植物病原真菌形态识别和临时玻片制备.
病害临时玻片标本的制作方法实验报告
病害临时玻片标本的制作方法实验报告篇一：病害临时玻片标本的制作方法实验报告:摘要:本实验旨在探究病害临时玻片标本的制作方法。
通过对实验材料的制备、观察和测试方法的详细介绍,可知该标本可用于诊断和防治病害,具有广泛的应用价值。
正文:1. 实验目的本实验的目的是探究病害临时玻片标本的制作方法,以便在病害防治中更好地应用该标本。
临时玻片是一种常用的病害诊断工具,它可以在观察病变部位时更加清晰、快速、准确地识别病害类型。
通过研究该标本的制作方法,可以更好地掌握病害诊断技能,提高病害防治水平。
2. 实验材料实验材料包括:病故肉质肉质部分、酒精、蒸馏水、氯仿、苯酚、氢氧化钠等化学试剂。
此外,还需要准备一块干净的玻片、一支干净的毛笔、一瓶蒸馏水、一个酒精灯和一个氯仿桶。
3. 实验步骤(1)将病故肉质肉质部分切成小块,放入酒精灯中煮烫,直到肉质部分变软,然后用毛笔轻轻刷掉表面的污渍和细菌。
(2)将煮烫好的病故肉质部分切成小块,放入氯仿桶中,加入蒸馏水,浸泡20分钟。
泡20分钟。
(4)将浸泡好的病故肉质部分取出,放入酒精灯中煮烫,直到酒精挥发尽,玻片表面不再出现湿润。
(5)将煮好的病故肉质部分放在玻片上,晾干,等待玻片表面干燥。
(6)将玻片放入展览柜中,等待展览。
4. 实验结果通过对实验结果的观察和分析,可知病害临时玻片标本的制作方法如下: (1)将病故肉质部分切成小块,放入酒精灯中煮烫,直到肉质部分变软,然后用毛笔轻轻刷掉表面的污渍和细菌。
(2)将煮烫好的病故肉质部分切成小块,放入氯仿桶中,加入蒸馏水,浸泡20分钟。
(3)将浸泡好的病故肉质部分取出,放入氯仿桶中,加入苯酚和氢氧化钠,浸泡20分钟。
(4)将浸泡好的病故肉质部分取出,放入酒精灯中煮烫,直到酒精挥发尽,玻片表面不再出现湿润。
(5)将煮好的病故肉质部分放在玻片上,晾干,等待玻片表面干燥。
通过观察实验结果,可知病害临时玻片标本的制作方法如下:(1)将病故肉质部分切成小块,放入酒精灯中煮烫,直到肉质部分变软,然后用毛笔轻轻刷掉表面的污渍和细菌。
制作并观察植物细胞临时装片
制作并观察植物细胞临时装片在生物学实验室中，观察植物细胞临时装片是一个常见的实验操作。
这个实验通过制作临时装片，使我们能够观察到植物细胞的结构和形态，从而更好地理解植物细胞的生理和生物学功能。
首先，我们需要准备所需的材料和试剂。
这包括一株适合观察的植物，比如新鲜的花瓣、叶片或茎段，盐水，甘油和显微镜玻片。
此外，还需要显微镜和一些实验工具，如剪刀、镊子和滴管。
接下来，我们需要进行样本的制备。
首先，用剪刀将所选的植物材料剪碎成适当的大小，然后将其放入一个含有盐水的试管中。
在盐水中浸泡片刻后，用镊子取出一小片植物组织，将其置于显微镜玻片上。
然后，加入一到两滴盐水，轻轻覆盖植物组织。
接下来，将一滴甘油滴在植物组织上，并将另一片显微镜玻片贴在其上方。
此时，我们可以在显微镜下观察到植物细胞临时装片。
通过调整显微镜的焦距和光源的亮度，我们可以清晰地观察到植物细胞的结构。
植物细胞通常由细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核等部分组成。
在显微镜下，我们可以看到细胞壁呈现出明显的网状结构，细胞膜则是一个薄膜状的透明层，将细胞质包围起来。
在细胞质中，可以观察到许多细胞器，如叶绿体、线粒体和高尔基体等。
最后，在显微镜镜下的高倍放大倍率下，我们甚至能够看到细胞核和染色体的一些细节。
观察植物细胞临时装片不仅可以让我们了解植物细胞的基本结构和功能，还可以帮助我们研究植物的生态和生理过程。
例如，通过观察叶绿体，我们可以了解光合作用的过程和机制。
通过观察细胞核，我们可以了解DNA的复制和基因表达的过程。
通过观察细胞壁和细胞膜，我们可以了解细胞的保护和传递物质的功能。
因此，观察植物细胞临时装片不仅是一项实验操作，还是一种学习和研究植物细胞的重要手段。
最后，在进行植物细胞临时装片实验时，我们需要注意一些细节。
首先，所选的植物材料应该是新鲜的，并且保持在一个适当的湿度下，以确保细胞的完整性和可观察性。
其次，在制作临时装片时要尽量避免气泡和杂质的混入，以免影响观察效果。
普通植物病理学实验
实验二、真菌一般形态观察和临时玻片制备【字号：大中小】【打印此页】【关闭窗口】一、目的和要求熟悉不同临时玻片制作方法；通过观察，认识病原真菌的营养体及其变态，认识真菌的子实体、有性繁殖、无性繁殖产生的各种类型孢子。
二、实验用具挑针、刀片、木板、酒精灯、火柴、载玻片、盖玻片、纱布、（棉蓝）乳酚油、二甲苯、显微镜、擦镜纸、吸水纸等。
三、内容与方法1．临时玻片的制作临时玻片制作方法很多，如涂、撕、粘、挑和切片等，可以根据病原物的类型选择使用。
（1）涂抹法：细菌和酵母菌的培养物常用涂抹法制片。
将细菌或酵母菌的悬浮液均匀地涂在洁净的载玻片上，在酒精灯火焰上烘干、固定，再加盖玻片封固。
加盖玻片前还可进行染色处理，使菌体或鞭毛着色而易于观察。
（2）撕取法：用小金属镊子仔细撕下病部表皮或表皮毛制成临时玻片。
（3）粘贴法：将塑料胶带纸剪成边长5mm左右的小块（注意胶带上不要印有指印），使胶面朝下贴在病部，轻按一下后揭下制成玻片。
（4）挑取法：用挑针从病组织或基物（如培养基）上挑取表面的霉状物、粉状物或孢子团制成玻片。
（5）组织透明法：将少量病组织材料切成细丝后放在载玻片上，滴加乳酚油后在酒精灯上徐徐加热至蒸气出现。
如此处理数次使组织透明，冷却后加盖玻片进行镜检。
此法可以观察到病原物在寄主内的原有状态。
（6）徒手切片：徒手切片时选取病状典型、病征明显的病组织材料，先在病征明显处切取病组织小块（边长5－8mm），放在小木块上，用食指轻轻压住，随着手指慢慢地后退，用刀片的刀尖将压住的病组织小块切成很薄的丝或片，用沾有浮载剂的挑针或接种针挑取薄而合适的材料放在一干净载玻片上的浮载剂液滴中央，盖上盖玻片，仔细擦去多余的浮载剂（注意浮载剂过多会使观察物出现晃动不稳定现象），即制成一张临时玻片。
浮载剂：水：溢菌、线虫活动、真菌孢子萌发、大小测量–优点：方便–缺点：产生气泡；易干燥乳酚油：除上述外均可用。
–优点：杀菌固定、孢子膨胀复原、组织透明–缺点：不易封固、有毒取小麦白粉病叶片，分别用上述6种方法制片，观察白粉病菌的分生孢子梗、分生孢子、菌丝和吸器。
《园林植物病虫害防治》课程标准
《园林植物病虫害防治》课程标准1.课程说明《园林植物病虫害防治》课程标准课程编码〔36304〕承担单位〔生物化学工程学院〕制定〔〕制定日期〔2022年10月〕审核〔专业指导委员会〕审核日期〔〕批准〔二级学院（部）院长〕批准日期〔〕（1）课程性质：本门课程是园林技术专业的核心专业必修课程。
（2）课程任务：主要针对园林工作岗位如花卉园艺工、绿化工、病虫害防治员、苗木生产管理员、园林植物病虫害检验检疫等岗位开设，主要任务是培养学生在相应岗位的防病虫、治病虫的能力，要求学生掌握园林植物病虫害识别与防治的操作流程和操作要求，具备从事园林植物病虫害防治工作的职业方面的基本技能。
（3）课程衔接：在课程设置上，前导课程有《园林植物学》、《土壤肥料学》、《微生物学》等，后续课程有《花卉栽培》、《园林植物苗圃学》、《园林植物规划设计》等。
2.学习目标课程总体学习目标：通过本课程的学习，使学生熟悉园林植物病虫害识别与防治的操作流程和操作要求，掌握园林植物病虫害防治的基本知识及技能，达到园林工作岗位相关职业工种中级职业标准的相关要求；培养学生坚定拥护中国共产党领导和我国社会主义制度，在习近平新时代中国特色社会主义思想指引下，践行社会主义核心价值观，具有深厚的爱国情感和中华民族自豪感；培养学生崇尚宪法、遵法守纪、崇德向善、诚实守信、尊重生命、热爱劳动，履行道德准则和行为规范，具有社会责任感和社会参与意识；培养学生乐观向上、诚实守信的品质，具备社会公德心、以及善于交流与合作的能力，树立生态安全环保意识，具备从事园林植物病虫害防治工作的责任心和事业心，以及良好的职业道德，并在此基础上达到以下职业能力培养目标。
1）知识目标：（1）掌握昆虫的外部形态、结构特征，昆虫的生物学特性、习性。
（2）掌握病害的症状、病原菌的特征，病害的发生发展规律，及病害的诊断。
（3）掌握物理机械防治、生物防治、化学防治的原理、优缺点、使用范围、应用方法、注意事项。
《园林植物病虫害防治》课程标准
《园林植物病虫害防治》课程标准一、课程性质本课程是中等职业学校农林牧渔类园林技术专业必修的一门专业核心课程，是在学习《植物与植物生理》《植物生产与环境》《园林植物栽培》等课程的基础上，开设的一门理论与实践相结合的专业课程，其任务是让学生掌握常见园林植物病虫草害识别、病虫害预测预报及综合防治的基础知识和基本技能，为后续《花卉栽培技术》《草坪建植与养护》等课程的学习奠定基础。
二、学时与学分108学时，6学分。
三、课程设计思路本课程按照立德树人的要求，突出核心素养、必备品格和关键能力，兼顾中高职课程衔接，高度融合园林植物病虫害防治的知识技能学习与职业精神的培养。
1.依据《中等职业学校农林牧渔类园林技术专业指导性人才培养方案》中确定的培养目标、综合素质、职业能力，按照知识与技能、过程与方法、情感态度与价值观三个维度，突出园林植物病虫害识别、预测预报、病虫害综合防治等能力的培养，结合本课程的性质和职业教育课程教学的最新理念，确定本课程目标。
2.根据“中等职业学校园林技术专业‘工作任务与职业能力’分析表”，依据课程标准及花卉园艺工等工作的岗位需求，围绕园林植物病虫害防治技术的关键能力，反映园林植物病虫害防治技术的新知识、新技术、新方法，体现科学性、适用性原则，确定本课程内容。
3.以常见园林植物病虫害的识别、病虫害预测预报及综合防治技术为主线，将园林植物病虫害防治的基础知识、基本技能和职业素养有机融入所设置的模块和教学单元。
遵循学生认知规律，参考学生的生活经验，序化教学内容。
四、课程目标学生通过本课程的学习，能识别主要园林植物病虫草害，掌握园林植物病虫草害防治的基本原理及方法，初步具备有效控制园林植物生产中常见病虫草害的能力。
1.熟悉主要园林植物害虫，识别引发园林植物病害的主要病原物。
2.掌握园林植物害虫的预测预报、防治原理和基本方法，以及园林植物病害的发生发展过程、流行规律、防治原理和基本方法。
3.在识别常见园林植物病虫害的基础上，会制作简易的园林植物病虫害标本。
(普通植物病理学)实验一物病害症状、真菌一般形态
实验一：植物病害症状、真菌一般形态、玻片标本观察及临时玻片标本制作一、目的及要求1、通过植物病害症状的观察，掌握植物病害的症状类型、病害特点以及病害症状在植物病害诊断中的作用。
2、熟悉常规临时玻片的制作方法，并通过玻片制作观察病原真菌的营养体结构和各种孢子类型。
二、实验材料1、植物病害新鲜标本橡胶炭疽病、橡胶白粉病、鸡蛋花锈病、花生黑斑病、花生褐斑病、香蕉炭疽病、香蕉叶斑病、黄瓜霜霉病、柑橘青霉（绿霉）病、丛枝病、病毒病、根结线虫、煤烟病、生木瓜、桑寄生。
2、制作的实验室标本香蕉灰纹病、木薯褐斑病、龟背竹锈病、番木瓜疮痂病、金钱树白绢病、菜豆锈病、玉米大斑病、菠萝蜜白化病、胡椒花叶病、香蕉黑星病、番木瓜环斑花叶病。
三、实验用具小烧杯50ml、培养皿90cm、小刀、刀片、载玻片（每人5~10片）、盖玻片、剪刀、镊子、透明胶（1cm宽）、吸水纸、酒精、显微镜（以上材料为每人一份）、蒸馏水。
四、实验内容与方法1、观察采集的新鲜植物标本和实验室陈列的制作标本，记录植物病害的病状和病征。
1.1 病状类型病状一般分为变色、坏死、腐烂、萎蔫和畸形5 大类型⑴变色：植物受到外来有害因素的影响后，常导致色泽的改变，如褪色、花叶、条点、白化、色泽变深或变浅等，统称为变色。
主要表现有：①褪绿或黄化：褪绿或黄化是由于植物叶绿素的减少而使叶片表现为浅绿色或黄色。
如：小麦黄矮病、植物的缺氮症等。
②花叶与斑驳：花叶是叶片颜色不均匀地变色，且不同变色部分的轮廓是很清楚的，如：烟草花叶病。
如果不同变色部分的轮廓不清楚则称为斑驳，如：黄瓜绿斑驳病等⑵坏死：坏死是由于病植物组织和细胞的死亡而引起的。
主要表现有：①斑点：根、茎、叶、花、果实的病部局部组织或少量细胞坏死，产生各种小型的、形状和颜色不同的斑点。
如：玉米大小斑病、花生黑斑病等。
②枯死：芽、叶、枝、花的局部或大部分组织发生变色、焦枯、死亡。
如：马铃薯晚疫病、水稻白叶枯病等。
③穿孔和落叶落果：在叶片病斑外围的组织形成离层，使病斑从叶片组织中脱落下来，形成穿孔，如：桃穿孔病；有些植物的花、叶、果等受害后，在叶柄或果梗附近产生离层而引起过早的落叶、落果等。
植物病理学实验实验一、植物病害症状的观察和真菌显微玻片制作
病原：
• 水稻矮缩病毒（RDV），属植物呼肠孤病毒属
水稻条纹叶枯病
症状：发病初期表现 从心叶开始出现黄绿 色条纹，逐渐发生卷 曲向下弯，枯株渐渐 矮化，叶片失绿，呈 绿白色，最后叶片退 淡而枯死。 病原物：水稻条纹叶 枯 病 毒 [Rice Stripe Virus （ RSV ） ] 属 纤 细 病毒属。
大豆锈病
细菌病害
主要症状: 斑点、溃疡、萎蔫、瘤肿等.
大豆细菌斑疹病
大豆细菌斑疹病
病毒病害
主要症状:花叶、褪色、畸形等。
苹果花叶病毒病
水稻黄矮病 Rice Yellow Stunt
又称黄条花叶病、水稻黄矮病、黄化病。 症状：
• 植株矮缩，叶肉褪绿变黄。不分蘖，根系 短小。分蘖后发病的不能正常抽穗结实。 拔节后发病抽穗迟，穗形小，结实差。品 种间症状大致相似，仅色泽有差异。矮秆 籼稻上多为金黄色，粳稻上色泽淡黄花叶 不明显，糯稻上色泽灰黄或淡黄，有的品 种呈紫色。
大白菜病毒病
菠菜病毒病
西葫芦病毒病
植物线虫病害
花生根节线虫病
黄瓜根结线虫
黄瓜根结线虫为害症状
水稻干尖线虫病
寄生植物病害
向日葵列当
菟丝子
菟丝子
真菌玻片的制作方法
涂抹法：将病原悬浮液均匀地涂在载玻片上。 撕取法：撕取发病部位表皮或表皮毛，观察着生在 寄主或基质表面的菌丝和孢子，寄主表皮细胞内的 真菌菌丝、吸器和休眠孢子囊堆等。 粘贴法：用透明塑料胶带粘贴，用于观察着生于病 组织或基质表面的菌丝或子实体。 挑取法：用挑针挑取病组织或基质表面的病原物， 也可先将埋生或半埋生的子实体连同病组织一并挑 出，再用挑针将子实体剥离。 组织透明法：利用化学药品处理病组织，使组织透 明，观察病原在组织内的结构和形态。 徒手切片：对于埋生或半埋生的子实体，可以用刀 片将病组织切成很薄的丝或片，然后用挑针挑取合 适的做成玻片。
实验二_病原菌形态观察
形态差异是子囊菌分类的重要依据
1、半子囊菌纲 ：子囊裸生，无子囊果。 2、不整囊菌纲：子囊果是闭囊壳，子囊无
规律地散生在闭囊壳内 3、核菌纲：子囊果是闭囊壳(子囊有规律
地排列在闭囊壳内)或子囊壳 4、腔菌纲：子囊果是子囊座 5、盘菌纲：子囊果是子囊盘
（一）半子囊菌纲
低等子囊菌，子囊裸生，无子囊果。子囊壁 薄，无孔口，靠壁的肿胀或消解来释放子囊 孢子。 与植物病害相关只有一个目：外囊菌目 外囊菌目只有一个属：外囊菌属
外囊菌属（Taphrina）
桃
子囊及
缩
子囊孢
叶
子
病
的
症
状
子囊长圆筒形,平行排列在寄主表面。缩叶病 （T.deformans）
（二）不整囊菌纲
（6）盘梗霉属（Bremia lactucae）孢囊梗 二叉状锐角，末端膨大呈盘状。
（7）白锈菌属 （Albugo）孢子囊 梗平行排列在寄主 表皮下，短棍棒形； 孢子囊串生。
四 子囊菌亚门真菌的基本形态
• 是真菌中数量最多的一个类群，称子囊菌 • 营养体一般都是分支繁茂的有隔菌丝体 • 无性繁殖一般都是在由菌丝分化的分生孢
• 引起大、小麦等 赤霉病。
（四） 腔菌纲（Loculoascomycetes）
子囊果是子囊座，子囊双层壁。
痂囊腔菌属（Elsinoe）
• 圆形子囊单生于
子座内的子囊腔 中；子囊孢子大 多长圆筒形，有3 个横隔。 • 引起葡萄黑痘病 等。
（五） 盘菌纲 (Discomycetes）
• 子囊果盘状或杯状，故称子囊盘。 • 子囊和侧丝形成一层子实层长在盘上。
• 子囊果是闭囊壳 • 子囊无规律地散生在闭囊壳内，子囊成
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实训二植物病原真菌形态识别和临时玻片制备
一、实训目标
认识植物病原菌物营养体及其变态的类型，辨别病原菌物有性繁殖体、无性繁殖体及其产生的各种类型孢子，学会制作临时玻片。
二、实训材料、器具及药品
1．实训材料：植物病原菌物所致病害新鲜材料、PDA培养物、玻片标本、多媒体教学课件和挂图。
2．实训器具及药品：显微镜、载玻片、盖玻片、擦镜纸、吸水纸、通草、解剖刀、刀片、挑针、镊子、蒸馏水、（棉蓝）乳酚油、计算机及多媒体教学设备等。
三、实训步骤与要求
1. 观察菌物的营养体
（1）观察菌丝在植物表面生长繁茂的霉状物或粉状物制片宜用挑取法。
先在洁净的载玻片中央加一滴蒸馏水或乳酚油，用挑针从病组织或纯培养的菌落上，挑取少量瓜果腐霉病菌或根霉菌、立枯丝核菌或链格孢菌的菌丝体，放入蒸馏水或乳酚油中，盖上盖玻片，制成临时玻片镜检。
观察菌丝形态、有无隔膜、颜色有无差别、分枝处有无缢缩。
病部病原体稀少、难以辩认霉层的病害标本制片可用刮取法，用两侧具刃的三角刮针(或刀片) 在浮载剂中略加湿润，在病部顺同一个方向刮取2～3次，使病原物粘于其上，然后将病原蘸在载玻片的浮载剂中镜检。
（2）观察菌物营养体的变态
①吸器：观察寄生植物表皮细胞的病原菌物可用撕取法。
取感染白菜霜霉病或小麦白粉病的病叶，用刀片割破叶片表皮再用小镊子轻轻撕下，放在浮载剂中制片镜检吸器的形状和在细胞内的位置。
②假根：挑取甘薯软腐病菌平板培养物制片镜检，观察在孢囊梗基部的假根的形态和颜色。
③菌核：观察瓜类菌核病、十字花科蔬菜菌核病的菌核标本。
比较菌核的大小、形状和颜色，镜检菌核切片，比较菌核外部和内部组织菌丝细胞的颜色、形状、大小及排列情况。
④菌索：观察苹果或甘薯紫纹羽病菌的根状菌索。
⑤子座：在示范镜下观察麦角病菌头状子座的切片，注意其内部结构与菌核区别。
2. 观察菌物的繁殖体
（1）观察无性孢子
①游动孢子囊和游动孢子:挑取少量十字花科蔬菜白锈病疱斑内白色粉末，放载玻片上水滴中避光保湿培养3～4h，镜检孢子囊萌发产生的游动孢子在水中的游动情况。
②孢子囊和孢囊孢子：挑取根霉菌培养物制片，镜检孢囊梗顶端黑色圆形的孢子囊及其破裂后散出的孢囊孢子形态特征。
③分生孢子：用挑取、刮取或切片的方法观察交链孢菌、青霉菌、炭疸病菌等分生孢子的着生部位、形态大小、颜色和分隔等形状。
手持刀片将实验材料切成薄片的制作方法称为徒手切片法。
切片前先准备一个盛有清水的培养皿，选取病状典型、病征明显的病组织材料，先在病征明显处切取病组织小块放在小木块上，用食指轻压住，随着手指慢慢地后退，用刀片将病组织小块切成很薄的丝或片，用毛笔轻扫在培养皿的水中，再用接种针挑取薄而合适的材料制片；也可用食指、中指夹住实验材料，材料要伸出食指外约2～3 mm，将刀口向内对着材料，并使刀片与材料切口基本保持平行，刀口由外向内、从左向右移动均匀地拉切，连续切下数片后，将刀片放在培养皿的水中晃动，切片即漂浮于水中；不便直接切片的细小、柔软或较薄材料，可夹在通草、接骨木、向日葵的茎髓或新鲜胡萝卜或马铃薯中间拉切。
④厚垣孢子：挑取瓜类枯萎病菌（或其他镰孢霉菌）的培养物制片、镜检，菌丝或孢子中个别细胞膨大、细胞壁加厚的孢子即厚垣孢子，观察其形状和颜色。
（2）观察有性孢子
①卵孢子：挑取疫霉的培养物（连同培养基）制片，镜检观察藏卵器、雄器和卵孢子形态、色泽。
或取谷子白发病病穗，制片镜检卵孢子形态。
②接合孢子：观察接合孢子玻片标本，注意观察其形状、颜色、表面纹饰。
③子囊孢子：采用挑、刮或切片的方法制作临时玻片或直接观察永久玻片，镜检桃缩叶病菌、瓜类白粉病菌、槐树白粉病菌、苹果树腐烂病菌和十字花科蔬菜菌核病子囊盘，观察子囊果的类型，子囊的形态和子囊孢子的数目、形态、颜色。
④担子孢子：挑取梨胶锈菌冬孢子萌发材料观察担子的形态、隔膜，小梗着生部位，数目，担孢子形态，颜色和数目。
四、作业
1. 认识病原菌物的菌丝、无性孢子和有性孢子有何意义？
2. 菌物营养体及其变态的作用是什么？
3. 针对不同的病征类型在显微镜观察时选择哪种制片方法？。