Mito-Tracker Green (线粒体绿色荧光探针
中波紫外线对人血小板线粒体DNA影响的初步观察
中波紫外线对人血小板线粒体DNA影响的初步观察[摘要]目的：观察中波紫外线对人血小板线粒体活性及线粒体dna的影响，探讨其作为评测光损伤敏感系统的可行性。
方法：以不同能量的中波紫外线照射人血小板，观察血小板线粒体活性及线粒体dna光化产物环丁烷嘧啶二聚体（cpds）含量的变化。
结果：接受不同能量中波紫外线照射的血小板，线粒体活性明显降低（p0.05，没有统计学差异；f组与g组p>0.05，没有统计学差异。
其余各组之间p<0.05，有统计学差异。
从图2可见，虽然uvb照射的剂量以1.41倍不断递增，但血小板线粒体光损伤产物cpds的含量并非直线上升，在c组到d组，以及f组到g组时可出现两个平台期。
3 讨论皮肤光老化是在日光照射条件下长期作用的结果。
虽然紫外线照射可直接损伤皮肤组织细胞的dna，但细胞核dna有酶修复系统，一过性的轻微损伤可能经过修复而无法检测，因此，光老化的研究中，寻找能保留光损伤的敏感载体非常有必要。
线粒体是人体细胞中除细胞核外唯一具有自身遗传物质（如dna）的细胞器。
其主要功能是通过呼吸链(电子传递链和氧化磷酸化系统)为细胞活动提供能量，并参与一些重要的代谢通路[5]。
线粒体dna的特点是缺乏组蛋白的保护并且没有完整的突变修复功能，因此mtdna的突变率远高于核dna突变[6]，这些特点使线粒体对损伤的反应非常敏感，线粒体dna突变及累积被认为是人类皮肤老化尤其是皮肤光老化的重要因素[2]。
而研究线粒体dna的变化需要排除核dna的影响，这是我们选择用不含核dna的血小板作为体外实验对象的原因。
光老化线粒体的损伤可表现为线粒体膜电位的降低，过氧化产物的增加，atp合成的减少等[7]。
从整体上而言，都是线粒体活性降低的表现之一。
我们以对皮肤的损伤强度比uva大约800～1000倍的中波紫外线（uvb）[8]照射血小板，从整体上观察照射前后血小板线粒体活性，以及mtdna光损伤产物cpds的变化，作为研究体外评价紫外线光损伤作用的参考指标。
线粒体活染色实验报告
线粒体活染色实验报告实验目的通过活染色技术观察和研究线粒体在细胞中的形态结构、数量和分布情况，进一步了解线粒体在细胞生物学过程中的功能和作用。
实验原理活染色是一种通过活体显微镜观察染色物在细胞中的分布和变化情况。
线粒体是细胞中重要的能量产生器，通过染色可以更直观地观察和研究线粒体的特征和状态。
本实验使用的线粒体活染色试剂为Mitotracker，它是一种荧光染料，可选择性地标记线粒体。
Mitotracker可以通过细胞膜进入细胞内，随着线粒体的活动而移动，通过检测荧光信号的分布和强度，可以直接观察线粒体在细胞中的运动和分布情况。
实验步骤1. 培养细胞：选择合适的细胞系，将其培养在含有适宜培养液的培养皿中，使细胞处于良好的生长状态。
2. 处理细胞：将培养好的细胞分为两组，一组为实验组，一组为对照组。
实验组细胞加入适量的Mitotracker活染试剂，对照组细胞不添加Mitotracker。
3. 孵育：将培养皿放入恒温培养箱中，以37C恒温孵育2小时，使Mitotracker 能充分进入细胞内，与线粒体结合。
4. 观察：将培养皿取出，用荧光显微镜观察细胞的荧光信号分布，并拍摄图像进行记录。
5. 分析：对实验组和对照组的观察结果进行比较分析，观察线粒体的数量、形态结构和分布情况变化。
实验结果通过荧光显微镜观察，我们发现实验组细胞中线粒体呈现出强烈的红色荧光信号，分布均匀且较为集中。
而对照组细胞中，没有观察到红色荧光信号，线粒体无特别明显的分布。
实验讨论1. 通过荧光显微镜观察线粒体荧光信号的数量、分布和形态结构变化，我们可以初步推测线粒体的活动程度和数量是否发生变化。
2. 通过与对照组细胞的比较，我们可以更准确地判断线粒体的特征和状态是否发生了变化。
3. 本实验结果表明，线粒体活染色技术可以用于研究线粒体在细胞功能和生物学过程中的作用和功能。
实验总结线粒体活染色技术是一种快速、准确的观察线粒体形态和特征的方法。
Lyso-Tracker Red (溶酶体红色荧光探针) 产品说明书
Lyso-Tracker Red (溶酶体红色荧光探针)产品简介：Lyso-Tracker Red 是一种溶酶体(lysosome)红色荧光探针，能通透细胞膜，可以用于活细胞溶酶体特异性荧光染色。
Lyso-Tracker Red 为采用Molecular Probes 公司的DND-99进行了荧光标记的带有弱碱性的荧光探针，其中仅弱碱可部分提供质子，以维持pH 在中性,可以选择性地滞留在偏酸性的溶酶体中，从而实现对于溶酶体的特异性荧光标记。
中性红(Neutral Red)和吖啶橙(Acridine Orange)也都可以对溶酶体进行荧光染色，但中性红和吖啶橙的染色缺乏特异性。
Lyso-Tracker Red 适用于活细胞溶酶体的荧光染色，但不适合用于固定细胞溶酶体的荧光染色。
Lyso-Tracker Red 分子的化学结构式参考图1。
图1. Lyso-Tracker Red 的化学结构式。
Lyso-Tracker Red 的分子式为C 20H 24BF 2N 5O ，分子量为399.25，最大激发波长为577nm ，最大发射波长为590nm 。
Lyso-Tracker Red 的激发光谱和发射光谱参考图2。
图2. Lyso-Tracker Red的激发光谱和发射光谱。
Lyso-Tracker Red 是嗜酸性荧光探针，用于活细胞内酸性细胞器的标记和示踪。
这些探针具有几个重要特征，包括高度选择靶向酸性细胞器和在纳摩尔浓度有效标记活细胞。
Lyso-Tracker Red 必须在极低浓度(通常约50nM)下才能获得优异的选择性。
这些探针的滞留(retention)机制虽然没有被研究清楚，但很可能与酸性细胞器的质子化和滞留性有关，Lyso-Tracker Red 探针的内吞作用动力学研究显示染料进入活细胞的摄入时间仅几秒即可。
然而，这些溶酶体探针会导致溶酶体被碱化，长期孵育会诱使溶酶体pH 值的增加。
mitotracker red染色线粒体结果描述
mitotracker red染色线粒体结果描述线粒体是细胞内的重要细胞器之一，其在细胞内的功能和代谢调控中起着重要的作用。
为了研究线粒体的分布和形态变化，科学家们开发了一种名为Mitotracker Red的荧光探针，通过其染色可以直观地观察线粒体在细胞中的分布和形态。
本文通过对Mitotracker Red染色线粒体结果进行描述，并结合相关研究进展，深入探讨了线粒体在细胞代谢调控、疾病发生发展等方面的重要作用。
第一章：Mitotracker Red染色技术原理及应用1.1 Mitotracker Red荧光探针原理Mitotracker Red是一种荧光染料，属于结合于活性氧物质、质膜电位等特性进行定位及定量分析。
其特点是可以通过荧光显微镜直接观察到线粒体，并且对活动和不活动状态下的线粒体都有较好的染色效果。
1.2 Mitotracker Red染色技术应用Mitotracker Red染色技术广泛应用于生物学、医学等领域。
例如，在细胞生物学研究中，可以通过Mitotracker Red染色观察线粒体在细胞中的分布和形态，研究线粒体的动态变化；在疾病研究中，可以通过Mitotracker Red染色评估线粒体的功能和形态变化，探究线粒体在疾病发生发展中的作用。
第二章：Mitotracker Red染色技术在细胞代谢调控中的应用2.1 线粒体与细胞代谢调控线粒体是细胞内能量代谢的关键场所，通过氧化还原反应产生ATP等能量物质。
线粒体功能异常与多种代谢性疾病如肥胖、2型糖尿病等密切相关。
Mitotracker Red染色技术可以直观地观察到线粒体分布和形态变化，在探究细胞代谢调控机制中起到重要作用。
2.2 Mitotracker Red染色技术在脂肪酸氧化调控中的应用脂肪酸氧化是重要的能量产生途径之一，在一些相关性肥胖和脂质代谢失调的疾病中，线粒体的功能异常与脂肪酸氧化调控异常密切相关。
通过Mitotracker Red染色技术，可以直接观察到线粒体在脂肪酸氧化过程中的分布和形态变化，进一步探究线粒体在脂肪酸氧化调控中的作用机制。
线粒体红色荧光探针（MitoTrackerRedCMXRos）
线粒体红⾊荧光探针（MitoTrackerRedCMXRos）产品简介：MitoTracker Red CMXRos是⼀种红⾊荧光染料，⽤于活细胞线粒体的染⾊。
MitoTracker Red CMXRos是⼀种细胞渗透型的X-rosamine衍⽣物，包含标记线粒体的弱巯基反应性的氯甲基官能团。
本品是⼀种氧化型的红⾊荧光染料，只需简单孵育细胞，即可被动运输穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上，该染料的积累取决于膜电位的⾼低。
⼀旦线粒体被染⾊后，还能根据后续实验的需求进⾏固定（醛类固定剂如甲醛）和透化（醛类去污剂如Triton X-100），探针依然维持在细胞内。
因为MitoTracker Red CMXRos的红⾊荧光与其他的绿⾊荧光探针具有良好的分辨率，因此本品适合双标实验。
虽然传统的线粒体荧光探针如TMR和罗丹明123，也能很容易的聚集在功能线粒体上，但是⼀旦线粒体膜电位丧失即会被洗掉，从⽽在⼀些需要细胞进⾏醛类固定或者包含线粒体能量状态影响因⼦的实验中，使其应⽤⼤受限制。
基本信息：规格50µg产品形式粉末Ex (nm)579Em (nm)599分⼦量531.5236溶剂DMSO产品应⽤标准实测：（由美仑细胞⽣物学项⽬组独⽴完成）本品配成 1mM 储存液后为紫⾊⾊液体，溶液澄清度且颜⾊检测⽆可见异物；然后进⾏荧光染⾊检测：⼯作条件：荧光显微镜，C6 细胞，400×，⼯作浓度 500nM，孵育45min。
结果：经染⾊，在40倍物镜下可看到细胞内线粒体被染上清晰的红⾊荧光。
储存条件：-20℃，避光防潮密闭⼲燥操作说明（仅供参考）1. 储存液的配制本品是以粉末形式提供，使⽤前需将本品回温⾄室温。
之后使⽤细胞培养级别的⽆⽔DMSO将其充分溶解⾄终浓度1 mM，即向50 µg粉末中加⼊94 µL DMSO即可。
【注】可根据单次的使⽤量将储存液分装后放到-20℃避光，避免反复冻融。
MitoTracker
MitoTracker®Red CMXRos线粒体红色荧光探针使用说明货号:M9940规格:50μg保存:-20℃避光干燥保存。
产品说明：MitoTracker®Red CMXRos是一种细胞渗透型的X-rosamine衍生物，包含标记线粒体的弱巯基反应性的氯甲基官能团。
本品是一种氧化型的红色荧光染料（Ex=579nm，Em=599nm），只需简单孵育细胞，即可被动运输穿过细胞膜并直接聚集在活性线粒体上。
一旦线粒体被染色后，还能根据后续实验的需求进行固定（醛类固定剂如甲醛）和透化（醛类去污剂如Triton X-100），探针依然维持在细胞内。
本品适合双标实验，因其红色荧光与其他的绿色荧光探针具有良好的分辨率。
虽然传统的线粒体荧光探针如TMR和罗丹明123，也能很容易的聚集在功能线粒体上，但是一旦线粒体膜电位丧失即会被洗掉，从而在一些需要细胞进行醛类固定或者包含线粒体能量状态影响因子的实验中，使其应用大受限制。
产品性质：CAS号（CAS NO.）：167095-09-2分子式（Formula）：C32H32Cl2N2O分子量（Molecular weight）：531.52外观（Appearance）:紫色固体激发波长（Ex）:579nm发射波长（Em）:599nm结构式（Structure）:使用方法1.储存液的配制本品是以粉末形式提供，使用前需将本品回温至室温。
之后使用细胞培养级别的无水DMSO 将其充分溶解至终浓度1mM。
本品M.Wt.=531.52g/mol，换算下来，50μg粉末只需加入94μL DMSO即可得到1mM储存液。
可根据单次的使用量将储存液分装后放到-20℃避光，避免反复冻融。
2.工作液的配制根据不同的实验目的使用不同的探针浓度，以下的起始操作条件仅作参考，可根据细胞类型和其他的相关因素如细胞或组织的透化等进行适当调整。
用适当的缓冲液或者细胞培养基稀释1mM储存液至工作液浓度。
mito tracker green激发波长和发射波长
mito tracker green激发波长和发射波长1. 引言1.1 概述本文旨在探讨Mito Tracker Green（一个用于细胞成像的荧光染料）的激发波长和发射波长相关性，并通过实验设计和方法来验证这种关联关系。
1.2 文章结构本文主要包含五个部分。
首先是引言，对研究的背景和目的进行概述。
其次是Mito Tracker Green激发波长和发射波长的介绍，包括其基本特性及应用领域。
随后是实验设计与方法，详细描述了所使用的材料、试剂以及实验步骤。
然后是结果与讨论，总结实验结果并对激发波长和发射波长之间的相关性进行分析。
最后是结论与展望，总结研究成果并提出未来研究方向。
1.3 目的近年来，随着细胞生物学研究的深入，荧光显微镜技术在观察细胞内物质分布和代谢活动中扮演着重要角色。
Mito Tracker Green作为一种用于标记线粒体、监测线粒体功能以及评估细胞健康状况的荧光染料，其激发波长和发射波长对于实现精确成像具有重要影响。
因此，本研究旨在探究Mito Tracker Green的激发波长和发射波长之间的关系，并为细胞学领域的研究提供可靠依据。
通过深入理解激发波长和发射波长的特性，将能够更好地应用Mito Tracker Green进行单细胞或多细胞实时监测，为相关生物学研究提供解决方案，同时也可能推动该染料在医学诊断领域的应用。
2. Mito Tracker Green 激发波长和发射波长2.1 Mito Tracker Green 简介Mito Tracker Green是一种常用的细胞染色剂，广泛应用于生物学研究中。
它属于荧光分子探针，可以被激发产生绿色荧光信号。
Mito Tracker Green主要用于标记线粒体，在细胞内的动态分布和功能研究中起着重要的作用。
2.2 激发波长Mito Tracker Green的激发波长为490纳米。
当暴露在光源中时，该分子能够吸收来自490纳米波长的光能。
线粒体荧光染实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解线粒体在细胞中的分布和形态；2. 掌握线粒体荧光染色的原理和方法；3. 观察线粒体在细胞中的动态变化。
二、实验原理线粒体是细胞内的能量工厂，其主要功能是通过氧化磷酸化产生能量。
线粒体荧光染色是一种常用的细胞生物学实验技术，通过特异性染色剂与线粒体结合，使线粒体在荧光显微镜下发出荧光，从而实现对线粒体的观察。
三、实验材料1. 细胞样本：小鼠成纤维细胞；2. 荧光染料：线粒体荧光染料（例如，MitoTracker Green FM、Mitochondria Red FM等）；3. 实验器材：荧光显微镜、离心管、移液器、吸管、培养皿、细胞培养箱等。
四、实验步骤1. 细胞培养：将小鼠成纤维细胞接种于培养皿中，置于细胞培养箱中培养至对数生长期。
2. 线粒体荧光染色：取对数生长期的细胞，用磷酸盐缓冲盐溶液（PBS）洗涤2次，弃去上清液。
3. 加入线粒体荧光染料：向细胞中加入适量的线粒体荧光染料，轻轻振荡均匀，使染料充分与细胞结合。
4. 遮光处理：将细胞置于避光环境中，静置30分钟，使染料与线粒体充分结合。
5. 洗涤：用PBS洗涤细胞2次，弃去上清液。
6. 荧光显微镜观察：将细胞置于荧光显微镜下，使用适当波长的激发光和发射光，观察线粒体的荧光。
7. 数据采集：使用图像采集系统采集线粒体的荧光图像，并进行统计分析。
1. 在荧光显微镜下，观察到细胞内的线粒体呈绿色荧光，表明线粒体已被成功染色。
2. 通过图像采集系统，得到线粒体的荧光图像，可以进行线粒体形态、分布、数量的统计分析。
3. 观察线粒体在细胞中的动态变化，发现线粒体在细胞内不断运动，具有一定的流动性。
六、实验讨论1. 线粒体荧光染色是一种常用的细胞生物学实验技术，通过特异性染色剂与线粒体结合，使线粒体在荧光显微镜下发出荧光，从而实现对线粒体的观察。
2. 本实验中，使用线粒体荧光染料对小鼠成纤维细胞进行染色，成功观察到细胞内的线粒体。
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Mito-Tracker Green (线粒体绿色荧光探针)产品简介：Mito-Tracker Green 是一种线粒体(mitochondria)绿色荧光探针，可以用于活细胞线粒体特异性荧光染色。
Mito-Tracker Green为采用Molecular Probes公司的carbocyanine进行了荧光标记的一种Mito-Tracker，分子量为671.88，可以用作线粒体特异性的荧光探针。
和rhodamine 123或JC-1相比，Mito-Tracker Green对于线粒体的染色不依赖于线粒体膜电位。
Mito-Tracker Green可以用于对活细胞的染色，但染色后如果固定会导致染色消退。
Mito-Tracker Green呈绿色荧光，检测时的最大激发波长为490nm，最大发射波长为516nm。
按最终工作浓度为20-200nM计算，可以配制约370-3700ml Mito-Tracker Green工作液。
保存条件：-20℃避光保存，半年有效。
注意事项：对于微量的液体，每次使用前先离心数秒钟，使液体充分沉降到管底。
荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
需自备盖玻片和载玻片(可以向碧云天订购)。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：1.Mito-Tracker Green储存液的配制：用无水DMSO(anhydrous dimethylsulfoxide)配制Mito-Tracker Green至终浓度为1mM。
配制后可以-20℃或更低温度避光保存。
2.Mito-Tracker Green工作液的配制：a.取少量1mM Mito-Tracker Green储存液按照1:5000-1:50000的比例加入到细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中，使最终浓度为20-200nM。
例如取1µl Mito-Tracker Green加入到50ml或5ml细胞培养液或适当的溶液(例如含钙镁离子的HBSS)中。
混匀后即为Mito-Tracker Green工作液。
HBSS with Ca2+ & Mg2+ (C0219) 可以向碧云天订购。
b.Mito-Tracker Green工作液使用前需37℃预温育。
注：工作液中Mito-Tracker Green的浓度可以根据实际情况进行适当调整。
为降低背景，在染色效果可以接受的范围内，建议尽量使用较低浓度的Mito-Tracker Green。
3.线粒体的荧光标记：a.去除细胞培养液，加入步骤2配制好的并37℃预温育的Mito-Tracker Green染色工作液，与细胞37℃共孵育15-45分钟。
b.去除Mito-Tracker Green染色工作液，加入37℃预温育的新鲜细胞培养液。
c.随后通常用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜进行观察。
此时可观察到线粒体呈明亮的强荧光染色。
如果染色效果欠佳，可以提高Mito-Tracker Green染色工作液中Mito-Tracker Green的浓度或在推荐的时间范围内适当延长染色时间。
使用本产品的文献：1. Zhang W, Shi Y, Chen Y, Yu S, Hao J, Luo J, Sha X, Fang XEnhanced antitumor efficacy by paclitaxel-loaded pluronic P123/F127 mixed micelles against non-small cell lung cancer based on passive tumor targeting and modulation of drug resistance.Eur J Pharm Biopharm. 2010 Aug;75(3):341-53.2. Wang Y, Fang F, Wong CW.Troglitazone is an estrogen-related receptor alpha and gamma inverse agonist.Biochem Pharmacol. 2010 Jul 1;80(1):80-5.3. Zheng Y, Li H, Manole CG, Sun A, Ge J, Wang X.Telocytes in trachea and lungs.J Cell Mol Med. 2011 Oct;15(10):2262-8.4. Zhang J, Zhou F, Wu X, Zhang X, Chen Y, Zha BS, Niu F, Lu M, Hao G, Sun Y, Sun J, Peng Y, Wang G.Cellular pharmacokinetic mechanisms of adriamycin resistance and its modulation by20(S)-ginsenoside Rh2 in MCF-7/Adr cells.Br J Pharmacol. 2012 Jan;165(1):120-34.5. Shao J, Xue J, Dai Y, Liu H, Chen N, Jia L, Huang J.Inhibition of human hepatocellular carcinoma HepG2 by phthalocyanine photosensitiser PHOTOCYANINE: ROSproduction, apoptosis, cell cycle arrest. Eur J Cancer. 2012 Sep;48(13):2086-96. doi: 10.1016/j.ejca.2011.10.013. Epub 2012 Jan 20.6. Qi G, Lin M, Xu M, Manole CG, Wang X, Zhu T.Telocytes in the human kidney cortex.J Cell Mol Med. 2012 Dec;16(12):3116-22. doi: 10.1111/j.1582-4934.2012.01582.x.7. Zheng L， Li Y, Cui Y.In Vitro Photodynamic Therapy on Human A549 Cells with a Novel Photosensitiser NTA Modified Haematoporphyrin Derivatives.World Congress on Medical Physics and Biomedical Engineering May 26-31, 2012, Beijing, China.8. Chen L，Li J, Liu Z, Ma Z, Zhang W, Du L, Xu W, Fang H, Li M.A novel pH “off-on” fluorescent probes for ly sosome imaging.RSC Adv., 2013, Advance Article.9. Sun L, Zhao M, Yu XJ, Wang H, He X, Liu JK, Zang WJ.Cardioprotection by acetylcholine: a novel mechanism via mitochondrial biogenesis and function involving the PGC-1α pathway.J Cell Physiol. 2013 Jun;228(6):1238-48. doi: 10.1002/jcp.24277.10.Tian L, Dai Z, Ye Z, Song B, Yuan J.Preparation and functionalization of a visible-light-excited europium complex-modified luminescent protein for cell imaging applications.Analyst. 2014 Mar 7;139(5):1162-7. doi: 10.1039/c3an02078a. Epub 2014 Jan 20.11.Pan C, Hu YF, Yi HS, Song J, Wang L, Pan MH, Lu C.Role of Bmbuffy in hydroxycamptothecine-induced apoptosis in BmN-SWU1 cells of the silkworm, Bombyx mori.Biochem Biophys Res Commun. 2014 May 2;447(2):237-43. doi: 10.1016/j.bbrc.2014.03.093. Epub 2014 Mar 29.12.He J, Shi W, Guo Y, Chai Z.ERp57 modulates mitochondrial calcium uptake through the MCU.FEBS Lett. 2014 Jun 5;588(12):2087-94. doi: 10.1016/j.febslet.2014.04.041. Epub 2014 May 8.13.Lei T, Guo N, Tan MH, Li YF.Effect of mouse oocyte vitrification on mitochondrial membrane potential and distribution.J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci. 2014 Feb;34(1):99-102. doi: 10.1007/s11596-014-1238-8. Epub 2014 Feb 6.14.Chang C, Wu G, Gao P, Yang L, Liu W, Zuo J.Upregulated Parkin expression protects mitochondrial homeostasis in DJ-1 konckdown cells and cells overexpressing the DJ-1 L166P mutation.Mol Cell Biochem. 2014 Feb;387(1-2):187-95. doi: 10.1007/s11010-013-1884-3. Epub 2013 Nov 16.15.Shen XL, Zhang B, Liang R, Cheng WH, Xu W, Luo Y, Zhao C, Huang K.Central role of Nix in the autophagic response to ochratoxin A.Food Chem Toxicol. 2014 Jul;69:202-9. doi: 10.1016/j.fct.2014.04.017. Epub 2014 Apr 19.16.Wang J, Duan Y, Zhi D, Li G, Wang L, Zhang H, Gu L, Ruan H, Zhang K, Liu Q, Li S, Ho CT, Zhao H.Pro-apoptotic effects of the novel tangeretin derivate 5-acetyl-6,7,8,4'-tetramethylnortangeretin on mcf-7 breast cancer cells.Cell Biochem Biophys. 2014 Nov;70(2):1255-63. doi: 10.1007/s12013-014-0049-7.。