151104大米中直链淀粉和支链淀粉的检测分光光度法
F NCP LS DM 稻米 直链淀粉含量测定 分光光度法
FNCPLSDM00009 稻米中直链淀粉含量的测定分光光度法F-NCP-LS-DM-00009稻米－直链淀粉含量测定－分光光度法1 适用范围目前测定直链淀粉含量的方法有国标法和简化法（农业部部标）两种,一般法适用于水稻、玉米、高梁、谷子籽粒直链淀粉含量的测定,简化法适用于稻米的测定。
2 原理直链淀粉与碘作用生成蓝色的淀粉—碘复合物,在适当的波长范围内其颜色的深浅与直链淀粉含量呈线性关系;测定该复合物水溶液的吸光度值,根据标准曲线,可求得待测样品的直链淀粉含量.3 试剂3.1 1mol/L乙酸溶液：量取57.8ml冰乙酸（GB 676－78分析纯）用蒸馏水定容至1000ml；3.2 柠檬酸溶液：5.6g柠檬酸（HG 3－1108－1981）用600ml蒸馏水溶解，加入5.0ml冰醋酸，定容至1000ml。
3.3 1mol/L氢氧化钠（GB 629－81 分析纯）溶液3.4 碘液：2.000±0.005g碘（GB 675－77 分析纯）和20.000±0.001g碘化钾 （GB 1272－1977 分析纯）用蒸馏水溶解并稀释至1000ml。
3.5 乙醇：95%乙醇（GB 679－1980 分析纯）和无水乙醇（GB 678－1978 分析纯）； 3.6 甲醇（GB 683）：85%（V/V）；3.7 1mg/ml直链淀粉标准溶液：称取0.1000g（干基）马铃薯直链淀粉纯品，放入100ml 容量瓶中，加入1ml无水乙醇湿润样品，再加入9ml 1mol/L NaoH溶液，于沸水浴中分散10min，冷却后用水定容；3.8 1mg/ml支链淀粉标准溶液：称取0.1000g支链淀粉纯品，置于100ml容量瓶中，加入1ml无水乙醇湿润样品，再加入9ml 1mol/L NaoH溶液，于沸水浴中分散10min，冷却后用水定容；3.9 直链淀粉参比样：具高、中、低直链淀粉含量的参比样品各一个（其直链淀粉含量预先经NY/T 558－1987或ISO 6647－1987方法准确测定；4 仪器设备4.1 具有孔径0.25mm（60目）网筛的实验室用粉碎机；4.2 分光光度计或全自动直链淀粉分析仪；4.3 分析天平：感量0.0001g；4.4 水浴锅；4.5 玻璃容器：50ml具塞试管、100ml容量瓶、50ml容量瓶、10ml、5ml、2ml、1ml移液管。
大米食用品质检验—直链淀粉含量测定(粮油食品检验技术课件)
三、材料、仪器、药品
(一)材料：
已测碾磨品质的精米粉碎，过100目筛的细粉（测胶稠度 同一样品）；不同直链淀粉含量的标准样品（4种含量）
（二）仪器：
1/10000分析天平（即感量0.0001g），水浴锅，100ml容 量瓶，1ml、5ml、10ml移液管或移液器，分光光钠溶液
直链淀粉含量测定
一、实验目的与要求
直链淀粉含量与米饭的黏性、柔软性、光泽、食味品质密切相 关，与加工品质也有密切关系。
含量高——黏性小、硬度大、光泽差 食用优质稻米以直链淀粉含量17-21％为宜。
初步掌握稻米蒸煮品质中直链淀粉含量的测定技术。
二、实验原理
1.直链淀粉与I-KI反应显蓝色，颜色深浅与直链淀粉含量成正比。 2.利用已知直链淀粉含量的标准样品与待测样品在同一条件下比 色测定，制作标准曲线，再根据吸光度和标准曲线确定待测样品 的含量。
五、作业
写出实验结果原始数据，作出所测品种稻米品质检验的综 合报告。
0.09M氢氧化钠溶液：取90ml上述溶液，蒸馏水稀释 至1000ml 【已配制好】
碘液：2.00g碘（分析纯）和20.00g碘化钾（分析纯） 混合，蒸馏水溶解后定容至1000ml 【已配制好】
1.00mol/L乙酸溶液：量取57.8ml冰乙酸（分析纯）， 蒸馏水稀释至1000ml 【已配制好】
95％乙醇（分析纯）
四、方法与步骤
称样→分散→配制显色液→比色→计算 1.称样：待测样品0.1000g于100ml洗净干燥的容量瓶底部。
2. 分 散 ： 加 1.0ml 无 水 乙 醇 ， 轻 摇 使 湿 润 分 散 ⇒ 加 9ml
1.00mol/L氢氧化钠溶液，旋转容量瓶使碱液冲洗黏附于瓶壁上的样
双光束双波长分光光度计测定稻米中直链淀粉的方法
精确称取 100 m g 精米粉于 100 m l 容量瓶中, 加 1 m l 无 水 乙 醇 充 分 湿 润 样 品, 再 加 9 m l 的 1 m o l L N aO H 溶液, 入沸水浴中分散 10 m in, 立即 冷却, 用蒸馏水定容。 11312 样品的比色测定
(3) 1 m o l L N aO H 溶液, 准确标定。 (4) 1 m o l L HA C 溶液, 准确标定。 (5) 碘贮备液及碘标准溶液。称 2 g 碘和 20 g 碘 化钾, 稀释至 100 m l 即为碘贮备液。 取 10 m l 碘贮 备液定容至 100 m l, 即为碘试剂。 (6) 日立 557 型双光束双波长分光光度计仪器。 112 分析方法 11211 测定波长和参比波长的选择 淀粉与碘形成碘—淀粉复合物, 它具有特殊的 颜色反应。直链淀粉与碘生成纯兰色, 支链淀粉与碘 作用生成紫红色, 在光电比色计中比色, 有着不同波 长范围的最大吸收值。根据双波长比色原理, 试样溶 液两个波长 Κ1、Κ2 的吸收差值与溶液中待测物质的 浓度成正比。选择波长必须满足两个基本条件: a. 共 存 组 分 在 这 两 个 波 长 应 具 有 相 同 的 吸 收 值, 即 ∃ EΚ22Κ1 = 0, 使其浓度变化不影响到测定值; b. 待定
则为白色。
(LQ. 1999 (2) : 2)
(3) 本方法具有操作简便, 精确度高和快速等优 点。
表 2 双波长法与国际水稻所标准方法测定结果对照表
分析方法
双波长法 标准法 平均值 标准差
桂朝二号 广陆矮四号 鄂晚五号 沪选 19 汕优 2 号 珍珠矮 平均值
27178 23100 18133 20184 22158 22153 22151
MM FS CNG 稻米直链淀粉含量的测定
MMFSCNG0181 稻米 直链淀粉 分光光度法MM_FS_CNG_0181稻米直链淀粉含量的测定1.适用范围本方法适用于稻米直链淀粉含量的测定。
4.原理概要将大米粉碎至细粉以破坏淀粉的晶形结构，使其易于完全分散及糊化，并对粉碎试样脱脂，脱脂后的试样在氢氧化钠溶液中分散，向一定量的试样分散液中加入碘试剂，在620nm处测定所形成的复合物的吸光度。
考虑到支链淀粉对试样中碘-直链淀粉复合物的影响，利用直链淀粉与支链淀粉的混合物制备校正曲线，从校正曲线上读取试样中直链淀粉含量。
3.主要试剂甲醇[85％(V/V)]、乙醇[95％(V/V)]。
氢氧化钠：1mol/L和0.09mol/L。
乙酸：1mol/L溶液。
碘试剂：称取2.000±0.005g碘化钾 ，加适量的水以形成饱和溶液，加入0.200±0.001g碘，碘溶解后将定量移至100mL容量瓶中定溶。
每天用前现配，避光保存。
马铃薯直链淀粉标准溶液(1mg/mL)：称取100±0.5mg脱脂及平衡后的直链淀粉于100mL烧杯中，加入1.0mL无水乙醇湿润样品，再加入9.0mL1mol/L氢氧化钠溶液于85℃水浴中分散10min，移入100mL容量瓶，用70mL水分数次洗涤烧杯，洗涤液一并移入容量瓶中定溶，剧烈摇匀。
1mL此标准分散液含1mg直链淀粉。
马铃薯直链淀粉标准品的制备见附录A。
支链淀粉标准溶液(1mg/mL)：称取100±0.5mg经除去蛋白质、脱脂及平衡后蜡质大米支链淀粉于100mL烧杯中，加入1.0mL无水乙醇湿润样品，再加入9.0mL 1mol/L 氢氧化钠溶液，于85℃水浴中分散，移入100mL容量瓶中，用70mL水分数次洗涤烧杯，洗涤液一并移入容量瓶中定溶，剧烈摇匀。
1mL此标准溶液含1mg支链淀粉。
蜡质大米支链淀粉标准品的制备见附录B。
4.仪器实验室用磨粉机：可将大米粉碎并通过80目筛。
筛（80目）、实验室用砻谷机、实验室用碾米机。
大米直链淀粉含量的测定
大米直链淀粉含量的链定2010-11-08链布2010-12-20日链施中链人民共和链生部国家链准化管理委链国会中链人民共和家链准国国GB/T15682——2008B 57492006—代替GB 5749-85大米直链淀粉含量的链定GB/T15683-20081范链本链准链定了非熟化大米直链淀粉含量的链定方法----基准方法。
本链准适用于直链淀粉含量高于5链量分的大米。
数本链准在延伸链用范链得到链后也可以用于米、玉米、小米和其他谷物的链定。
确糙2链范性引用文章下列文件中的款通链本链准的引用而成链本链准的款。
凡是注日期的引用文件条条其后所有的修改链不包括勘链的容或修链版均不适用于本链准然而鼓根据本随内励链准成链链的各方究是否可使用链些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件其最达研新版本适用于本链准。
GB/T 21305谷物及谷物制品水分的链定常链法GB/T 21305-2007 ISO 712 1998IDTISO 7301 大米链格ISO8466-1水链分析方法定链和链以及性能特征链第一部分 链性定链估估——函的链链链价数ISO15914链物链料原料链解法链淀粉含量链定3链链和定链ISO7301 中立的以及下列链链和定链使用本链准。
确与3、1直链淀粉amylose淀粉中的多聚糖成分其葡萄糖链元主要以直链链链链接的大分子。
状构3、2支链淀粉amylopectin淀粉中的多聚糖成分其葡萄糖链元主要以支链链链接的大分子。
构4原理大米粉碎至链粉以破淀粉的胚乳链使其易于完全分散及糊化链粉碎链链将坏构并脱脂脂后的链链分散在链化链溶液中向一定量的链链分散液中加入链链然后使用脱氧碘分光光度链于720nm 链链定链色链合物的吸光度。
考链到支链淀粉链链链中碘-直链淀粉链合物的影利用链链薯直链淀粉和支链淀粉响的混合链链制作校正曲链校正曲链中链出链品的直链淀粉含量。
从注 链方法链链上取于直链淀粉决-的链和力在碘720nm 链定的目的是使支链淀粉的干链作用少到最小。
大米中直链淀粉含量浅析
大米中直链淀粉含量浅析作者：孟庆顺来源：《硅谷》2015年第02期摘要本文通过对影响大米中直链淀粉含量测定的因素分析，提出了标准方法应注意的几个技术问题。
关键词大米；直链淀粉含量；测定；国标法；简化法中图分类号：TS231 文献标识码：A 文章编号：1671-7597（2015）02-0210-01淀粉是大米中重要的化学成分，是含量最高的碳水化合物，在稻谷籽粒中的含量在70%左右，糙米中达到80%以上，而在碾白的大米中可达到90%以上。
天然淀粉都是具有结晶的颗粒形式。
稻谷中直、支链淀粉含量比例是稻谷的重要品种品质特性。
直链淀粉是淀粉中的多聚糖成分，其葡萄糖单元主要以直链关结构连接成的大分子，而支链淀粉中的葡萄糖单元主要以支链结构连接成的大分子。
直链淀粉含量是优质大米的重要的指标之一。
因而直链淀粉含量的测定就显得尤为重要。
目前测定直链淀粉含量的方法有国标法（GB/T15683-2008《大米直链淀粉含量的测定》）和简化法（NY/T55-1987（GB7648-1987）《水稻、玉米、谷子籽粒直链淀粉测定法》）（农业行业标准）两种，它们均适用于稻米直链淀粉含量的测定。
GB/T15683-2008中，将大米粉碎至细粉破坏淀粉的胚乳结构，脱脂，用氢氧化钠溶液分散试样，加入碘试剂，用分光光度计于720 nm处测量样液吸光度。
并利用标准溶液绘制标准曲线，于标准曲线上计算含量。
NY/T55-1987中，脱脂后的样品中支链淀粉与碘生成棕红色，直链淀粉与碘生成深蓝色，样液用分光光度计在620 nm读取吸光度。
并利用标准溶液绘制标准曲线，于标准曲线上计算含量。
标准样品和样品在同等条件下都要进行脱脂。
1 影响大米直链淀粉含量的主要因素分析1）主观因素即人为因素。
主要是操作不当带来的偏差，如样品不具备代表性、未按标准粉碎过筛，混样不均；分散时间不一致；显色定容、分光光度计等仪器操作不当。
2）客观因素一是大米本身的品种、等级对直链淀粉含量有直接的影响，国家标准GB1354-2009中《大米》标准中优质大米中规定直链淀粉含量：籼米和粳米为14.0%-24.0%，籼糯米和粳糯米为≤2.0，而非优质大米不检测直链淀粉含量。
分光光度法测定大米直链淀粉含量的误差分析
大米 是人 们 日常 主食 之 一 ， 大 米 中直链 淀粉 含量 是影 响大 米食 用品 质 、 加 工 品质 的重 要 因素 。 因此 ， 直链 淀粉 的准 确测 定 对 发 展 种植 优质 水 稻 具有 重要 意义 。张巧 杰【 Ｊ ］ 论 述 了直链 淀粉 测定 过 程 中温度对 吸 光值 的影 响 ， 证 明 了当 测量 标 准 曲 线 的 温度与 测量 样 品 的 温 度 大体 一 致 时 ， 直 链 淀
黑龙 江 农 业 科 学 ２ ０ １ ５ （ ４ ） ： １ ２ ９ ～１ ３ ２
Ｈ ｅ ｉ ｌ ｏ ｎ ｇ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ａ ｇ ｒ ｉ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ
质量 安全 ｊ
分 光 光 度 法 测 定 大 米 直 链 淀 粉 含 量 的误差 分 析
品有 限公 司 ； 碘： 北 京 益 利精 细化 学 品有 限公 司 ； 马铃薯 直链 淀粉 标 准 品 ： 北 京 高 科 恒辉 技 术 发 展
粉 含 量的测 定 将 不 会受 影 响 ； 袁 建ｆ 等 人 从 脱 脂 方法、 脱 脂 时间 、 酸度 等角度 对 直链淀 粉测 定方 法
的准确 度做 了相 关 试 验 ， 认 为在 一 定 酸 度 范 围 内
有 限公 司 ； 支 链 淀粉标 准 品 ： 北京 高科 恒辉 技术 发
展有限公 司； 石 油醚： 北 京 益 利 精 细 化 学 品有 限
公司。
１ ． ２ 方 法
乙酸 的添加 量对 测 量 值 无影 响 ， 碘 的添 加 量 对 测 量 值有 影 响 ， 但 是影 响 的 范 围很 小 ， 可 以忽 略 ； 宋
关键词 ： 分光光度法 ； 大米； 直链淀粉 ； 误 差
大米淀粉含量的测定
不同品牌的大米中淀粉的含量测定研究广东石油化工学院化学与生命科学学院生物技术摘要淀粉跟稀硫酸在加热的条件下能够完全水解成葡萄糖、麦芽糖等还原糖。
还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。
还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸及其他产物，3，5-二硝基水杨酸则被还原成棕红色的3-氨基-5硝基水杨酸。
在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm 波长下测定光密度值，查对标准曲线。
由于淀粉完全水解成还原糖的量是成正比的，所以，也与棕红色物质的深浅成正比关系。
关键词水解还原糖吸光度1 前言最近网上有人提出疑问：“我们吃的大米淀粉含量究竟有多少？哪种大米的淀粉含量最高？”很多人都不太能准确地回答。
对于我们南方人来说，大米是我们的主要食物、能量来源，基于网上有人提出“大米淀粉含量究竟有多少”的疑问，我们决定对某超市出售的某几种大米的淀粉含量进行实验研究。
通过实验测出不同品种大米的淀粉含量，比较不同品种大米的淀粉含量的高低。
2 实验目的1、掌握测定稀酸水解淀粉的原理和方法，利用酸水解法测定淀粉的原理，测定不同品牌的大米中淀粉的含量。
3 实验原理淀粉是植物体最主要的贮藏多糖，也是人和动物的重要食物来源和发酵工业的基本原料。
主要存在于大米、种子和块茎中。
淀粉经过稀硫酸水解后生成葡萄糖、麦芽糖等小分子物质而被机体利用。
酸水解淀粉产生葡萄糖、麦芽糖等还原糖能使3，5-二硝基水杨酸还原，生成棕红色的的3-氨基-5-硝基水杨酸，后者在540nm处有最大吸收峰。
可用比色法进行测定。
反应中还原糖被氧化成相应的糖酸。
反应如下：淀粉的含量与产生的还原糖的量成正比。
用标准的淀粉溶液制作标准曲线，用比色法测定稀硫酸作用于淀粉后生成的还原糖的量，以单位质量样品在过量酸作用下完全水解生成的还原糖的量从而测定淀粉的含量。
4 实验设备80℃水浴锅高速组织捣碎机分光光度计20 mL具塞比色管×13容量瓶（100 mL×7、1000 mL×2）量筒（20 mL、50 mL）试管架移液管（2mL×6、1mL×6）电子天平胶头滴管烧杯玻璃棒5 实验材料及试剂5.1 样品来源本研究使用的样品包括5种不同品牌的大米。
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大米中直链淀粉和支链淀粉的检测分光光度法
企业标准（拟定稿）
倪天瑞2015年11月04日
1. 适用范围
大米中直链淀粉和支链淀粉含量的测定，不适用于熟制大米的检测；
2. 规范性引用文件
NY/T 2639-2014稻米直链淀粉的测定分光光度法
GB/T 15683-2008大米直链淀粉含量的测定
3. 原理
大米中淀粉与碘形成显色复合物，在波长620 nm处测定显色物的吸光度值，其吸光度与直链淀粉含量成正比；
大米中淀粉分为直链淀粉和支链淀粉，直链淀粉含量之外数值即为支链淀粉含量。
4. 试剂
使用试剂为分析纯试剂，水为三级水
4.1氢氧化钠溶液（1 mol/L）:称取4 g氢氧化钠，溶于100 mL水中；
4.2乙酸溶液（1 mol/L）:量取
5.78 mL冰乙酸，用水定容至100 mL ；
4.3碘液：0.2 g碘、2 g碘化钾，用水定容至100 mL；
4.4乙醇溶液（95%）
4.5空白校正液：氢氧化钠溶液（0.09 mol/L），量取4.5 mL 1 mol/L氢氧化钠溶液，定容至50 mL；
4.6直链淀粉标准品，购于上海将来试剂公司；
4.7支链淀粉标准品，购于上海将来试剂公司；
5. 仪器
分光光度计
分析天平，感量土 0.0001 g
水浴锅
烧杯
研钵
筛子（80 目）
6. 分析步骤
6.1样品处理：将样品混匀，称取约10 g,粉碎后，过80目筛子；
6.2前处理：准确称取样品50± 0.2 mg,置于50 mL容量瓶中，加入0.5 mL 95%乙醇溶液，冲洗容器壁上的粉末，再加入 4.5 mL氢氧化钠溶液，摇匀，沸水浴10 min，取出，冷却至室温，定容至50 mL。
该溶液即为待测液。
6.3标准溶液：
6.3.1直链淀粉标准溶液（1 mg/mL）
称取50± 0.2 mg直链淀粉标准品，置于50 mL容量瓶中，加入0.5 mL 95%乙醇溶液，冲洗容器壁上的粉末，再加入4.5 mL氢氧化钠溶液，摇匀，沸水浴10 min,取出，冷却至室温，定容至50 mL。
6.3.2支链淀粉标准溶液（1 mg/mL）
称取50±0.2 mg支链淀粉标准品，制备方法同上
6.4梯度浓度直链淀粉标准溶液配制
上述数据是在平均淀粉含量为 90%的大米干基基础上计算所得。
6.5测定
6.5.1标准曲线制作：
准确量取0.5 mL梯度标准溶液到10 mL离心管中，加入5mL水，0.1 mL乙酸溶液，摇匀，加入0.2 mL碘试剂，定容至10 mL，摇匀，静置10 min ；
分光光度计用空白校正液调零后，在620 nm处测定系列标准溶液的吸光度；以
吸光度为纵坐标，直链淀粉含量（干基质量分数）为横坐标，绘制标准曲线。
6.5.2样品检测
准确量取0.5 mL待测液到10 mL离心管中，加入5mL水，0.1 mL乙酸溶液，摇匀，加入0.2 mL 碘试剂，定容至10 mL，摇匀，静置10 min;分光光度计用空白校正液调零后，在 620 nm处测定系列标准溶液的吸光度。
每个浓度样品做2份平行测定。
7. 结果表示
参照6.5.1的标准曲线的吸光度值得到测定结果，两次检测结果的算数平均值为测定结果。