时 经验
➢ RIPA ➢ FVIII 结合试验
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病例1
女，25岁，月经增多伴皮肤黏膜瘀点、瘀斑10年 APTT70’‘，PT13“，Fg2.1g，BPC130×109/L FⅧ:C21%，FⅨ:C60%， FⅪ:C73%，FⅫ:C81% vWF:Ag 30% ，BT16’, vWF:Ristocf A:25% 诊断 血管性血友病 治疗 DDAVP，低温冷沉淀制剂