马铃薯快速繁殖实验报告
马铃薯快速繁殖实验报告

沸数分钟 →调节pH值 至5.8 →定容→装瓶(棕色)→贴标签→放入冰箱保 存。
用时每配 l L 培养基取 该溶液 5m l。
母
规定 浓缩 称取 母液定 配 1L MS 培
液
用量 倍数 量/mg 容体 积 养基 吸取量
种
成分
/mg.L-1
/mL
/mL
类
铁 Na2ED TA.2H2O
植物快繁与传统营养繁殖(vegetative propagation)相比,其特点表现在: ①繁殖效率高。由于不受季节和灾害性气候的影响,材料可周年繁殖。生长速度 快,材料能以几何级数增殖。②培养条件可控性强。培养材料完全是在人为提 供的培养基质和小气候环境条件下生长,便于对各种环境条件进行调控。③占 用空间小 。一间 30m 2的培养室可同时存放1 万多个培养瓶,培育数十万株苗木。④管 理方便,利于自动化控制。培养材料在 人为环境中生长,省去了田问栽培的一 些繁杂劳动,并可利用仪器进行自动化控制,便于工厂化生产。⑤便于种质保 存和交换。通过抑制生长或超低温贮存的方法,使培养材料长期保存,并保持 其生活力,既节约了人力、物力和土地,还防止了有害病虫的传播,更便于种 质资源的交换 和转移。 (2)马铃薯是高度杂合的,因此它们的种子后代不可能与原种完全相同。只有 由无性繁殖产生的植株,在遗传上才能与其亲本植物完全相同,从而使品种的 特性代代相传。利用植物组织培养技术,在无菌条件 下 对 外植体进行离体培 养,使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法称为植物离体无性繁 殖。马铃薯试管苗在光照条件下进行自养的程度大于异养。相反,在高浓度的
实验13马铃薯脱毒试管苗快速繁殖

▪ 4 实验用具和仪器
▪ 酒精棉球、小块纱布、枪状镊子、手术剪、 解剖刀、已灭菌培养皿、酒精灯、超净工 作台等。
▪ 5 药品和试剂
▪ 马铃薯快速繁殖培马铃薯脱毒试管
7 实验操作流程
▪ 〔1〕准备工作 ▪ ①接种室的清洁和消毒 ▪ ②超净工作台的开机和消毒 ▪ ③剪刀、镊子、已灭菌培养皿、酒精
棉球、酒精灯、待用培养基等的准备 ▪ ④ 实验材料的准备
〔2〕无菌操作
▪ ① 实验操作前,操作人员洗手及手和小臂 消毒〔注意问题?〕
▪ ② 使用的镊子、解剖刀等用95%酒精浸泡, 之后放在酒精灯上灼烧灭菌,再放在灭菌 后的培养皿中冷却后使用。
▪ ③培养瓶外壁的消毒
〔2〕无菌操作
▪ ④将马铃薯试管苗剪为单节茎段后接种到 培养基中,在植入材料的前后,培养瓶的 瓶口须在酒精灯火焰上烧烤灭菌。
▪ ⑤封口、标记、将培养瓶置于培养架上, 在温度20-25℃,光照强度2000-3000lx, 光照时间12-14小时/天的条件下培养。
图1 马铃薯试管苗的茎段扦插繁殖
实验1-3 马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖
▪ 1 实验目的
▪ 通过本次实验,掌握无菌操作的根本技术; 了解马铃薯脱毒种薯生产的过程,为马铃 薯脱毒种薯的生产提供必要的根底苗。
▪ 2 实验方法:单节茎段扦插〔短枝发生型〕 ▪ 3 实验原理
▪ 利用适宜的培养基,诱导带有腋芽的马铃 薯单节茎段进展芽生长和根再生形成单苗, 从而到达快速繁殖的目的。
马铃薯快繁实习报告

一、实习背景马铃薯(学名:Solanum tuberosum L.)是我国重要的粮食作物之一,也是全球第四大粮食作物。
由于其适应性强、产量高、营养丰富,在我国农业生产中占有重要地位。
马铃薯快繁技术是指通过无性繁殖方式,快速大量繁殖马铃薯优良品种,提高马铃薯种植效率,满足市场需求。
为了深入了解马铃薯快繁技术,提高自身实践能力,我于2023年在XX农业大学参加了马铃薯快繁实习。
二、实习目的1. 熟悉马铃薯快繁技术的基本原理和操作流程。
2. 掌握马铃薯脱毒苗的培育方法。
3. 提高实验室操作技能,培养严谨的科学态度。
4. 了解马铃薯产业现状和发展趋势。
三、实习内容本次实习主要包括以下内容:1. 马铃薯快繁技术原理马铃薯快繁技术主要包括脱毒苗的培育和大量繁殖两个阶段。
脱毒苗的培育是通过组织培养技术,去除马铃薯体内的病毒,获得无病毒的植株。
大量繁殖则是通过扦插、嫁接等方法,将脱毒苗大量繁殖成可种植的植株。
2. 实验室操作技能培训实习期间,我们学习了实验室基本操作规程,包括无菌操作、显微镜观察、植物组织培养等。
通过实际操作,掌握了植物组织培养技术,为后续的马铃薯快繁实验打下了基础。
3. 马铃薯脱毒苗的培育(1)材料准备:选取优良品种的马铃薯块茎,进行表面消毒,去除病毒。
(2)组织培养:将消毒后的马铃薯块茎切割成小块,接种到含有生长调节剂的培养基上,进行组织培养。
(3)脱毒苗筛选:通过显微镜观察,筛选出无病毒的植株。
(4)大量繁殖:将脱毒苗移植到新的培养基上,进行大量繁殖。
4. 马铃薯快繁实验(1)扦插繁殖:将脱毒苗的茎段进行扦插,诱导生根。
(2)嫁接繁殖:将脱毒苗的茎段嫁接到健康的马铃薯植株上,实现繁殖。
(3)栽培管理:对繁殖出的马铃薯植株进行浇水、施肥、除草等管理。
四、实习收获1. 理论知识与实践相结合,提高了自己的动手能力和解决问题的能力。
2. 深入了解了马铃薯快繁技术的基本原理和操作流程,为今后的科研工作奠定了基础。
马铃薯的快速繁殖的研究

目录一立题依据---------------------------------------2 二主要研究内容-----------------------------------2 三技术路线---------------------------------------5 四要达到的技术或经济指标-------------------------6 五经济效益分析-----------------------------------9 六研究进度--------------------------------------10 七风险分析--------------------------------------10 八项目组成员------------------------------------11一立题依据(1)马铃薯是高度杂合的,因此它们的种子后代不可能与原种完全相同。
只有由无性繁殖产生的植株,在遗传上才能与其亲本植物完全相同,从而使品种的特性代代相传。
利用植物组织培养技术,在无菌条件下对外植体进行离体培养,使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法称为植物离体无性繁殖。
马铃薯试管苗在光照条件下进行自养的程度大于异养。
相反,在高浓度的糖类存在的情况下,以及在无光照的限制条件下,马铃薯向着诱导生成试管薯的过程。
这样生长出来的试管薯称之为原种种薯。
(2)短枝发生型是指外植体携带的带叶茎段,在适宜的培养环境中萌发,形成完整植株,再将其剪成带叶茎段,继代再成苗的繁殖方法。
该方法与田间枝条的扦插繁殖方法类似,故又称为微型扦插。
能一次成苗,遗传性状稳定,培养过程简单,移栽成活率高。
许多花卉、葡萄、马铃薯等试管苗的繁殖常用此方法。
(3)在黑暗环境的诱导下,马铃薯试管苗可以在试管薯诱导培养基中结出种薯,且悬于茎秆上。
马铃薯试管薯是利用茎尖分生组织脱毒技术,在组织培养条件下高倍扩繁脱毒试苗,进而诱导试管苗所形成的块茎。
马铃薯快繁实习报告

马铃薯快繁实习报告一、实习背景及目的近年来,马铃薯作为一种高产、高效、可持续发展的粮食作物,在我国得到了广泛种植。
为了提高马铃薯的产量和品质,减少生产成本,我国农业科研院所积极开展马铃薯快繁技术研究。
本次实习旨在了解马铃薯快繁技术的过程,掌握相关操作技能,为今后马铃薯生产提供技术支持。
二、实习内容与过程1. 实习前的准备在实习开始前,我们参加了马铃薯快繁技术培训,了解了马铃薯快繁的基本原理、流程及注意事项。
同时,我们还学习了如何配制培养基、无菌操作技术、植物生长调节剂的使用等知识。
2. 实习过程(1)外植体消毒选取健康、无病虫害的马铃薯块茎作为外植体。
将块茎去皮、切块,并用流水冲洗干净。
然后,用70%酒精消毒30秒,无菌水清洗,再用5%次氯酸钠消毒10分钟,无菌水清洗。
最后,将外植体放入无菌水中备用。
(2)愈伤组织诱导将消毒后的马铃薯外植体放入诱导培养基中,培养基中包含植物激素、营养成分等。
放入培养箱中,调节温度为18-22℃,光照时间为12小时/天。
(3)愈伤组织增殖在诱导培养基中,愈伤组织逐渐形成。
当愈伤组织生长到一定程度时,将其转移到增殖培养基中,继续培养。
增殖培养基中植物激素的比例有所不同,以促进愈伤组织的分裂和增殖。
(4)分化培养将增殖后的愈伤组织转移到分化培养基中,培养基中植物激素的比例调整为有利于芽分化的程度。
在分化培养过程中,适当增加光照时间,以促进芽的分化和生长。
(5)炼苗移栽当芽苗长到2-3片叶时,将其从培养瓶中取出,洗净根部的培养基,放入清水中浸泡一段时间,以适应外界环境。
然后,将芽苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩中,适当遮阳,保持湿度,防止干旱。
(6)栽培管理在移栽后的一个月内,定期浇水、施肥,并及时防治病虫害。
当植株生长到一定程度时,进行土壤栽培,直至成熟。
三、实习成果与分析通过本次实习,我们掌握了马铃薯快繁技术的基本操作,了解了各个环节的关键因素。
在实习过程中,我们成功诱导出了愈伤组织,并分化出了芽苗。
马铃薯快速繁殖(实验结果)

一.实验设计方案快速繁殖培养基为MS培养基。
诱导培养基的配方如下:MS培养基+5mg/L 6-BA+8%蔗糖。
采用固液培养法诱导。
结薯率=总结薯个数/植株总数×100%单薯的重量=总重量/总薯数*100%步骤(3)培养将果酱瓶置于培养室中培养,培养条件是室温25-27℃。
每天光照16小时。
光强2000-3000lx。
②、更换培养基后,将果酱瓶放在室温25-27℃完全黑暗的条件下静止培养,不需要摇动或者摆动。
(五)注意事项由于高温高压灭菌会对部分物质活性产生一定的影响,因此配制培养基时要予以注意。
如NAA要最后加。
(一)实验现象及观察结果1、马铃薯试管苗快繁结果:下图为马铃薯试管苗快繁结果:图1 马铃薯试管苗快繁结果由图可见:经培养,瓶内15株(每瓶5棵,共3瓶)均成活,长势良好,株高和茎粗正常,叶片深绿色偏小;未出现茎段陡长的现象。
但由于培养时间较长,果酱瓶内培养基明显减少。
2、马铃薯试管薯诱导结果:由于时间关系,本小组实验绝大部分培育的苗尚未开始结薯,有极个别瓶苗结1-2个。
因此,不方便计算结薯率和单薯的重量。
(二)实验分析讨论1、光照对苗的快繁影响较大。
中期观察发现,苗未直立生长,且整体向一个方向倾斜,有较明显的向光生长趋势。
后期对培养瓶移位,改变捕光方向和位置后,有明显改善。
这是由于培养架内各处光照不均匀,以至偏向角落的苗向光生长。
2、马铃薯试管苗快繁过程中发现,有些同学的苗始终不长高,且不生根。
这是由于扦插时,违背了其形态学特性,故不生根。
3、避光才能诱导微型薯的产生。
在培育过程中,不时会有同学打开挡光布,甚至直接将培养瓶拿出来观察,这对试管薯的诱导是及其不利的。
4、有些同学快繁培养基耗尽后未及时更换或补充新的培养基,以致快繁苗因营养缺乏而死。
(三)实验总结本次实验包括以下主要环节:培养基的配制、试管苗快繁培养以及马铃薯试管薯诱导。
在配制培养基过程中,各小组分工合作,操作谨慎。
初中马铃薯实验报告

一、实验目的1. 了解马铃薯的种植方法及生长过程。
2. 掌握马铃薯的繁殖方式。
3. 培养学生的观察能力、动手能力和团队协作能力。
二、实验材料1. 马铃薯2. 土壤3. 花盆4. 水壶5. 测量工具(如尺子、天平等)6. 记录本三、实验步骤1. 准备工作(1)选取健康的马铃薯,去掉腐烂、发霉的部分。
(2)将马铃薯切成小块,每个小块保留1-2个芽眼。
(3)准备好花盆、土壤、水壶等实验材料。
2. 马铃薯种植(1)在花盆中铺上一层土壤,厚度约为10厘米。
(2)将马铃薯小块芽眼朝上,均匀地摆放在土壤上。
(3)再覆盖一层土壤,厚度约为5厘米。
(4)用喷壶喷水,使土壤湿润。
3. 马铃薯生长观察(1)每天观察马铃薯的生长情况,记录下叶片、茎、根的变化。
(2)观察马铃薯的生长速度,记录下高度、宽度等数据。
(3)观察马铃薯的抗病能力,记录下病虫害发生的情况。
4. 马铃薯繁殖(1)待马铃薯生长到一定阶段,选取健康的植株进行繁殖。
(2)将植株上的芽眼割下来,放入新的花盆中。
(3)按照种植马铃薯的步骤进行种植。
四、实验结果与分析1. 马铃薯在适宜的温度、湿度、光照条件下,生长良好。
2. 马铃薯的生长速度较快,大约每周增长2-3厘米。
3. 马铃薯在生长过程中,容易受到病虫害的侵袭,需要及时防治。
4. 通过观察马铃薯的生长过程,了解到马铃薯的繁殖方式,为以后种植马铃薯提供了经验。
五、实验总结本次实验让我们了解了马铃薯的种植方法、生长过程及繁殖方式。
通过实验,我们培养了观察能力、动手能力和团队协作能力。
同时,也让我们认识到,种植马铃薯需要关注环境因素,如温度、湿度、光照等,以保证马铃薯的健康生长。
在实验过程中,我们还发现了一些问题,如病虫害防治、土壤质量等。
这些问题需要我们在今后的学习中进一步探讨,以提高马铃薯的产量和质量。
总之,本次实验让我们对马铃薯有了更深入的了解,为今后种植马铃薯提供了宝贵的经验。
在今后的学习和生活中,我们将继续关注农业种植技术,为我国的农业发展贡献自己的力量。
马铃薯的培养实验报告

一、实验目的1. 了解马铃薯的生长习性及繁殖方法。
2. 掌握马铃薯的离体培养技术。
3. 观察马铃薯生长过程中的形态变化。
二、实验材料与仪器1. 实验材料:马铃薯块茎、无菌水、无菌滤纸、无菌刀片、移液枪、培养皿、超净工作台、恒温培养箱、显微镜等。
2. 实验试剂:氯化钠、氯化钙、葡萄糖、琼脂、氢氧化钠、硫酸铜、硝酸钾等。
三、实验方法1. 马铃薯块茎表面消毒:将马铃薯块茎洗净,用无菌刀片切去表面1-2cm,用无菌水清洗3-5次,再用70%酒精浸泡1分钟,最后用无菌滤纸吸干水分。
2. 马铃薯芽尖剥离:用无菌刀片将消毒后的马铃薯块茎切成3cm×3cm的小块,确保芽尖位于小块中央。
3. 培养基制备:按照以下配方制备培养基:- 营养基:马铃薯浸出粉20g,葡萄糖20g,氯化钠1g,氯化钙0.5g,硝酸钾0.5g,硫酸铜0.01g,琼脂10g。
- pH值调至6.0-6.5。
4. 培养基灭菌:将制备好的培养基分装于无菌培养皿中,用高压蒸汽灭菌法进行灭菌,灭菌时间为20分钟。
5. 马铃薯芽尖接种:将灭菌后的培养基冷却至50℃左右,将马铃薯芽尖接种于培养基上,每皿接种3个芽尖。
6. 培养条件:将接种后的培养皿置于恒温培养箱中,温度控制在25℃左右,光照强度为2000-3000勒克斯,光照时间为12小时/天。
7. 观察与记录:每隔一定时间观察马铃薯芽尖的生长情况,记录芽尖的生长高度、叶色、叶形等形态变化。
四、实验结果与分析1. 马铃薯芽尖生长情况:接种后第5天,芽尖开始生长,表现为芽尖变绿,生长速度逐渐加快。
第10天,芽尖高度可达1cm左右,叶片开始展开,颜色鲜绿。
第15天,芽尖高度可达2cm左右,叶片数量增多,颜色更加鲜绿。
2. 马铃薯芽尖形态变化:接种后第5天,芽尖开始分化出茎和叶,茎逐渐变粗,叶片逐渐展开。
第10天,茎粗约1mm,叶片数量约4片,颜色鲜绿。
第15天,茎粗约2mm,叶片数量约6片,颜色更加鲜绿。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
(2)MS基本培养基配置:(配置前先检查各母液情况,如发现有霉菌和沉淀结晶产生,就不能再2.5ml;铁盐母液:2.5ml;有机物母液:各2.5ml。混匀。
(2)马铃薯快速繁殖培养基及诱导培养基的配制:
事先配好的MS基本培养基母液、琼脂、蔗糖、生长调节物质、蒸馏水、1mol·L-1HCl、1mol·L-1NaOH等。
3.实验材料:马铃薯脱毒苗
四实验方法步骤及注意事项
实验步骤:
(一)MS培养基母液和常用试剂的配制与保存
1.大量元素母液的配制
MS培养基中的9种大量元素除C、H、O外,剩下的六种可由KNO3、NH4NO3、CaCl2• 2H2O、MgSO4• 7H2O、KH2PO4几种无机盐来供应,它们可配在同一母液中(具体配制见下表)。配制的步骤为:确定母液的浓度和体积→计算各种化合物用量→称量→分别溶解→混合→定容→装瓶→贴标签→放入冰箱保存。
170
3400
2.微量元素母液的配制
MS培养基中的微量元素可由MnSO4•4H2O、 ZnSO4•7H2O、 H3BO3、 Na2MoO4•2H2O、KI、 CuSO4•5H2O、 CoCl2•6H2O几种无机盐来供应,它们也可配在同一母液中(具体配制见下表)。配制步骤同大量元素(混合时不要求先后顺序)。
母液种类
成分
规定用量/mg.L-1
浓缩倍数
称取量/mg
母液定容体积/mL
配1L MS培养基吸取量/mL
微量元素
MnSO4.H2O
16.9
200
3380
1000
5
ZnSO4.7H2O
8.6
1720
H3BO3
6.2
1240
KI
0.83
166
Na2MoO4.2H2O
0.25
50
CuSO4.5H2O
0.025
(3)待琼脂完全溶解后,加入规定用量的蔗糖(15g),继续加温并不断搅拌,待琼脂煮透后端离火源,再加入所需用量的母液(可事先取好放于一烧杯中),最后加蒸馏水至所需体积,即500ml。
(4)调节培养基的酸碱性至pH5.8:
由于培养基的pH值直接影响到培养物对离子的吸收,因而过酸或过碱都对植物材料的生长有很大影响。此外,琼脂培养基的pH值还影响到凝固情况。所以,当培养基配制好后应立即进行pH值的调整。最好用酸度计测试,既快又准,如无条件也可用精密pH试纸。培养基若偏酸时用lmol·L-1 NaOH来调节,偏碱则可用lmol·L-1 HCl来调节。一般来说,当pH值高于6.0时,培养基将会变硬;pH值低于5.0时,琼脂不能很好地凝固。
3.熟悉马铃薯快繁培养基及试管薯诱导培养基的配置方法。
4.通过本次实验,进一步掌握无菌操作技术。
5.了解马铃薯脱毒种薯生产的过程,为马铃薯脱毒种薯的生产提供必要的基础苗。
6.熟悉移栽的过程和原理。
7.掌握马铃薯幼苗移栽的技术和操作方法。
二实验原理、实验流程或装置示意图
1.实验原理
(1)作为植物营养繁殖的一个新手段,植物组织培养技术现正日益普及。利用植物组织培养技术,在无菌条件下对外植体进行离体培养,使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法称为植物离体无性繁殖(propagationin vitro)。植物离体无性繁殖又称植物快繁或微繁(micropropagation),它是植物组织培养技术在农业生产中应用最广泛、产生经济效益最大的研究领域,涉及的植物种类繁多,技术日益成熟并程序化,繁殖速度突破了植物自然繁殖的界限,成就了工厂化育苗的梦想。
本科学生综合性实验报告
学号姓名
学院生命科学学院专业、班级
实验课程名称马铃薯快繁和移栽
教师及职称
开课学期2012至2013学年下学期
填报时间2013年6月日
云南师范大学教务处编印
实验序号
实验二
实验名称
马铃薯快繁和移栽
实验时间
2012.03.15—2012.06.26
实验室
生科院组培实验室325
实验内容
1 MS培养基母液和常用试剂的配制
2 马铃薯试管苗快速繁殖培养基的配制
3 马铃薯试管苗的快速繁殖
4 马铃薯试管薯的诱导
5马铃薯幼苗的移栽
一实验目的
1.通过本次实验,能熟练准确配制MS培养基母液和组培室常用的化学试剂,巩固相关理论基础知识。
2.通过本次实验,掌握配制培养基的步骤,能熟练准确配制培养基,并能根据实验目的设计适合的培养基配方。
2.药品和试剂
(1)母液配制:
硝酸铵、硝酸钾、氯化钙、硫酸镁、磷酸二氢钾、碘化钾、硫酸锰、硫酸锌、钼酸钠、硫酸铜、氯化钴、乙二胺四乙酸二钠、硫酸亚铁、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆素、烟酸、肌醇、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)、NAA(α-萘乙酸)、 6-BA 、浓盐酸、氢氧化钠、95%酒精、蒸馏水、75% 酒精等。
(3)短枝发生型是指外植体携带的带叶茎段,在适宜的培养环境中萌发,形成完整植株,再将其剪成带叶茎段,继代再成苗的繁殖方法。该方法与田间枝条的扦插繁殖方法类似,故又称为微型扦插。能一次成苗,遗传性状稳定,培养过程简单,移栽成活率高。许多花卉、葡萄、马铃薯等试管苗的繁殖常用此方法。
(4)在黑暗环境的诱导下,马铃薯试管苗可以在试管薯诱导培养基中结出种薯,且悬于茎秆上。马铃薯试管薯是利用茎尖分生组织脱毒技术,在组织培养条件下高倍扩繁脱毒试苗,进而诱导试管苗所形成的块茎。试管薯具有无病原、体积小、贮藏运输方便、能工厂化周年生产,从而为马铃薯优良种质的保全提供了一条理想的途径。
(6)利用适宜的培养基,诱导带有腋芽的马铃薯单节茎段进行芽生长和根再生形成单苗,从而达到快速繁殖的目的。
(7)培养基配方设计:①根据培养的目的选择一种培养基为基本培养基。②确定培养基中各种激素的浓度及相对比例。本实验中马铃薯试管苗快速繁殖培养基
培养基的配方如下: MS培养基 +C30g/L+A7g/L PH 5.8
浓缩倍数
称取量/mg
母液定容体积/mL
配1L培养基吸取量/mL
有
机
成
分
甘氨酸
2.0
200
100
250
5
盐酸硫胺素
0.1
5
盐酸吡哆素
0.5
25
烟酸
0.5
25
肌醇
100
5000
4.铁盐母液的配制
铁盐母液宜单独配制,其配制步骤为:
确定母液的浓度和体积→计算各种化合物用量→称量→分别溶解→混合→煮沸数分钟→调节pH值至5.8 →定容→装瓶(棕色)→贴标签→放入冰箱保存。
配制好的各种母液应分别贴上标签,写明母液名称、配制倍数、配制者、配制日期。母液最好在2~4℃的冰箱中保存。尤其对生长调节物质与有机类物质要求较严。贮存时间不宜过长,如发现有霉菌和沉淀结晶产生,就不能再使用。
(二)马铃薯试管苗快速繁殖培养基的配制
基本配方:MS基本培养基+0.7%琼脂+3%蔗糖(每小组配制0.5L)
注意: CaCl2 • 2H2O最后加入
母液
种类
成分
规定
用量/mg.L-1
浓缩倍数
称取量/mg
母液定容体积/mL
配1L MS培养基吸取量/mL
大量元素
KNO3
1900
20
38000
1000
50
NH4NO3
1650
33000
CaCl2.2H2O
440
8800
MgSO4.7H2O
370
7400
KH2PO4
100
0.1
6.其它常用试剂的配制
盐酸(lmol·L-1 ):用浓度36.5%、密度1.19g/cm3的浓盐酸配制
氢氧化钠(lmol·L-1 ):用固体氢氧化钠配制
75%酒精(v/v) :用95%的酒精来配制
稀铬酸洗涤液:重铬酸钾50 g溶于1000 ml蒸馏水中,冷却后缓慢加入工业用硫酸90 ml。
(5)培养基的分装:
配制好的培养基要趁热分装,分装时容器口小者可采用漏斗分注,口大者直接加注。试管、三角瓶等培养容器加注量占其容积的1/4~1/3为宜,果酱瓶每瓶20~30ml,太多既浪费培养基,又减少了培养材料的生长空间;太少又会因营养不良影响生长。培养基分装完后,用封口膜封严瓶口,并用棉线扎紧。本次实验中500ml分装到10个果酱瓶,每人两瓶,剩余两瓶备用。
2.实验流程
(1)实验总体流程
(2)母液配制流程
(3)马铃薯试管苗快速繁殖培养基的配制流程
三 实验设备及材料
1.实验设备
果酱瓶、500mL搪瓷杯、三角瓶、烧杯、容量瓶、玻璃棒、25mL量筒、1mL和5mL移液管、洗耳球、PH试纸、封口膜、扎口用棉线、药勺、称量纸、普通电子天平、酒精棉球、小块纱布、灭菌滤纸、枪状镊子、手术剪、解剖刀、已灭菌培养皿、酒精灯、超净工作台、冰箱、高压蒸汽灭菌锅、电磁炉、记号笔。
(2)马铃薯是高度杂合的,因此它们的种子后代不可能与原种完全相同。只有由无性繁殖产生的植株,在遗传上才能与其亲本植物完全相同,从而使品种的特性代代相传。利用植物组织培养技术,在无菌条件下对外植体进行离体培养,使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法称为植物离体无性繁殖。马铃薯试管苗在光照条件下进行自养的程度大于异养。相反,在高浓度的糖类存在的情况下,以及在无光照的限制条件下,马铃薯向着诱导生成试管薯的过程。这样生长出来的试管薯称之为原种种薯。
(5)培养基是植物离体培养组织和细胞赖以生存的营养基质。配制培养基时,为了减少试剂称取时的工作量和少量称取时出现的误差,以及避免多种营养成分混合导致沉淀产生或相互反应而失去培养效果,预先要将各种营养成分配制为一定倍数的培养基母液,待使用时稀释到要求的浓度。母液的浓度为培养基浓度的10倍、100倍或更高。 将事先配制好的培养基母液按一定比例稀释至浓度为培养基中规定的使用浓度,再加入琼脂、蔗糖、生长调节物质等,制备成符合要求的培养基。