2-6 知识点 聚酰胺色谱简介
聚酰胺色谱的分离原理

聚酰胺色谱的分离原理聚酰胺色谱是一种常用的色谱技术,广泛应用于化学、生物、医药等领域。
其分离原理主要基于化合物在固定相和流动相之间的相互作用差异,通过这种差异实现化合物的分离和检测。
本文将对聚酰胺色谱的分离原理进行详细介绍,希望能够帮助读者更好地理解这一技术的工作原理。
聚酰胺色谱的固定相通常是由聚合物构成的,其表面具有一定的亲和性,能够与待分离化合物发生特定的相互作用。
这种相互作用可以是静电作用、氢键作用、疏水作用等,根据不同的化合物特性选择不同的固定相。
在实际应用中,固定相的选择对于色谱分离的效果至关重要。
流动相则是指在色谱柱中流动的溶剂,其主要作用是将待分离化合物带入色谱柱并在固定相上进行分离。
流动相的选择通常考虑化合物的极性、溶解度等因素,以保证化合物能够在固定相上得到良好的分离效果。
流动相的性质对于色谱分离的效果具有重要影响,因此在实验中需要进行合理的优化。
在聚酰胺色谱中,化合物在固定相和流动相之间的相互作用差异导致了它们在色谱柱中的迁移速率不同,从而实现了化合物的分离。
当样品进入色谱柱后,固定相上的相互作用将化合物分离开来,不同化合物在流动相的作用下逐渐迁移,最终在检测器中被检测出来。
聚酰胺色谱的分离原理基于化合物之间的相互作用差异,这种分离原理在实际应用中具有很高的灵敏度和分辨率。
通过合理选择固定相和流动相,并进行优化条件,可以实现对复杂混合物的高效分离和检测。
因此,聚酰胺色谱在化学、生物、医药等领域得到了广泛的应用,并为科研工作者提供了强大的分析工具。
总之,聚酰胺色谱的分离原理是基于化合物在固定相和流动相之间的相互作用差异,通过这种差异实现了化合物的分离和检测。
在实际应用中,需要合理选择固定相和流动相,并进行条件的优化,以实现对复杂混合物的高效分离和检测。
希望本文能够帮助读者更好地理解聚酰胺色谱的分离原理,为其在实验研究中的应用提供帮助。
聚酰胺柱色谱的分离机理是

聚酰胺柱色谱的分离机理
聚酰胺柱色谱(Polyamide Column Chromatography,简称PAC)是一种高效的液相色谱分离技术,常用于生物制药领域的纯化和分离。
其分离机理主要包括以下几个方面:
1.静电作用:聚酰胺柱的表面带有一定的电荷,可以与待分离物质中的离子或极性分子发生静电作用,从而实现分离。
2.疏水作用:聚酰胺柱的内部是由非极性的聚酰胺材料构成,因此可以与待分离物质中的疏水性分子发生疏水作用,从而实现分离。
3.分子筛作用:聚酰胺柱的孔隙大小和形状可以通过控制聚合反应的条件进行调节,从而形成一定的分子筛效应。
待分离物质中的分子可以根据其大小和形状被筛选出来,从而实现分离。
4.分子间作用:聚酰胺柱中的聚酰胺材料具有一定的亲和性,可以与待分离物质中的分子发生相互作用,从而实现分离。
聚酰胺柱色谱的分离机理是多种作用机制的综合作用,可以实现对不同分子的高效分离和纯化。
聚酰胺色谱法的原理及应用

聚酰胺色谱法的原理及应用原理聚酰胺色谱法是一种基于色谱技术的分析方法,通过利用聚酰胺材料与待分析物之间的相互作用来实现物质的分离和测定。
聚酰胺是一种具有一定亲和性的高分子材料,常用于固相色谱分离中。
聚酰胺材料聚酰胺是一种高分子聚合物,具有良好的化学稳定性和机械强度。
聚酰胺材料可以通过不同的合成方法获得不同的分子结构和性质,从而适用于不同的分析需求。
常见的聚酰胺材料有聚丙烯酰胺、聚甲酸酰胺等。
色谱分离原理聚酰胺色谱法利用聚酰胺材料与待分析物之间的相互作用来实现分离。
聚酰胺材料可以吸附待分析物,而不同的待分析物在聚酰胺材料上的吸附能力不同,从而实现它们的分离。
这种相互作用可以是氢键相互作用、疏水相互作用、离子交换相互作用等。
聚酰胺色谱法的步骤1.样品预处理:待分析的样品需要经过适当的预处理,如溶解、提取、稀释等,以获得适合分析的样品。
2.色谱柱的准备:选择适当的聚酰胺色谱柱,并根据不同的分析需求选择合适的条件进行调整。
3.样品进样:将经过预处理的样品注射到色谱柱上。
4.色谱条件的优化:通过调整流速、温度、洗脱剂浓度等色谱条件,优化分离效果。
5.数据分析:利用色谱检测器检测样品信号,并进行数据处理和结果分析。
应用聚酰胺色谱法在许多领域得到了广泛的应用。
以下列举了一些常见的应用领域:环境分析聚酰胺色谱法可以用于环境样品的分析,如水样中有机污染物的检测、土壤中的农药残留分析等。
通过优化色谱条件和选择合适的聚酰胺材料,可以实现对不同种类污染物的敏感、准确的分离和测定。
食品安全聚酰胺色谱法可应用于食品中有害物质的检测,如农药残留、食品添加剂等。
聚酰胺材料的亲和性对于不同种类的有害物质具有一定的选择性,从而能够有效地分离和测定食品中的有害物质。
药物分析聚酰胺色谱法被广泛应用于药物的分析和质量控制。
通过优化色谱条件和选择合适的聚酰胺材料,可以实现对不同药物成分的分离和测定,从而确保药物的质量和安全性。
生物分析聚酰胺色谱法在生物样品分析中也具有重要的应用价值。
聚酰胺色谱的分离原理

根据分离机制不同,高效液相色谱可分为四大基础类型:分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱和凝胶色谱。
①分配色谱法:分配色谱法是四种液相色谱法中应用最广泛的一种。
它类似于溶剂萃取,溶质分子在两种不相混溶的液相即固定相和流动相之间按照它们的相对溶解度进行分配。
一般将分配色谱法分为液-液色谱和键合相色谱两类。
液-液色谱的固定相是通过物理吸附的方法将液相固定相涂于载体表面。
在液-液色谱中,为了尽量减少固定相的流失,选择的流动相应与固定相的极性差别很大。
a.液-液色谱:按固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。
正相色谱法:采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基与氰基键合相);流动相为相对非极性的疏水性溶剂(烷烃类如正己烷、环己烷),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、三氯甲烷等以调节组分的保留时间。
常用于分离中等极性和极性较强的化合物(如酚类、胺类、羰基类及氨基酸类等)。
反相色谱法:一般用非极性固定相(如C18、C8);流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。
适用于分离非极性和极性较弱的化合物。
RPC 在现代液相色谱中的应用最为广泛,据统计,它占整个HPLC 应用的80%左右。
随着柱填料的快速发展,反相色谱法的应用范围逐渐扩大,现已应用于某些无机样品或易解离样品的分析。
为控制样品在分析过程的解离,常用缓冲液控制流动相的 pH 值。
但需要注意的是,一般的 C18 和 C8 使用的 pH 值通常为2~8,太高的 pH 值会使硅胶溶解,太低的 pH 值会使键合的烷基脱落;但也有新液相色谱柱可在 pH 1~14范围操作。
从下表可看出,当极性为中等时正相色谱法与反相色谱法没有明显的界线(如氨基键合固定相)。
正相色谱法与反相色谱法比较表固定相极性高~中中~低流动相极性低~中中~高组分洗脱次序极性小先洗出极性大先洗出b.键合相色谱:通过化学反应将有机分子键合在载体或硅胶表面上形成固定相。
聚酰胺薄层色谱分离黄酮类化合物原理

聚酰胺薄层色谱分离黄酮类化合物原理聚酰胺薄层色谱(TLC)是一种常用的化学分离技术,广泛应用于化学、生物学和药学等领域。
它是一种快速、简单、低成本的技术,可用于分离和鉴定各种化合物。
本文将介绍聚酰胺薄层色谱分离黄酮类化合物的原理。
黄酮类化合物是一类具有广泛生物活性的天然化合物,包括黄酮、异黄酮、黄酮糖苷等。
它们具有抗氧化、抗癌、抗炎等多种生物活性,因此在医药、保健品和食品等领域具有广泛的应用前景。
但是,由于它们在结构上相似,因此需要一种高效的分离技术来区分它们。
聚酰胺薄层色谱是一种基于分子亲和性的分离技术。
在这种技术中,样品被施加在聚酰胺薄层(TLC板)上,然后在TLC板上施加一个移动相。
移动相可以是有机溶剂、水或它们的混合物。
样品分子会在TLC板和移动相之间发生相互作用,从而发生分离。
在黄酮类化合物的分离中,最常用的移动相是甲苯-乙酸乙酯-甲醇-氨水(5:4:1:0.1)。
这种移动相可以使黄酮类化合物在TLC板上产生良好的分离效果。
当样品被施加到TLC板上时,它们会与TLC板表面的硅烷基发生相互作用。
这种相互作用是通过氢键和范德华力产生的。
由于黄酮类化合物之间的结构相似性较高,因此它们之间的相互作用也较强。
但是,由于它们的极性不同,因此它们与TLC板表面的相互作用也有所不同。
当移动相通过TLC板时,黄酮类化合物会被带到不同的位置。
这些位置可以通过紫外线或其他检测方法进行检测。
这种检测方法可以确定样品中黄酮类化合物的数量和种类。
总之,聚酰胺薄层色谱是一种简单、快速、低成本的化学分离技术。
它可以用于分离和鉴定各种化合物,包括黄酮类化合物。
通过选择适当的移动相和检测方法,可以实现对黄酮类化合物的高效分离和定量分析。
聚酰胺柱色谱特点

聚酰胺柱色谱特点
1.宽泛的应用范围:聚酰胺柱色谱可以用于分离和测定多种化合物,包括有机小分子、生物大分子、药物、天然产物、杂质等。
其灵敏度高,分离效果好,可以应对复杂样品的分析。
2.良好的峰形对称性:聚酰胺柱色谱具有良好的峰形对称性,峰形峭度高,基线噪音低,可提供准确且稳定的峰面积和峰高值。
这对于定量分析和溶质纯度评估非常重要。
3.高效分离:聚酰胺柱色谱是一种高效的分离技术,其分离离子能力强,分离效率高。
它能够有效地分离复杂混合物中的同系物和结构相似的化合物,提高分析结果的精确度。
4.大载荷承载能力:聚酰胺柱色谱具有较高的载荷承载能力,可以分离大分子化合物如蛋白质、聚合物和多肽等。
这使得它在分离和纯化大分子化合物时非常有用。
5.高溶剂稳定性:聚酰胺柱色谱在使用常见有机溶剂和水作为流动相时都具有良好的稳定性,不易受溶剂影响。
这使得其在液相色谱中具有广泛的应用,可以适应不同样品类型和分析目的。
6.长寿命和稳定性:聚酰胺柱色谱由于其使用聚合物材料制成,具有较高的耐久性和稳定性。
在适当的操作和维护下,聚酰胺柱可以使用一段相对较长的时间,并保持良好的分离性能。
7.良好的再生性:聚酰胺柱色谱拥有良好的再生性,可以多次使用。
当柱子出现失效或需要更换时,可以进行再生处理,而不必完全更换。
这有助于降低分析成本并提高分析效率。
总之,聚酰胺柱色谱具有广泛的应用范围,高效分离能力,宽泛的溶剂适应性,良好的峰形对称性和稳定性。
它是一种重要的分离技术,在化学、药学、环境和生物学等领域中发挥重要作用。
聚酰胺吸附色谱技术的原理

聚酰胺吸附色谱技术,通常被称为PAN(Polyacrylonitrile)固相微萃取技术,是一种固相微萃取技术的变种。
该技术利用聚酰胺材料作为吸附相,将目标物质从样品中富集和分离,以提高灵敏度和准确性。
以下是聚酰胺吸附色谱技术的基本原理:
原理:
1.固相选择性:
–聚酰胺材料对特定类型的化合物具有选择性吸附性。
这种选择性基于样品中分析物与聚酰胺之间的相互作用,如范德华力、氢键、离子交
换等。
2.富集和分离:
–样品溶液通过聚酰胺吸附材料时,目标分析物会与聚酰胺发生相互作用,从而在固相上发生吸附。
同时,一些干扰物质可能被排除。
3.洗脱:
–通过改变样品流动条件,例如改变溶剂组成或温度,可以实现对吸附在聚酰胺上的目标物的洗脱。
这一步将目标物从聚酰胺上解吸,形成
一个富集的洗脱液。
4.分析:
–洗脱液经过洗脱后,通常需要进一步进行分析,如色谱分析或质谱分析,以确定目标分析物的存在和浓度。
优点:
•选择性:聚酰胺对不同类型的化合物具有一定的选择性,可以实现对特定类别的分析物的选择性富集。
•灵敏度提高:通过富集目标物,可以在分析过程中提高其浓度,从而提高分析的灵敏度。
•简便性:相对于一些传统的富集技术,聚酰胺吸附色谱技术通常较为简便易行。
应用领域:
聚酰胺吸附色谱技术在环境分析、生物样品分析以及药物残留等领域有着广泛的应用。
需要注意的是,实施该技术时需要考虑样品基质的影响,以及在洗脱步骤中保证目标物的完全洗脱,避免由于残留而引起分析误差。
26知识点聚酰胺色谱简介

26知识点聚酰胺色谱简介聚酰胺色谱是一种广泛应用于分析化学领域的色谱技术,其原理基于样品分子在固定相和流动相之间的相互作用力。
该技术可以用于分离和鉴定各种有机物,具有高效、灵敏、准确和可靠等特点。
本文将介绍26个关键的聚酰胺色谱知识点。
1. 色谱基本原理聚酰胺色谱利用样品在固定相和流动相之间的平衡分配,通过分子间相互作用力的差异来实现样品分离。
2. 固定相的选择聚酰胺色谱中常用的固定相有硅胶、聚合物和离子交换树脂等,选择合适的固定相可以提高分离效果。
3. 流动相的优化流动相的选择和优化对色谱分离起着重要作用,常用的流动相有有机溶剂和缓冲溶液等。
4. 样品前处理样品前处理是为了去除杂质和增加分析物的浓度,常用的方法包括萃取、浓缩和稀释等。
5. 色谱柱的选择色谱柱的选择包括填充剂类型、粒径大小和柱长等,不同的色谱柱可以实现不同的分离效果。
6. 色谱检测器常用的色谱检测器包括紫外-可见吸收检测器、荧光检测器和质谱检测器等,选择合适的检测器可以提高灵敏度和选择性。
7. 分离机理聚酰胺色谱的分离机理涉及吸附作用、分配作用和离子交换作用等,不同的分离机理适用于不同的分析对象。
8. 反相色谱反相色谱是聚酰胺色谱中常用的一种分离模式,基于样品与固定相间的亲疏水性差异来实现分离。
9. 离子色谱离子色谱是一种用于分离和测定离子化合物的聚酰胺色谱方法,常用于水质分析和环境监测等领域。
10. 手性色谱手性色谱是一种用于分离手性化合物的聚酰胺色谱方法,可以鉴别和测定药物、化妆品和农药中的手性杂质。
11. 气相色谱-质谱联用气相色谱-质谱联用技术结合了气相色谱和质谱的优势,可以用于复杂样品的定性和定量分析。
12. 液相色谱-质谱联用液相色谱-质谱联用技术结合了液相色谱和质谱的优势,可以实现更高灵敏度和更好的选择性。
13. 聚酰胺色谱在药物分析中的应用聚酰胺色谱在药物分析中广泛应用,可以用于药物成分分离、杂质检测和药代动力学研究等。
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聚酰胺薄层色谱常用的溶剂系统
黄酮体苷元
氯仿-甲醇(94:6/96:4) 氯仿-甲醇-丁酮(12:2:1) 苯-甲醇-丁酮 (90:6:4/84:8:8) 氯仿-甲醇-甲酸(60:38:2) 氯仿-甲醇-吡啶(70:22:8) 氯仿-甲醇-甲酸(60:38:2)
黄酮体苷
甲醇-醋酸-水(90:5:5) 甲酸-水(4:1);乙醇 (4:1)丙酮-水(1:1); 异丙醇-水(3:2)30-60% 醋酸;氯仿-甲醇-丁酮(64: 25;10)乙酸乙酯-95%乙 醇(6:4)氯仿-甲醇 (7:3);正丁醇-乙醇-水 (1:4:5)
聚酰胺的不足及解决方案
聚酰胺柱层析的不足: 比如机械强度不大, 粒度不均匀,分离时流速较慢 一些小分子杂质混入的问题 采用的解决方案有: 1.装柱前先过筛 2.装柱时用5%甲醇或10%盐酸预先除去小分子杂 质 3.与硅藻土混合制粒以增加机械强度。
聚酰胺与物质的氢键缔合能力在水中最强,在含水醇中则
随着醇浓度的增高而相应减弱,在高浓度醇或其它有机溶 剂中则几乎不缔合。 强酸或强碱均可破坏聚酰胺与溶质之间的氢键缔合
分离机理
“氢键吸附”学说
溶剂分子与聚酰胺或黄酮类化合物形成氢键缔 合的能力越强,则聚酰胺对这两种化合物的吸附作 用将越弱。聚酰胺层析柱即是利用此性质对各种植 物中黄酮、茶多酚等进行吸附、洗脱而分离的。
吸附原理
聚酰胺是由酰胺键聚合形成的高分子化合物。 其酰胺基可与羟基酚类,酸类,醌类,硝基 等化合物以氢键形成结合而被吸附 ,其脂 肪长链可作为分配层析的载体。聚酰胺在含 水系统中层析时,聚酰胺作为非极性固定相, 其层析行为反向柱层析;在非水溶剂系统时, 聚酰胺作为分配层析的载体,其层析行为为 正向柱层析。
分离机理
“双重层析”理论
当用极性流动相(含水溶剂系统)洗脱时,聚酰胺作为非极 性固定相,其层析行为类似反相分配层析,当用有机溶剂洗脱
时,聚酰胺作为极性固定相,其层析行为类似正相分配层析。
但固定相(吸附剂)的极性是由其本身结构及性质决定的,不应 随洗脱液的改变而改变,况且聚酰胺层析属于吸附层析,不是 分配层析。因此,“双重层析理论”也没有揭示出产生这两种 相反现象的根本原因。
聚酰胺薄层色谱常用-水(1:1)苯-甲醇-醋酸(45:8:4) ; 环己烷-醋酸(93:7) ;10%醋酸
丙酮-水(1:1) ;正己烷-苯-醋酸 (45:8:4) ;石油醚-苯-醋酸(10:10:5) 丙酮-水(1:1)苯-甲醇-醋酸(45:8:4) ; 环己烷-醋酸(93:7) ;10%醋酸
黄酮类化合物的分离
对于分离黄酮类化合物来说,聚酰胺是较理想的吸附剂。 其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中的羟基数目 与位置。一般有以下规律: 1、苷元相同,连接糖越多,吸附力越大,流出越慢。 2、母核上增加羟基,洗脱速度相应减缓。 3、对位、间位酚羟基使吸附能力 〉邻位酚羟基。 4、不同类型的黄酮的流出顺序一般是:异黄酮 〉二氢 黄酮醇〉黄酮 〉黄酮醇。 5、分子中芳香核、共轭双键多者则吸附力强,晚出柱。 6、若形成分子内氢键则吸附力减弱。
3、水洗:先用水洗脱。
聚酰胺吸附法的操作
4、醇洗:在水中递增乙醇浓度至浓乙醇溶液,或氯仿、 氯仿-甲醇,递增甲醇至纯甲醇洗脱。若仍有物质未被 洗脱,可用稀氨水或稀甲酰胺溶液洗脱,分段收集。 5、找到最佳吸附比:先小量试验找到最佳吸附比。
6、放大:根据小试及最佳吸附比进行放大试验。
7、聚酰胺的回收:使用过的聚酰胺一般用5%氢氧化 钠溶液洗涤,然后水洗,再用10%醋酸液洗,然后用 蒸馏水洗至中性,即可。
甾体、萜类 甾体苷
聚酰胺与大孔树脂的区别
吸附原理不同:大孔树脂是物理吸附原理; 聚酰胺是化学吸附原理,氢键吸附,用于酚 类、黄酮类、醌类成分的分离。 大孔树脂的分离效果没有聚酰胺好。若是粗 粉可以用大孔树脂进行分段,聚酰胺可用于 黄酮类成分的细分或纯化。 聚酰胺树脂可以使用其干柱层析功能,在分 离黄酮的过程中作用也是很大的,而大孔树 脂则没有此功能。
苯-乙醇(8:2/9:1);50%醋酸;甲酸-水 (1.5:100/1:1)乙酸乙酯-甲醇-醋酸(20:1: 1);0.05mol/L磷酸钠-乙醇(3:1)
氨基 酸衍 生物
聚酰胺薄层色谱常用的溶剂系统
生物碱
环己烷-乙酸乙酯-正丙醇-二甲基胺(30: 2.5:0.9:0.1) ; 水-乙醇-二甲基胺(88:12:0.1) 己烷-丙酮(4:1);氯仿-丙酮(4:1) 甲醇-水-甲酸(60:35:5); 乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(50:20:25:5)
前处理
用过的聚酰胺
一般用5%NaOH水溶液洗脱,洗至NaOH水溶液颜 色极淡为止。有时因某些鞣质与聚酰胺又不可逆吸 附,用NaOH水溶液很难洗脱,可用5%NaOH在柱 中浸泡,每天将柱中的NaOH水溶液放出一次,并 加入新的5%NaOH水溶液,这样浸泡一周后,鞣质 可基本洗脱完。然后用蒸馏水洗脱至pH8-9,再用2 倍量的10%醋酸水溶液洗脱,最后蒸馏水洗脱至pH 中性,重复使用。
聚酰胺吸附法的操作
1、装柱:一般将颗粒状聚酰胺混悬于水中,使其充分 膨胀,然后装柱,让聚酰胺自由沉降;当用非极性溶剂 系统时候,则用组分中低级性的溶剂装柱。 2、稀释适当浓度上样:一般每100ml聚酰胺上样1.52.5g,样品先用洗脱溶剂溶解,浓度为20%-30%。 水溶性化合物直接上样;若提取物水溶性不好,则用挥 发性有机溶媒溶解、拌适量聚酰胺、挥干或减压蒸干、 干法装入柱顶。
前处理
新买的聚酰胺 取聚酰胺以90-95%乙醇浸泡,不断搅拌,除 去气泡后装入柱中。用3-4倍体积的90-95% 乙醇洗脱,洗至洗脱液透明并在蒸干后无残渣 (或极少残渣)。再依次用2-2.5倍体积 5%NaOH水溶液、1倍体积的蒸馏水、2-2.5 倍体积的10%醋酸水溶液洗脱,最后用蒸馏水 洗脱至pH中性,备用。
聚酰胺与大孔树脂的区别
聚酰胺树脂可以首先用聚酰胺薄膜展开系统,而大 孔树脂没有薄层 树脂进行新药研发,其新药若用大孔树脂制备,必 须有打孔的残留检查,而聚酰胺目前还没有正式的 文件要检查其残留 聚酰胺上样时,其样品中的鞣质会对主子产生死吸 附,大孔出现这种现象很少 大孔的可选择类型比聚酰胺多,而且还增加了许多 键合类型,如ASD型,其键合了酰胺键,增加了其 选择性。
聚酰胺色谱简介
1. 什么是聚酰胺
聚酰胺(Polyamide)是通过酰胺基聚合而成的一类高分子化合物,层析 分离中常用的聚酰胺是由己内酰胺聚合而成的尼龙6和由己二酸和己 二胺聚合而成的尼龙66。 聚酰胺不溶于水、甲醇、乙醇、乙醚、氯仿及丙酮等有机溶剂,对碱 较稳定,对酸尤其是无机酸稳定性较差,可溶于浓盐酸、冰醋酸及甲 酸。 分子量:14000~17000 比表面:5~10m2/g PH值: 6~7 产品价格:30~60目 180元/KG60~100目 240元/KG100目以上 300元/KG
分离机理
洗脱机理
聚酰胺分子中有极性酰胺基团和非极性的脂肪键。作为一 个相对弱极性的化合物,当移动相为极性强的溶剂(如水、乙醇、
丙酮等)时,聚酰胺作为非极性固定相,其层析行为类似反相分
配层析,极性较大的吸附物易被洗脱。随着洗脱剂极性降低, 极性较小的化合物可相继被洗脱下来。
应用范围
聚酰胺特别适应于多元酚类化合物的分离,如 黄酮、醌类、酚酸、含羰基化合物、羧基化合 物等。 例如:葛根素中提取葛根黄酮、茶叶提取茶多 酚、 人参中提取人参皂苷、银杏叶中提取银杏 黄酮、甘 草中提取甘草皂苷、甜叶菊中提取甜 菊苷、发酵液中提取维生素和抗生素等成份 对鞣质吸附强,用于将植物粗提物中的鞣质除 去。
分离原理
CH2 N H O C CH2 CH2 O C N CH2 CH2 CH2 CH2 CH2 C C CH2 O H N CH2 O H O H O O CH2
固定相
CH2 CH2 CH2 H N
移动相
吸附规律
形成氢键的基团数目越多,则吸附能力越强。 易形成分子内氢键者在聚酰胺上的吸附相应减弱。 分子中芳香化程度越高,则吸附性越强;反之,则减弱。
聚酰胺柱层析的溶剂洗脱系统
含水溶剂系统 非水溶剂系统 甲醇-水(4:1) 氯仿-甲醇(94:6) 乙醇-水(2:1)甲醇-乙酸 苯-甲醇(3:1/7:3) -水(90:5:5 )
含水系统洗脱能力:碱液>甲醇>水 溶剂洗脱能力与溶剂极性相关可使化合物得到较好的 分离。 选择系统时,可以将样品加入上述溶剂系统中,观察 样品在聚酰胺薄膜的层析行为,然后确定溶剂系统。