3种经典工艺生产的金银花提取物中绿原酸类成分含量比较_陈有根
[ 4] 吕方军 , 蓝琪 田 , 罗国安. 薄层扫描 法预测银 黄注射液 的稳定 性 [ J] . 中草药 , 1988, 19(10):17.
[ 5] 陈 钢 , 侯世祥 , 胡 平 , 等. 金银花提取物中绿原 酸的稳定性 研究 [ J] . 中国中药杂志 , 2003, 28(3):223-226.
0. 128 6 0. 112 0. 239 4 98. 92
B. 金银花单煎提取物 HPLC色谱图 图 1 HPLC 色谱图
a. 绿原酸 b. 3, 5-二咖啡酰基硅宁酸
2. 1. 4 线性关系考察 分别精密称取绿原酸和 3, 5-二咖啡酰基奎宁酸适量 , 加 50 甲醇制成每 1 m L 含绿原酸 0. 408 m g、3, 5-二咖啡酰奎宁酸 0. 278 mg 的混合溶液 。精密吸取 1、2、4、6、8 m L和 10 mL, 置 10 mL 量瓶中 , 加 50 甲醇至刻度 , 摇匀 , 制成系列 对照品溶液 , 按上述色谱条件进样 10 μL, 以进样量 为横坐标 , 峰面积为纵坐标计算 , 得绿原酸的回归方 程为 :Y =2 703. 3X - 115. 47, r =0. 999 8, 线性范围 为 0. 408 ～ 4. 080 μg;3, 5-二咖啡酰奎宁酸的回归方 程为 :Y =3 801. 9X +84. 66, r =0. 999 9, 线性范围为 0. 278 ～ 2. 780 μg。 2. 1. 5 精密度试验 精密吸取上述系列对照品溶 液之 4(6→10 mL)10 μL, 连续进样 5 次 , 分别测定 峰面积 , 绿原酸和 3, 5-二咖啡酰基奎宁酸的 RSD 分 别为 0. 80 , 0. 53 。 2. 1. 6 重复性试验 取提取物 C, 按供试品溶液制 备方法制备 5份供试液 , 依法测定 , 计得绿原酸平均 含量为 5. 68 (RSD =0. 85 ), 3, 5-二咖啡酰基奎 宁酸平均含量为 1. 24 (RSD =1. 28 )。 2. 1. 7 稳定性试验 取同一份供试品溶液 , 每隔 2
和 3, 5-二咖啡酰基奎宁酸对照品溶液 , 按 2. 1. 2项 下操作 , 测定 , 计算回收率 , 结果见表 1、表 2。
表 1
绿原酸回 收率测定结果 (n =5)
样品量 加入量 测得量 回收率 平均回收率 RSD
/mg
/m g
/m g
/
/
/
0. 563 8 0. 626 1. 178 1 98. 13
3种经典工艺生产的金银花提取物中绿原酸类成分含量比较
陈有根 , 王志斌 , 戴俊东 (北京市药品检验所 , 北京 100035)
关键词 :金银花提取物 ;绿原 酸 ;3, 5-二咖啡酰基奎宁酸 ;总绿原酸 摘要 :目的 :比较 3种经典工艺生产的金银花提取物中绿原 酸 、3, 5-二咖啡酰 基奎宁酸和 总绿原酸的 含量差异 。 方 法 :用 经典的水 -醇法 、石 -硫法和改良石 -硫法生产金银花提取物 , 用 高效液相 -梯 度洗脱 法测定 3种提取 物中绿 原酸和 3, 5-二 咖啡酰基奎宁酸的含 量 , 用分光光度法测定 3种提取物中总绿原酸含量 。 结果 :3种提取物中绿原 酸含量分别为 5. 03 、 4. 01 、5. 68 , 3, 5-二咖 啡 酰 奎 宁 酸 含 量 分 别 为 0. 41 、 0. 73 、 1. 24 , 总 绿 原 酸 含 量 分 别 为 13. 53 、 19. 85 、 27. 87 。 结论 :改良石 -硫法生产的金银花提取物中绿原酸 、3, 5-二咖啡酰基奎宁酸和总绿原酸含量最高 。 中图分类号 :R 284. 2 文献标识码 :A 文章编号 :1001-1528(2007)03-0362-03
[ 2] 高锦明 , 张鞍灵 , 张康 健 , 等. 绿 原酸分 布 、提取 与生 物活性 研 究 [ J] . 西北林学院学报 , 1999, 14(2):73-74.
[ 3] 顾利红 , 朱 品业. 日光 和温 度对绿 原酸 供试 液稳 定性的 影响 [ J] . 中成药 , 1999, 21(11):568-569.
收稿日期 :2006-02-16 基金来源 :科技部 “十五 ”国家重大科技专项 “创新药物和中药现代化 ”专题 。 编号 :2001BA 701A 36-2。 作者简介 :陈有根 (1965 ～ ), 男 , 博士 , 副主任药师, 研究方向 :中药分析 。 联系电话 :010-66121225。
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2007年 3月 第 29卷 第 3期
中成药 Chine se T raditiona l P atentM ed icine
M a rch 2007 V o .l 29 N o. 3
精密称定 , 分别置 10 mL 量瓶中 , 加 50 甲醇至刻 度 , 振摇使完全溶解 (B 有少量不溶物 ), 0. 45 μm 微 孔滤膜滤过 , 取续滤液 , 备用 。 2. 1. 3 系统适应性 在上述色谱条件下测定 , 结果 表明 , 理论塔板数以绿原酸峰计算为 51 390, 以 3, 5二咖啡酰基奎宁酸峰计算为 395 500。 (见图 1)
含量 /
RSD /
0. 41
0. 95
0. 73
1. 13
1. 24
1. 28
2. 2 总绿原酸含量测定 2. 2. 1 供试品溶液的制备 精密称取提取物 A、B 细粉各 50 mg, 提取物 C 细粉 25 m g, 分别置 50 mL 量瓶 中 , 加甲 醇 40 mL, 置 超声 清洗 器 中 振荡 10 m in, 取出 , 冷却至室温后 , 加甲醇至刻 度 , 摇匀 , 滤 过 , 精密量取续滤液 1 m L, 置 10 m L量瓶中 , 加甲醇 至刻度 , 摇匀 , 即得 。 2. 2. 2 检测波长的确定 在 200 ～ 400 nm 波长范 围内对绿原酸对照品和供试品溶液进行扫描 , 结果 表明 , 对照品溶液和供试品在此范围内有 3个吸收 峰 , 即 327、243、220 nm , 其中 327 nm 处吸 收最强 , 因此 , 选择 327 nm 作为检测波长 。 2. 2. 3 线性关系考察 精密称取绿原酸对照品 , 加 甲醇使溶解制成每 1 m L 含绿原酸 0. 098 m g的对照 品溶液 。 精密量取 对照品溶液 0. 4、0. 8、1. 2、1. 6、
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2. 0 mL, 置 10 mL 量瓶中 , 分别加甲醇至刻度 , 摇匀 。
以甲醇为空白 , 在 327 nm 的波长处测定吸收度 , 以
洗器中振荡 10 m in, 取出 , 冷却至室温后 , 加甲醇至
2. 1. 9 样品测定 取上述 3种工艺生产的金银花
提取物 , 按 2. 1. 2项下操作制备供试品溶液各 3份 ,
按上述色谱条件测定含量 , 结果见表 3。
表 3
样品 测定结果 (n =3)
样品
A B C
绿原酸
含量 /
RSD /
5. 03
0. 87
4. 01
0. 75
5. 68
0. 85
3, 5-二咖啡酸基奎宁酸
对照品浓度 (C )为横坐标 , 吸收度 (A)为纵坐标 , 计
算回归方程为 A =0. 047 7C +0. 002 19, r =0. 999 2
(n =3), 线性范围为 3. 92 ～ 19. 6 μg /m L。
2. 2. 4 精密度试验 取提取物 C 细粉 25 m g, 精密
称定 , 置 50 m L 量瓶中 , 加入 40 m L甲醇 , 置超声清
Ag ilent-1100高效液相色谱仪 , 四元泵 , 自动进 样器 , 柱 温 箱 , DAD 二极 管 阵列 检 测器 , A gilen tA l
0. 02工作站 。 岛津 UV-2450PC 型可见 -紫外分光光 度仪 。 1. 2 试药
绿原酸对照品 (中国药品生物制品检定所 ), 3, 5-二咖啡酰基奎宁酸对照品 (自制 , 纯度 >98 );金 银花药材 (采自山东省平邑县白彦镇 );乙腈为色谱 纯 , 其它试剂均为分析纯 。 2 方法与结果 2. 1 绿原酸 、3, 5—二咖啡酰基奎宁酸含量测定 2. 1. 1 色谱条件 色谱柱 :K rom asil C18 (4. 6 mm × 250 mm , 5 μm );流动相 :A 为乙腈 , B为 0. 3 磷酸 溶液 , A:0→20 m in 5 →10 , 20→ 45 m in 10 → 26 ;流速 :1 mL /m im;检测波 长 :327 nm ;柱温 :30 ℃。 2. 1. 2 供试品溶液的制备 取金银花药材 200 g, 3 份 , 分别照文献 [ 1 ～ 3] 所收载的 石 -硫法和改 良石 -硫 法进行提取 (两次煎煮用水量均分别为 20倍和 12 倍 )、处理 , 得浓缩液 , 继续减压浓缩得稠膏 , 真空干 燥 , 粉碎成细粉 , 分别得 3种金银花提取物 A、B、C。 取提取物 A、B 细粉各 75 mg、提取物 C 细粉 25 m g,
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中成药 Chine se T raditiona l P atentM ed icine
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Hale Waihona Puke 参考文献 :[ 1] 张鞍灵 , 马 琼 , 高锦 明 , 等. 绿原 酸及 其类 似物 与生 物活 性 [ J]. 中草药 , 2001, 32(2):173-175.
金银 花为常 用中药 , 来 源于 忍冬 科植物 忍冬 Lon icera japon ica Thunb. 的 干燥 花 蕾 , 具有 清 热解 毒 , 凉散风热的功能 。 金银花提取物是生产多种中 成药制剂的中间原料 。 《中国药典 》和 《部颁标准 》 中收载的金银花提取物的生产工艺有 3种 , 即 :水 醇法[ 1] 、石 -硫法 [ 2] 和改良石 -硫法 [ 3] , 它们均属于有
[ 5] 陈 钢 , 侯世祥 , 胡 平 , 等. 金银花提取物中绿原 酸的稳定性 研究 [ J] . 中国中药杂志 , 2003, 28(3):223-226.
0. 128 6 0. 112 0. 239 4 98. 92
B. 金银花单煎提取物 HPLC色谱图 图 1 HPLC 色谱图
a. 绿原酸 b. 3, 5-二咖啡酰基硅宁酸
2. 1. 4 线性关系考察 分别精密称取绿原酸和 3, 5-二咖啡酰基奎宁酸适量 , 加 50 甲醇制成每 1 m L 含绿原酸 0. 408 m g、3, 5-二咖啡酰奎宁酸 0. 278 mg 的混合溶液 。精密吸取 1、2、4、6、8 m L和 10 mL, 置 10 mL 量瓶中 , 加 50 甲醇至刻度 , 摇匀 , 制成系列 对照品溶液 , 按上述色谱条件进样 10 μL, 以进样量 为横坐标 , 峰面积为纵坐标计算 , 得绿原酸的回归方 程为 :Y =2 703. 3X - 115. 47, r =0. 999 8, 线性范围 为 0. 408 ～ 4. 080 μg;3, 5-二咖啡酰奎宁酸的回归方 程为 :Y =3 801. 9X +84. 66, r =0. 999 9, 线性范围为 0. 278 ～ 2. 780 μg。 2. 1. 5 精密度试验 精密吸取上述系列对照品溶 液之 4(6→10 mL)10 μL, 连续进样 5 次 , 分别测定 峰面积 , 绿原酸和 3, 5-二咖啡酰基奎宁酸的 RSD 分 别为 0. 80 , 0. 53 。 2. 1. 6 重复性试验 取提取物 C, 按供试品溶液制 备方法制备 5份供试液 , 依法测定 , 计得绿原酸平均 含量为 5. 68 (RSD =0. 85 ), 3, 5-二咖啡酰基奎 宁酸平均含量为 1. 24 (RSD =1. 28 )。 2. 1. 7 稳定性试验 取同一份供试品溶液 , 每隔 2
和 3, 5-二咖啡酰基奎宁酸对照品溶液 , 按 2. 1. 2项 下操作 , 测定 , 计算回收率 , 结果见表 1、表 2。
表 1
绿原酸回 收率测定结果 (n =5)
样品量 加入量 测得量 回收率 平均回收率 RSD
/mg
/m g
/m g
/
/
/
0. 563 8 0. 626 1. 178 1 98. 13
3种经典工艺生产的金银花提取物中绿原酸类成分含量比较
陈有根 , 王志斌 , 戴俊东 (北京市药品检验所 , 北京 100035)
关键词 :金银花提取物 ;绿原 酸 ;3, 5-二咖啡酰基奎宁酸 ;总绿原酸 摘要 :目的 :比较 3种经典工艺生产的金银花提取物中绿原 酸 、3, 5-二咖啡酰 基奎宁酸和 总绿原酸的 含量差异 。 方 法 :用 经典的水 -醇法 、石 -硫法和改良石 -硫法生产金银花提取物 , 用 高效液相 -梯 度洗脱 法测定 3种提取 物中绿 原酸和 3, 5-二 咖啡酰基奎宁酸的含 量 , 用分光光度法测定 3种提取物中总绿原酸含量 。 结果 :3种提取物中绿原 酸含量分别为 5. 03 、 4. 01 、5. 68 , 3, 5-二咖 啡 酰 奎 宁 酸 含 量 分 别 为 0. 41 、 0. 73 、 1. 24 , 总 绿 原 酸 含 量 分 别 为 13. 53 、 19. 85 、 27. 87 。 结论 :改良石 -硫法生产的金银花提取物中绿原酸 、3, 5-二咖啡酰基奎宁酸和总绿原酸含量最高 。 中图分类号 :R 284. 2 文献标识码 :A 文章编号 :1001-1528(2007)03-0362-03
[ 2] 高锦明 , 张鞍灵 , 张康 健 , 等. 绿 原酸分 布 、提取 与生 物活性 研 究 [ J] . 西北林学院学报 , 1999, 14(2):73-74.
[ 3] 顾利红 , 朱 品业. 日光 和温 度对绿 原酸 供试 液稳 定性的 影响 [ J] . 中成药 , 1999, 21(11):568-569.
收稿日期 :2006-02-16 基金来源 :科技部 “十五 ”国家重大科技专项 “创新药物和中药现代化 ”专题 。 编号 :2001BA 701A 36-2。 作者简介 :陈有根 (1965 ～ ), 男 , 博士 , 副主任药师, 研究方向 :中药分析 。 联系电话 :010-66121225。
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精密称定 , 分别置 10 mL 量瓶中 , 加 50 甲醇至刻 度 , 振摇使完全溶解 (B 有少量不溶物 ), 0. 45 μm 微 孔滤膜滤过 , 取续滤液 , 备用 。 2. 1. 3 系统适应性 在上述色谱条件下测定 , 结果 表明 , 理论塔板数以绿原酸峰计算为 51 390, 以 3, 5二咖啡酰基奎宁酸峰计算为 395 500。 (见图 1)
含量 /
RSD /
0. 41
0. 95
0. 73
1. 13
1. 24
1. 28
2. 2 总绿原酸含量测定 2. 2. 1 供试品溶液的制备 精密称取提取物 A、B 细粉各 50 mg, 提取物 C 细粉 25 m g, 分别置 50 mL 量瓶 中 , 加甲 醇 40 mL, 置 超声 清洗 器 中 振荡 10 m in, 取出 , 冷却至室温后 , 加甲醇至刻 度 , 摇匀 , 滤 过 , 精密量取续滤液 1 m L, 置 10 m L量瓶中 , 加甲醇 至刻度 , 摇匀 , 即得 。 2. 2. 2 检测波长的确定 在 200 ～ 400 nm 波长范 围内对绿原酸对照品和供试品溶液进行扫描 , 结果 表明 , 对照品溶液和供试品在此范围内有 3个吸收 峰 , 即 327、243、220 nm , 其中 327 nm 处吸 收最强 , 因此 , 选择 327 nm 作为检测波长 。 2. 2. 3 线性关系考察 精密称取绿原酸对照品 , 加 甲醇使溶解制成每 1 m L 含绿原酸 0. 098 m g的对照 品溶液 。 精密量取 对照品溶液 0. 4、0. 8、1. 2、1. 6、
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2. 0 mL, 置 10 mL 量瓶中 , 分别加甲醇至刻度 , 摇匀 。
以甲醇为空白 , 在 327 nm 的波长处测定吸收度 , 以
洗器中振荡 10 m in, 取出 , 冷却至室温后 , 加甲醇至
2. 1. 9 样品测定 取上述 3种工艺生产的金银花
提取物 , 按 2. 1. 2项下操作制备供试品溶液各 3份 ,
按上述色谱条件测定含量 , 结果见表 3。
表 3
样品 测定结果 (n =3)
样品
A B C
绿原酸
含量 /
RSD /
5. 03
0. 87
4. 01
0. 75
5. 68
0. 85
3, 5-二咖啡酸基奎宁酸
对照品浓度 (C )为横坐标 , 吸收度 (A)为纵坐标 , 计
算回归方程为 A =0. 047 7C +0. 002 19, r =0. 999 2
(n =3), 线性范围为 3. 92 ～ 19. 6 μg /m L。
2. 2. 4 精密度试验 取提取物 C 细粉 25 m g, 精密
称定 , 置 50 m L 量瓶中 , 加入 40 m L甲醇 , 置超声清
Ag ilent-1100高效液相色谱仪 , 四元泵 , 自动进 样器 , 柱 温 箱 , DAD 二极 管 阵列 检 测器 , A gilen tA l
0. 02工作站 。 岛津 UV-2450PC 型可见 -紫外分光光 度仪 。 1. 2 试药
绿原酸对照品 (中国药品生物制品检定所 ), 3, 5-二咖啡酰基奎宁酸对照品 (自制 , 纯度 >98 );金 银花药材 (采自山东省平邑县白彦镇 );乙腈为色谱 纯 , 其它试剂均为分析纯 。 2 方法与结果 2. 1 绿原酸 、3, 5—二咖啡酰基奎宁酸含量测定 2. 1. 1 色谱条件 色谱柱 :K rom asil C18 (4. 6 mm × 250 mm , 5 μm );流动相 :A 为乙腈 , B为 0. 3 磷酸 溶液 , A:0→20 m in 5 →10 , 20→ 45 m in 10 → 26 ;流速 :1 mL /m im;检测波 长 :327 nm ;柱温 :30 ℃。 2. 1. 2 供试品溶液的制备 取金银花药材 200 g, 3 份 , 分别照文献 [ 1 ～ 3] 所收载的 石 -硫法和改 良石 -硫 法进行提取 (两次煎煮用水量均分别为 20倍和 12 倍 )、处理 , 得浓缩液 , 继续减压浓缩得稠膏 , 真空干 燥 , 粉碎成细粉 , 分别得 3种金银花提取物 A、B、C。 取提取物 A、B 细粉各 75 mg、提取物 C 细粉 25 m g,
2007年 3月 第 29卷 第 3期
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M a rch 2007 V o .l 29 N o. 3
Hale Waihona Puke 参考文献 :[ 1] 张鞍灵 , 马 琼 , 高锦 明 , 等. 绿原 酸及 其类 似物 与生 物活 性 [ J]. 中草药 , 2001, 32(2):173-175.
金银 花为常 用中药 , 来 源于 忍冬 科植物 忍冬 Lon icera japon ica Thunb. 的 干燥 花 蕾 , 具有 清 热解 毒 , 凉散风热的功能 。 金银花提取物是生产多种中 成药制剂的中间原料 。 《中国药典 》和 《部颁标准 》 中收载的金银花提取物的生产工艺有 3种 , 即 :水 醇法[ 1] 、石 -硫法 [ 2] 和改良石 -硫法 [ 3] , 它们均属于有
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不同产地加工方法的金银花中绿原酸_木犀草苷含量及指纹图谱比较_高晓艳
212.62 106.10 -0.42
S11
S10
S9
S8
S7 S6
S5
S4
S3
S2
S1
R
0.00 8.69 17.38 26.07 34.76 43.45 52.14 60.83
3 批，按上述 HPLC 指纹图谱方法测定， 见图 1，采用国家药典会公布的“中药色 谱指纹图谱相似度评价系统 B 版”软件
பைடு நூலகம்
292
2010 第十二卷 第二期 ★Vol.12 No.2
实验结果表明，金银花的产地加工方法中，微波 杀青烘干、滚筒杀青烘干两种方法所得金银花的绿 原 酸 、木 犀 草 苷 含 量 较 高 ，烤 房 烘 干 方 法 仅 次 之 ，以 上 3 种方法均高于晒干方法；而在 HPLC 指纹图谱 中，不同的产地加工方法得到的金银花的色谱峰数 量、大小也不同。但是无论采用何种加工方法，为获 得优质的金银花，关键是选择最佳的工艺参数（如温 度、时间等）。
425.67
2. 供试品溶液的制备
取粉末约 0.2g，精密称定，置 50mL 具 319.15
塞锥形瓶中，精密加入 50％甲醇 25mL，超 声提取 30min，过滤，取续滤液，即得。
3. 参照物溶液的制备 取 绿 原 酸 对 照 品 适 量 ，精 密 称 定 ，加 50% 甲 醇 适 量 溶 解 ， 并 稀 释 制 成 66.22μg·mL-1 的溶液，即得。 4. 不同加工方法的比较 将不同产地加工方法的金银花各 2~
Contents of Chlorogenic Acid and Luteolin-7-glu of Flos Lonicerae and Fingerprint Comparison Gao Xiaoyan, Ling Ya, Xiao Wei
金银花中绿原酸提取方法的研究
２ 方 法
２ ． １ 金银花提取 工艺的比较 ２ ． １ ． １ 水 煎煮 法 取 金银 花 ３ ０ ｇ ＋ ｌ Ｏ倍 量水 一 煎 煮 ３
取金银 花 ２ ０ ｇ ＋ ｌ Ｏ倍 量 乙醇一
１ ． ８ ７ ａ ｒ ｇ 置２ ５ ｍ Ｌ容 量瓶 中 ，加 ５ ０ ％甲醇使溶解 并稀释
裹５ 验 证 试 验 结 果
参 考 文 献
川 盂 日增 。 石建平 ． 等。 金银花 中绿原酸的提取工艺及抗 菌
２ ０ ０ ８ 。 ｌ １ （ ８ ） ： ９ ４ ２ — ９ ４ ３ ．
【 ３ 】 张春华， 严云良． 医药数理统计（ 第 ｌ 版） 【 ＾ ＝ Ｉ 】 ． 北京： 科学出
中圈分类号 ： Ｒ ２ ８ ４ ． ２ 文献标识码 ： Ａ
Ｓ ｔ ｕ ｄ ｙ ｏ ｎ Ｅｘ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｃｈ ｌ ｏ ｒ ｏ ｇ ｅ ｎ ｉ ｃ Ａｃ ｉ ｄ ｉ ｎ Ｆ ｌ ｏ ｓ Ｌｏ ｎ ｉ ｃ ｅ ｒ ａ ｅ
Ｗ ＡＮＧ Ｙａ ｎ ｇ － ｑ ｉ ｕ， ＨＥ Ｍｉ ａ ｏ
２ ． １ ． ２ 乙醇 回流提 取
回流提取 ３ 次， ｌ ｈ ／ 次一合并提取液一减压浓缩至 ｌ： １ 的浸膏 。 ２ ． １ ． ３ 酸 醇 回 流提 取 取 金银 花 ２ ０ ｇ ＋ １ ０倍 量 乙 醇 （ ｐ Ｈ ４ ） 一 回流提取 ３次 ， ｌ ｈ ／果 与 分 析
３ ． １ 提取工艺 比较
通过 ３ 种 提取 工艺 比较 ， 水 提结果偏低 ， 此法不 可 行； 醇提 和酸 醇提法绿原 酸转移率较高 ， 二 者差别不大 （ 表２ ） 。 考虑实验简便 ， 故选择醇提金银花 ， 制定 因素水 平表 ， 做正交试验 优选最佳工艺 。
金银花中绿原酸成份的提取方法分析研究
金银花中绿原酸成份的提取方法分析研究陈茜【摘要】目的对金银花中绿原酸的提取方法进行分析研究.方法针对绿原酸的性质,设计了纯乙醇提取、50％乙醇提取、水提取与超声波提取方法对比实验、醇提法与超声波提取方法对比实验,并对每种提取方法的优缺点进行了分析.结果50％的乙醇水溶液比纯乙醇提取效果好.与传统的醇提取法相比较,超声波法提取绿原酸的提取效果更好.研究亦表明,增加乙醇的浓度,提取绿原酸的浓度会增加,但是当绿原酸浓度到达最高峰后,随着乙醇浓度的增加,绿原酸的含量却呈降低趋势.传统醇提法乙醇的最佳浓度是70％,超声波醇提法乙醇的最佳浓度是60％.结论与水提法相比较,醇提法提取效果较好,绿原酸的提取效率也较高,加入超声波后提取效率变得更高,提取物绿原酸的含量也会增加.【期刊名称】《中国中医药现代远程教育》【年(卷),期】2018(016)005【总页数】3页(P88-90)【关键词】金银花;绿原酸;超声波;乙醇提取;中药化学【作者】陈茜【作者单位】锦州市妇婴医院中药局,辽宁锦州121000【正文语种】中文金银花为常用中药，具有清热解毒，保肝利胆、凉风散热，抗病毒等功能[1]。
近年来研究表明，金银花还具有抗人类免疫缺陷病毒、抗肿瘤的功效，具有广阔的临床应用前景。
金银花的主要成分包括绿原酸、肌醇、木犀草素、异绿原酸以及三萜皂苷等，其中，绿原酸是金银花的抗菌有效成分，一般常用绿原酸的含量高低来评价金银花质量的好坏[2]。
绿原酸是一种有机酸，同时含有羧基和邻二酚羟基，易溶于醇溶液、丙酮和水等溶剂。
当前，从金银花当中提取出绿原酸的常用提取方法包括传统的水提法、乙醇提取法、酶提取法等。
本文将对绿原酸的常用提取方法进行实验和分析总结，并根据绿原酸的性质，设计出了水提取、纯乙醇提取、50%乙醇提取、超声波提取方法与醇提法对比实验、水提法与超声波提取方法对比实验，对每种提取方法的优缺点进行了分析。
1 材料与方法1.1 仪器和试药电子天平、烧杯若干、量筒、锥形瓶、漏斗、超声波发生器（郑州予华仪器制造有限公司）、离心机（江苏天瑞仪器股份有限公司）、高效液相色谱仪（上海仪电分析仪器有限公司）。
金银花中绿原酸的提取及纯化方法比较
维普资讯
第２ ６卷第 １ 期
２０ ０ ６年 ３月
林 产 化 学 与 工 业
Ｃｈ ｍｉｔｙ ａ ｄ Ｉ ｄ ｓｒ ｆ Ｆ ｒ ｓ ｏ ｕ ｔ ｅ ｓｒ ｎ ｎ ｕ ｔ ｏ ｏ ｅ ｔＰｒ ｄ ｃｓ ｙ
Ｖｏ ． ６ ．１ １２ Ｎｏ Ｍｆ．２ ６ ｉ ｒ ｏｏ
中图分类号 ：Ｑ ｌ Ｒ ８ ． Ｔ ｇ ；２ ４ ２
文献标识码 ： Ａ
文章编号 ：２３— ４ ７ ２ ０ ） １ Ｏ １ Ｏ ０ ５ ２ １ （ ０６ ０ 一 １６一 ５
Ｃｏ ａ ｉｏ ｆＴｅ ｈ ｏ ｏ ｉ ｓ ｏ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ ｔａ ｔ ｎ ａ ｄ Ｐ ｒｆｃ ｔ ｎ ｏ ｍｐ ｒｓ ｎ ｏ ｃ ｎ ｌ ｇ ｅ ｆ Ｅｘｒ ｃｉ ｎ ｕ ｉｉａ ｉ ｆ ｏ ｏ
论 述 和 比较 ， 且 结 合 实 际 生 产 应 用 的 可 行 性 ， 出 了合 理 的操 作 工 艺 ： 用 水 提 法 提 取 出金 银 花 并 提 先
中的有 效成 分， 再用大孔树脂法对提 出物进行纯化 ， 最终可得 到提取 率及纯度都较 高的绿原酸。
ＸＩ ＡＮＧ Ｎ Ｚ
关键词 ： 金银花 ； 原酸 ； 取 ； 绿 提 纯化
的含量 随提取 时 间延长 而逐 步降低 ， 随浓缩 干燥 时 间延长 、 度升 高而 明显 降低 ； 亦 温 以水 提减 压浓 缩 、 真
空 干燥所 得绿 原 酸含量 较高 。 １ ２ 石硫 法 （ ． 水提 石灰 乳法 ）
在金 银花 水提 液 中加入 石灰 乳 ， 绿原 酸 与钙 盐 生 成 沉 淀 ， 然后 用 硫 酸 分 解 沉 淀 ， 程 见 文 献 ［ ］ 流 ３ 。 该 法操 作简单 、 济 ， 提取 物 和绿 原酸 得 率 均较 低 Ｊ其 原 因 可能 有 ： ） 原 酸 是 奎尼 酸 和 咖 啡 酸 的 经 但 ， １绿
第２ ６卷第 １ 期
２０ ０ ６年 ３月
林 产 化 学 与 工 业
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中的有 效成 分， 再用大孔树脂法对提 出物进行纯化 ， 最终可得 到提取 率及纯度都较 高的绿原酸。
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3种经典工艺生产的金银花提取物中糖类成分含量比较
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金银花的有效成分及其提取工艺研究
中，突兀着一座座零乱的水泥砖瓦建筑．给人以极不协调 之感。
－２．２绿化植物配置不合理，整体形象不鲜明。洞庭湖区小 城镇景观建设在植物的搭配种植上忽略了城镇本身的乡土物 种。有些地方不顾客观实际，盲目求新、求景点丰富，照抄照搬 大城市绿化植物配置．盲目引进外来树种．大搞大树移植、大 模纹色块、大草坪，营造的景观与周边环境不协调．费用高；有 的采用微地型、景石、大小黄杨球及植物模纹，这一块、那一 块，机械地堆砌在绿地上。显得支离破碎，破坏了绿地的自然 风格。
［６］吴二喜．忍冬与灰毡毛忍冬微量元素的分析．中草药， １９９８，１９（６）：４５－４７．
［７］李永梅，王天志，王志霄．细毡毛忍冬花蕾化学成分研 究．中国中药杂志，２００１，２６（１）：４５—打．
［８］符史良，钟杰平，李海霞等．从金银花中提取绿原酸的 工艺研究．广东海洋大学学报，２００７，２７ｆ４）：７０一７３．
比较和优化研究．中成药，２０００，２２ｆ６）：４０２． ［３］黄丽瑛．中药金银花化学成分的研究．中草药，１９９６，２７
（１１）：６４５—“７．
２万１４方数据
‘
［４］娄红祥，郎伟君，吕木坚．金银花水溶性化合物的分离 与结构确定．中草药。１９９６，２７（４）：１９５．
［５］陈昌祥，王薇薇，倪伟等．金银花花蕾中三萜皂甙．云南 植物研究．２０００，２２（２）：２０１－２０８．
１．洞庭湖区的位置和范围 洞庭湖位于荆江南岸，跨湘、鄂两省，接纳湘、资、沅、澧四 水，吞吐长江，是调蓄长江洪水的主要湖泊，为我国第二大淡 水湖。因整个洞庭湖处在湖南省境内。故习惯上认为洞庭湖区 仅指湖南省北部滨湖地区，而在湖北省境内的部分则算作江 汉平原的西南隅。按地理坐标划分：西起东经１１１０１２．５’，东至 东经１１３０４３．６’，东西之间的直线距离２４３千米左右：南抵北纬 ２８。１７．６’，北止北纬２９０５７’，南北之间的直线距离约为１８３千米。 根据行政区划的范围，洞庭湖区包括常德、益阳、岳阳３个地市 的武陵、鼎城、安乡、汉寿、津市、澧县、ｌ临澧、南县、益阳、沅江、 华容、湘阴、岳阳汩罗等１６个县（市、区）共计３８９个乡（镇）及１５ 个国营农场（涔澹、西洞庭、西湖、贺家山、茶盘洲、千山红、大 通湖、北洲子、金盆、南湾湖、钱粮湖、君山、建新、屈原、黄盖 湖）的全部，另有桃源的大部分，石门、宁乡及平章三县的一部 分，占湖南省土地面积的１４．９６％。 、２．洞庭湖区小城镇景观设计的现状及问题 近些年来，洞庭湖区的小城镇经济有了一定的发展，为提 升其整体形象，在道路绿化建设和主要城镇经济区景观培植 方面投入了大量的资金，在注重提高经济效益的同时，也开始 注重生态环境景观效益的提高．如：在主干道种植行道树．在 道路交叉口中心区进行绿化种植等等。 尽管洞庭湖区小城镇建设取得了一定的成绩，然而．在景 观特色的营造方面仍存在以下主要问题： ２．１景观环境特色缺乏明确定位。洞庭湖区小城镇景观 的建设缺乏正确定位，导致盲目模仿大城市的大广场、大 草皮、宽马路，出现求大求全的景观建造．与小城镇的空间 形态格格不入。洞庭湖区水系发达，景色天成，圩垸内沟渠 如网交织，绿树荫荫，碧水涟涟，可惜小城镇的建筑物却不 能与一派秀美的湖乡水色相辉映．在如画的自然景色之
金银花中绿原酸提取方法的比较和优化研究
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广西师范学院学报（自然科学版）
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收稿日期：#""#$!#$!" 基金项目：广西师范学院青年教师科研基金 作者简介：许东颖（!M&#O），女，海南省人，讲师，主要从事分离工程及相关学科的研究及教学工作)
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广 西 师 范 学 院 学 报（自 然 科 学 版）
关键词：金银花；绿原酸；提取 中图分类号：2/#()/! 文献标识码：3
金银花又称 双 花、银 花，它 是 忍 冬 科 植 物 忍 冬 456789:;<;-5678;=1>6?)、红 腺 忍 冬 456789:;1@$ -5AB;>8;C7D)山银花 456789:;856E>F;G8)毛花柱忍冬 456789:;H;F@FI@B;J91H)的干燥花雷)是清热解 毒、凉散风热的常用中药［!!#］，其主要有效成分为绿原酸，异绿原酸［(］，它们是奎宁酸（K>7678;87H）和咖 啡酸（L5EE978;87H）的酯)绿原酸分子量为(*’)(，溶点#"%0［’］，易溶于水、醇、丙酮等溶剂中)绿原酸药 用历史悠久，具有抗菌、抗病毒、保肝利胆之功效等)!M&"年以来对金银花的有效成分进行了提取，开始 采用螯合法，后改用铅盐法［*］，最后改为溶剂提取法，随着有效成分的含量和制剂稳定性的要求不断提 高，提取工艺亦不断改进)目前绿原酸主要从金银花中提取，在中药制剂中，绿原酸的提取方法有水提石 灰乳法、水提法、水提醇沉淀法、稀醇提取法等［/!%］多种常用方法)这几种方法得到绿原酸含量较低，金 银花得不到充分利用，导致资源浪费)稀醇提取法为目前较好的一种提取工艺，但得到绿原酸含量也不 高)在总结前人的工作和自己探索的基础上，提出一种新的稀醇提取方法的设想，为了保证抗菌有效成 分的提取完全，通过正交设计进行优化，对测定条件和影响因素进行了探讨，为金银花的醇提工艺提供 了科学依据)
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关键词：金银花；绿原酸；提取 中图分类号：2/#()/! 文献标识码：3
金银花又称 双 花、银 花，它 是 忍 冬 科 植 物 忍 冬 456789:;<;-5678;=1>6?)、红 腺 忍 冬 456789:;1@$ -5AB;>8;C7D)山银花 456789:;856E>F;G8)毛花柱忍冬 456789:;H;F@FI@B;J91H)的干燥花雷)是清热解 毒、凉散风热的常用中药［!!#］，其主要有效成分为绿原酸，异绿原酸［(］，它们是奎宁酸（K>7678;87H）和咖 啡酸（L5EE978;87H）的酯)绿原酸分子量为(*’)(，溶点#"%0［’］，易溶于水、醇、丙酮等溶剂中)绿原酸药 用历史悠久，具有抗菌、抗病毒、保肝利胆之功效等)!M&"年以来对金银花的有效成分进行了提取，开始 采用螯合法，后改用铅盐法［*］，最后改为溶剂提取法，随着有效成分的含量和制剂稳定性的要求不断提 高，提取工艺亦不断改进)目前绿原酸主要从金银花中提取，在中药制剂中，绿原酸的提取方法有水提石 灰乳法、水提法、水提醇沉淀法、稀醇提取法等［/!%］多种常用方法)这几种方法得到绿原酸含量较低，金 银花得不到充分利用，导致资源浪费)稀醇提取法为目前较好的一种提取工艺，但得到绿原酸含量也不 高)在总结前人的工作和自己探索的基础上，提出一种新的稀醇提取方法的设想，为了保证抗菌有效成 分的提取完全，通过正交设计进行优化，对测定条件和影响因素进行了探讨，为金银花的醇提工艺提供 了科学依据)
金银花不同加工方法对绿原酸含量的影响
临床医药文献杂志Journal of Clinical Medical 2018 年第 5 卷第 31 期2018 Vol.5 No.31178·实验研究·金银花不同加工方法对绿原酸含量的影响董琼，徐继朋（马应龙药业集团股份有限公司，湖北武汉 430064）【摘要】目的 探讨不同加工方法，对金银花中绿原酸含量的影响。
方法 采用硫磺熏蒸、滚筒杀青和蒸汽杀青三种加工方法对金银花进行加工，采用高效液相色谱法对金银花中的绿原酸进行测定。
结果 硫磺熏蒸、滚筒杀青和蒸汽杀青三种方法加工后，绿原酸的平均含量分别为4.08%、5.64%、4.34%。
结论 三种加工方法加工金银花，其中采用滚筒杀青加工，绿原酸提取率最高，且操作简便，质量稳定。
【关键词】金银花；绿原酸；硫磺熏蒸；滚筒杀青；蒸汽杀青【中图分类号】R283 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-8242.2018.31.178.01金银花是一种清热解毒的良药，它不仅能够宣散风热，还能够改清热解毒，用于各种热性病。
金银花中主要含绿原酸、异绿原酸、黄酮类物质，另外还含有少量的忍冬苷、肌醇、皂苷、挥发油等成分[1]。
近年来，临床对金银花的需求量更是逐年增加，但由于受到加工方式以及储存条件的影响，使得金银花药材的质量参差不齐。
有报道称，不同加工方法会影响金银花中部分化学成分的含量[2]。
本文旨在探讨不同加工方法对金银花中绿原酸含量的影响，现报道如下。
1 实验仪器与实验试剂1.1 实验仪器Agilent1260液相色谱仪（安捷伦科技有限公司）；FA1604电子天平（上海天平仪器厂）；HS3120超声仪（天津市恒奥科技发展有限公司）。
1.2 实验试剂与试药绿原酸标准品（中国药品生物制品检定所）；乙腈为色谱纯；甲醇为分析纯；纯化水；冰醋酸。
药材样品分别取材于山东省临沂市平邑县。
2 实验方法2.1 色谱条件色谱柱：Sino Chrome ODS-BP（250 mm×4.6 mm，5 μm）分析柱；流动相：乙腈—0.4%磷酸（15:85）；柱温：35℃；流速：1 mL/min；UVD检测波长：327 nm；进样量：20 μL。
不同加工方法金银花有效成分高效液相色谱比较分析
临床医药文献杂志Journal of Clinical Medical 2019 年第 6 卷第 13 期2019 Vol.6 No.13178・实验研究・不同加工方法金银花有效成分高效液相色谱比较分析陈朝晖，喻晶（马应龙药业集团股份有限公司，湖北武汉 430064）【摘要】目的 通过高效液相色谱法比较不同加工方法金银花有效成分的含量。
方法 收集经杀青烘干、土烤烘干、晒干三种不同加工方法加工的金银花样品，采用高效液相色谱法测定有机酸类、黄酮类的含量。
结果 杀青烘干和土烤样品有机酸含量高于晒干，有显著性差异（P＜0.05），黄酮类含量无显著性差异（P＞0.05）。
结论 杀青烘干等现代加工方法更有利于提升金银花品质。
【关键词】金银花；有机酸类；黄酮类；加工方法【中图分类号】R284.1 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-8242.2019.13.178.01金银花正名又称忍冬，自古便被誉为清热解毒的良药，因其性甘寒、气芳香，所以可清热却不伤胃，透达又可祛邪。
其功效主要是清热解毒，主治温病发热、热毒血痢、痈疽疔毒等。
现代研究已经证实存在于金银花中的绿原酸、木犀草苷、槲皮素等可以有效抑制金黄葡萄球菌、溶血性链球菌等多种上呼吸道感染致病病毒[1]。
不同产地对金银花的加工方法也各不相同，临床中缺少基于金银花不同加工方法对其有效成分含量的比较。
本研究中采用高效液相色谱法评价不同加工方法对其有效成份的影响。
1 仪器与试药1.1 仪器美国Agilent公司生产的高效液相色谱仪；电子分析天平；数控超声波清洗器。
1.2 试剂绿原酸对照品，木犀草苷、芦丁、槲皮素购自中国食品药品检定研究院。
异绿原酸A、异绿原酸C对照品购自成都曼思特生物科技有限公司，对照品纯度均高于98%。
乙腈、甲醇为色谱纯，磷酸、乙醇为分析纯。
1.3 材料收集于山东平邑县的金银花样品，经鉴定均为忍冬科植物忍冬的花蕾。
加工方法包括杀青烘干、土烤烘干、晒干三种。
正交试验比较金银花中绿原酸、异绿原酸A的提取工艺
摇 摇 金银花即忍冬的干燥花蕾,味甘,性寒,具有清 热解毒、疏风散热之功效。 金银花的活性成分主要 有黄酮类、有机酸类、挥发油、三萜类,其中以有机酸 类的绿原酸、异绿原酸生物活性显著,具有抗菌( 烟 曲霉、大肠埃希菌) [1 - 2] 、 抗氧化、 抗炎[3] 、 抗病毒, 参与人体血小板凝集和凝血因子的生成等作用[4] 。 因此,有机酸类的活性成分一直是衡量金银花提取 效率优劣的重要指标。
Comparison of extraction process for chlorogenic acid and isochlorogenic acid A from Lonicerae flos by orthogonal experiment
TANG Jie1 ,CHENG Qing鄄bing2 ,FU En鄄tao1 ,LIU Xiu鄄shu1 ,FAN Gao鄄fu1 ,FANG Li鄄bo1 (1. School of Bioengineering,Hefei Vocational and Technical College,Chaohu Anhui 238000;
省高校优秀青年人才支持重点项目( gxyqZD2017128) ; 校级自然科研项目(201514KJB001) [作者单 位] 1. 合 肥 职 业 技 术 学 院 生 物 工 程 学 院, 安 徽 巢 湖 238000;2. 安徽省合肥市食品药品检验中心,230000 [ 作者简介] 汤摇 洁(1985 - ) ,女,讲师.
本实验参照文献[5 -7] ,优化了一个简便的高效 液相色谱法( HPLC) 同时检测金银花中绿原酸及异 绿原酸 A 含量的方法,并采用正交设计的方法探讨 金银 花 提 取 工 艺 的 最 佳 条 件。 王 玥 等[8 -9] 运 用 HPLC 法已验证绿原酸作为单一指标回流法显著优