生物化学实验指导书
生物化学实验
生物化学实验指导书蛋白质浓度测定（Foin-酚试剂法）一、实验目的:熟悉并掌握Folin-酚法测定蛋白质浓度的原理和方法。
二、实验原理蛋白质或（多肽）分子在含有酪氨酸或色氨酸，能与Folin- 起氧化还原反应，生成合物，蓝色的深浅与蛋白质浓度成正比，可用比色法测定蛋白质浓度。
此法也适用酪氨酸或色氨酸的定量测定。
三、仪器、原料和试剂（1）仪器：可见分光光度计（2）试剂：Folin-酚试剂A：将1g 碳酸钠溶于L 0.1mol/L氢氧化钠溶液。
另将0.5g CuSO4•5H2O溶于 L 1%酒石酸钾（或酒石酸钠）溶液。
将前者与硫酸铜-酒石酸钾1mL混合，混合后的溶液1日内有效。
Folin-酚试剂B：在1.5L容积的磨口回流瓶中加入100g钨酸钠（Na2WO4•2H2O），（Na2MoO4•2H2O），及700m L 85%磷酸，L浓盐酸充分混合，烧瓶内加小玻璃珠数颗，以防溶液溢出，接上回流冷凝管以文火回流10h。
回流结束后，加入150g硫酸锂（LiSO4），L蒸馏水及数滴液溴，开口继续沸腾15min，以除去多余的溴。
冷却后溶液呈金黄色（如果仍呈绿色，须再重复的步骤），定容至1L，过滤，滤液置棕色瓶中保存，可在冰箱长期保存。
若此贮存液使用过久，颜色由可加几滴液溴，煮沸数分钟，恢复原色仍可继续使用。
使用时用标准NaOH滴定酸度，以酚酞为指示剂。
该试剂的酸度应为2mol/L左右，将之稀释至相当于1mol/L酸度使用，即为Folin-酚试剂。
酪蛋（0.5%）。
四、实验步骤（1）蛋白浓度标准曲线制作取7支干净试管，分两组按表1顺序加入试剂。
混匀，室温放置10min，各管再加Folin-酚试剂B 0.5mL，30min后比色（500nm），以标准蛋白量为横坐标，吸光值为纵坐标，在坐标纸上绘制标准曲线。
表1 Folin-酚法测定蛋白质浓度——标准曲线的制作管号0123456试剂酪蛋白00.050.10.20.30.40.5蒸馏水(mL)0.50.450.40.30.20.10 Folin- 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0（2）样液测定准确吸取样液0.5mL置干净试管内，加入4mL Folin-酚试剂A，10min后，再加试剂B 0.5mL，30min后比色（500nm），对照标准曲线求出样液蛋白质浓度。
生物化学实验指导
《生物化学》实验指导实验室规则一、实验目的生物化学是医学教育中的一门实践性较强的基础学科。
实验教学是过程的重要组成部分，是理论教学的延伸和补充。
实验目的是：1、初步学会生物化学实验的基本操作技能及实验研究的基本方法。
2、熟悉生物化学实验原理，了解一些临床生化检验项目。
3、培养严肃认真的工作方法、实事求是的科学态度、团结协作的工作作风和观察分析、思考、独立解决问题的能力。
二、实验基本要求实验教学包括实验前准备、实验操作、整理实验结果、书写实验报告等环节，为了提高实验效果，实现实验目的，要求学生必须做到以下几点。
（一）实验前1、仔细阅读实验指导，了解实验目的和要求，充分理解实验原理，熟悉实验步骤、操作程序和注意事项。
2、预测实验各个步骤可能得到的结果，对预期实验结果能做出合理的解释。
3、注意和估计实验中可能发生的误差，并制定防止误差的措施。
（二）实验时1、保持实验室肃静，不能进行与实验无关的活动。
2、在教师或实验技术人员的指导下，熟悉仪器的构造、性能及操作规程。
3、实验器材摆放整齐，有条不紊、装置正确。
4、按照实验步骤，严肃认真的循序操作，不能随意更动。
5、爱护公物，注意节省实验器材和药品。
注意安全，严防触电、火灾、酸碱灼伤及中毒事故的发生。
6、仔细、耐心地观察实验田中出现的现象，随时客观的记录实验结果，以免发生错误或遗漏。
实验条件应始终保持一致，如有变动,应加文字说明。
（三）实验后1、整理实验结果，书写实验报告，按时交给指导教师评阅。
2、整理实验仪器和清洗玻璃仪器，关闭仪器、设备和电源。
清点实验器材，办理借还手续。
3、做好实验室清洁卫生工作，关闭水、气阀门，切断电源，关闭门窗，确保安全。
实验一生化实验基本操作一、实验目的通过基本操作训练，学会熟练进行进行玻璃仪器洗涤；吸量管使用；溶液的混合；离心机使用；７２１型分光光度仪使用。
二、实验用品烧杯、试管；吸量管、移液管；旋涡混合（振荡）器、玻璃棒；离心机使用；７２１型分光光度仪三、实验内容及步骤（一）玻璃仪器的洗涤在生化实验中，玻璃仪器洁净与否，是获得准确结果的重要环节。
生物化学实验指导1
生化实验室的一般规则1. 进入实验室应穿着工作服。
留长发的同学应挽短、戴帽。
2. 整洁。
实验台必须洁净，各种仪器放置要有秩序。
实验完毕，必须将仪器洗净、放好，拭净台面，方可离开实验室。
3. 安静。
实验时不可谈笑，如有问题可以小声请教师解答。
4. 废物及废液处理。
实验完的废液应倾入水槽中，并用水冲净。
但浓酸、浓碱及氰化物等不可倒入水槽，应倾入预先准备的废液盆或污物桶中。
少量浓酸、浓碱可直接倾入水槽，然后以大量流水冲净。
火柴梗、废滤纸、棉花等不可扔入水槽，应弃入废物盆或垃圾箱中，以免堵塞水管。
5. 试剂与标准溶液。
取用试剂后，应立即将瓶塞盖好；放回原处。
取用有毒试剂时，须用滴定管或滴管。
取样时，应注意用多少取多少。
如未用完只可弃去，不可倒回瓶中；6. 凡可产生烟雾或有毒气体的实验必须在通风橱中操作。
7. 在用恒温水浴箱保温时，应注意随时盖好箱盖。
调节温度到所需温度后，即不再旋动调温旋扭。
8. 贵重仪器如分光光度计、离心机等必须爱护，使用前应熟读使用方法，记住操作要点，按操作规程工作。
如有问题应请教师帮助，不得自行拆卸检修。
9. 防火。
勿使酒精、乙醚或其它易燃试剂靠近火焰。
若蒸发此类溶液时，应用水浴，不得直火加热，以免发生火灾。
10. 实验前应熟读实验指导，记住要点。
实验时应仔细操作并注意观察现象及结果，及时记录。
生化实验的基本操作-1-一、玻璃器皿的洗涤玻璃器皿的洗涤在生物化学实验中是一项重要的工作。
实验性质不同所采取的洗涤方法也不同。
例如研究酶制备的反应时，组织匀浆对金属的污染是非常敏感的，至于细菌的悬浮液对少量的金属可能不敏感，但少量的维生素和其它有机物质则有较大的影响。
一般氧化剂洗液如重铬酸洗液不能有效地除去油脂、硫酸钡等污迹。
因此污迹不同所应采用的洗涤试剂和方法也不同。
如可用汽油或洗涤剂（洗衣粉液或洗洁净）除去油脂，用酸性硫代硫酸钠溶液或热草酸除去氧化性污迹MnO2等，用40％尿素除去附着管内壁的血凝块等。
【精品】食品专业基础实验指导书生物化学实验
《食品质量与安全》专业基础实验指导书上海理工大学医疗器械与食品学院实验实训中心目录课程名称:《生物化学实验指导》实验名称:实验一蛋白质含量的测定－考马斯亮蓝G250染色法实验二蛋白质的两性性质及等电点的测定实验三紫外吸收法测定核酸的含量实验四可溶性总糖的测定（蒽酮比色法)一、实验一蛋白质含量的测定－考马斯亮蓝G250染色法二、实验目的：通过实验掌握蛋白质的定量测定方法。
三、预习要求：要求预习实验讲义。
四、实验原理:考马斯亮蓝G250测定蛋白质浓度，是利用蛋白质-染料结合的原理，定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。
考马斯亮蓝G—250存在着两种不同的颜色形式,红色和蓝色。
考马斯亮蓝G-250在酸性游离状态下呈棕红色，最大光吸收在465nm，当它与蛋白质结合后变为蓝色,最大光吸收在595nm。
在一定的蛋白质浓度范围内，蛋白质—染料复合物在波长为595nm处的光吸收与蛋白质含量成正比，通过测定595nm处光吸收的增加量可知与其结合蛋白质的量。
蛋白质和考马斯亮蓝G—250结合，在2min左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速，其结合物在室温下1小时内保持稳定。
蛋白质—染料复合物具有很高的消光系数，使得在测定蛋白质浓度时灵敏度很高，可测微克级蛋白质含量。
五、实验设备与器材：仪器721型分光光度计、分析天平（万分之一)、量筒（100ml)、烧杯(250ml)、移液管(1ml,5ml)、漏斗、漏斗架、容量瓶（100mL,1000mL）、试管试剂：牛血清白蛋白蛋白质标准溶液：称取10mg牛血清白蛋白,溶于100mL蒸馏水中，即为100μg/mL的蛋白溶液.考马斯亮蓝G250试剂：称取100mg考马斯亮蓝G250溶于50mL90%乙醇溶液中，加入85％的磷酸100mL，最后用蒸馏水定容至1000mL。
此溶液在室温下可放置1个月。
95％乙醇溶液85％磷酸六、实验内容与步骤：1、标准曲线绘制取6支试管，按下表加入各试剂。
20170328修订-生物化学实验指导书(2017) (1)
《生物化学》实验指导书2017年03月28日修订目录实验一生物化学实验常用仪器设备及使用实验二甲醛滴定法实验三糖的定量：3，5－二硝基水杨酸比色法实验四粗脂肪提取和含量测定实验五血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳实验六动物组织中脱氧核糖核酸的制备及测定实验一生物化学实验常用仪器设备及使用一、生物化学实验须知1．实验室规则(1) 实验课必须提前5 分钟到实验室,不迟到,不早退，应自觉遵守课堂纪律。
(2) 使用仪器、药品、试剂和各种物品必须注意节约, 应特别注意保持药品和试剂的纯净, 严防混杂污染。
(3) 实验台、试剂药品架必须保持整洁, 仪器药品摆放井然有序。
实验完毕,需将药品、试剂排列整齐, 仪器洗净倒置放好, 实验台面抹拭干净, 经教师验收仪器后, 方可离开实验室。
(4) 使用和洗涤仪器时, 应小心谨慎, 防止损坏仪器。
使用精密仪器时, 应严格遵守操作规程, 发现故障应立即报告教师, 不要自己动手检修。
(5) 在实验过程中要听从教师的指导, 严肃认真地按操作规程进行实验, 并简要、准确地将实验结果和数据记录在实验记录本上。
课后写出实验报告, 由课代表收齐交给教师。
(6)仪器损坏时, 应如实向教师报告, 真填写损坏仪器登记表, 然后补偿一定金额。
(7)每次实验课安排同学轮流值日, 值日生要负责当天实验的卫生和安全检查。
2．实验记录实验课前应认真预习实验内容，将实验名称、实验原理、实验内容和步骤等简单扼要写在记录本上。
实验记录本要标明页码，不能随意撕掉任何一页。
实验中使用的试剂纯度和终浓度以及使用的仪器类型等都要记录清楚。
实验中观察到的现象、结果和得出的数据，应及时直接记在记录本上，绝对不可以随意记在单片纸上。
原始记录必须准确、简练、清楚。
3．实验报告的书写实验结束后,应及时整理和总结实验结果, 写出实验报告。
（1）标题标题应包括实验名称、实验时间、实验室名称、实验组号、实验者及同组者姓名、实验室条件。
（2）实验目的（3）实验原理应简述基本原理，不要完全照抄实验指导书。
生物化学与分子生物学实验指导书-方成
实验五：血清蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳（验证性；4学时）【实验目的】1.掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理。
2.熟悉聚丙烯酰胺凝胶电泳的操作过程。
3.了解聚丙烯酰胺凝胶电泳的特点和应用范围。
【实验原理】1．聚丙烯酰胺凝胶的聚合原理聚丙烯酰胺凝胶(PAG)是一种人工合成的凝胶，由丙烯酰胺（Acrylamide简写为Acr）和交联剂甲叉双丙烯酰胺（N，N¹-methylene-bisacrylamide，简写Bis）在催化剂（过硫酸胺或核黄素）的作用下，聚合成含有酰胺基侧链的脂肪族长链，相邻的两个链通过甲叉桥交联形成就具有三维网状结构的聚丙烯酰胺凝胶。
为了加速聚合，在合成凝胶时还加入四甲基乙二胺作为加速剂。
聚丙烯酰胺凝胶具有三维网状结构，能起分子筛作用。
用它作电泳支持物，对样品的分离不仅取决于各组分所带电荷的多少，也与分子大小有关。
凝胶网孔的大小主要受成胶物的总浓度及Acr和Bis的比例的影响。
一般电泳采用成胶物质总浓度为7.5%，此浓度称为标准凝胶浓度。
如果改变总胶浓度，也应相应改变Acr和Bis的比例。
2．不连续聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳的原理根据凝胶各部分缓冲液的种类及pH值，孔径大小是否相同等，可分为连续系统和不连续系统聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）。
连续系统是指电泳槽内缓冲液的pH值与凝胶中的相同，不连续系统则不同。
不连续圆盘电泳一般是在小玻璃管内进行的。
把三种性质不完全一样的聚丙烯酰胺凝胶重叠起来。
上层为样品胶，中间为浓缩胶，这两层胶的凝胶浓度为3%是大孔胶，应用Tris-HCl 缓冲液，其pH6.7。
下层是分离胶，此层凝胶总浓度为7.5%，是小孔胶，也用Tris-HCl缓冲液，pH8.9。
上下电泳槽缓冲液是Tris-甘氨酸缓冲液，pH=8.3。
由于凝胶的孔径和缓冲液的pH值不同，产生浓缩效应、电荷效应和分子筛效应，使电泳的灵敏度、分辨率提高。
（1）浓缩效应：无论哪种电泳方式，要想得到良好的分离效果，电泳开始前必须使样品中各种成分同处于同一起跑线上。
生化技术实验指导书(20学时)
生化技术实验指导书湖北工业大学生物工程学院二0一0年三月修订实验一酵母RNA的提取及其组分的鉴定一、实验目的1.了解稀碱法提取RNA及提取物组分鉴定的基本原理；2. 掌握稀碱法提取RNA及提取物组分鉴定的具体操作方法。
二、实验原理酵母中RNA的含量比较丰富（2.67%~10%），而DNA的含量相对地较少（据资料报道，酵母DNA的含量低于RNA的20%），因此从酵母中提取RNA比较方便。
RNA溶于碱性溶液，碱性溶液使蛋白质带负电荷，促进RNA(带负电荷)与蛋白质的分离，碱性溶液可使酵母细胞壁变性，同时进行加热，可增加细胞壁的通透性，使核酸从细胞内释放出来。
因此，酵母粉用稀碱液加热抽提时，可将其中的RNA抽提出来。
当碱性抽提液中和后，加入2倍体积的95%乙醇时，可以使抽提物沉淀出来。
抽提物的主要成分是RNA的钠盐，并带有少量的蛋白质。
用碱抽提时，RNA会有不同程度的降解。
地衣酚（3，5-二羟基甲苯）是比较灵敏的测定戊糖的试剂，常用于测定RNA。
核糖与地衣酚试剂反应呈现鲜绿色。
地衣酚试剂反应灵敏，也易被其他物质干扰。
DNA中的脱氧核糖也可与地衣酚反应，因此，单靠地衣酚显色实验不能作为RNA 与DNA鉴别依据。
二苯胺试剂是常用于测定DNA中脱氧核糖的试剂，脱氧核糖与二苯胺试剂反应产生蓝色物质，而RNA中的核糖一般不与苯胺起反应。
嘌呤碱可与硝酸银反应生成白色的嘌呤银化合物的沉淀。
双缩脲反应是检验蛋白质常用的颜色反应。
双缩脲或含有两个以上肽键的化合物（蛋白质、肽等）在碱性条件下与硫酸铜反应生成紫红色的配合物。
如果蛋白质含量很低时，此颜色反应不易观察到。
三、试剂与器材1. 试剂：（1）酵母粉（药用）；（2）0.5%NaOH溶液；（3）乙酸；（4）10%硫酸溶液；（5）氨水；（6）5%硝酸银溶液；（7）95%乙醇；（8）地衣酚试剂（硫酸铁铵1.35g，地衣酚2g，用蒸馏水配成50mL作为母液，保存于冰箱中。
使用前，取母液2.5mL，加浓盐酸41.5mL再加蒸馏水60mL）；（9）二苯胺试剂（1.5g二苯胺溶于100mL高纯度的冰醋酸中，再加1.5mL浓硫酸）；（10）10%氢氧化钠溶液；（11）1%硫酸铜溶液。
大四选修实验课生物化学实验教学大纲
大四选修实验课生物化学实验教学大纲一、实验课程简介1.1 实验课程名称：生物化学实验1.2 实验课程性质：选修实验课1.3 实验课程学分：2学分1.4 实验课程学时：36学时二、实验课程目标2.1 培养学生使用生物化学实验仪器和设备的基本技能。
2.2 培养学生进行生物化学实验的观察能力。
2.3 提高学生的实验设计和数据分析能力。
2.4 培养学生的科学研究思维和合作能力。
三、实验课程内容3.1 生物化学实验原理和基本操作3.1.1 生物化学实验室安全操作规范3.1.2 常用生物化学实验仪器和设备的使用方法3.2 常见生物分子的提取与纯化实验3.2.1 蛋白质提取和纯化实验3.2.2 DNA提取和纯化实验3.2.3 RNA提取和纯化实验3.3 酶动力学实验3.3.1 酶的浓度对反应速率的影响实验 3.3.2 酶的温度对反应速率的影响实验 3.3.3 酶的pH值对反应速率的影响实验 3.4 生物化学分析实验3.4.1 蛋白质浓度测定实验3.4.2 DNA含量测定实验3.4.3 RNA浓度测定实验3.4.4 酶活性测定实验3.5 生物分子特性分析实验3.5.1 蛋白质电泳实验3.5.2 DNA电泳实验3.5.3 RNA电泳实验3.6 细胞生物化学实验3.6.1 细胞色素氧化实验3.6.2 细胞代谢实验四、实验教学方法4.1 理论教学与实践相结合4.1.1 理论知识讲授4.1.2 实验操作演示4.2 实验课前准备4.2.1 实验课程大纲的讲解4.2.2 实验操作流程的演示4.3 实验课程实践操作4.3.1 学生实验操作指导4.3.2 学生自主探究实验4.4 实验数据收集与分析4.4.1 学生实验数据的记录和整理 4.4.2 实验数据的统计和分析4.5 实验总结与讨论4.5.1 学生实验报告撰写4.5.2 学生实验结果的讨论和总结五、实验教学评价方法5.1 实验报告的评分5.1.1 实验报告的内容完整性和准确性5.1.2 实验数据的整理和分析能力5.2 实验操作的评分5.2.1 实验过程的规范性和安全性5.2.2 实验结果的准确性和可重复性5.3 实验讨论的评分5.3.1 学生对实验结果的讨论和结论5.3.2 学生对实验中存在问题的思考和解决方案六、教材及参考资料6.1 教材：《生物化学实验原理与技术》6.2 参考资料：1. Berg, Jeremy M., Tymoczko, John L., & Gatto, Gregory J. S. (2012). Biochemistry (7th ed.).2. Nelson, David L., Cox, Michael M. (2017). Lehninger Principles of Biochemistry (7th ed.).七、实验教学大纲修订和调整7.1 实验教学大纲的修订和调整需根据教学实际需求进行。
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生物化学实验指导书生物化学教研室2011、2、1目录实验须知实验内容实验一蛋白质的两性电离和等电点的测定实验二血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳实验三血清总蛋白测定（双缩脲法、Folin—酚法）实验四 PH与温度对酶活性的影响实验五激活剂和抑制剂对酶活性的影响实验六酶的特异性实验七琥珀酸脱氢酶活性的抑制实验八分光光度计的使用实验九血糖的测定（葡萄糖氧化酶法）实验十肝中酮体生成作用实验十一血清胆固醇测定（酶法）实验十二 ALT的测定实验十三血红蛋白与核黄素的凝胶柱色谱分离实验十四肝组织核酸的提取、分离和鉴定实验十五血清尿素氮的测定实验十六血清胆红素测定实验十七：总糖的测定---蒽酮比色法实验十八：饥饿与饱食对肝糖元含量的影响实验十九：乳酸脱氢酶活力测定生物化学实验须知一、实验目的1．培养学生科学的思维方法和学习作风，独立工作能力。
2．学习基础生物化学实验方法，为今后的学习与研究准备更好的条件。
3．培养学生爱护国家财物、爱护集体、团结互助的优良道德品质。
4．培养学生的书面及口头表达能力。
二、实验的总要求1．按教研室予先公布的实验进度表，了解各次实验的具体内容，并认真做好预习。
弄清各步骤的意义，避免教条或机械式做实验。
未预习者不得进实验室。
2．进行实验不仅要求结果良好，而且要求敏捷高效。
一切步骤都按正规操作方法进行；样品与试剂勿过量取用；注意力集中，避免差错。
3．实验中观察要仔细，记录要详尽、及时与客观。
无论实验成功与失败，都应直接记录在实验报告本中，不得于实验后追记。
对于失败的实验，要分析其原因。
4．实验室是集体学习与工作的场所，实验时应保持肃静，不得大声喧哗，以免影响他人的工作与思考。
5．注意保持实验室内的整洁。
实验用器具、试剂等应排列整齐有序。
实验时切勿将试剂、标本溅洒于实验台面、地面及衣物上，如果有溅出应及时处理。
实验后应清洗用过的仪器及清理自己的实验场所。
实验所用的器材、设备不得随意乱动。
实验室内的一切器材物品严禁携出。
6．实验时使用水、电、火、易燃易爆试剂、化学毒剂及传染标本等应注意安全，防止燃烧或爆炸，防止中毒等事故之发生。
7．对师长尊敬，对同学要团结友爱。
三、实验报告实验报告的书写是培养学生书面表达能力和科学作风的重要手段之一，实验者应该重视。
实验报告的内容包括下列各项：实验名称、实验日期、实验目的、实验原理、实验步骤，实验记录、计算、讨论或小结。
实验记录应包括随做随记的原始记录。
书写实验报告要字迹工整，语句通顺。
书写工整的实验报告，是尊师的重要表现之一。
四、组织与分组1．每一实验室推选一名学生课代表，负责下列工作：①实验报告的收集与分发；②安排清扫值日名单；③反映同学学习情况及对教学工作的意见；④其它临时性的工作。
2．一般每个学生单独进行实验。
有的实验要两人一组，由相邻两学生组成固定小组。
小组的成员在指导教师的同意下，可作适当的调整。
五、仪器1．每次实验前，实验者应根据本实验使用的仪器种类与数目，检查分发在实验桌上的各种仪器，如有缺损应于清洗前立即向准备室负责老师补换。
实验中如有破损，则必须登记，按学院规定处理。
实验后应将完整仪器洗涤清洁，点交管理人员。
2．公用仪器（包括贵重仪器，如分光光度计、电动离心机等）使用时间不宜过长，以免妨碍他人工作。
设有使用登记薄的仪器，使用后必须登记，以示负责。
对于不熟悉之仪器，应请教师指导，切勿随意乱动。
六、试剂1．每2~6人合用一份试剂。
在一般情况下，使用的试剂应该固定。
2．取试剂瓶塞与量取用具（如吸管或滴管）不应分开，用后应立即放回原处，量取用具应按规定放置。
瓶塞与量具一旦弄错，试剂即受损坏、污染，实验就可能失败。
3．标准试剂不应用潮湿之吸管与之直接接触，取出后不得再放入原瓶。
七、玻璃仪器的洗涤一般玻璃仪器用肥皂或去污粉以毛刷洗涤即足以满足要求，洗后应将肥皂或去污粉仔细冲掉，将水倾去后，器壁不挂水珠，视为合格。
铬酸洗液仅用于毛刷不能洗净的仪器，切勿滥用普通玻璃仪器之洗涤。
使用铬酸洗液时，仪器应干燥；过多的水份将使洗液迅速失效。
用过之铬酸洗液须加以保存以反复使用，直至为绿色后方可舍弃；其舍弃法与浓硫酸液相同。
用洗液浸洗过的玻璃仪器，应先用自来水冲洗，然后再用蒸馏水或去离子水清洗，清洗时，宜采用“少量多次”原则以节约蒸馏水，同时清洗的效率也高。
八、舍弃物的处理舍弃物必须依照其性质作适当的处理。
以免造成实验材料的浪费，损坏水槽及下水管道，或污染实验环境。
1．所有固体舍弃物（例如用过的滤纸、损坏的软木塞及橡皮物、玻璃渣、火柴梗等）。
必须放入废物筒或篓中，切勿丢入水槽中。
2．废硫酸或洗液，应先倾入大量水中，再倒入水槽中，并以大量水冲走。
3．实验完成后的沉淀或混合物，若含有可提取或收回的贵重物品者，不可随意舍弃，应放入教师指定的回收器中。
实验一：血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳实验目的：1. 掌握血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的方法及实验原理。
2. 了解血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的临床意义及影响因素。
实验原理：带电粒子在电场中移动的现象称为电泳。
血清蛋白质的等电点均低于pH7.4，因此，在pH比其等电点高的缓冲液中它们都电离成负离子，在电场中都会向正极移动。
因各种血清蛋白质等电点不同，在同一pH下所带电荷数量不同，加上分子量的差别等因素，它们在电场中的运动速度就不同。
蛋白质分子小而带电荷多的运动较快；分子大而带电荷少的运动较慢。
所以可利用电泳将血清蛋白质按其在电场中运动的速度快慢分为白蛋白、α1－球蛋白、α2－球蛋白、β－球蛋白及γ－球蛋白等五条区带。
可用分光光度法定量检测出五种蛋白质的含量和百分数，也可将染色后的膜条直接用光密度计测定。
实验器材：【仪器】1．试管、试管架、吸量管2．电泳仪：包括直流电源整流器和电泳槽两个部分，电泳槽内装有两个电极（用白金丝制成）。
3．醋酸纤维薄膜（2.5×8㎝）：【试剂】1．pH8.6，离子强度0.075的巴比妥缓冲液：巴比妥钠15.45g，巴比妥2.76g，蒸馏水700～800 ml，加热溶解，冷后补足蒸馏水至1000ml。
2．氨基黑10B染色液：氨基黑10B 0.5g，甲醇50ml，冰醋酸10ml，蒸馏水40ml，混合使溶解。
3．漂洗液：甲醇45ml，冰醋酸5ml，蒸馏水50ml，混匀，分装甲乙丙三瓶备用。
4．新鲜血清5．0.4mol/L氢氧化钠溶液6．透明液：冰醋酸25ml，无水乙醇75ml，混匀备用。
实验内容与方法：1.电泳槽的准备：将缓冲液加入电泳槽的两槽内，并使两槽液面在同一水平。
两槽内侧边各贴挂四层滤纸或纱布，浸入缓冲液中构成盐桥。
2．薄膜的准备与点样：取2.5×8cm的膜条（1）薄膜有光泽面向下，放入培养皿中的巴比妥缓冲液中使膜条充分浸透下沉，约浸泡10－20分钟，即膜条无白斑时。
（2）将充分浸透的膜条取出，用干净滤纸吸去多余的缓冲液，于薄膜的无光泽面距一端1.5cm处作为点样线。
（3）用点样器在盛有血清的表面血中蘸一下，点样器下端粘上薄层血清，然后将点样器竖直，使其沾有血清的顶端紧贴在薄膜点样线上，待血清全部渗入膜内后，移开点样器，注意点样的两端不可到边。
2．电泳：将点样后的膜条置于电泳槽的盐桥上，放置时膜条无光泽面（即点样面）向下，以防薄膜干燥，点样端置于负极，槽架上以四层滤纸作桥垫，膜条与滤纸需贴紧。
盖好电泳槽的盖，待平衡5分钟后，即可通电。
调节电泳仪，使两极间距（指膜条与滤纸桥总长度）的电压为8～10V/cm长，或电流0.4～0.6mA/cm宽，通电50分钟左右关闭电源。
3．染色与漂洗：通电完毕后，用镊子将薄膜取出，直接浸于盛有氨基黑10B的染色液中，染3分钟取出，立即浸于漂洗液中，分别在漂洗液甲、乙、丙三瓶中各漂洗5'，直至背景漂净为止。
用滤纸吸干薄膜，即得五条蛋白区带，从阳极至阴极端依次为白蛋白、α1－球蛋白、α2－球蛋白、β－球蛋白及γ－球蛋白，。
实验注意事项：1．点样是实验成功的关键，点样不可太多或太少。
2．电泳和漂洗时不要拿错膜条。
实验报告：血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳思考题：血清蛋白质在pH8.6的巴比妥缓冲液中带什么电荷?它们泳动的先后顺序如何?为什么？实验二蛋白质两性电离与等电点的测定实验目的：1. 了解蛋白质两性电离与等电点的测定原理。
2. 熟悉蛋白质两性电离与等电点测定的操作方法。
3.培养学生严谨的作风和准确地进行实际操作的能力，提高分析问题的能力。
实验原理：蛋白质是两性电解质,其电离过程取决于溶液的PH值。
若当PH大于蛋白质的PI时，蛋白质带负电荷，不易沉淀。
反之，当PH小于蛋白质的PI时，蛋白质带正电荷，也不易沉淀。
当溶液处于某一PH值时，蛋白质所带的正、负电荷数量相等，净电荷为零，呈兼性离子状态，此时溶液的PH值称为这种蛋白质的等电点（PI）；这时的蛋白质在电场中既不向负极也不向正极移动；溶解度最低，容易析出。
所以当溶液处于PI时，沉淀最多。
实验器材：【仪器】试管、试管架、吸量管【试剂】⒈ 5g/L酪蛋白醋酸钠溶液: 称取纯酪蛋白0.5g，加蒸馏水40ml及1.00mol/L氢氧化钠溶液10.0ml，振摇使酪蛋白溶解，然后加入1.00mol/L醋酸溶液10.0ml，混匀后倒入100ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，混匀。
2．0.1g/L溴甲酚绿指示剂：该指示剂变色范围为PH 3.8－5.4。
酸色型为黄色，碱色型为蓝色。
3．0．02mol/L盐酸溶液4．0．02mol/L氢氧化钠溶液5．1.00mol/L醋酸溶液6．0.1mol/L醋酸溶液7．0.01mol/L醋酸溶液实验内容与方法：一. 蛋白质两性电离实验1．取试管一支，加入5g/L酪蛋白醋酸钠溶液0.3ml，0.1g/L溴甲酚绿指示剂1滴，混匀，观察溶液呈现的颜色。
2．用乳头滴管缓慢滴加0．02mol/L盐酸溶液，随滴随摇，直到有明显的大量沉淀发生。
观察溶液颜色的变化。
3．继续滴入0．02mol/L盐酸溶液，观察沉淀与溶液颜色的变化。
4．再滴入0．02mol/L氢氧化钠溶液，随滴随摇，使之再度出现明显的大量沉淀，再继续滴入0．02mol/L氢氧化钠溶液，沉淀又溶解，观察溶液颜色的变化。
二酪蛋白等电点的测定：1．取试管5支，按下表操作：加入物（ml） 1 2 3 4 5 蒸馏水 1.6 － 3.0 1.5 3.381.00mol/L醋酸溶液2.4 －－－－0.10mol/L醋酸溶液－ 4.0 1.0 －－0.01mol/L醋酸溶液－－－ 2.5 0.625g/L酪蛋白醋酸钠溶液 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0溶液的最终PH 3.2 4.1 4.7 5.3 5.92．静置20分钟，观察各管沉淀出现情况。
并以“－、＋、＋＋、＋＋＋”记录沉淀多少。
实验注意事项：仔细观察并记录蛋白质两性游离实验中沉淀及沉淀消失的现象。