微生物实验6 霉菌

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霉菌的分离实验报告

霉菌的分离实验报告

霉菌的分离实验报告引言霉菌是一类真菌,广泛存在于自然界的土壤、空气、植物等环境中。

它们以分解有机物质为生,在自然界中具有重要的生态作用。

然而,霉菌也是一种常见的病原微生物,能够引起多种人类和动植物的感染疾病。

为了更好地了解霉菌的特性和传播途径,本实验旨在通过分离方法获取纯净的霉菌菌株,并初步分析其形态特征。

实验材料和方法实验材料:- 手套- 剪刀- 无菌培养基(琼脂)- 玻璃棒- 离心管- 蒸馏水- Petri 洁净培养皿- 测量瓶实验方法:1. 霉菌样品的收集:在潮湿的环境中选择具有明显霉斑的表面进行采样,避免采集到周围环境中的杂菌。

2. 实验场所的准备:在无菌条件下完成所有操作,保持实验环境的卫生。

3. 样品处理:带着手套使用剪刀将具有霉斑的样品剪下,并将其放入离心管中。

加入20 ml 的蒸馏水,将离心管盖好,摇匀样品,使其充分悬浊。

4. 稀释与分离:取0.1 ml 的上述悬浊液加入测量瓶中,再加入9.9 ml 的蒸馏水进行10倍稀释。

取1 ml 的稀释液加入离心管中,再加入9 ml 的蒸馏水进行10倍稀释。

依次取样进行稀释,最后取适量稀释液均匀涂布在无菌琼脂培养皿上。

5. 培养条件:将琼脂培养皿孵育在恒温培养箱中,温度为25 ±2,培养时间为48 - 72小时。

6. 菌落形态观察:在培养箱中取出培养皿,通过目测观察霉菌菌落的形态特征,如颜色、形状、凸起程度等。

实验结果经过培养箱中的恒温孵育,在培养皿上出现了多个菌落。

根据其形态特征,选取了三个菌落用无菌棉签分别划线后进行传代。

菌落1- 颜色:灰白色- 形状:圆形- 表面:粗糙- 边缘:光滑菌落2- 颜色:绿色- 形状:不规则- 表面:绒毛状- 边缘:锯齿状菌落3- 颜色:黑色- 形状:扁平- 表面:光滑- 边缘:光滑结论通过实验,成功分离得到了三种霉菌菌株,并对其进行了初步的形态特征分析。

菌落1为灰白色、圆形,表面粗糙,边缘光滑;菌落2为绿色、不规则形状,表面绒毛状,边缘呈锯齿状;菌落3为黑色、扁平形状,表面光滑,边缘光滑。

六霉菌的形态观察与鉴定

六霉菌的形态观察与鉴定

4. 操作程序
载玻片培养观察法 1.无菌培养皿的准备
在一洁净干燥的培养皿内,放一铝丝制载玻片架,
再放人分别用纸包好的洁净载玻片1-2片及盖玻片 1-2片,然后盖上皿盖,包扎后灭菌备用。
2.霉菌载玻片培养物的制备 ( 1 )取约 3ml 经灭菌后的察氏培养基试管,标上
青(毛、根或曲)霉字样。
(2)以无菌操作方式取出无菌培养皿中的载玻片 和盖玻片,打开备用。 (3)取一标好字样的试管培养基,于酒精灯上以 微火融化。
在幼小而活力旺盛时,菌丝体产生大量的分生孢子梗。分生孢子梗顶端膨大成为顶 囊,一般呈球形。项囊表面长满一层或两层辐射状小梗(初生小梗与次生小梗)。最 上层小梗瓶状,顶端着生成串的球形分生孢子。以上几部分结构合称为“孢子穗”。 孢子呈绿、黄、橙、褐、黑等颜色。 ------ 曲霉孢子穗的形态,包括分生孢子梗的长度、顶囊的形状、小梗着生是单轮还 是双轮,分生孢子的形状、大小、表面结构及颜色等,都是菌种鉴定的依据。
Black Mold, Aspergillus variecolor. (SEM x2,315)
曲霉Aspergillus 的分生孢子
毛霉
1.形态特征:菌丝发达,白 色无隔多核。 2.繁殖:孢囊孢子、厚垣孢 子、接合孢子。 3.应用:腐乳:蛋白酶
Mucor sp.
毛霉属(Mucor):孢囊梗直接从菌丝上长出,孢
四 思考题

青霉、曲霉、根霉、毛霉的形态有哪些异同? 比较显微镜下放线菌和霉菌的细胞形态和菌落的特 征?
接合孢子
Bread Mold Spores on Fungal Fruiting Structure, Rhizopus sp. (SEM x2,990)
2. 培养基: 马铃薯琼脂平板培养物.

霉菌的形态观察实验报告

霉菌的形态观察实验报告

霉菌的形态观察实验报告
实验目的,通过观察霉菌的形态特征,了解霉菌的生长规律和形态特点。

实验材料和方法,将霉菌培养基均匀涂抹在培养皿上,接种霉菌,放置在25摄氏度下培养一周。

观察霉菌的生长情况,记录下霉菌的形态特征。

实验结果,经过一周的培养,我们观察到霉菌在培养皿上呈现出不同的形态特征。

首先,我们发现霉菌的生长呈现出不规则的菌丝状,有的呈现出圆形,有的呈现出分枝状,有的呈现出丝状。

其次,霉菌的颜色也各不相同,有的呈现出白色,有的呈现出绿色,有的呈现出黑色。

最后,我们还观察到霉菌在培养基上形成了孢子,孢子的形态也各异,有的呈现出囊状,有的呈现出杆状,有的呈现出球状。

实验分析,通过观察和记录,我们发现霉菌的形态特征具有多样性,不同的霉菌在不同的培养条件下呈现出不同的形态特征。

这些形态特征与霉菌的生长环境、营养条件、气候等因素密切相关。

霉菌的形态特征对其生长繁殖、传播途径等具有重要意义,也为我们研究霉菌的生物学特性提供了重要的参考。

实验结论,通过本次实验,我们对霉菌的形态特征有了更深入的了解。

霉菌的形态特征具有多样性和变异性,这为我们研究霉菌的分类、鉴定和防治提供了重要的依据。

同时,我们也意识到了霉菌的生长环境对其形态特征的影响,这对我们预防和控制霉菌的生长具有一定的指导意义。

总结,本次实验通过对霉菌的形态特征进行观察和记录,增加了我们对霉菌的认识,也为我们今后的研究工作提供了重要的参考。

希望通过我们的努力,能够更好地认识和理解霉菌,为人类的健康和生活环境做出更大的贡献。

(完整word版)实验7-霉菌的形态观察

(完整word版)实验7-霉菌的形态观察
2
(完整 word 版)实验 7-霉菌的形态观察
2、试比较细菌与酵母菌、放线菌与霉菌的菌落形态差异。
菌丝
无性孢子
孢子囊
囊轴
3
(完整 word 版)实验 7-霉菌的形态观察
有性孢子
4
(完整 word 版)实验 7-霉菌的形态观察
5
三、操作步骤
1、取 95%酒精浸泡的载玻片 1 块,火焰烧去酒精; 2、冷却后在载玻片中央滴棉蓝乳酚油 1 滴; 3、以解剖针从霉菌菌落上挑少许菌丝体置于染液中; 4、以解剖针使菌丝体在染液中充分展开; 5、将 1 洁净的盖玻片盖于染液上,以滤纸吸去盖玻片边缘过剩的染液; 6、显微镜下 20X、40X 物镜观察绘图。
一、 实验原理 菌落形态是指某种微生物在一定的培养基上由单个菌体形成的群体形态。细菌、放线菌、
酵母菌和霉菌,每一类微生物在一定培养条件下形成的菌落各具有某些相对的特征,通过观察 这些特征,来区分各大类微生物及初步识别、鉴定微生物,方法简便快速,在科研和生产实践 中常被采用。 二、实验器材
1、菌种 细菌(大肠杆菌)、未鉴定放线菌、酵母菌、霉菌(青霉菌、根霉)等; 2、培养基 牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号合成培养基和马铃薯蔗糖培养基等; 3、材料 无菌平皿,接种环(针) 三、操作步骤 1、制备菌落平板 分别用上述不同培养基制成平板,然后用上述的细菌、放线菌、酵母菌 以划线法制成已知菌平板,而霉菌则用点种法(一点或三点均可)制成已知菌平板。 2、细菌菌落特征的观察 观察菌落的大小、表面状况、透明度、色泽、边缘、隆起度、透 光性、是否分泌色素等特点来掌握细菌菌落的形态特征。 3、放线菌菌落特征的观察 观察菌落的大小、表面形状(呈崎呕、褶皱或平滑),气生菌 丝的形状(呈绒状、粉状或茸毛状),有无同心环以及菌落的颜色等特点,以便掌握放线菌菌落 的形态特征。 4、酵母菌菌落特征的观察 大多数酵母菌形成的菌落与细菌的相似、但较细菌的菌落大而 厚,湿润、粘稠、易被挑起。菌落多呈乳白色,少数为红色(如红酵母),酵母菌菌落的颜色、光 泽、质地、表面和边缘特征均为识别时的重要依据. 5、霉菌菌落特征的观察 霉菌菌落通常以扩散方式向四周蔓延,菌丝较粗而长,形成的菌 落较疏松、呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状,一般比细菌菌落大几倍到几十倍。菌落背面呈现不同 颜色. 四、注意事项 1、在观察过程中应注意比较并区分放线菌与霉菌、酵母菌与细菌的菌落特征. 2、制备菌落平板时应注意培养基的选用和培养时间的控制. 五、作业 1、分别描述细菌、放线菌、霉菌、酵母菌细胞的主要特征。

霉菌实验报告

霉菌实验报告

霉菌实验报告霉菌实验报告一、引言霉菌是一类广泛存在于自然界中的微生物,其在生物学、医学、食品工业等领域中具有重要的研究价值。

本次实验旨在观察不同条件下霉菌的生长情况,以及对其进行定性和定量分析,进一步了解霉菌的特性和生态习性。

二、实验方法1. 实验材料准备本次实验所需材料包括:霉菌培养基、琼脂培养基、无菌培养皿、无菌培养瓶、无菌移液管、显微镜、染色剂等。

2. 实验步骤(1)制备霉菌培养基:按照配方将所需成分溶解于适量的蒸馏水中,经过高温高压灭菌后,倒入无菌培养皿或培养瓶中。

(2)取一份霉菌培养基,分别加入不同浓度的染色剂,制备含有不同颜色的培养基。

(3)将不同颜色的培养基分别接种霉菌菌种,放置于相应的培养条件下,如温度、湿度等。

(4)观察霉菌的生长情况,记录生长速度、菌丝形态等信息。

(5)通过显微镜观察和拍摄霉菌的细胞结构,进行定性分析。

三、实验结果与讨论1. 霉菌生长情况观察经过一段时间的培养,我们观察到不同颜色的霉菌在不同条件下的生长情况有所差异。

例如,白色霉菌在温度较低、湿度较高的条件下生长较快,而黑色霉菌则对温度较高的环境更适应。

2. 霉菌菌丝形态观察通过显微镜观察,我们发现霉菌的菌丝形态各异。

有的菌丝呈现出分支状,有的呈现出网状,有的呈现出环状。

这些不同的菌丝形态可能与不同的菌种、培养条件以及环境因素等有关。

3. 霉菌细胞结构分析在显微镜下观察到的霉菌细胞结构包括细胞壁、细胞质、细胞核等。

细胞壁是霉菌的外层保护结构,具有支持和保护细胞的功能。

细胞质是细胞内的液体环境,其中包含着各种细胞器和代谢物质。

细胞核是霉菌的遗传物质的存储和复制中心,其中包含着DNA等重要的遗传信息。

四、实验结论通过本次实验,我们观察到了不同条件下霉菌的生长情况,分析了霉菌的菌丝形态和细胞结构。

实验结果表明,霉菌对环境条件的适应性较强,不同菌种在不同条件下的生长速度和形态有所差异。

同时,霉菌的细胞结构也是其适应环境和生存的重要因素。

微生物实验@实验6 霉菌的形态观察

微生物实验@实验6  霉菌的形态观察
滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染液于载玻片上,用
手术刀取菌丝,在50%乙醇中浸泡一下,然 后置于染液中,用手术刀和回形针小心将菌 丝分开,去掉培养基,盖上盖玻片,用低倍 镜和高倍镜镜检。
透明胶带法
载玻片培养观察法
搭片法培养霉菌
霉菌的有些结构在制片过程中易被破坏,影响
观察,可采用载片培养法。此法便于直接在显 微镜下观察,尤其适用于根霉的假根、曲霉的 足细胞及分生孢子链等结构的着生和生长情况 的观察。并且还可以在同一标本上观察到微生 物发育的不同阶段的形态。
观察黑根霉
菌丝情况和 子囊孢子情 况(着重辨 认孢子囊、 包囊梗、假 根):
观察黑曲霉菌丝
分隔情况和分生 孢子着生情况 (着重辨认分生 孢子梗、足细胞 和分生孢子):
观察青霉菌
丝和分生孢 子着生情况:
1.单轮生青霉群;2.对称二轮 生青霉群;3.多轮生青霉群; 4.不对称生青霉群
五、实验结果
实验三
霉菌的形态观察
一、实; 了解常见霉菌(根霉、毛霉、曲霉、青 霉)的基本形态特征;

学习掌握霉菌染色的基本方法。
二、实验原理
霉菌菌丝比较粗大(菌丝和孢子的直径达到
3~10μm),通常是细菌菌体宽度的几倍至 几十倍,因而可用低倍、高倍镜观察。霉菌 菌丝细胞容易收缩变形,孢子容易飞扬,在 制备霉菌标本时,常用乳酸石炭酸溶液作为 介质,具有不使细胞变形,可杀菌防腐,不 易干燥,能保持较长时间等优点。若加入棉 蓝,又具有一定的染色效果。
六、问题与讨论
1.为何要用乳酸石炭酸棉兰染液对 霉菌进行染色?
三、实验材料
• 菌种:根霉(Rhizopus sp.)、毛霉(Mucor sp.)、曲霉(Aspergillus sp.)、青霉 (Penicillium sp.)的平板培养物,

霉菌的形态实验报告

霉菌的形态实验报告

霉菌的形态实验报告霉菌的形态实验报告引言:霉菌是一类微生物,广泛存在于自然界中的土壤、空气、水体以及植物和动物体内。

它们具有多样的形态和结构,对人类和环境有着重要的影响。

本实验旨在通过观察和研究霉菌的形态特征,了解其生长和繁殖方式,进一步认识霉菌的生物学特性。

实验材料与方法:1. 霉菌培养基:将适量的琼脂糖、葡萄糖、酵母粉和琼脂按比例混合,加入适量的蒸馏水,混合均匀后加热煮沸,倒入培养皿中,冷却凝固。

2. 霉菌样品:从自然环境中采集到的霉菌样品,如土壤、腐烂的植物等。

3. 实验器材:培养皿、显微镜、移液管、烧杯等。

实验步骤:1. 准备好霉菌培养基,将其倒入培养皿中,待凝固。

2. 从采集到的霉菌样品中取一小块,用移液管将其转移到培养皿的表面,轻轻涂抹均匀。

3. 将培养皿放入恒温箱中,设置适宜的温度和湿度,培养一段时间。

4. 取出培养皿,用显微镜观察霉菌的形态特征,记录下所见。

实验结果与讨论:在观察过程中,我们发现了霉菌的多样形态。

有些霉菌呈现出菌丝状的结构,由细长的菌丝组成,形成一个复杂的网络。

这种菌丝状的结构有助于霉菌在环境中的生长和营养吸收。

另外,还有一些霉菌呈现出颗粒状或球状的形态,它们通常生长在潮湿的环境中,如水体或腐烂的植物上。

除了形态上的差异,我们还观察到了霉菌的颜色多样性。

有些霉菌呈现出白色或浅黄色,而另一些则呈现出绿色、黑色或红色等。

这是由于霉菌在生长过程中产生的色素的不同。

色素的产生与霉菌的代谢活动密切相关,不同的色素可能具有不同的生物学功能。

此外,我们还注意到霉菌在培养基上的分布情况。

有些霉菌呈现出均匀的分布,形成一个连续的菌落;而另一些则呈现出不规则的分布,形成散落的斑点。

这可能与霉菌在培养过程中的生长速度和竞争关系有关。

通过这次实验,我们对霉菌的形态特征有了更深入的了解。

霉菌的多样形态和色彩给我们展示了微观世界的奇妙之处。

同时,我们也认识到霉菌在自然界中的重要作用,它们可以分解有机物质,促进土壤肥沃化,还可以产生抗生素等有益物质。

霉菌实验操作方法

霉菌实验操作方法

霉菌实验操作方法霉菌实验是一种常用的微生物实验,用于观察和研究霉菌的生长和繁殖情况。

以下是一种常用的霉菌实验操作方法:1. 准备所需材料和试剂:- 霉菌菌种(如青霉菌、曲霉菌等)- 培养基(如琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂等)- 干燥的无菌培养皿- 培养皿密封膜或胶带2. 无菌操作:- 洗手并进行必要的消毒,确保实验环境无菌。

- 将所需材料和试剂进行高温高压灭菌或丙酮消毒。

- 使用无菌技术操作,避免外界的菌群污染。

3. 制备菌种悬液:- 从保存的霉菌菌种中取出一小部分,通过接种环或接种针悬浮于无菌生理盐水或无菌培养基中。

- 使菌种悬液均匀分布。

4. 霉菌培养:- 将无菌培养基熔化并冷却至适宜的温度。

- 将培养基倒入无菌培养皿中,待其固化形成培养基平板。

- 使用接种环或接种针,分别在培养基表面划线或刺激式接种菌种悬液。

- 均匀划线或刺激式接种以确保霉菌的均匀分布。

5. 培养皿密封:- 用无菌的培养皿密封膜或胶带将培养皿密封,防止外界空气和其他菌群的进入。

- 将密封后的培养皿标记上必要的信息(菌株名称、日期等)。

6. 培养条件:- 将密封后的培养皿置于适宜的温度和湿度条件下。

- 注意避光,霉菌一般在暗处生长。

7. 观察和记录:- 在培养一段时间后,观察培养皿上是否有霉菌生长。

- 记录霉菌的生长情况,包括菌落的形态、颜色和分布等。

- 还可以进一步进行镜检,观察霉菌的菌丝和孢子等微观结构。

8. 结果分析:- 根据观察和记录的结果,分析和总结霉菌的生长和繁殖情况。

- 可以进行统计分析或比较不同实验组的结果。

请注意,实验中的操作和培养条件可能因具体的实验目的和研究对象而有所不同。

在进行实验前,应仔细研究和理解所用菌种的特性,以及相应的实验操作方法和安全注意事项。

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微生物实验报告霉菌的培养及观察实验刘欣怡201100140057生物科学基地班组别:周一下午三组同组者:曹平平,周楠,刘艺,刘希伟实验完成时间:2012年11月12号一、实验原理1. 观察霉菌的菌落特征,学会霉菌的一般制作方法。

2. 观察并理解多种霉菌的个体形态及生长繁殖方式。

3. 进一步巩固无菌操作以及显微镜的使用二、实验器材1. 菌种:黑曲霉,毛霉,青霉,根霉的培养 7d 的马铃薯琼脂平板培养物(小室培养)。

2. 仪器:无菌操作台,分析天平,玻璃棒,三角瓶,小烧杯,加热炉,漏斗,纱布,培养皿,载玻片,盖玻片,U 型玻璃棒,解剖刀,镊子,接种环,移液管,酒精灯,火柴,显微镜等。

3. 试剂及培养基:马铃薯培养基(其配方见附录),蔗糖,琼脂,去离子水100,现配的20%甘油,酒精溶液等。

三、实验原理及方法1、霉菌霉菌的营养体是分枝的丝状体。

其个体比细菌和放线菌大得多,分为基内菌丝和气生菌丝。

气生菌丝生长到一定阶段又可分化出繁殖菌丝。

不同霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子。

霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多(约为3-10μm),常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍,因此,用低倍显微镜即可观察。

霉菌菌丝较粗大,细胞易收缩变形,且孢子容易飞散,所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液,用此染液做霉菌制片的特点是细胞不变形,具有杀菌、防腐作用,不易干燥,能保持较长时间,能防止孢子四处飞散,棉兰具有一定的染色作用,染液的蓝色能增大反差。

(如果用水封片,常因渗透作用而膨胀,水也易使菌丝、孢子和气泡混为一团,影响观察。

)霉菌菌落特征:A。

因霉菌的菌丝较粗且长,故形成的菌落较疏松,常成绒毛状、絮状、蜘蛛网状或毡毯状,一般比细菌和放线菌菌落大几倍到几十倍。

B。

在固体培养基上菌落最初往往是浅色或白色,当菌落上长出各种颜色的孢子后,由于孢子具有不同形状、构造和颜色,使菌落表面呈现肉眼可见的不同结构和色泽,如黄、绿、青、黑、橙等。

C。

有些霉菌的菌丝还能分泌一些水溶性色素扩散到培养基内,使培养基正面和反面呈现不同的颜色。

D。

同一霉菌在不同成分的培养基上可形成不同特征的菌落,但各种霉菌在固定的培养基上形成的菌落,其形状、大小、颜色等特征是稳定的,因此菌落特征是鉴定霉菌的重要依据之一。

2、观察方法观察霉菌的形态有多种方法,常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法,本次实验采用载玻片培养观察法(小室培养法)。

3、载玻片培养观察法(小室培养法)用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上,接种后盖上盖玻片培养,霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。

培养一定时间后,将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。

这种方法既可以保持霉菌自然生长状态,还便于观察不同发育期的培养物。

4、有隔菌丝和无隔菌丝:5、关于本实验所用霉菌的初步认识及比较:四、实验内容根据本实验提供的四种霉菌,即根霉、毛霉、黑曲霉和青霉,运用小室培养的方法在28℃下正置培养这四种霉菌,一个培养皿中有两个琼脂小块,分别接种两种霉菌,一周后用显微镜观察这四种霉菌各自的形态特征,记录观察的结果并比较不同霉菌间形态特征上的区别五、实验步骤1、配制马铃薯培养基配制100ml马铃薯培养基(PDA),其成分配比及配制方法见附录。

将土豆去皮后切成小块,称取所需量的土豆块后将其放入盛有去离子水的小烧杯中,加热煮沸20分钟,期间可用玻璃棒进行搅拌。

加热结束后,添加去离子水使烧杯中溶液为100ml。

先用一层纱布(放置在另一个干净烧杯口)进行过滤,然后在用6层纱布过滤上一步中的滤液。

最后,向其中加入称量好的糖和琼脂,把液体转移到锥形瓶中,加棉塞并用牛皮纸封口,然后放入灭菌锅中进行灭菌。

2、需要灭菌的其他器材取6个干净的平皿,其中4套平皿中各放入一张滤纸片、一个U型玻璃棒,一个载玻片和4个盖玻片。

将这6套平皿包在一起;选取两个2ml的滴管,分别用牛皮纸包好。

3、制作琼脂块灭菌后,在酒精灯旁无菌操作倒培养基少量于灭菌培养皿(其底部已经画好了格子)中,静置冷却凝固成薄层。

将已在酒精中浸泡一段时间的解剖刀取出,在酒精灯上进行灼烧。

解剖刀稍稍冷却后,解剖刀沿着平皿底部已经划好的线切割该培养基,得到为若干1cm²左右的琼脂块。

4、无菌操作台的准备工作打开无菌操作台的电源,打开通风开关和紫外线灯开关,关上两侧的玻璃门紫外线照射20分钟。

实验操作开始前,关上紫外线灯并打开日光灯。

稍打开玻璃门,能放入手的开口距离即可,放入酒精灯并点燃。

实验操作过程中,一直通无菌风。

5、制作小室在平皿底部铺一张略小于皿底的圆滤纸片,在其上放一U型玻棒。

在玻棒上放上一块载玻片。

取方形琼脂块,将其移至载玻片上,载玻片两端各放置一块。

小室培养的平皿如下图所示(图片是从课本照下来的)。

6、接种在酒精灯上方进行无菌操作,将接种环灼烧两次后稍冷却,挑取很少量的菌落接种于琼脂块的边缘上,然后用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。

一个培养皿中的U型玻璃棒上有一个载玻片,其上两边各放一个琼脂块,两个琼脂块都需要接种,而且接不同的霉菌,琼脂块上接种了霉菌后,要左右做好标记,以防弄混了各个琼脂块上的霉菌。

7、培养两个琼脂块均接种后,用无菌镊子夹取平皿中的盖玻片盖在琼脂块上。

然后,继续无菌操作去灭菌的2ml滴管在每个培养小室中的滤纸片上各滴加2ml的20%灭菌甘油,然后盖上皿盖,于27℃正置培养。

8、镜检观察一周后,从培养箱中取出培养皿。

直接取出载玻片放在显微镜上进行观察。

先在低倍镜后高倍镜进行下观察并记录四种霉菌菌丝体及孢子的形态特征,必要时可换油镜观察。

9、实验完成实验结束后,仪器归位并整理实验台。

六、实验结果1、实验记录照片黑曲霉观察视野(图中黑色球状边缘不规则)青霉观察视野图(图中可以看到帚状孢子梗)根霉在油镜下的观察视野(图中可以清晰地观察到囊轴和孢子囊)毛霉观察视野(图中可清晰地看到完整的孢子囊和破裂的孢子囊)2、实验结果记录及对比表青霉曲霉根霉毛霉七、实验结果分析1、获得本实验成功的关键:在载玻片培养观察中,注意无菌操作,接种量要少并尽可能将分散的孢子接种在琼脂块边缘,避免培养后菌丝过于密集影响观察。

2、区分毛霉和黑曲霉:一般情况下,毛霉的孢子囊的表面光滑,其孢子都在孢子囊内,而黑曲霉的分生孢子梗膨大成球形,其表面有分生小梗,小梗顶端为一串串孢子。

所以黑曲霉的球形部位是粗糙面,而且是不规则的球形。

但是如果毛霉的孢子囊破裂,其中的孢子释放出来,则容易将该种毛霉和黑曲霉弄混。

此时,要注意观察,因为黑曲霉分生孢子梗膨大的球形表面上的分生小梗长短不一,所以圆形边缘不规则,而且因为孢子是黑色所以不易看到其一个个的孢子,但是破裂的毛霉孢子囊处是孢子散落出一片,近乎无圆形可言,但是毛霉孢子近乎无色,相对容易看到其一个个的孢子(40倍物镜下可以清晰地看到一个个的孢子)。

毛霉菌丝无隔,黑曲霉菌丝有隔。

黑曲霉有足细胞,而毛霉没有。

3、由根霉的观察图可以看出:根霉的营养菌丝体透明而且无隔,菌丝体交错勾连在一起,呈树根状;气生菌丝发达;营养菌丝体上产生匍匐枝,匍匐枝的节间形成特有的假根,要找到两个假根才能找到匍匐枝;与假根相对处向上直立着生孢囊梗,其顶端膨大形成孢子囊,囊内产生孢子;孢子囊表面光滑,其底部右半球型的囊轴。

在本小组的实验结果中,能较好的观察到根霉孢子囊部分的结构,而且很清楚。

对于假根和匍匐枝这两个本来就不容易观察到的结构,在本班内观察到了补充:根霉除了无性生殖外,还能进行有性生殖,即结合孢子,大致如下图所示。

但是不容易观察到。

该图中两个菌丝间共同形成的孢子即结合孢子。

(真正的菌丝是弯曲不规则的。

)八、实验注意事项1、在使用无菌操作台前,要先打开通无菌风的开关,并打开紫外线灯照射20分钟,这样前期灭菌才彻底2、打开紫外线灯后,一定要把两边的玻璃门合上,这样紫外线就不会泄漏出来。

紫外线灯照射无菌操作台20分钟后,一定要关上再进行实验操作,否则会使眼睛受伤。

3、使用无菌操作台进行制作小室培养的培养皿时,注意要严格无菌操作,玻璃门开口要小,把手放入即可。

4、本实验中虽然在无菌操作台上进行制培养皿操作,但还是要在酒精灯上方进行,双重保险。

5、用马铃薯配培养基时,最好把马铃薯去皮后切成小块,这样放入去离子水中进行加热煮沸时马铃薯中的淀粉更容易溶解。

6、加热煮沸操作中,一开始可以先多加些水,因为要煮沸20分钟,期间会大量蒸发失水,而且,溶液不足100ml要添加去离子水。

7、灭菌时盖玻片不要堆积在一起,而且载玻片、盖玻片不要和平皿接触,防止和平皿粘在一起而不好用镊子夹取。

8、倒薄片时,培养基倒入培养皿中的量要少,制作成很薄的平板。

9、倒平板可以不用再无菌操作台上进行。

10、接种时尽可能将菌种接在琼脂块边缘,避免培养后菌丝过于密集影响观察。

11、接种时确认有菌接上即可,接菌量不宜过多,会导致菌丝过密难以观察12、注意,培养皿底部必需要加甘油,作用是保持培养皿内的湿度。

13、注意,培养皿底部放一小片圆形滤纸片,目的是防止加入的甘油随处流动而沾湿培养基中其他处。

14、注意,本次实验的培养皿要正置培养,千万不要倒过来。

15、解剖刀一定要先在酒精中浸泡,然后使用前在酒精灯上灼烧,保证灭菌彻底,以防在切割培养基时引入细菌。

16、解剖刀在灼烧后要稍稍冷却,否则过热的刀片接触到培养基会使接触处的培养基稍融化,不利于切割。

17、可以先在培养皿底部打上格子,边长1cm的正方形,然后再倒入培养基,静置冷去后沿线用解剖刀划开即可。

18、用灭菌的解剖刀挑起小块培养基,放在载玻片两端。

19、在向小块培养基上盖盖玻片时要注意不要产生气泡,以免影响以后观察。

20、可以直接从培养皿中取出载玻片。

放到显微镜上观察。

21、用10倍到40倍的物镜进行观察即可,根据视野进行调整。

22、实验结束后,仪器归位,整理实验台。

九、实验思考题1、黑曲霉和黑根霉在形态特征上有何区别?答:①菌丝:根霉无隔有假根,曲霉无隔有足细胞。

②孢子梗:根霉位于假根上,曲霉由气生菌丝分化而来。

③孢子囊形态:根霉孢子囊表面平滑,曲霉表面不平滑,呈絮状。

2、如果要求对某霉菌不同发育时期(基内菌丝→气生菌丝→孢子丝或繁殖菌丝)进行连续观察,写出实验方案。

答:①选取对数期菌落进行同步培养,分化出处于同一生长阶段的菌。

②接种,霉菌至少接五个小室。

③培养观察:在适宜条件下培养,每隔一天在相同时间内取出一个盖玻片进行观察记录。

3、可以从哪几个方面进行霉菌菌落形态的观察和对比?答:菌落的大小(局限生长还是蔓延生长,在培养基上的直径的大小和密度);菌落的颜色(正面和反面各自的颜色,基质的颜色变化);菌落的组织形态(絮棉状,蛛网状,绒毛状等,疏松或紧密,有无同心轮纹,有无放射状的绉褶)。

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