样品采集保存和运输
临床检验标本采集、运输、保存操作规程

临床检验标本采集、运输、保存操作规程临床检验标本采集、运输和保存操作规程第一章体液标本的采集、运输和保存操作规程一、尿液标本的采集、运输和保存尿液标本的采集、运输和保存是临床检验中非常重要的一环。
尿液干化学测定的检查项目包括尿液比重、pH值、尿胆原、胆红素、潜血、酮体、蛋白质、白细胞、亚硝酸盐、葡萄糖和抗坏血酸等。
同时也需要检测尿液有形成份,如红细胞和白细胞形态等。
此外,还需要检测24小时尿总蛋白、尿肌酐和尿尿酸等。
二、脑脊液标本的采集、运输和保存脑脊液标本的采集、运输和保存也是非常重要的。
在采集脑脊液标本时,需要注意消毒和无菌操作。
运输时需要保持标本的低温,保存时需要在低温环境下保存。
三、浆膜腔积液标本的采集、运输和保存浆膜腔积液标本的采集、运输和保存需要注意消毒和无菌操作。
采集时需要避免污染和空气污染。
运输时需要保持标本的低温,保存时需要在低温环境下保存。
四、分泌物标本的采集、运输分泌物标本的采集、运输需要注意消毒和无菌操作。
采集时需要避免污染和空气污染。
运输时需要保持标本的低温。
五、分泌物革兰阴性双球菌检测标本的采集、运输分泌物革兰阴性双球菌检测标本的采集、运输需要注意消毒和无菌操作。
采集时需要避免污染和空气污染。
运输时需要保持标本的低温。
六、标本的采集、运输和保存标本的采集、运输和保存需要注意消毒和无菌操作。
采集时需要避免污染和空气污染。
运输时需要保持标本的低温,保存时需要在低温环境下保存。
七、前列腺液标本的采集、运输和保存前列腺液标本的采集、运输和保存需要注意消毒和无菌操作。
采集时需要避免污染和空气污染。
运输时需要保持标本的低温,保存时需要在低温环境下保存。
八、粪便采集、运输和保存粪便采集、运输和保存需要注意消毒和无菌操作。
采集时需要避免污染和空气污染。
运输时需要保持标本的低温,保存时需要在低温环境下保存。
第二章血液一般检验的标本采集、运输和保存操作规程一、未梢血标本采集未梢血标本采集需要注意消毒和无菌操作。
样品的运输及保存

样品的运输及保存1采样结束后应尽快将样品检验或送往留样室,需要复检的应送往实验室。
2疑似急性细菌性食物中毒样品应无菌采样后立即送检,一般不超过四小时;气温高时应将备检样品置冷藏设备内冷藏运送,不得加入防腐剂。
3需要冷藏的食品,应采用冷藏设备在0℃~5℃冷藏运输和保存,不具备冷藏条件时,食品可放在常温冷暗处,样品保存一般不超过36h。
(微生物项目常温不得超过4h)4采集的冷冻和易腐食品,应置冰箱或在包装容器内加适量的冷却剂或冷冻剂保存和运送,为保证途中样品不升温或不融化,必要时可于途中补加冷却剂或冷冻剂。
5食品标签标明存放、运输条件的食品,采集的样品存放、运输条件要与之相符,如酸奶标识说明要冷藏,样品的运送及复检样品的保存都要做到冷藏。
6需做微生物检测的样品,保存和运送的原则是应保证样品中微生物状态不发生变化。
微生物检测用的样本及不能冷藏保存的样本原则上不复检、不留样。
采用快速检测方法检测出的超标样品,应随即采用国标方法进行确认。
检测不合格的样品,要及时通知被采样单位和生产企业。
处理样品时,禁止将有毒有害液体样本直接倒入下水道。
7采集的样品注意应在保质期内,尽量抽取保质期于3个月以上的产品(保质期限不足3个月的除外)。
留样和需要确证的样品,按产品说明书要求存放,期限为检测结果出示后三个月。
对餐饮业要求凉菜48h留样。
8样本保存要保持样本原有状态,样本应尽量从原包装中采集,不要从已开启的包装内采集。
从散装或大包装内采集的样本如果是干燥的,应保存在干燥清洁的容器内,不要同有异味的样本一同保存。
9根据检验样本的性状及检验的目的不同而选择不同的容器保存样本,一个容器装量不可过多,尤其液态样本不可超过容量的80%,以防冻结时容器破裂。
装入样本后必须加盖,然后用胶布或封箱胶带固封,如是液态样本,在胶布或封箱胶带外还须用融化的石蜡加封,以防液体外泄。
如果选用塑料袋,则应用两层袋,分别封口,防止液体流出。
10特殊样本要在现场进行处理,如作霉菌检验的样本,要保持湿润,可放在1%甲醛溶液中保存,也可储存在5%乙醇溶液或稀乙酸溶液里。
采样及运输技术规范

三、地表水样品的采集、运输和保存—流程
容器的洗涤:
尽可能使用专用容器。如不能使用专用容器,那么最好准备 一套容器进行特定污染物的测定,以减少交叉污染。同时应注意 防止以前装高浓度分析物的容器污染随后同一低浓度污染物的样 品。对于新容器,应用洗涤剂清洗,再用实验室标准用水彻底清 洗。用于清洁的清洁剂和溶剂可能引起干扰,例如当分析富营养 物质时,含磷酸盐的清洁剂的残渣污染。如果使用,应确保洗涤 剂和溶剂的质量。所用的洗涤剂类型和选用的容器材质要随待测 组分来确定。测磷酸盐不能使用含磷洗涤剂;测硫酸盐或铬则不 能用铬酸—硫酸洗液。测重金属的玻璃容器及聚乙烯容器通常用 盐酸或硝酸(c=1mol/L)洗净并浸泡一至两天然后用蒸馏水或 去离子水冲洗。
采 样 方 法 和 采 样 设 备 确 定
样 品 保 存 方 法 的 确 定
样 品 的 运 输 和 管 理
实 验 室 内 、 间 质 量 控 制
度精 密
平 行 双 样
加ห้องสมุดไป่ตู้回收率
准 确 度
空白试验值 插入标准 样品分析
原 始 数 据 整 理 复 核
三、地表水样品的采集、运输和保存—流程
确 定 采 样 负 责 人
二、地表水样品的采集、运输和保存—重要性
样品的保存——各种水质的水样,从采集到分析这段
时间内,由于物理的、化学的、生物的作用会发生不同程
度的变化,这些变化使得进行分析时的样品已不再是采样 时的样品,为了使这种变化降低到最小的程度,必须在采 样时对样品加以保护。
二、地表水样品的采集、运输和保存—重要性
水样变化的原因 生物作用:细菌、藻类及其他生物体的新陈代谢会消耗水样中的某些 组分,产生一些新的组分,改变一些组分的性质,生物作用会对样品 中待测的一些项目如溶解氧、二氧化碳、含氮化合物、磷及硅等的含 量及浓度产生影响。 化学作用:水样及水样各组分可能发生化学反应,从而改变了某些组 分的含量与性质。例如溶解氧吸收空气中二氧化碳而改变,空气中的 氧能使二价铁、硫化物等氧化,聚合物解聚,单体化合物聚合等。 物理作用:光照、温度、静置或震动,敞露或密封等保存条件及容器 材质都会影响水样的性质。如温度升高或强震动会使得一些物质如氧、 氰化物及汞等挥发,长期静置会使Al(OH)3、CaCO3、Mg3(PO4)2 等沉淀。某些容器的内壁能不可逆地吸附或吸收一些有机物或金属化 合物等。
样品采集运输保存的管理

病原微生物标本采集中的要求
一)、样本种类 按照病原微生物种类分:病毒、细菌、真菌 寄生虫等; 按照检测项目分:血清学抗体检测、病原学 检测、核酸检测等。 不同的病原微生物或检测项目对样本的采 集都有不同的要求。
病原微生物标本采集中的要求
(一)、病毒性疾病样本的采集原则 早、准、冷、快、足、护 1、宜早不宜迟: 要求在发热期采集,一般在一周以内,最 好3天以内,可提高病毒分离成功率及检 出率。(病毒血症期)பைடு நூலகம்2、从富集病毒的组织或体液中采集。如呼吸 道或消化道分泌物或血液或尿液等
病原微生物标本采集中的依据
1.《中华人民共和国传染病防治法》 2.《病原微生物实验室生物安全管理条例》 3.《可感染人类的高致病性病原微生物菌 (毒)种或样本运输管理规定》 4.人禽流感疫情预防控制技术指南(试行) 附件7:禽流感实验室检测技术方案
病原微生物标本采集中的依据
5.非典型肺炎病例实验室检测样本采集技术指南 (试行)(卫生部) 6.卫生部关于建立传染性非典型肺炎相关样品资源 库和病毒毒株库的通知(卫科教发[2003]234号 7.关于印发《传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂 行管理办法》和《传染性非典型肺炎病毒的毒种 保存、使用和感染动物模型的暂行管理办法》的 通知(科技部、卫生部、国家药监局、国家环保 局联合下发的国科发农社字[2003]129号)
一、样本采集
样本采集的时间、数量和质量得当与否都直接关 系到实验室检测结果的可靠性和准确性,可见样 本采集是实验室检测的基础。 样本采集是一项技术性和专业性很强的工作,样 本采集的人员,需要通过必要的培训。 样本采集需要与患者或具有感染性的个体直接接 触,存在被感染的潜在风险。 可见,样本的采集无论对实验室检测结果或 样本采集人员均至关重要。
食品安全事故样本采集、保存及转运要求

食品安全事故样本采集、保存及转运要求一、常见的食品安全事故标本和样品采集类型病人:粪便、尿液、血液、呕吐物、洗胃液、肛拭子、咽拭子;从业人员:粪便、肛拭子、咽拭子、皮肤化脓性病灶标本;可疑食品:可疑食品剩余部分及同批次产品、半成品、原料;加工单位剩余的同批次食品,使用相同加工工具、同期制作的其他食品;使用相同原料制作的其他食品;食品制作环境:加工设备、工用具、容器、餐饮具上的残留物或物体表面涂抹样品或冲洗液样品;食品加工用水;其他:由毒蕈、河豚等有毒动植物造成的中毒,要搜索废弃食品进行形态鉴别。
二、标本(样品)的采集、保存和运送(一)粪便标本。
粪便标本是检测细菌、病毒、寄生虫、毒素等的常用标本。
应优先采集新鲜粪便15-20g。
若病人不能自然排出粪便,可采集肛拭子。
采集肛拭子标本时,采样拭子应先用无菌生理盐水浸湿后插入肛门内3cm-5cm处旋转一周后拿出。
合格的肛拭子上应有肉眼可见的粪便残渣或粪便的颜色。
1.用于细菌检验的标本用于细菌检测的粪便标本需5g。
肛拭子,需插入Cary-Blair 运送培养基底部,将顶端折断,并将螺塞盖旋紧。
标本应4℃冷藏保存。
若疑似弧菌属(霍乱弧菌、副溶血弧菌等)感染,标本应常温运送,不可冷藏。
2.用于病毒检验的标本用于病毒学检测的粪便需10 g。
肛拭子需置于2ml病毒保存液中。
标本应立即冷冻保存。
如采样现场无冷冻条件,标本应4℃冷藏,并尽快送至有冷冻条件的实验室。
标本保存和运送过程中,冷藏或冷冻的温度和时间必须记录。
3.用于寄生虫检验的标本寄生虫检测需要新鲜大便5g,按1份粪便对3份防腐剂的比例加入防腐剂溶液(10%福尔马林或 10%聚乙烯醇)在室温条件下储存和运送。
如果暂无防腐剂,可将未处理粪便标本置4℃冷藏(但不能冷冻)48小时。
4.当致病原因不明时,每个病例的粪便应分为三份、肛拭子采集3个,分别按照细菌、病毒和寄生虫检验要求进行保存。
(二)血液及血清标本。
全血标本通常用于病原的培养及基因检测、毒物检测,一般情况下采集5ml-10ml。
临床试验检验标本采集及运输标准操作规程

临床试验检验标本采集及运输标准操作规程全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:一、前言临床试验是评价药物安全性和有效性的重要手段,而标本采集及运输是临床试验的重要环节之一。
合理的标本采集和运输操作规程对于保证临床试验数据的准确性和可靠性至关重要。
为了规范标本采集及运输工作,提高临床试验的质量,特制定本标准操作规程。
二、术语定义1. 临床试验:指对人体进行的药物安全性和有效性评价的研究。
2. 标本:指用于生化检测、药物浓度测定等分析的生物组织或体液。
3. 采集者:指从受试者身上采集标本的人员。
4. 运输者:指将标本从采集点送至检验点的人员。
三、采集操作规程1. 采集前准备(1)采集者应接受相关培训,了解采集标本的目的、方法和注意事项。
(2)采集器具应事先消毒,并准备好采集所需的标本管、采血针等工具。
(3)标本采集应在合适的环境中进行,保证采集者和受试者的安全和舒适。
2. 采集过程(1)根据临床试验方案要求,确保采集正确的标本类型和数量。
(2)遵循标本采集的标准流程,依次进行手部消毒、标本采集、采集管标记等操作。
(3)采血时应注意选择适当的采血部位和针头,避免造成受试者不必要的疼痛和伤害。
3. 采集后处理(1)采集完毕后,采集者应及时将标本管密封并标记好受试者信息。
(2)遵守标本储存和运输的规定,确保标本的稳定性和完整性。
1. 运输前准备(1)运输者应对标本进行分类和包装,确保标本的准确性和完整性。
(2)运输前应检查标本信息是否完整,并与采样者信息进行核对。
2. 运输过程(1)运输标本应选择符合要求的运输工具和容器,避免标本泄漏和污染。
(2)在运输途中应避免标本受到振动和温度变化,保证标本的稳定性和质量。
(3)运输者应妥善保管标本,避免与其他物品混杂,并遵守相关安全规定。
3. 运输后处理(1)标本送达检验点后,应立即进行登记和接收,确保标本信息准确无误。
(2)对标本进行处理时应遵守相关规程,确保标本能够及时送检并得到准确分析。
海洋监测技术2-样品采集、贮存和运输

②采样程序包括几个主要方面 a.确定采样目的; b.采集的时空尺度; c.采样点的设置; d.现场采样方法及质量保证措施
采样目的 是决定采样地点、采样 频率、采样时间、样品处理及分析 技术要求的主要依据。
③采样目的:
a. 环境质量控制 b. 环境质量表征 c. 污染源鉴别
a. 环境质量控制: 环境质量控制指对某海域的一个或几个环 境要素的浓度进行反复核查,核查结果决 定是否要及时对环境状况采取相应措施。
谱分析具有准确性和简明性,可以作为 确定采样时间和频率的一种方法,根据大量资 料绘制出的污染物入海量的变化曲线,在变化 的最高期望或较高期望上确定采样时间和采样 频率。
运用多年调查监测资料,以适合的参数作 为统计指标,进行时间聚类分析。
根据时间聚类结果也可以确定采样时间和采 样频率。还可运用其他统计学方法,进行统计 学检验,进而确定采样时间和频率。
品(取决于时间)及在固定的流量间隔下采集定 时样品(取决于体积).
常用在直接入海排污口等特殊情况下,以揭 示利用瞬时样品观察不到的变化。
c.混合样品 指在同一采样点上以流量、时间、体积为基
础的若干份单独样品的混合。 混合样品用于提供组分的平均数据。 若水样中待测成分在采集和贮存过程中变化
明显,则不能使用混合水样,要单独采集并保 存。
a.一般性用途容器: 可用自来水洗和一般用涤剂清洗尘埃和包装 物质,然后用铬酸和硫酸洗涤液浸泡,再用蒸馏 水淋洗。 b.使用过的容器: 在器壁和底部多有吸附和附着的油分、重金 属及沉淀物等,根据不同的实验要求,一般来说 应避免使用,如果必须再使用,须用刷子充分洗 净后方可使用。
c.具塞玻璃瓶、聚乙烯瓶: 在磨口部位常有溶出、吸附和附着现象,聚 乙烯瓶特别易吸附油分、重金属、沉淀物及有机 物,难以除掉,要十分注意。 使用聚乙烯容器时,先用1 mol/L 盐酸溶液清 洗,然后再用1+3硝酸溶液进行较长时间的浸泡。
现场样品采集,保存,运输

现场样品采集、保存和运输在现场调查中,很重要的—项工作是正确采集、妥善保存、和尽快送检样品,以及随后对样品检测结果进行正确的判读和分析。
(一)样品采集的目的、作用和原则现场调查的目的主要可分为两大类:一是查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因,二是进行卫生质量监测和评价。
应该遵循如下总原则:1.注意生物安全:需要采取的具体措施包括如下两方面:①个人防护:采样时要戴手套,接触不同患者时不能重复使用一副手套,以免交叉感染,并注意手套是否有小的破损;采样中尽可能穿防护服;采样后消毒要穿戴防护服和厚橡胶手套,对污染区表面和溢出物进行消毒;如怀疑有高度传染力的病原,需使用护目镜、呼吸面罩等;为了防止意外,确保安全,采样应备有急救包。
②恰当处理污染废弃物:污染的可废弃设备和材料应先消毒后废弃;用过的针头妥善收集消毒,并按规定销毁或损毁;在暴发疫点使用过的防护服、设备、材料等使用化学消毒剂消毒后再清洗,特殊情况也可在现场建简易焚烧炉焚烧。
2.注意采样的代表性或针对性:以卫生质量评价为目的的样品采集,影响采样代表性的因素包括采样量、采样部位、采样时间、采样的随机性和均匀性,以及按批号抽样。
以查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因为目的的样品采集,不要求样品的代表性,强调针对性,尽可能采集病原微生物含量最多的部位和足够检测用的样本。
3.注意采样时间和种类:以分离培养细菌为目的,则应尽量在急性发病期和使用抗生素之前采集标本,如果已使用抗生素,采样和分离培养最好加入相应的中和剂(中和样品中残存的抑菌物质)或进行其他处理。
作病毒分离和病毒抗原检测的标本,应在发病初期和急性期采样,最好在发病1~2天内采取。
4.注意避免采样引入新的污染或者对微生物的杀灭因子:所有采样用具、容器需严格灭菌,并以无菌操作采样。
对微生物样品,应避免采样时对微生物的杀灭作用和引入新的抑菌物质,如容器是否有消毒剂的残留,或使用刚烧灼未冷却的采样工具。
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基因芯片样品的采集、保存和运输
基因芯片实验、microRNA芯片实验、
PCR芯片实验和实时定量PCR实验的样品准备
一、动物组织样品保存与运输(每张芯片需50-100mg组织)
1、新鲜组织样品的保存与运输
A、使用RNA later试剂
→取新鲜组织(注:生物体死亡后尽快在10分钟内取材),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,所用组织必须切至厚度在
0.5 cm以下(长宽不限),然后放入装有5倍体积RNA later的离心管(或冻存管)中。
→4℃孵育过夜,此时样品管需要横置以便组织块充分接触到RNA later,然后转入- 20℃中保存。
样品在- 20℃不会冻结,但是溶液中可能有一些晶体出现,这并不影响后续的RNA抽提。
冻存样品也可以反复冻溶,其RNA含量和完整性不受影响。
→RNAlater处理的标本可用常规冰袋4℃低温运输(无需使用干冰- 70℃运输)。
B、使用Trizol试剂
Trizol试剂可抑制RNA酶活性,破坏细胞膜结构以裂解细胞释放出RNA。
→取新鲜组织(注:生物体死亡后1分钟内取材料并保存好),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,每50~100 mg组织加1 ml Trizol溶液匀浆裂解组织样品,操作最好在冰上进行。
→匀浆的裂解液4℃短期保存(1个月),-20度或- 70℃长期保存。
干冰运输,短期(5天以内)冷藏(4℃)运输亦可。
2、冻存组织的保存与运输
生物体死亡后尽快(最好在10分钟内)切取新鲜组织,以PBS或生理盐水清洗干净切为小块,立刻放入液氮中冷冻2-3小时后可转入-70℃冰箱保存或着一直保存在液氮中。
冻存组织可放入干冰中直接运输,或者以Trizol 4℃下匀浆:冻存的组织块以液氮研磨后加Trizol或直接加Trizol以电动匀浆器匀浆,匀浆的裂解液干冰运输或短期(5天以内)冷藏(4℃)运输。
二、哺乳动物培养细胞样品采集、保存与运输——使用Trizol试剂(不建议使用RNAlater)
1、悬浮细胞
→悬浮细胞培养液倒入离心管中,离心沉淀细胞,弃去上清液。
→细胞沉淀(1×107个细胞)中加入1 ml的Trizol裂解液。
→反复吸打几次后,目视可见细胞层溶解完全。
- 70℃保存或干冰运输。
注:Trizol处理的标本冷藏(4℃)运输,短期(5天以内)亦可。
2、贴壁细胞
→从培养容器中吸出并弃去培养液。
→培养瓶中直接加入Trizol试剂,Trizol用量与细胞贴壁面积有关,约15 cm2细胞贴壁面积加入1 ml Trizol。
→反复吸打几次后,目视可见细胞层溶解完全。
- 70℃保存或干冰运输。
注:Trizol处理的标本冷藏(4℃)运输,短期(5天以内)亦可。
注:
1、上海市内细胞样品也可以直接常温运送,运送时在培养瓶中装满培养液并以封口膜封口,然而某些实验条件中包含时间限制,建议以Trizol处理。
2、所使用的1.5 ml冻存管或离心管、枪头等必须高温灭菌,装好样品后管口需要以封口膜封好。
3、如需干冰,快递运输所用干冰量至少为8公斤,且运输用泡沫箱需用封箱带密封。
植物组织样品准备
组织需要量:
100mg - 1g,根据植物不同部位的组织决定组织需要量(尽可能量多些,但不必超过1g)
保存和运输方法:
准确取得所需新鲜组织后,如有必要可用PBS清洗干净,将所用组织切碎,装入冻存管中或者用锡箔包裹好,立即投入液氮中保存。
冻存组织可干冰或液氮运输。
注:
1、所使用的1.5 ml冻存管或离心管、枪头等必须高温灭菌,装好样品后管口需要以封口膜封好。
2、快递运输所用干冰量至少为8公斤,且运输用泡沫箱需用封箱带密封。
蛋白芯片实验、转录因子芯片实验和免疫印迹实验的样品准备
悬浮细胞:
→约1×107个细胞,低速离心收集,弃去培养液,加入2-5 ml PBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入- 70°C冰箱保存。
干冰运输。
贴壁细胞:
→约1 × 107个贴壁细胞,胰酶消化后加入PBS悬浮细胞,低速离心收集,弃去液体,加入2-5 ml PBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入- 70°C冰箱保存。
干冰运输。
组织:
→采集新鲜组织(注意:生物体死亡后10分钟内取材料并保存好),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,切为小块,放入液氮或- 70°C冰箱中保存,干冰运输。
血清和血浆:
→采集新鲜血液,分离血清或血浆后放入- 20°C或- 70°C冰箱保存。
干冰运输。
检测蛋白芯片血清约需要100-200ul 的量。
注:
1、本市内细胞样品也可以直接常温运送,运送时在培养瓶中装满培养液并以封口膜封口,然而某些实验条件中包含时间限制,建议冻存后运输。
2、所使用的1.5 ml冻存管或离心管、枪头等必须高温灭菌,装好样品后管口需要以封口膜封好。
3、快递运输所用干冰量至少为8公斤,且运输用泡沫箱需用封箱带密封。
ChIP-chip样本采集、保存和运输
悬浮细胞:
→约1×107个细胞,低速离心收集,弃去培养液,加入2-5 ml PBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入- 70°C冰箱保存。
干冰运输。
贴壁细胞:
→约1 × 107个贴壁细胞,胰酶消化后加入PBS悬浮细胞,低速离心收集,弃去液体,加入2-5 ml PBS悬浮细胞,转入小离心管中,低速离心沉淀细胞,弃去PBS,放入- 70°C冰箱保存。
干冰运输。
组织:
采集新鲜组织(注意:生物体死亡后10分钟内取材料并保存好),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,切为小块,放入液氮或- 70°C冰箱中保存,干冰运输。
为获得理想结果,建议根据下述方法处理、保存及运输细胞样品用于ChIP-chip实验:
悬浮细胞:
1.取107悬浮细胞低速离心,用10ml培养基将细胞沉淀重悬于50ml离心管中;
2.加入270ul 37%的甲醛(本公司可提供),轻轻混匀,室温孵育10分钟;该步骤最好在通风橱中完成;
3.加入1ml 1.25M的苷氨酸(本公司可提供),轻轻混匀,室温孵育5分钟,中和甲醛;
4.1000×g离心5分钟,弃上清,用预冷的1×PBS/EDTA洗细胞两遍;
5.1000×g离心5分钟,弃上清;
6.收集到的样品-80℃冻存,干冰运输
贴壁细胞:
1.将10cm培养皿中(107细胞)旧的培养基吸掉,添加10ml新鲜培养基;
2.加入270ul 37%的甲醛(本公司可提供),轻轻混匀,室温孵育10分钟;该步骤最好在通风橱中完成;
3.加入1ml 1.25M的苷氨酸(本公司可提供),轻轻混匀,室温孵育5分钟,中和甲醛;
4.将皿中的混合液吸掉,用预冷的1×PBS/EDTA洗细胞两遍,加入1ml含有1×protease inhibitor cocktail
的1×PBS,用细胞刮将皿底的细胞刮下,收集到1.5ml离心管中;
5.1000×g离心5分钟,弃上清;
6.收集到的样品-80℃冻存,干冰运输
注:
1、所使用的1.5 ml冻存管或离心管、枪头等必须高温灭菌,装好样品后管口需要以封口膜封好。
2、快递运输所用干冰量至少为8公斤,且运输用泡沫箱需用封箱带密封。
注:特殊样本(如:石蜡包埋样本、全血样本等)请来电咨询。