浅谈食源性致病微生物快速检测技术
食源性致病菌快速检测方法研究报告
食源性致病菌快速检测方法研究报告摘要】目的应用酶联免疫吸附实验（ELISA）快速检测奶类及肉类制品中沙门菌。
方法样品经增菌后，用ELISA法及国标法对样品中的沙门菌进行初步检测，并比较ELISA法检测结果与国标法灵敏性、特异性、符合率。
结果检测200份奶类制品和肉制品，经ELISA法检测阳性率为8.3%，国标法阳性率为6.7%。
ELISA法敏感性、特异性分别为100%、97%，与国标法符合率达99.3%。
结论 ELISA法可快速、方便的对食品中沙门菌的污染情况进行初步检测，灵敏度高、特异性好，与国标法符合率高。
适用于食品中沙门菌的初步检测。
【关键词】奶制品肉制品沙门菌 ELISA沙门菌为常见的引起食源性疾病爆发的病原菌，在我国微生物性食物中毒中一直位居首位，而受沙门菌污染的奶、肉制品为造成人类感染的主要来源，因此沙门菌一直为医疗卫生、食品卫生及商检部门重点检验对象之一[1]。
本研究采用ELISA法检测奶、肉制品中沙门菌，并与国标法进行比较研究，现报道如下：1 材料与方法1.1实验材料奶、肉制品分别来自本市8家不同超市，包括70份奶及奶制品样本，60份肉及肉制品样本。
取样均采取随机抽样的方法进行。
每份样品250ml或250g，经无菌包装后置冷链保存送实验室检测。
缓冲蛋白胨水，氯化镁孔雀绿增菌液，四硫酸钠煌绿增菌液，亚硒酸盐胱氨酸增菌液，亚硫酸铋琼脂，DHL琼脂，HE琼脂，WS琼脂，SS琼脂，三糖铁琼脂，蛋白陈水、靛基质试剂，尿素琼脂（pH7.2)，氰化钾（KCN）培养基，氨基酸脱梭酶试验培养基，糖发酵管， ONPG培养基，半固体琼脂，丙二酸钠培养基，沙门氏菌因子血清。
均按国标相关规定进行。
ELISA相关试剂均购自试剂公司。
1.2实验方法样品按国标法相关规定预先增菌。
样品处理后于36°C培养4h，转种于100ml氯化镁孔雀绿增菌液中，42°C18-24h，另取10ml转种于亚硒酸盐胱氨酸增菌液中，36°C18-24h。
食品中有害微生物快速检测方法概述
(一)、概述食用被微生物污染的食品而导致的疾病，称作食源性疾病。
导致这类疾病的微生物叫食源性致病菌。
随着人们居住和卫生条件的不断改善，以及抗生素的滥用，人类对病菌的抵抗能力却在不断下降，食源性疾病一直呈上升的趋势。
因此，对食品中致病菌的监测和检验也就越显示其重要性，常规的检验大多依靠培养目标微生物的方法来确定食品是否受到此微生物的污染，这些方法需要一定的培养时间，少则2～3天，多至数周，才能确定。
而现行有效的一些快速检测方法不仅可以大大缩短检测时间提高微生物检出率并可用于微生物计数、早期诊断、鉴定等方面，以做到快速、简便、准确。
快速方法包括了微生物学、分子化学、生物化学、生物物理学、免疫学和血清学等领域。
（二）、常见、常用的快速、简便的检测微生物数量的方法如下：1、活细胞计数的改进方法（1）、旋转平皿计数方法（2）、疏水性栅格滤膜法（HGMF）或等格法（isogrid method）（3）、血膜系统（Pertrifilm）（4）、酶底物技术（ColiComplete）（5）、直接外荧光滤过技术（DEFT）（6）、“即用胶”系统（SimPlate）2、用于估计微生物数量的新方法（1）、阻抗法（2）、A TP生物发光技术3、其他方法（1）、微量量热法（2）、接触酶测定仪（3）、放射测定法（三）、食品中沙门氏菌的快速筛检方法1、沙门氏菌显色培养基法2、免疫学方法3、分子生物学方法4、自动传导法（四）、大肠杆菌O157：H7快速检测方法大肠杆菌O157：H7肠出血性大肠杆菌的主要血清型，自1982年在美国被分离并命名以来，陆续发现本菌与轻度腹泻、溶血性尿毒综合症、出血性肠炎、婴儿猝死综合症等多种人类病症密切相关，是食源性疾病的一种重要致病菌。
E.coli O157：H7属于肠杆菌科埃希氏菌属，为革兰氏阴性杆菌，有鞭毛。
近年来作为食品卫生及流行病学的研究热点，E.coli O157：H7的分离和鉴定方法已取得了较大进展。
微生物快速检测技术..
引言：微生物在生物工程、食品安全、环境监测等领域中起着重要作用，因此，开发快速、准确、高效的微生物检测技术至关重要。
微生物快速检测技术是指能够在较短时间内对微生物进行快速检测和鉴定的技术。
本文将详细介绍微生物快速检测技术的原理、方法和应用。
概述：微生物快速检测技术基于先进的分子生物学、生物化学和光学仪器，在短时间内能够对微生物的存在和数量进行快速和准确的检测。
与传统的培养方法相比，微生物快速检测技术具有操作简便、结果快速、准确性高等优势。
在食品安全领域，微生物快速检测技术能够快速鉴定食品中的致病菌，提高食品的质量和安全性。
在环境监测领域，微生物快速检测技术能够迅速监测水质和土壤中的微生物，为环境保护提供有力支持。
正文内容：一、基于PCR技术的微生物快速检测1. PCR技术的原理和方法：介绍PCR技术的工作原理、步骤和所需试剂。
2. 基于PCR的微生物检测方法：详细介绍基于PCR技术的微生物检测方法，如实时荧光PCR、逆转录PCR等，以及其在食品和环境中的应用。
3. PCR技术的优势和局限性：分析PCR技术的优点和局限性，并提出未来的发展方向和改进方法。
二、基于基因芯片技术的微生物快速检测1. 基因芯片技术的原理和方法：介绍基因芯片技术的工作原理、设计和制备方法。
2. 基于基因芯片的微生物检测方法：详细介绍基于基因芯片技术的微生物检测方法，如DNA芯片、RNA芯片等，以及其在食品和环境中的应用。
3. 基因芯片技术的优势和局限性：分析基因芯片技术的优点和局限性，并提出未来的发展方向和改进方法。
三、基于质谱技术的微生物快速检测1. 质谱技术的原理和方法：介绍质谱技术的工作原理、样品制备和仪器设备。
2. 基于质谱的微生物检测方法：详细介绍基于质谱技术的微生物检测方法，如MALDI-TOF质谱、飞行时间质谱等，以及其在食品和环境中的应用。
3. 质谱技术的优势和局限性：分析质谱技术的优点和局限性，并提出未来的发展方向和改进方法。
试析食源性致病菌快速检测技术现状及进展
试析食源性致病菌快速检测技术现状及进展食源性致病菌是最常见的食源性致病菌致病因素，食源性致病菌检测技术不仅灵敏度高、特异性高，而且检测结果精确、微量、快速、检测成本较低，本文主要就食源性致病菌快速检测技术现状及进展进行阐述。
标签：食源性致病菌；快速检测技术；研究；进展1食源性致病菌检测技术发展的必要性当前，食源性致病菌检测技术在食品安全检验领域中占据着重要的位置，包括食品的质量安全监督、生产过程的质量监控以及食品安全研究等方面，保障食品的安全质量达标[1]。
据WHO估计，全世界每年发生食源性疾病数十亿人，每年约有二百万儿童死于腹泻，其中66%以上是由细菌性致病菌所致[2]。
出于对食品安全的保障，采用食源性致病菌快速检测技术对食品质量安全进行检测，确保流通于市场中的食品安全质量都已经达标，使消费者放心购买、放心食用。
2食源性致病菌快速检测技术分析PCR检测技术、免疫检测技术、基因探针检测技术、生物芯片检测技术展开分析：2.1PCR检测技术PCR技术又称为聚合酶链反应技术，是DAN的体外扩增技术之一。
PCR技术主要应用于检测食品中的致病微食源性致病菌及转基因成分[3]，此种技术专业性要求高、技术含量大、操作也较为复杂，而且所需的检测仪器价格高昂，对PCR实验室的要求相当严格。
而沙门氏菌属是肠杆菌科中最重要的病原菌属，在世界各地的食物中毒中沙门氏菌食物中毒常占首位或第二位[4]，目前共发现2541个血清型。
黄金林[5]等从上个世纪90年代就开始尝试利用PCR技术检测食品中以及临床样品和环境中的沙门氏菌。
范宏英[6]等建立了沙门氏菌的实时定量PCR检测方法和同时检测沙门氏菌和其他菌的多重PCR体系，但在特异性方面还存在一定的欠缺。
金黄色葡萄球菌是引起食物中毒的主要病原菌之一。
目前，金黄色葡萄球菌常用的目标基因主要包括毒素相关基因和特异性鉴别基因。
王韶等[7]利用nuc基因序列建立了葡萄球菌PCR检测体系。
食品微生物快速检验和无菌操作技术
食品微生物快速检验和无菌操作技术食品微生物是指在食品中生长、繁殖或形成代谢产物，对人体健康有潜在危害的微生物。
一旦食品中存在微生物，就可能导致食品变质，不但影响产品质量，还对人体健康造成影响。
因此，对食品微生物进行快速检验和无菌操作技术是保证食品安全的关键。
快速检验技术可以提高检测效率，对于生产和加工过程中需要实时监测的食品生产企业而言尤为重要。
常用的食品微生物快速检测技术包括PCR技术、荧光PCR技术、生物传感器技术等。
1. PCR技术PCR技术是指聚合酶链式反应技术。
通过PCR技术，可以在短时间内扩增肠道致病菌的DNA，从而检测食品中是否存在这些微生物。
PCR技术具有高灵敏度、高特异性、快速、简单等优点，能够在短时间内对食品微生物进行快速检测。
PCR技术的不足是对反应体系的管控要求严格，反应过程中温度控制相对复杂，因此需要操作者有经验和高技能水平。
荧光PCR技术是在PCR技术基础上发展起来的一种新型PCR技术。
荧光PCR技术利用荧光探针与特定PCR产物结合生成荧光信号，从而进行定量检测。
荧光PCR技术具有快速、高灵敏度、高特异性、定量性强等优点，并且不需要繁琐的后续测序，因此被广泛应用于食品微生物检测中。
3. 生物传感器技术生物传感器技术是通过对微生物的生物学特性和物理化学特性进行研究，利用微生物和某些物理化学传感器相结合，对微生物进行检测或定量分析的一种新型检测技术。
生物传感器技术具有灵敏度高、快速、简单、无需复杂设备等优点，因此被广泛应用于食品微生物检测领域。
二、无菌操作技术无菌操作技术是指在无微生物污染的条件下，进行微生物实验和处理的操作技术。
无菌操作技术的目的是为了避免微生物的污染，保证实验的准确性和可靠性。
常用的无菌操作技术包括灭菌、隔离、纯化等。
1. 灭菌灭菌是指在一定温度、压力和时间条件下，杀灭微生物的技术。
常用的灭菌方式有热灭菌、紫外线灭菌、化学灭菌等。
其中，热灭菌是最常用的灭菌方式之一，它通过高温杀灭微生物，能够有效地消除微生物污染。
食品微生物快速检测技术研究
理论研究 | theory76 食品安全导刊 2018年4月为保障食品安全，减少食源性疾病的发生，食源性致病菌的检测显得尤为关键。
传统的微生物检验方法主要基于培养法，一般流程为：样品均质，增菌，选择性分离，生化鉴定及血清学鉴定。
其优点是灵敏度高、价格低廉、容易操作，缺点是劳动量大且检验周期长。
随着技术的发展，无需增菌，直接检测食品样品中低浓度的致病菌已成为可能。
这些不依赖于培养、新型、快速的检测技术可以有效分离、聚集和鉴别致病菌，从而缩减了整个检验周期。
核酸检测技术基于PCR 的检测技术普通PCR PCR 技术被广泛用于各类食品中致病菌及毒素的检测。
介于食品基质的影响，常需离心或磁珠法预处理将致病菌从食品中分离。
也有研究使用金属氢氧化物进行微生物的富集分离，Taylor 等人使用氢氧化钛从碎牛肉中分离E.coli O157:H7后，通过对志贺毒素基因II 的扩增进行检测。
多重PCR 多重PCR 是在一个反应体系中使用多对引物同时进行多个目标扩增的PCR 反应，可同时检出多种病原微生物，比普通PCR 更加高效、经济、便捷。
使用此技术，需要对多对引物进行精心设计，以使其具有相近的退火温度。
每对引物的浓度需要调整优化，否则可能导致引物二聚体生成和非目标片段扩增。
实时荧光定量PCR 实时荧光定量PCR（qPCR）是利用荧光信号的变化，实时监测PCR 反应过程中DNA 扩增产物的方法。
使用该方法，无需电泳或进行其他后续分析。
最早的qPCR 使用SYBR Green 荧光染料进行荧光信号的测定，此外还有TaqMan 探针法、分子信标法，他们在准确性、特异性方面要优于染料法。
实时定量反转录PCR 实时定量反转录PCR（RT-qPCR）也可实时监测扩增的目标产物，它先以RNA 为模板反转录cDNA，再以cDNA 为模板进行PCR 反应。
RT-qPCR 灵敏度较高，样品制备或扩增条件的细微差异都可能影响结果。
由于RNA 在胞外极易降解，故RT-qPCR 优势在于仅活细胞的RNA 被提取，结果假阳性率较低。
食品中致病菌的多重快速检测技术
食品中致病菌的多重快速检测技术食品安全一直是人们关注的重要问题，由于食品中常常存在着致病菌，给人们的健康带来了潜在的威胁。
因此，快速检测食品中的致病菌成为食品安全领域亟待解决的问题之一。
近年来，随着科技的不断进步，食品中致病菌的多重快速检测技术逐渐成为研究热点，并取得了令人瞩目的成果。
一、PCR技术的应用多重快速检测技术中的PCR技术是一种基于分子生物学原理的检测方法。
它是通过放大食品中的致病菌的DNA序列，并通过特定的荧光探针来检测致病菌的存在与否。
这种技术具有高灵敏度、高准确性和高特异性的特点，可以迅速、准确地检测到食品中的致病菌。
在PCR技术中，常用的目标基因有16S rRNA基因、23S rRNA基因等。
通过选择合适的引物和探针，可以选择性地检测目标致病菌。
例如，可以设计特异性引物和探针用于检测大肠杆菌、沙门氏菌等常见的致病菌。
此外，PCR技术还可以实现多种致病菌的同时检测，提高检测效率。
二、免疫技术的应用除了PCR技术，免疫技术也是常用的食品中致病菌快速检测方法之一。
免疫技术是通过检测食品中的致病菌抗原或特定的抗体来判断食品是否受到致病菌的污染。
常见的免疫技术有ELISA、荧光免疫分析等。
免疫技术具有灵敏度高、操作简便等优点，适用于大规模的食品快速检测。
例如，可以通过ELISA方法检测食品中的沙门氏菌，快速准确地判断食品是否受到沙门氏菌的污染。
三、基于质谱的快速检测技术基于质谱的快速检测技术是近年来迅速发展的一种食品中致病菌检测方法。
这种技术利用食品中致病菌的代谢产物或特定标记物质的质谱特征来进行快速检测。
例如，基于质谱的快速检测技术可以通过检测食品中的挥发性有机化合物来鉴定食品中的细菌。
通过对质谱数据的分析，可以快速准确地确定食品中是否存在致病菌。
此外，还有基于纳米材料技术的快速检测方法，利用纳米材料的特殊性质，通过检测特定的物质变化来判断食品中是否存在致病菌。
这种技术具有高灵敏度、快速性和简便性的特点，对提高食品安全具有重要意义。
食品中致病菌的快速检测技术研究
食品中致病菌的快速检测技术研究食品安全一直是人们关注的焦点，食品中的致病菌往往会给人们的健康带来严重威胁。
因此，研究食品中致病菌的快速检测技术显得尤为重要。
本文将探讨当前食品安全领域中的一些新兴技术，并讨论其在食品检测中的应用前景。
首先，快速检测致病菌技术中的一项重要进展是基于PCR方法的检测技术。
PCR（聚合酶链反应）是一种分子生物学技术，可以快速复制并扩增特定的DNA序列。
以此为基础，科学家们开发出了一系列快速、高灵敏度的PCR方法，用于检测食品中的致病菌。
这些方法通过检测食品样品中的致病菌特定基因的存在与否，可以快速准确地判断食品的卫生状况。
其次，近年来，光学传感技术的应用给食品检测带来了一系列的创新。
光学传感器可以通过测量食品样品中特定物质的吸收光谱或发射光谱来判断样品中是否存在致病菌。
这种技术不仅可以实现快速检测，还具有灵敏度高、非侵入性等优点。
此外，激光散斑技术也被应用于食品安全领域中的快速致病菌检测。
激光散斑技术通过测量食品表面激光光斑的散射和衍射情况，可以对样品中的细菌进行非接触式的检测。
除了传统的实验室方法外，生物传感技术也被广泛应用于食品安全领域中的致病菌快速检测。
例如，基于免疫反应的生物传感技术利用抗体和抗原的特异性结合来检测致病菌。
这种技术灵敏度高、选择性强，可以在短时间内检测出食品中的致病菌。
另外，基于DNA杂交的生物传感技术也被广泛研究和应用。
这种方法通过将食品样品中的致病菌RNA与DNA探针杂交，然后通过特定的检测方法来测量杂交物质的存在，从而判断样品中是否存在致病菌。
当然，上述的技术只是众多食品安全领域中致病菌快速检测技术的冰山一角。
随着科技的不断进步，越来越多的新技术被应用于食品安全领域。
例如，纳米技术可以通过纳米材料与致病菌的特异性相互作用，实现对致病菌的快速检测。
此外，微流控技术的应用也有望在食品中的致病菌快速检测领域产生重要影响。
利用微流控技术，可以实现对微小样品的高通量、自动化检测，从而提高食品样品的分析效率和准确性。
食品病原微生物快速检测技术研究进展
调查 研究食品病原微生物快速检测技术研究进展 何芝菲 重庆市潼南区疾病预防控制中心目前，一些食品微生物学快速检测方法主要是通过综合应用微生物学、化学、生物化学、生物物理学、免疫学和血清学检测技术对微生物进行分离、检测、鉴定和计数，与传统方法相比，速度更快、更方便、更灵敏。
分子生物学技术基因探针技术。
基因探针的工作原理是：将双链ＤＮＡ标记物的微生物特性制成ＤＮＡ探针，ＤＮＡ分子杂交严格遵循碱基配对的原则，通过检测被测样品并标记杂交分子，可以形成ＤＮＡ探针来确定样品中是否含有这种微生物，可以通过放射性测试样品中的微生物数量得出ＬＳＯ。
该方法具有特异性高、灵敏度高、操作简单、检测时间短等优点。
基因体外扩增技术。
基因体外扩增技术又称聚合酶链反应，该技术的工作原理是指通过样品，以体外扩增的形式，部分微生物拥有相应的特异性双链ＤＮＡ片段，经过测试，这部分ＤＮＡ片段扩增出产品样品，最后完成对食品中微生物的快速检测。
基因芯片技术。
基因芯片技术是一种新的微分析技术，主要通过先进的微电子、微机械、计算机等技术，将设计好的基因片段在玻璃等载体上有序、高密度地排列，最终形成信息检测芯片。
这种基因芯片技术的工作原理是利用微印刷或光学原位合成的方法，使各种基因都是特定序列通过密集、连续的固定，一般包括通过相应的加工玻璃、硅或硝化纤维等支撑物。
在待检测的完整样品上进行标记，然后将样品置于寡核苷酸芯片固定点以上，进行多重杂交。
然后，利用先进的扫描量仪分析杂交信号的强度和分布，观察检测到的靶分子是否存在，以及检测到的分子的数量和序列，最后确定检测到的样品中是否真的存在某种特定的微生物。
免疫技术乳胶凝集反应。
乳胶凝集是利用抗原和抗体特异性结合的特点，再加上大分子的乳胶粒子作为载体吸附可溶性抗原在其表面，当特异性抗体结合时，产生凝集作用。
酶联免疫法。
在食品微生物快速检测技术中，酶联免疫分析是一种固相免疫分析技术，在酶联免疫分析领域应用最为广泛。
食源性致病微生物的检测与分子诊断研究
食源性致病微生物的检测与分子诊断研究食品安全一直是人们关注的焦点，食源性疾病不仅会影响人们的健康，还会给社会带来不小的负担。
因此，食品的安全检测十分重要。
目前，食品安全检测主要涉及到食源性致病微生物的检测和分子诊断。
这两方面的研究不仅能保障食品安全，还对于防止疾病流行具有重要意义。
一、食源性致病微生物的检测食源性疾病是由食品中的致病微生物或毒素引起的疾病，而食源性致病微生物是指通过口腔摄入食品而进入人体并引起疾病的微生物。
常见的包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、链球菌等。
传统的食源性致病微生物检测方法主要是基于培养方法来检测，需要将微生物在特定的培养基中生长出来。
但这样的方法周期较长，还会存在许多假阴性和假阳性结果。
因此，现代的检测方法主要基于生物技术和化学分析技术发展而来。
生物技术在食源性致病微生物检测方面有着广泛的应用，其中最重要的技术是聚合酶链式反应（PCR）。
PCR是一种能够特异性扩增一段DNA片段的技术，也是目前最为先进、灵敏、准确和快速的方法之一。
在食品检测中，可以通过PCR扩增特定的基因片段，从而检测出所需的致病菌。
相较于传统的培养方法，PCR快速、特异性高、检测灵敏而且可重复性好，因此，PCR已成为食源性病原微生物检测中最常用的工具之一。
化学分析技术是另一个发展成熟的检测方法，其中最常用的是ELISA（酶联免疫吸附试验）。
ELISA是一种利用抗体和抗原之间的特异性作用进行检测的方法，凭借其特异性、灵敏性、简便性等优点，已经广泛应用于食品中毒的检测中。
通过ELISA技术，可以对食品中的常见致病微生物，如沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等进行快速、准确的检测。
除此之外，还有快速检测卡、荧光素酶免疫检测、光学波导光子传感器等现代化快速检测技术。
这些技术均有很高的检测灵敏度和检测速度，但其缺点在于需要消耗较高的成本，并且需要特殊的设备和操作技能，限制了其在实际应用中的推广。
二、分子诊断技术分子诊断技术指的是利用分子生物学方法，针对疾病相关基因、蛋白质、多肽等分子进行检测的技术。
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检验与检疫・259・
Health For Everyone 《人人健康》
2016年22期与传统的检测技术和方式相比较，微生物检测的检测速度更快，准确性更高，是一种快速检测技术[1]。
快速检测虽不是最终的确证方法，但是由于在实际食品安全检测中样本、监管等均具有分散性，且样本的量均存在较大差异性。
因此在食品安全检测过程中首先应用快速检测方法对相关样本进行初步筛选，然后再应用仪器对存在可疑性的样本进行确证，可大大缩短检测时间，提高检测工作效率。
本文就食源性致病微生物快速检测技术的新进展做如下综述。
1 微生物培养法的改进
（1）疏水网膜法（HGMF ）。
应用疏水网膜将接受检测的样本进行过滤，疏水网膜的小格会将存在于样本中微生物捕获，然后将适量的琼脂倒在疏水网膜上，进行适当时间的培养后便可对微生物进行计数。
（2）快速纸片法。
将事先已经进行制备的凝胶剂作为测试片，测试片分为上、下层薄膜，上层为聚丙烯薄膜，下层为聚乙烯薄膜，且在下层薄膜中有网格，还覆盖有细菌生长培养基。
应用该种方法时，将适量的检测样本稀释液倒入下层的培养基上，然后将上层薄膜盖上即可，等24-48h 便可得出结果。
（3）特异性显色培养基法。
该种方法主要是根据特异性显色反应来实现对微生物进行检测的。
将适量人工合成的无色底物融入到分离培养基中，存在于微生物细胞中特异性酶发生作用，导致显示出荧光或者相应的颜色，通过对颜色及荧光来对菌株进行鉴定。
（4）免疫磁性微球法。
该种方法是在磁性颗粒表面耦联存在特异性的抗体，使之与受检样品中存在的致病微生物所具有的特异性发生结合作用，促进存在于微生物中的磁性颗粒发生聚集，进而实现分离并浓缩。
2 酶联免疫吸附法
酶联免疫吸附（ELISA ）为一种固相酶免疫分析方法，其主要是通过将抗原抗体免疫在反应过程中存在的特异性与酶具有的催化作用结合起来的新型检测方法。
应用该种方法均可对抗原、抗体进行有效检测。
ELISA 是将接受检测的抗原（抗体）加入到相载体吸附抗体（抗原）中，然后在添加适量的酶标记抗体（抗原）促进反应，最终生成一种复合物，该种复合物的成分主要为抗体（抗原）、待测样本抗原（抗体）、酶标记抗体（抗原）三种。
最后，生成的复合物与酶的底物发生作用进而产生有色产物。
按照吸光度值将待测样本的产物量进行精确计算。
ELISA 在应用过程中具有较强的特异性和较高的灵敏度，因此该种方法具有检测速度快、准确性高、重现性好等诸多优点，在微生物检测中得到广泛应用。
3 PCR 技术
PCR 技术是聚酶链式反应的简称，该种技术同时还可称为体外酶促基因扩增法或者无细胞分子克隆系统。
该种技术主要以2条待扩张的DNA 链作为模板，以一对寡核苷酸当作介导，存在于DNA 中的聚合酶发生促进反应，使存在特异性的DNA 在体外发生序列扩增，进而导致存在于末端的特异性片段成指数形式累积。
该种技术在应用过程中主要表现出操作简单、反应速度快、特异性强、灵敏度高等诸多优点，其凭借这些优点被广泛应
用于医学、分子生物学等众多领域中，对大肠杆菌、沙门氏菌等致病微生物进行检测。
4 基因芯片（DNA chip）鉴定技术
基因芯片技术发展与上个世纪90年代，其是一种由多门学科交叉融合而形成的一种高新技术。
该种技术主要通过对显微点样或原位合成技术的应用，有序地将数量较大的DNA 探针固化在支持物的表面，然后使之与样本进行杂交，通过对杂交信号进行检查分析获取受检样本的相应基因序列及表达信息等。
DNA chip 技术可平行化、大数量、高通量地对功能基因进行精确的分型，并进行相应的鉴定。
该种技术中应用的基因芯片具有极高密度，其可在同一时间实现对众多种样本进行微生物检测，并快速进行全面分析，大大提高了微生物检测效率和质量。
目前，基因芯片研究受到我国高度重视。
5 直接计数法
①直接落射荧光滤过（DEFT ）技术。
部分样品经过多聚碳酯盐滤膜过滤后还存在部分细菌，将这些细菌进行荧光染色后，应用落射荧光显微镜对其进行计数，将所得结果×放大系数便可算出存在于原样本中的细菌数。
抗体-DEFT 技术主要是通过对靶细胞荧光抗体进行选择性染色，快速将存在于新鲜蔬菜、包装沙拉等中的李氏杆菌进行检测，也可以对大肠杆菌进行检测。
②固相细胞计数（SPC ）法。
SPC 法结合应用了落射荧光显微镜技术和流式细胞计数法，应用该种方法时可省略前期增菌环节，直接对存在于滤膜上的细胞进行计数。
使用滤膜将存在于基质中的相关微生物进行分离，然后通过氩（Ar ）激光对其进行标记荧光，再应用激光扫描仪器进行自动计数。
SPC 主要应用于水中活细胞总数测定，对存在于饮用水中的特殊微生物进行测定是便经常用到该种技术。
6 自动化仪器分析技术及综合法
计算机技术的发展和应用极大地推动了微生物检测技术的发展。
动微生物鉴定系统是计算机技术与微生物数码鉴定方法的结合。
该种系统可自动对相关生化反应进行判定，然后组成数码，将这些数码与储存于数据库的相应分类单位进行比较，进而获得最终鉴定结果。
综合法主要包含ATP 生物发光法、阻抗法、放射性示踪法。
ATP 生物发光法主要被应用于牛奶、鲜肉、啤酒等多种领域的检测。
阻抗法可在6-12h 对各种食品中存在的总菌数进行测定，并可选择性地对各种非致病菌和致病菌进行检测。
7 结束语
在科学技术不断发展地推动下，食源性致病微生物检测技术及方法不断得到完善和改进，各种快速检测技术不断涌现。
快速检测技术凭借操作简便、灵敏度高、特异性强、准确性高等诸多优势越来越多的被应用于食源性致病微生物检测中，并发挥着重要作用。
参考文献
[1]赵广英，张晓，窦文超，等.一次性免疫传感器快速检测阪崎肠杆菌的研究[J].中国食品学报，2013，5（10）：31-32.
【摘 要】社会物质生活水平不断提升，食品安全质量问题成为人们关注的热点，导致食品出现质量问题的重要原因之一其中就有食源性微生物。
对食源性致病微生物进行检测是一项极为繁杂的工作，所以，进行深入研究快速检测技术及方法具有非常重要的意义。
【关键词】食源性致病微生物；质量安全问题；检测技术
【中图分类号】TS207.4 【文献标识码】B 【文章编号】1004-597X （2016）22-0259-01浅谈食源性致病微生物快速检测技术
李晓燕
（大同市食品药品检验检测中心 山西 大同 037000）。